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文檔簡介

學(xué)習(xí)目標了解生化組分提取方法的分類;知道常用提取劑的類型、特點和選用原則;掌握常用提取方法的原理和應(yīng)用。重難點重點:了解常見的生化成分;難點:掌握提取技術(shù)的分類和原理。生化組分的種類及溶解性1提取技術(shù)的分類和原理2目錄提取用緩沖液3浸提技術(shù)及其影響因素4固液提取液液提取轉(zhuǎn)移釋放一.生化組分的種類及溶解性氨基酸及其衍生物類分子量較小結(jié)構(gòu)簡單容易制備一.生化組分的種類及溶解性多肽類1濃度低活性強2腺體器官體液3多肽類素調(diào)節(jié)因子一.生化組分的種類及溶解性核酸類核苷酸腺苷多核苷酸一.生化組分的種類及溶解性酶類胃蛋白酶胰蛋白酶脂肪酶纖溶酶鏈激酶凝血酶抗栓酶一.生化組分的種類及溶解性糖類單糖寡糖多糖糖的衍生物細菌多糖真菌多糖植物多糖一.生化組分的種類及溶解性脂質(zhì)類磷脂類卵磷脂腦磷脂固醇類膽固醇麥角固醇膽酸類膽汁酸二.生化組分的溶解性酸堿鹽脂溶性水溶性二.生化組分的溶解性酸性生物分子易溶于堿性溶劑,堿性生物分子易溶解于酸性溶劑;極性目標產(chǎn)物易溶解于極性溶劑,非極性目標產(chǎn)物易溶解于非極性溶劑;對于氨基酸、蛋白質(zhì)和活性肽這些兩性組分來說,應(yīng)選擇其遠離等電點PI值的提取條件。三.提取技術(shù)的分類和原理1.水溶液提取多肽、蛋白質(zhì)、酶和多糖等生物大分子的提取一般以水溶液作為提取劑,稱之為水溶液提取。在提取目標產(chǎn)物的過程中,根據(jù)目標產(chǎn)物和生物原料的特性,可以選擇緩沖液、鹽溶液、酸溶液或堿溶液進行提取。利用緩沖液和鹽溶液進行提取時,條件一般比較溫和,所以大部分水提采用的是緩沖液和鹽溶液。三.提取技術(shù)的分類和原理2.有機溶劑提取小分子維生素激素有機酸防水解去雜質(zhì)三.提取技術(shù)的分類和原理3.超臨界流體萃取有利于溶劑與產(chǎn)物的分離三.提取技術(shù)的分類和原理4.雙水相萃取某些親水性高分子聚合物的水溶液超過一定濃度后可以形成兩相,并且在兩相中水分均占很大比例,即形成雙水相系統(tǒng)。利用親水性高分子聚合物的水溶液可形成雙水相的性質(zhì),Albertsson于20世紀50年代后期開發(fā)了雙水相萃取法又稱雙水相分配法。20世紀70年代,科學(xué)家又發(fā)展了雙水相萃取在生物分離過程中的應(yīng)用,為蛋白質(zhì)特別是胞內(nèi)蛋白質(zhì)的分離和純化開辟了新的途徑。四.提取用緩沖液1.緩沖液的選擇足量緩沖容量PH在要求的范圍內(nèi)對抗稀釋作用提取的其他要求四.提取用緩沖液2.緩沖液的組成防腐劑鹽穩(wěn)定劑熬合劑四.提取用緩沖液3.常用的緩沖液磷酸鹽緩沖液是生化提取中使用最廣泛的緩沖液之一。該緩沖液適用的pH范圍比較寬(但在pH7.5以上緩沖能力較小),pH受溫度的影響比較小,稀釋后pH變化?。ㄈ缦♂?0倍之后pH變化小于0.1),而且很容易能夠配制不同濃度的緩沖體系。需要注意的是,磷酸鹽緩沖液與鈣離子、鎂離子及重金屬離子會結(jié)合形成沉淀。5.浸提技術(shù)及影響因素煎煮法;浸漬法;滲漉法;回流

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