實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)第五節(jié)雜環(huán)類藥物的分析雜環(huán)類藥物的定義：夾雜有非碳原子的環(huán)狀化合物稱為雜環(huán)化合物雜環(huán)種類比較多，我們只講解四種：1、吡啶類藥物苯并噻嗪類苯并二氮卓類氟喹諾酮類一、吡啶類藥物的分析異煙肼1、結(jié)構(gòu)NCONHNH22、鑒別測(cè)定衍生物的熔點(diǎn)NOCH3NOCH+OHCOH3CONHN=CHOH CONHNH2 異煙腙黃色結(jié)晶mp.228~231℃銀鏡反應(yīng)分子中肼基具有還原性，與氨制硝酸銀試液作用，被氧化為氮?dú)夂彤悷熕徜@，硝酸銀被還原為黑色銀而使溶液變渾濁，并在試管上生成銀鏡。N +4[Ag(NH3)2]OH+N2+4Ag CONHNH2 COONH4 沉淀反應(yīng).HgCl2NCONHNH.HgCl2NCONHNH+HgCl2222N23、檢查酸堿度PH6.0~8.0溶液的澄清度與顏色本品1.0g，加水10ml溶解，與I號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液比較不得更濃顏色與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照液比較（重鉻酸鉀3.0ml，硫酸銅0.1ml，→250ml）比較不得更深主要檢查雙異煙酰肼： N NCONHNHOC游離肼1?ê??·50mg/ml10ul±ê×?áò?á??50ug/ml2ul1?±ê異丙醇-丙酮3：2展開(kāi)顯色劑：對(duì)二甲氨基苯甲醛在供試品主斑點(diǎn)前方與硫酸肼斑點(diǎn)相應(yīng)的位置上，不得顯黃色斑點(diǎn)50ug/ml2ul限度100%0.02%50mg/ml10ul溶出度測(cè)定轉(zhuǎn)藍(lán)法：溶劑：水，用量1000ml要求：30min，限量為60%→符合規(guī)定4、含量測(cè)定氧化還原法： CONHNH COOH3 2+3+2kBrO3H+3+3N2+KBr3H2O+ N N指示劑：甲基橙終點(diǎn)：粉紅色消失微過(guò)量的溴酸鉀可將粉紅色的氧化還原指示劑甲基橙氧化褪色滴定條件：甲基橙為不可逆的氧化還原指示劑，為防止溶液中局部過(guò)濃的溴酸鉀破壞指示劑，提前到達(dá)終點(diǎn)，應(yīng)在18~25℃溫度下，充分?jǐn)嚢?，緩慢滴定。加水量多少影響指示劑褪色時(shí)間，因此應(yīng)嚴(yán)格按藥典規(guī)定條件操作。二、苯并噻嗪類藥物的分析基本結(jié)構(gòu) 6 5 4NRNR12391078R2，10位取代，如氯丙嗪，異丙嗪，奮乃靜等吩噻嗪母核位共軛三環(huán)系統(tǒng)，有紫外特征吸收，一般在205nm，254nm，300nm處有最大吸收，常見(jiàn)一般最強(qiáng)吸收為254nm波長(zhǎng)，2，10位取代基不同，吸收峰略有變化。鹽酸氯丙嗪SN.HClClCH2CH2CH2N(CH3)2N1、鑒別氧化顯色本品加硝酸顯紅色，逐漸變?yōu)榈S色SNSNO+.NO3ClCH2CH2CH2N(CH3)23-吩噻嗪酮-5-亞砜紫外特征本品，加鹽酸溶液（9→1000）制成5ug/ml溶液，→分光光度法測(cè)定，→254nm，306nm有最大吸收，并且A=0.46254A254254306氯化物鑒別反應(yīng)因含Cl—，所以有氯化物鑒別反應(yīng)Cl-Cl-Ag+AgCl+硝酸白色沉淀2、檢查有關(guān)雜質(zhì)氯丙嗪亞砜（見(jiàn)光氧化），避光操作供試品和標(biāo)準(zhǔn)品溶液同作薄層層析比較斑點(diǎn)溶出度采用轉(zhuǎn)藍(lán)法溶劑：水，用量1000ml；轉(zhuǎn)速：100rpm，溶出時(shí)間：30min取溶液10ml，過(guò)濾，取濾液5ml，稀釋至25ml，在254nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度A，已知：E1%=915，Q=70% A 25ml 1% 1000ml溶出量E 5ml 100%表示量3、含量測(cè)定（1）原料藥非水堿量法溶劑：醋酐，指示劑：橙黃IV，滴定液：0.1mol/l高氯酸滴定液，終點(diǎn)：溶液顯玫瑰紅色在滴定前加醋酸汞[Hg（Ac）]試液5ml消除干擾2（2）制劑分光光度法254nmE1%=915306nmE1%=115A/E?á1%?á??êí±?êy?áì??yêy°ù·?o?á?=?á100% 1?ê??·μ?á? 三、苯并二氮雜卓類藥物的分析1、結(jié)構(gòu)1 9 N 2N8N37 6 5 4目前臨床上常用的苯并二氮雜卓類藥物為催眠藥，鎮(zhèn)靜藥，都具有這樣的結(jié)構(gòu)如：安定，硝基安定，氯硝安定，佳樂(lè)安定等具有苯并二氮雜卓-2-酮的結(jié)構(gòu)NNNNH124569837紫外特征吸收分子中存有共軛系統(tǒng)，在紫外區(qū)有特征吸收例如：安定0.5%硫酸-甲醇溶液，在242，284，366nm波長(zhǎng)處有最大吸收。堿性二氮雜卓中的氮原子呈堿性，所以可用強(qiáng)酸進(jìn)行滴定，如在非水環(huán)境中，用高氯酸直接滴定。酮式-烯醇式互變異構(gòu)例如：硝基安定NNNNHONNHNO2NaOHíaê?NO2??′?ê?NNNNHNO2??酮式轉(zhuǎn)換為烯醇式后，共軛體系增加，紫外吸收波長(zhǎng)有所變化。水解開(kāi)環(huán)此類藥物在強(qiáng)酸性溶液中水解開(kāi)環(huán)，生成芳伯胺→呈現(xiàn)芳伯胺鑒別反應(yīng)NNNHOH+ONH2二、安定結(jié)構(gòu)CH3OClNNN鑒別熒光反應(yīng)原料藥+硫酸→紫外燈下，黃綠色熒光片劑+丙酮提取→提取液蒸干后+硫酸→黃色熒光氯化物鑒別反應(yīng)安定中含有氯原子，經(jīng)氧瓶燃燒后（有機(jī)破壞），用5%NaOH溶液吸收，轉(zhuǎn)化為無(wú)機(jī)氯離子，在硝酸存在的酸性條件下，與AgNO反應(yīng)，產(chǎn)生白色AgCl沉淀。3紫外特征吸收安定+0.5%硫酸-甲醇溶液溶解，原料藥制成5ug/ml，片劑制成10ug/ml溶液，在242，284，366nm波長(zhǎng)處有最大吸收。紅外光譜供試品安定紅外光譜和標(biāo)準(zhǔn)品（對(duì)照品）紅外光譜對(duì)比，一致。3、檢查（1）檢查有關(guān)雜質(zhì)○1氨基酮安定分解產(chǎn)物○2去甲安定制備過(guò)程中甲基化不完全中間體○3環(huán)化副產(chǎn)物六元環(huán)而非七元環(huán)100mg/ml×÷1?ê??·èüòo1?ê??· ±?2?2???0.3mg/ml×÷????èüòo100mg/ml0.3mg/ml如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，與對(duì)照溶液的主斑點(diǎn)比較，不得更深。0.3mg/mlv限量100%0.3%100mg/mlv安定片劑含量均勻度的檢查供試品用0.5%硫酸-甲醇溶液溶解成100ml，過(guò)濾后，取濾液10ml，稀釋成25ml，在284nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度A，已知E1%=454A/E?á1%?á??êí±?êy￡¨25ml/10ml￡??á×üì??yêy￡¨100ml￡?°2?¨±êê?á?°ù·?o?á?=?á100% ±êê?á? 安定片劑溶出度測(cè)定采用轉(zhuǎn)藍(lán)法采用鹽酸溶液HCl（9→1000）800ml，轉(zhuǎn)速100rpm，溶出時(shí)間：20min過(guò)濾后取濾液10ml，在242nm測(cè)定吸收度A，已知E1%=1018,Q=75%A/E?á1%?á×üì??yêy￡¨800ml￡?èü3?á?=?á100% ±êê?á? 安定注射液的顏色檢查安定受熱、光作用分解氨基酮和去甲氨基酮，為黃綠色顏色，為了控制雜質(zhì)，與黃綠色9號(hào)標(biāo)準(zhǔn)比色液比較，不得更深。4、含量測(cè)定（1）原料藥含量測(cè)定用非水堿量法（分子中含有堿性氮原子）溶劑：冰醋酸－醋酐指示劑：結(jié)晶紫滴定液：0.1mol/l高氯酸滴定液終點(diǎn)：溶液顯綠色TFVC 100%MsT=28.47mg片劑的含量測(cè)定紫外分光光度法取20片片劑，研細(xì)，稱約10mg，用0.5％硫酸－甲醇溶液溶解，稀釋成100ml，過(guò)濾，取濾液10ml，稀釋成100ml，在284nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度A，已知E1%=454。A/E?á1%?á??êí±?êy￡¨100ml/10ml￡??á×üì??yêy￡¨100ml￡?°2?¨°ù·?o?á?=?á100% 1?ê??á?· 注射液的含量測(cè)定用高效液相色譜法（HPLC）○1H標(biāo)/C標(biāo)＝H樣/C樣○2校正因子，內(nèi)標(biāo)法四、氟喹諾酮類抗菌藥的分析喹諾酮類藥物是一類化學(xué)合成抗菌藥，由于具有抗菌譜廣，抗菌作用強(qiáng)，使用安全，易于制造等優(yōu)點(diǎn)，迅速發(fā)展。第一代：吡酮酸類含有1.4-二氫-4-氧-吡啶-3-羧酸基本結(jié)構(gòu)NCOOHNO第二代：喹諾酮類含有1.4-二氫-4-氧代喹啉ONN第三代：氟喹諾酮類含有6-氟-4氧-喹諾酮-3-羧酸結(jié)構(gòu)ONFCOOHN此類藥物作用更佳，臨床上使用較多（各種沙星類藥物）性質(zhì)：含有羧基和堿性氮原子，故顯酸堿兩性，易溶于酸和堿具有共軛體系，紫外區(qū)有特征吸收一、諾氟沙星結(jié)構(gòu)：ONNNNFHN C2H5 1-乙基-6-氟-4-氧代-1.4-二氫-7-（1-哌嗪基）-3-喹啉羧酸兩性化合物鑒別、含有叔胺基，與丙二酸、醋酐共熱顯紅棕色、有機(jī)氟化物的鑒別反應(yīng)有機(jī)物→有機(jī)破壞→F-→加茜素氟藍(lán)試液、硝酸亞鈰試液→顯藍(lán)色、紫外吸收：在273nm波長(zhǎng)處有最大吸收二、環(huán)丙沙星結(jié)構(gòu)ONNNNFHN1-環(huán)丙基-6-氟-1.4-二氫-4-氧-7-（1-哌嗪基）-3-喹啉羧酸鑒別、紅外鑒別供試品紅外圖譜與標(biāo)準(zhǔn)品紅外圖譜一致、薄層層析供試品與標(biāo)準(zhǔn)品的斑點(diǎn)顏色，位置一致1?ê??·±ê×??·第十章生物堿類藥物的分析第一節(jié)概述定義生物堿是一類含氮的堿性有機(jī)化合物絕大部分存在于植物體內(nèi)，有明顯生理活性或毒性，如：利血平→抗高血壓藥物阿片→鎮(zhèn)痛→存在于罌粟莨菪堿→解痙→存在于顛茄植物中麻黃堿→縮血管→存在于麻黃植物中黃連素→抗菌→存在于小檗堿植物中生物堿地通性分子中都含有氮原子顯堿性，能和酸成鹽堿性，季銨結(jié)構(gòu)>叔胺>環(huán)酰胺脂肪胺、脂環(huán)胺>芳香胺如分子中同時(shí)含有酚羥基或羧基，則具有兩性性質(zhì)生物堿不溶于水，易溶于有機(jī)溶劑中生物堿鹽則不溶于有機(jī)溶劑，易溶于水。3、生物堿鑒別（1）化學(xué)鑒別法○1沉淀反應(yīng)和生物堿沉淀試劑反應(yīng)生物堿沉淀試劑：如碘化汞鉀，碘化鉍鉀，碘－碘化鉀，氯化汞等形成難溶于水的沉淀，沉淀有不同顏色，可用于鑒別。如：加蘭他敏加碘化汞鉀→黃白色沉淀加碘化鉍鉀→橙紅色沉淀○2生物堿顯色反應(yīng)與生物堿顯色試劑反應(yīng)，生成不同顏色生物堿顯色試劑：對(duì)二甲氨基苯甲醛、香草醛、甲醛硫酸、氧化性試劑(硝酸、溴、氯酸鉀等)、三氯化鐵○3專屬性鑒別反應(yīng)托烷類生物堿鑒別反應(yīng)：加發(fā)煙硝酸，醇制KOH，產(chǎn)生深紫色如：阿托品，山莨菪堿、東莨菪堿舉例：P212,表10－3熔點(diǎn)測(cè)定法測(cè)定生物堿熔點(diǎn)測(cè)定生物堿鹽熔點(diǎn),如形成碘化汞鉀、碘化鉍鉀等不溶性鹽，測(cè)定熔點(diǎn)紫外特征吸收如分子中含有雙鍵或共軛系統(tǒng)，有紫外吸收特征如硝酸一葉秋堿：7ug/ml水溶液，在256nm波長(zhǎng)處有最大吸收紅外光譜供試品光譜與標(biāo)準(zhǔn)品光譜對(duì)照，一致4、生物堿類藥物的檢查（1）雜質(zhì)檢查生物堿類藥物一般都從植物中提取或是半合成的，因此有許多雜質(zhì)，檢查方法：○1薄層層析法供試品溶液和標(biāo)準(zhǔn)雜質(zhì)品作薄層層析，對(duì)照±?2?2???○2化學(xué)方法如磷酸可待因中檢查嗎啡可待因無(wú)酚羥基，而嗎啡有酚羥基，因此可用三氯化鐵試液檢查○3高效液相色譜法抗腫瘤藥物長(zhǎng)春新堿用高效液相色譜檢查雜質(zhì)制劑含量均勻度和溶出度測(cè)定溶劑殘留量與含醇量的檢查許多生物堿存在于植物體內(nèi)，用溶劑提取，（有些溶劑有毒，如甲醇，氯仿等），因此必須做檢查。第二節(jié)生物堿類藥物的含量測(cè)定含量測(cè)定方法較多一、非水堿量法本類藥物含有氮原子顯堿性，在冰醋酸－醋酐溶液中可用高氯酸直接滴定。指示劑：結(jié)晶紫B.HX+HClO4B.HClO4+HX實(shí)際上是一個(gè)置換滴定，強(qiáng)酸置換出弱酸在冰醋酸中，酸性大?。篐ClO>HBr>HSO>HCl>HSO_>HNO>有機(jī)酸HBrHCl酸不及H，也是一個(gè)較強(qiáng)酸，滴定時(shí)，容易使終點(diǎn)提前，結(jié)果偏低。所以，在滴定前應(yīng)加入醋汞[Hg(Ac)]使生成在冰醋酸中難以解離的鹵化汞，消除影響。22B.HX+Hg(Ac)22B.HAc+HgX2試驗(yàn)注意點(diǎn)：一般生物堿都為一元酸鹽，所以滴定比例為1：1如為生物堿的硫酸鹽，硫酸為二元酸，在滴定過(guò)程中只能滴定到硫酸氫鹽階段，所以，硫酸鹽的生物堿滴定比例為1：1(BH+)2.SO4+HClO4(BH+).ClO4+(BH+).HSO4-如：硫酸阿托品藥物硫酸奎寧、硫酸奎尼丁中含有4個(gè)氮原子，但只有2個(gè)氮原子和硫酸成鹽。因此，用高氯酸滴定的比例為1：3H+NCHOHNHH+NCHOHNH+NCHOHNH++HSO4ClO4-ClOClO-NCHOHNH+H+NCHOHN-.SO4+3HClO4CHCH2CHCH2-4 H 4 (4)硝酸在冰醋酸中為弱酸，但具有氧化性，影響指示劑變色，所以硝酸生物堿鹽用電位法指示終點(diǎn)，而不用指示劑指示終點(diǎn)。二、水溶液中容量分析法1、提取中和法基本原理：根據(jù)生物堿鹽可以溶解在水中，而游離生物堿溶解于有機(jī)溶劑中，而不溶于水中的性質(zhì)。B.HX+NH3(?òNaOH)BBèüóú?? èüóúóD?úèüòo○1用有機(jī)溶劑提取游離堿，蒸干溶劑，加中性乙醇溶解，用酸標(biāo)準(zhǔn)液直接滴定；○2用有機(jī)溶劑提取游離堿，加入酸成鹽，蒸干溶劑，用非水堿量法滴定；○3用有機(jī)溶劑提取游離堿，加入過(guò)量定量的酸成鹽，多余的酸用氫氧化鈉回滴。如：阿片中含有嗎啡，那可汀，可待因，罌粟堿。主要測(cè)定嗎啡的含量分離測(cè)定見(jiàn)下圖：2、直接中和法2、直接中和法氨茶堿由茶堿和乙二胺組成氨茶堿加硫酸成茶堿，加硝酸銀溶液，生成銀鹽沉淀和硝酸，生成的硝酸用氫氧化鈉滴定。3、雙相滴定鹽溶于水，游離生物堿不溶于水B.HNO3+NaOHBèüóú??èüóúóD?úèü?áNaNO+3+H2O三、酸性染料比色法在適當(dāng)?shù)腜H介質(zhì)中，有機(jī)堿（B）可與氫離子結(jié)合成鹽（BH+）,一些酸性染料（如溴麝香草酚藍(lán)、溴甲酚綠）在此條件下解離為陰離子（In-）。則陽(yáng)離子和陰離子可以結(jié)合成絡(luò)合離子。BH++In-BH+In-阿片濾渣，罌粟堿、可待因，不溶性鈣鹽濾液（嗎啡，那可汀鹽）Ca(OH)2研磨、過(guò)濾樹(shù)脂MgSO4,Ca(OH)2濾液（鹽）嗎啡結(jié)晶，不溶于乙醚溶液乙醇、乙醚、NH4Cl測(cè)定形成有色配位化合物，溶解在有機(jī)溶劑中，提取后，測(cè)定吸收度，計(jì)算含量。由于所用試劑為酸性染料，所以叫酸性染料比色法。試驗(yàn)條件：適當(dāng)PH值PH過(guò)?。河欣陉?yáng)離子生成，不利于陰離子生成；PH過(guò)大：有利于陰離子生成，不利于陽(yáng)離子生成。適當(dāng)有機(jī)溶劑和酸性染料有機(jī)溶劑必須提取率高，選擇性好，常用溶劑：氯仿、二氯甲烷由于氯仿在水中的溶解度小，所以是最常用的提取溶劑。常用酸性染料：溴麝香草酚藍(lán)、溴甲酚綠。水分的影響用有機(jī)溶劑提取離子對(duì)時(shí)，應(yīng)嚴(yán)防混入水份，否則微量的水份可以使有機(jī)溶劑（如氯仿）發(fā)生渾濁，影響比色。一般加脫水劑（如無(wú)水硫酸鈉）或經(jīng)濾紙慮過(guò)后除去。第三節(jié)咖啡因的分析咖啡因?yàn)橹袠信d奮藥，常見(jiàn)于復(fù)方阿司匹林等各種感冒藥中。1、結(jié)構(gòu) O CHCH3NNNONN3 CH3 CHNOM.F.=194.2810421.3.7－三甲基黃嘌呤2、鑒別（1）紫脲酸銨反應(yīng)（生物堿顯色反應(yīng)）在酸性溶液中咖啡因可被氯酸鉀氧化為阿馬林酸，再與氨作用生成四甲基紫脲酸銨而顯紫色，加入氫氧化鈉，則紫色消失。NNONNNNONN3KClKClO3NNONHOOHOOCH3CH3 NCH3 NH3O CH3 CH3 CH3 O ONNNNOHNNNNOHOONNNNONH4OOCH3 NCH3NH3 CH3 NCH3OO CH3 CH3 CH3 CH3 (2)、沉淀反應(yīng)咖啡因和碘－碘化鉀試液作用，生成紅棕色的復(fù)合物沉淀。B+KI+2I2+HCl B.HI.2I2+KCl該沉淀與氫氧化鈉試液作用發(fā)生分解，顏色消失B.HI.2I2+NaOHB+3NaI+2NaIO+3H2O3、含量測(cè)定采用非水堿量法溶劑：醋酐：冰醋酸＝5：1指示劑：結(jié)晶紫滴定液：0.1mol/l高氯酸滴定液終點(diǎn)：溶液顯黃色滴定度：T，每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/l）相當(dāng)于19.42mg的CHNO。810421ml0.1mol/l194.2g/mol19.42mg第四節(jié)鹽酸麻黃堿的分析鹽酸麻黃堿具有2個(gè)手性碳原子，因此有旋光性，比旋度為－33?！?5.5。，左旋。OHNHCH3CCCH3.HClHHCHNO.HClM.F.=210.701015鑒別絡(luò)合顯色在堿性條件下與硫酸銅作用生成藍(lán)紫色絡(luò)合物，該絡(luò)合物溶于乙醚呈紫紅色，水層則為藍(lán)色。絡(luò)合物結(jié)構(gòu)：CCCCCH3OHNHCH3HCuHNHCH3HOCH3CC含量測(cè)定1、原料藥、注射液采用非水堿量法注射液在水浴上蒸干因?yàn)槭躯}酸鹽，所以在滴定前必須加入醋酸汞溶劑：冰醋酸指示劑：結(jié)晶紫滴定液：0.1mol/l高氯酸滴定液終點(diǎn)：顯翠綠色2、片劑采用銀量法B.HCl+AgNO3B.HNO3+AgCl第五節(jié)鹽酸小檗堿的分析略講第十一章甾體激素類藥物的分析第一節(jié)概述定義和分類定義：甾體激素類藥物是指具有甾體結(jié)構(gòu)的激素類藥物，主要包括腎上腺皮質(zhì)激素和性激素。分類：ì??¤?ê?¤??￡o?÷òa′óàà￡??1?×￡????ó?òa?μè￡??éμ??éá|?￠μ?è??×?éμèé?é??ù?¤?ê?¤?????¤?ê?¤??￡o????′úD￡???÷òa?a?¤?êía?Tì?D??¤??￡oê?ò??á?oíè??￡??y?á?oíè??￡??¤???×?oíaμèD??¤??′??¤??￡o±??×?á′??t′?μè?D?¤??￡o??ì?aíèμí??ˉ?¤??￡o±?±??á?μáú°°×?êí??ˉ￡μ?ó?óú???à結(jié)構(gòu)特征甾體激素類藥物的母體結(jié)構(gòu)為環(huán)戊烷多氫菲，共有A、B、C、D四個(gè)環(huán)。 12 17ABABCD15789101114162153 4 6 10、13位有甲基，為雄甾烷，雄激素母體18ABABCD1913位有甲基，為同化激素母體18ABABCD10、13位有甲基，17位有乙基（二個(gè)碳原子），為孕甾烷，孕激素母體21AABCD181920A環(huán)位苯環(huán)，13位有甲基，為雌甾烷，雌激素母體18AABCD1、糖皮質(zhì)激素結(jié)構(gòu)特征OH129OH1291116?éòyè?·ú?éòyè????ù?ò?ê?ùCO?éòyè????ü?éòyè??×?ù?ò???ùO 6 1、2位引入雙鍵，如潑尼松，氫化潑尼松，氟輕松，地塞米松等；9位引入氟：如氟輕松，地塞米松，倍他米松等；11位引入羥基或羰基：如潑尼松→氫化潑尼松，可的松→氫化可的松；16位引入甲基或羥基：如引入甲基,地塞米松，倍他米松；引入羥基，曲安萘德；這些結(jié)構(gòu)改變，引出一大類糖皮質(zhì)激素類藥物。結(jié)構(gòu)特征：○1A環(huán)3位羰基，4，5位雙鍵，形成共軛體系，Δ4－3－酮；○2C環(huán)11位上有揚(yáng)原子，羰基或羥基（β－用實(shí)線表示）；○3D環(huán)17位上有α－羥基（用虛線表示）；○4D環(huán)17位上有α－醇酮基（O=C-CH2OH），醇有時(shí)成酯形式存在，以醋酸酯較常見(jiàn)。○56，9位可以有氟原子。總之，可供分析用的主要基團(tuán)有：Δ4－3－酮，17－α－醇酮基，有機(jī)氟，酯類結(jié)構(gòu)。雄激素和蛋白同化激素結(jié)構(gòu)特征：○1A環(huán)，Δ4－3－酮○217位β-OH○3雄激素：10，13位有甲基，同化激素：10位無(wú)甲基雌激素和孕激素雌激素結(jié)構(gòu)特征：○1A環(huán)為苯環(huán)○23位為酚羥基○317位β－OH或有乙炔基○410無(wú)甲基孕激素結(jié)構(gòu)特征：○1A環(huán)，Δ4－3－酮○217位有羥基（黃體酮除外）○317位甲基酮17－CO-CH3○410位有些有甲基，有些無(wú)甲基。綜上所述，可用于分析簽定用的基團(tuán)：1、Δ4－3－酮；2、C位α－醇酮基，羥基，乙炔基，甲基酮；3、A環(huán)酚羥基；4、酯基17及有機(jī)氟三、鑒別紅外光譜法供試品紅外圖譜與標(biāo)準(zhǔn)圖譜比較。一致P241～257，各種甾體激素的紅外圖譜。顯色反應(yīng)○1與強(qiáng)酸的呈色反應(yīng)許多甾體激素能與硫酸、磷酸、高氯酸、鹽酸等反應(yīng)呈色。其中以與硫酸的呈色反應(yīng)應(yīng)用較廣，呈現(xiàn)一定的顏色或熒光。如醋酸可的松→呈現(xiàn)黃色氫化可的松→呈現(xiàn)綠色熒光P263，表11－9，部分甾體激素類藥物與硫酸反應(yīng)的現(xiàn)象此外，尚有硫酸加各種溶劑作為顯色劑，如：硫酸－甲醇，硫酸－乙醇中國(guó)藥典中甲睪酮，甲羥孕酮就用此法鑒別?！?某些官能團(tuán)的呈色反應(yīng)C－酮基，C-酮基能與般羰基羰基試劑：2.4－二硝基苯肼；異煙肼，羥胺，氨基脲如2.4－二硝基苯肼和黃體酮反應(yīng)呈現(xiàn)黃色。A環(huán)為苯酚結(jié)構(gòu)用FeCl顯色；和重氮鹽反應(yīng)，生成有色偶氮化合物17甲基酮17－CO-CH能與亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng)呈各種顏色。如：黃體酮和亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng)，現(xiàn)藍(lán)紫色，為黃體酮的特征反應(yīng)，其他甾體激素則顯橙色或無(wú)色。α－醇酮17－CO-CHOH具有還原性，能與許多氧化反應(yīng)，如氨制硝酸銀，斐林試劑，四氮唑鹽等。其中以四氮唑鹽反應(yīng)最常用。常見(jiàn)的有氯化三苯四氮唑和四氮唑藍(lán)。氯化三苯四氮唑：NN+NNN+NN-?1?-NNNHNNN+NN+NNCl-?1?-Cl-NN+NNNNNHNNN OCH3OCH3 OCH3OCH3?Té? oìé? E、17－乙炔基，和硝酸銀反應(yīng)形成沉淀如：炔諾酮，炔雌醇 CCH CCAgOHOH +AgNO3 3、薄層層析鑒別法供試品和標(biāo)準(zhǔn)品溶液做薄層層析±?2?2???如為同一物質(zhì)，應(yīng)在同一位置出現(xiàn)，如果不在同一位置出現(xiàn)，則可能非同一物質(zhì)（Rf值不同）。四、檢查甾體激素類藥物多由其他甾體化合物或結(jié)構(gòu)類似的其他甾體激素經(jīng)結(jié)構(gòu)改造而來(lái)的，因而可能會(huì)帶來(lái)原料、中間體、異構(gòu)體、降解產(chǎn)物以及試劑和溶劑等許多雜質(zhì)。游離磷酸鹽如:倍他米松磷酸鈉中檢查磷酸鹽1?ê??·25mg￡¨H3PO4)?a?á?§+H2SO4±ê×?òo￡¨0.0036￡￥W/VKH2PO4)?×°±?ù±?·ó￡-??áò?á???aà? 730nm′|2a?¨A±è??A1?<A±ê甲醇和丙酮如：地塞米松磷酸鈉中檢查甲醇和丙酮采用氣相色譜法：要求，丙酮含量不超過(guò)5.0％，不得含有甲醇。雌酮如：炔雌醇中檢查雌酮 CCH O OH è2′?′? ′?ía加間二硝基苯，能在雌酮16位上加成1?ê??·5mg?ó???t???ù±?D?????μ?KOHòò′?èüòo×?oìé?±ê×?′?ía1?ê??·??é?<±ê×??·??é?4、其他甾體薄層層析，采用自身對(duì)照法檢查將供試品配成高濃度和低濃度兩種溶液，在薄層上展開(kāi)如：氫化可的松的檢查供試品配成：3.0mg/ml和60ug/ml±?2?2??????¨?èμí?¨?è要求：高濃度雜質(zhì)斑點(diǎn)數(shù)不超過(guò)規(guī)定量（如氫化可的松雜質(zhì)斑點(diǎn)數(shù)不超過(guò)3個(gè)），高濃度雜質(zhì)斑點(diǎn)的顏色、大小不能深于低濃度的主斑點(diǎn)。舉例：P267－表11－11部分甾體激素類藥物的其他甾體檢查法五、含量測(cè)定甾體激素類藥物含量測(cè)定方法很多，可用容量法（乙炔基用硝酸銀滴定）、比色法（各種顏色，如和四氮唑鹽反應(yīng)）、紫外分光光度法（分子中有共軛體系）、熒光法（有些激素反應(yīng)后有熒光產(chǎn)生）、氣相色譜法、高效液相色譜法等。主要講解紫外分光光度法測(cè)定甾體激素類藥物：由于甾體激素類藥物中有許多含有Δ4－3－酮、Δ4.1－3－酮、苯環(huán)等，都具有共軛體系，在紫外區(qū)有特征吸收。我們可以通過(guò)測(cè)定吸收度值A(chǔ)來(lái)計(jì)算甾體激素的含量：AC1%EE1%可以查表，P272表11－14部分甾體激素的紫外分光光度測(cè)定條件第十二章維生素類藥物的分析概述維生素是維持人體正常代謝和機(jī)能所必需的生物活性物質(zhì)，一般不能在人體內(nèi)合成，而主要必須從外界攝取。維生素類藥物主要用于治療維生素缺乏癥和營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充。市場(chǎng)上有許多復(fù)方制劑：21金維他、黃金搭檔等補(bǔ)鈣時(shí)用→VD夜盲癥補(bǔ)充→VA維生素主要有二大類：脂溶性維生素：VA、VD、VE、VK；水溶性維生素：VB、VC、煙酸、泛酸、葉酸一、維生素E1、結(jié)構(gòu)CH3OCH3OCH3C16H333¤??·?á′CH3COO CH3 α－生育酚醋酸酯可作為脂溶性抗氧劑2、鑒別（1）、氧化顯色 H+ HNO3??éú??E éúóy·ó éúóyoì?á???a￡¨è￥′×?á?￥￡? 3èé?2、絡(luò)合顯色KOH Fe3+??￡-éúóy????éú??E éúóy·ó ???a FeCl3￡¨è￥′×?á?￥￡?(?1?-￡?Fe2+2.2￡-áa?áठoìé? NNNNFe3紅色三聯(lián)吡啶絡(luò)亞鐵離子二、維生素C1、結(jié)構(gòu)CH2OHHCOHOHOHOHOHL-構(gòu)型分子中有共軛體系，有紫外吸收特征分子中含有二烯醇結(jié)構(gòu)，具有酸性，并有很強(qiáng)的還原性，能和氧化劑發(fā)生反應(yīng)作水溶性抗氧劑2、鑒別、還原硝酸銀??éú??C ￡?2AgNO32Agoúé?3áμí、還原二氯靛酚 Cl ClNHNNHNO ONaOH ONa Cl Cl藍(lán)色無(wú)色醌型結(jié)構(gòu)酚型結(jié)構(gòu)共軛體系非連續(xù)共軛體系3、含量測(cè)定直接碘量法維生素C具有還原性，能和碘發(fā)生氧化還原反應(yīng)CHOHOCHOCHCH2OHHOHH+OH2O +I2O +2HIOHOH O O 維生素C被氧化成去氫抗壞血酸，碘被還原成碘化氫指示劑：淀粉終點(diǎn)：微過(guò)量碘可使淀粉指示劑變藍(lán)T=8.806mg每1ml碘滴定液（0.1mol/l）相當(dāng)于8.806mg維生素C維生素C注射液中加入穩(wěn)定劑焦亞硫酸鈉，具有強(qiáng)還原性，因此對(duì)碘量法有干擾，應(yīng)加入丙酮，消除干擾。Na2S2O5 + H2O 2NaHSO3 CH CHNaHSO3 +CH33OCH3C3SO3NaOOH第十三章抗生素類藥物的分析概述抗生素是一類重要的藥物，臨床上應(yīng)用最多的是抗生素，在藥品使用中占地份額最大，一般都在40％以上。舉例：臨床上應(yīng)用的抗生素大都有生物合成的，經(jīng)過(guò)發(fā)酵、提純制得，因此，藥物中就會(huì)有許多雜質(zhì)，引起過(guò)敏反應(yīng)等。所以為了保證用藥的安全與有效，抗生素常規(guī)檢驗(yàn)應(yīng)包括：、鑒別試驗(yàn)用化學(xué)方法或生物學(xué)方法證明是何種抗生素、異常毒性試驗(yàn)限制產(chǎn)品種的毒性雜質(zhì)、無(wú)菌試驗(yàn)檢查藥品是否無(wú)菌、水份測(cè)定限制過(guò)高水份，以免影響產(chǎn)品的穩(wěn)定性、熱原試驗(yàn)檢查藥品中的致熱物質(zhì)、溶液澄清度檢查限制不溶性雜質(zhì)、酸堿度測(cè)定、降壓試驗(yàn)檢查降壓物質(zhì)、含量測(cè)定或效價(jià)測(cè)定確定含量或效價(jià)抗生素含量或效價(jià)測(cè)定主要有：物理化學(xué)測(cè)定法和微生物檢定法微生物檢定法：是以抗生素抑制細(xì)菌生長(zhǎng)能力或殺菌能力作為衡量標(biāo)準(zhǔn)。優(yōu)點(diǎn)：方法靈敏度高，用量少，與臨床較接近，更符合實(shí)際；缺點(diǎn)：測(cè)定時(shí)間長(zhǎng)，誤差大，重復(fù)性差。物理化學(xué)測(cè)定法：常規(guī)藥物分析方法，根據(jù)抗生素的化學(xué)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，利用物理性質(zhì)或化學(xué)反應(yīng)來(lái)測(cè)定。優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單，省時(shí)，準(zhǔn)確缺點(diǎn)：不一定符合實(shí)際抑菌或殺菌能力。第一節(jié)β－內(nèi)酰胺類抗生素結(jié)構(gòu)特征β－內(nèi)酰胺類：青霉素類和頭孢菌素分子中都含有β－內(nèi)酰胺環(huán)青霉素類：45S3CH3RCONHCH3N1N127頭孢菌素類：5N1N12348RCONHOCH2RCOOH青霉素類的結(jié)構(gòu)是由側(cè)鏈RCO及母核6－氨基青霉烷酸（6-APA），母核由β－內(nèi)酰胺環(huán)與氫化噻唑環(huán)并合而成的。頭孢菌素類的結(jié)構(gòu)是由側(cè)鏈RCO及母核7－氨基頭孢菌烷酸（7-ACA）組成母核是由β－內(nèi)酰胺環(huán)與氫化噻嗪環(huán)組合而成的。β－內(nèi)酰胺環(huán)為四元環(huán)，具有較大張力，因此容易發(fā)生開(kāi)環(huán)反應(yīng)?；瘜W(xué)性質(zhì)酸性分子中具有羧基，因此具有酸性，能和堿（無(wú)機(jī)堿或有機(jī)堿）成鹽。如青霉素鈉、鉀鹽等旋光性青霉素含有3個(gè)手性碳原子：C、C、C2 5 6頭孢菌素含有2個(gè)手性碳原子：C、C6 7所以具有旋光性紫外吸收特征青霉素母核無(wú)紫外吸收，因?yàn)槟负藳](méi)有共軛系統(tǒng)但其側(cè)鏈如有苯環(huán)等共軛系統(tǒng)，則有紫外吸收如：青霉素R:CH2CONH則在257nm、264nm波長(zhǎng)處有吸收峰頭孢菌素：母核中具有O=C-N-C=C結(jié)構(gòu)，因此有紫外吸收特征吸收波長(zhǎng)在260nm，這是7-ACA母核的特征吸收峰。β－內(nèi)酰胺環(huán)的不穩(wěn)定性干燥純凈的青霉素很穩(wěn)定，對(duì)熱也穩(wěn)定，如：結(jié)晶青霉素鉀鹽，在105℃加熱1.5小時(shí)，效價(jià)也不降低，基本無(wú)變化，但青霉素水溶液很不穩(wěn)定，水溶液在30℃放置24小時(shí)，則效價(jià)下降56％。這主要是由于β－內(nèi)酰胺環(huán)不穩(wěn)定引起的，β－內(nèi)酰胺環(huán)容易受酸堿、重金屬、青霉素酶、羥胺等影響發(fā)生環(huán)的破裂而失去抗菌作用，甚至引起過(guò)敏反應(yīng)。舉例：青霉素盡量不用葡萄糖水化（PH4.1左右），化完藥后應(yīng)立即靜滴，靜滴時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)。相對(duì)來(lái)說(shuō)，頭孢菌素也會(huì)發(fā)生β－內(nèi)酰胺環(huán)開(kāi)裂，但相對(duì)穩(wěn)定性要高一點(diǎn)。舉例：醫(yī)院中要求青霉素類藥物，不管靜滴用還是口服用，都必須做皮試，頭孢菌素則要求靜滴藥物作皮試。三、鑒別試驗(yàn)羥戊酸鐵反應(yīng)青霉素與羥胺作用生成羥戊酸衍生物，在中性溶液中與Fe3+作用生成紅色配位化合物。NNHOHHN S CH3 NNHOHHNRCONHCH3 NH2OH RCONHCH3OOCOOHCOOH S CH3HNONH3HNONH3Fe/COOHO紅色焰色反應(yīng)鈉鹽黃色火焰鉀鹽紫色火焰有機(jī)胺鹽的特殊反應(yīng)青霉素可以和有機(jī)堿成鹽，如普魯卡因青霉素，酸化后可析出普魯卡因，因具有芳伯胺基，有重氮化－偶合反應(yīng)。與硫酸及硫酸－甲醛試劑呈色反應(yīng)多數(shù)青霉素和頭孢菌素遇硫酸在冷時(shí)和加熱時(shí)都無(wú)變化，而遇硫酸－甲醛試劑有較顯著的顏色變化，可供鑒別。如：H2SO4H2SO4100℃加熱1分鐘H2SO4-甲醛H2SO4-甲醛100℃加熱1分鐘羥氨芐青霉素?zé)o色無(wú)色無(wú)色暗黃氨芐青霉素?zé)o色無(wú)色無(wú)色暗黃普魯卡因青霉素?zé)o色無(wú)色無(wú)色棕紅色頭孢氨芐無(wú)色淡黃色淡黃色黃色紅外光譜法抗生素紅外吸收?qǐng)D譜與對(duì)照?qǐng)D譜比較，一致檢查檢查內(nèi)容較多，溶液澄清度，顏色，酸堿度，水份，異常毒性，熱源，降壓物質(zhì)等。含量測(cè)定微生物測(cè)定法物理化學(xué)測(cè)定法：主講，文獻(xiàn)報(bào)道較多如：紫外分光光度法（氨芐西林鈉）、酸堿滴定法、碘量法（頭孢氨芐）、高效液相色譜法（頭孢拉定）、汞量法（青霉素鈉）。青霉素鈉――硝酸汞電位滴定法原理： ??D????aoó￡?PH4.6 PH4.6?à?1?????à?1°·?à?1°·??1ˉ í??è￡????a Hg(NO)2μ??¨??o?PH4.6NH2??o?PH4.6NH2COOHgCH3 CH3 +Hg(NO3)2+ 2HNO3NH2 COOH青霉胺青霉胺絡(luò)汞分二次測(cè)定：第一次，是青霉素水解后滴定，測(cè)出總青霉素含量；第二次，不經(jīng)水解直接滴定，測(cè)出降解物百分含量；二者之差即為青霉素百分含量。第二節(jié)氨基糖甙類抗生素的分析本類抗生素是以氨基環(huán)醇與氨基糖縮合而成，故稱為氨基糖甙類抗生素，目前臨床上使用有：鏈霉素、慶大霉素、卡那霉素、丁安卡那霉素、新霉素等硫酸鏈霉素一、化學(xué)結(jié)構(gòu)NHOHOHOHNHOHOHOHNHNHCC2NH2NHOOOHCHOCH3OOOHCH3NHCH2OH.3/2H2SO4á′?1?òá′?1ì?á′?1??ì?°·°±?ùì? N-?×?ù￡-L-??ì?ì?°·OH二、化學(xué)性質(zhì)3個(gè)堿性中心，能和酸成鹽具有甙鍵，能發(fā)生水解，水解成各部分單元鏈霉糖部分有醛基，能和各種氧化劑（KMnO、KClO、HO）羰基試劑、羥胺、半胱胺酸4 4 2等反應(yīng)。水解后鏈霉糖能發(fā)生重排生成麥芽酚。三、鑒別茚三酮反應(yīng)由于鏈霉素具有氨基糖甙結(jié)構(gòu)，具有羥基胺類和α－氨基酸的性質(zhì)鏈霉素＋茚三酮→藍(lán)紫色N－甲基葡萄糖胺反應(yīng)（Elson-Morgan）反應(yīng)鏈霉素水解后產(chǎn)生N－甲基葡萄糖胺，加乙酰丙酮，對(duì)二甲氨基苯甲醛，產(chǎn)生紅色麥芽酚反應(yīng)（Maltol）本品水溶液，加NaOH，水浴加熱后，加硫酸鐵銨溶液即顯紫紅色，為鏈霉素特有反應(yīng)。CH33 á′?1?? ?ó??·ó4、坂口反應(yīng)（Sakayuchi）8￡-???ùà-??′????á??á′?1??3èoìé?鏈霉素上鏈霉胍的特有反應(yīng)5、硫酸鹽鑒別Ba2++SO42-BaSO4×?oìé???o???OFe3+NaOH???a????OOCHOROFe3+NaOH???a????OOCHOOH O CH3 O CH四、含量測(cè)定采用微生物測(cè)定法鏈霉素一般用國(guó)際單位表示第三節(jié)四環(huán)素類抗生素本類抗生素分子中都含有4個(gè)環(huán)，故稱為四環(huán)類抗生素鹽酸四環(huán)素一、結(jié)構(gòu)OHOOHOOHCHOHOOHOOHCH3HOHH123456789101112OH.HClCONH2二、化學(xué)性質(zhì)手性碳原子，具有旋光性，比旋度為－240～－258含有酚羥基（10位），烯醇型羥基（3、12位），因而顯弱酸性。能和堿成鹽。含有二甲氨基（－N(CH)）和酰胺基（-CONH），因而顯堿性，能和酸成鹽。 32 2四環(huán)素是兩性化合物，遇酸或堿均能成鹽。易發(fā)生差向異構(gòu)化反應(yīng)，形成無(wú)抗菌作用的差向異構(gòu)體（ETC）。(CH)N1211109876121110987654321OHCH3HOHH323HOH1234567101112OHOH89CONH2CONH2 OH O OH O OH O OH OETC在加熱情況下，易形成脫水四環(huán)素（ATC），脫水四環(huán)素易發(fā)生差向異構(gòu)化,形成差向脫水四環(huán)素（EATC）。HOH312345678HOH3123456789101112-H2O12111076543213HOHOHOHCONH2CONH2 OH O OH O OH OH O OATCHOHHHOHH32CH312345671011121211107654321HOH CH3 H N(CH3)2OHOHCONH2CONH2 OH OH O O OH OH O OATCEATC在堿性溶液中四環(huán)素的碳環(huán)容易破裂，生成無(wú)活性的異四環(huán)素。OH-3HOHO12345OH-3HOHO12345678910111212111076543213HOHOHOH89CONH2CONH2 OH O OH O OH O OH O與金屬離子形成配位化合物脫水四環(huán)素（ATC）、4－差向脫水四環(huán)素（EATC）、細(xì)胞毒性比四環(huán)素大250倍，4－差向四環(huán)素的細(xì)胞毒性比四環(huán)素大70倍，所以，四環(huán)素藥物中必須控制這些雜質(zhì)。舉例：梅花K膠囊四環(huán)素外觀色澤變深往往是脫水雜質(zhì)含量較高。三、鑒別顯色反應(yīng)四環(huán)素與硫酸作用，生成脫水四環(huán)素，溶液顯深紫色，再加三氯化鐵試液后，生成脫水四環(huán)素鐵絡(luò)合物，溶液顯紅棕色。HOH CH3 H N(CH3)HOHOHCONH2 OH O O O Fe/3 絡(luò)合物結(jié)構(gòu)氯化物鑒別為鹽酸鹽，所以具有氯化物鑒別反應(yīng)。薄層層析±?2?2???0.5mg/ml1?ê??·èüòo???á???·???????·èüòo1?±ê供試品斑點(diǎn)顏色，位置與對(duì)照品斑點(diǎn)相同。四、檢查有關(guān)雜質(zhì)：ETC、ATC、EATC、CTC(金霉素)采用薄層層析 1 23456 1．5mg/ml供試品2．0.2mg/ml差向四環(huán)素3．0.025mg/ml脫水四環(huán)素4．0.025mg/ml差向脫水四環(huán)素5．0.1mg/ml金霉素6．0.05mg/ml四環(huán)素、0.1mg/ml金霉素、0.025mg/ml差向脫水四環(huán)素、0.025mg/ml脫水四環(huán)素、0.2mg/ml差向四環(huán)素第十四章制劑分析第一節(jié)概述為了防治與診斷疾病的需要，更好地發(fā)揮藥物的分析，降低毒性，減少副作用，便于患者服用，便于儲(chǔ)藏與運(yùn)輸，根據(jù)藥典、部標(biāo)準(zhǔn)或其他法定處方，需將原料藥和輔料等經(jīng)過(guò)加工制成各種制劑。常用的劑型有：片劑、注射劑、酊劑、栓劑、膠囊劑等根據(jù)制劑中含有有效成分的種類，又可將制劑分為單方制劑和復(fù)方制劑。一、制劑分析的特點(diǎn)制劑分析：是對(duì)各種制劑，應(yīng)用物理、化學(xué)或生物測(cè)定的方法進(jìn)行分析，檢驗(yàn)其是否符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。特點(diǎn)：消除輔料的干擾稀釋劑、賦形劑、附加劑會(huì)影響鑒別、檢查和含量測(cè)定，所以首先要消除這些干擾。如：維生素C中穩(wěn)定劑，焦亞硫酸鈉→干擾碘量法阿司匹林片劑中酒石酸、枸櫞酸，影響酸堿滴定→兩步滴定法消除共存藥物的干擾復(fù)方制劑、特別是含量測(cè)定根據(jù)制劑生產(chǎn)中可能引入的雜質(zhì)確定檢查項(xiàng)目和限度要求制劑的雜質(zhì)檢查，主要是檢驗(yàn)制劑在制備過(guò)程中或貯存過(guò)程中所產(chǎn)生的雜質(zhì)。原料藥不再檢驗(yàn)，因?yàn)橥读锨耙褭z驗(yàn)合格。含量限度比原料藥寬如：原料藥磺胺嘧啶含量不得少于99.0％，磺胺嘧啶片應(yīng)為標(biāo)示量95.0～105.0％，允許±5.0％。二、制劑分析的指導(dǎo)原則1、鑒別A、為消除共存藥物和輔料的干擾，應(yīng)通過(guò)溶劑溶解而分離；B、多采用紫外分光光度法鑒別（規(guī)定吸收波長(zhǎng)或不同波長(zhǎng)吸收度的比值）；C、當(dāng)主藥含量低微時(shí)，可采用靈敏度高、專屬性強(qiáng)的方法，如薄層層析、高效液相色譜法；D、必要時(shí)可增加與同類藥物相區(qū)別的鑒別試驗(yàn)（如磺胺類測(cè)定提取物的熔點(diǎn)）。2、雜質(zhì)檢查A、制劑的雜質(zhì)檢查一般首選薄層色譜法，如不能解決，再選用高效液相色譜法；B、除檢查生產(chǎn)工藝中可能帶入的有關(guān)雜質(zhì)外，主要控制降解產(chǎn)物；C、當(dāng)紫外分光光度法用于雜質(zhì)檢查時(shí)，應(yīng)選用主藥無(wú)吸收的波長(zhǎng)或雜質(zhì)有吸收的波長(zhǎng)處規(guī)定吸收值限量，用以控制雜質(zhì)的限量。3、含量測(cè)定A、可能時(shí)應(yīng)選用與原料藥相同的測(cè)定方法；B、共存藥物、輔料、附加劑有干擾時(shí)，可考慮增加預(yù)處理或改進(jìn)方法，排除干擾后用原料藥的測(cè)定方法；C、降解產(chǎn)物有干擾時(shí)，可選用專屬性較高的方法；D、主藥含量很小的制劑可選用靈敏度較高的方法，常用紫外分光光度法。但應(yīng)注意避免溶劑或降解產(chǎn)物的干擾，選用的波長(zhǎng)應(yīng)具有合適的峰形和吸收，E1%在100以上，應(yīng)盡量減少使用有機(jī)溶劑，尤其避免使用有毒作用的溶劑；E、含量測(cè)定法應(yīng)能適用于含量均勻度和溶出度的共同應(yīng)用，三種測(cè)定盡可能用相同的溶劑；F、復(fù)方制劑的含量測(cè)定，若不能直接采用吸收系數(shù)法，而又無(wú)其它適宜方法時(shí)，也可用合適的計(jì)算分光光度法，對(duì)于含三個(gè)或三個(gè)以上組分的制品不宜選用此法；G、對(duì)于所含雜質(zhì)或賦形劑干擾含量測(cè)定，需先經(jīng)繁雜的分離才能測(cè)定，或各成分間互相干擾的制劑或復(fù)方制劑，可選用高效液相色譜法。第二節(jié)片劑分析片劑系指藥物與適宜的輔料通過(guò)制劑技術(shù)制成片狀或異性片狀的制劑，主要供口服應(yīng)用。一、片劑組成片劑除主要成分之外，還有一些輔料（賦形劑）。一般是淀粉、糖粉、碳酸鈣、硫酸鈣以及少量的硬脂酸鎂、滑石粉等。由于輔料存在，常干擾主藥的含量測(cè)定，但主要含量大時(shí)，可以采用直接測(cè)定法，因它不受輔料影響，或影響可以忽略不計(jì)。例如：藥典中，中和法測(cè)定阿司匹林、谷氨酸，碘量法測(cè)定安乃近片，亞硝酸鈉測(cè)定磺胺類藥物的片劑，都不需要分離輔料，而直接進(jìn)行滴定。二、片劑的分析步驟外觀觀察：包括外觀色澤、臭、味等物理性狀；鑒別：鑒別藥品的真?zhèn)?；檢查：檢查片劑在生產(chǎn)過(guò)程和貯藏過(guò)程中的雜質(zhì)檢查、常規(guī)片劑劑型檢查（如硬度等）、微生物檢查（如細(xì)菌、霉菌數(shù)及活螨檢查）。5、含量測(cè)定：判斷是否符合藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)三、鑒別片劑的鑒別是已知物的確證試驗(yàn)。一般選用專屬性強(qiáng)、附加成分無(wú)干擾或易于消除干擾的化學(xué)鑒別試驗(yàn)。利用化學(xué)反應(yīng)的外部特征（溶液顏色的改變，沉淀的生成或溶解，產(chǎn)生氣體或熒光等）做鑒別試驗(yàn)。片劑鑒別一般不采用紅外吸收?qǐng)D譜法，是因?yàn)槠瑒┲刑峒冎魉幈容^復(fù)雜。但也有例外，棕櫚酸氯霉素、螺內(nèi)酯片等。附加成分無(wú)干擾，直接鑒別；將片劑中的不溶性輔料慮過(guò)或離心沉淀，取濾液或上清夜進(jìn)行鑒別；用有機(jī)溶劑提取主藥后進(jìn)行鑒別；四、檢查（一）、片劑的常規(guī)檢查片劑的常規(guī)檢查包括重量差異試驗(yàn)、崩解時(shí)限試驗(yàn)、片劑的厚度與直徑均勻度試驗(yàn)、硬度試驗(yàn)、含量均勻度試驗(yàn)和溶出度檢查1、重量差異檢查法：重量差異定義：系指以稱重法測(cè)定每片的片重與平均片重之間的差異程度。片劑重量差異的限度，應(yīng)符合下列有關(guān)規(guī)定：平均重量重量差異限度0.30g以下±7.5％0.30g或0.30g以上±5.0％檢查方法：取藥片20片，精密稱定總重量，求平均片重，再分別稱定各片的重量，每片重量與平均片重相比較（凡無(wú)含量測(cè)定的片劑，每片重量與標(biāo)示片重比較），超出重量差異限度的藥片不得多于2片，并不得有1片超出限度的1倍。操作注意事項(xiàng)：、操作時(shí)，應(yīng)戴手套或指套，勿用手直接接觸供試品，應(yīng)用平頭鑷子拿取片劑；、易吸潮的供試品須放置在密閉的稱量瓶，盡快稱量；、凡規(guī)定檢查含量均勻度的片劑，