關(guān)于輸血前免疫血清學(xué)檢查第一頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三

在檢驗醫(yī)學(xué)中，沒有幾項檢驗像輸血前檢驗一樣，臨床醫(yī)生幾乎完全依賴其結(jié)果的正確性。輸血前檢驗的每一個環(huán)節(jié)均可能發(fā)生差錯，標本搞錯最為常見。第二頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三

急性溶血反應(yīng)：多由ABO血型不相容輸血引起，人為差錯是其主要原因。遲發(fā)性溶血反應(yīng)：多由ABO以外血型不相容輸血所致，輸血前檢驗不規(guī)范是其主要原因?；颊咻斎氩幌嗳莸难撼煞挚蓪?dǎo)致嚴重不良后果：第三頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三三項檢查：●血型的鑒定●抗體篩選和鑒定●交叉配血試驗三者互為補充，缺一不可輸血前免疫學(xué)檢查目的：使輸入的血液成分有效存活不會引起受血者的紅細胞發(fā)生破壞第四頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三血型鑒定

常規(guī)ABO血型鑒定應(yīng)包括正、反定型，二者起到互相驗證和質(zhì)控的作用。反定型要用試管法，不用玻片法

我國已規(guī)定常規(guī)血型鑒定還應(yīng)包括Rh（D）定型。第五頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三ABO正定型采用單克隆抗-A、抗-B血型試劑，抗-B試劑不應(yīng)該與獲得性B抗原反應(yīng)。

采用A1和B試劑細胞進行反定型檢測；新生兒和以前做過反定型可省略。

只有正反定型結(jié)果相符才能正確判定ABO血型；單純正定型O型不可靠，單純反定型AB型也不可靠。第六頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三

日常工作中需要定期做陽性/陰性對照，在可能的情況下，最好每天在使用定型試劑前作陽性/陰性對照，以檢測其活性。

在觀察定型結(jié)果時，既要觀察有無凝集，也要觀察凝集強度，這有助于A、B亞型、類B等的發(fā)現(xiàn)。第七頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三

在正定型試劑中增加抗-AB、抗-A1及抗-H

抗-AB用來確認弱A和弱B抗原；抗-A1用來鑒定A亞型；抗-H用于鑒定亞型及孟買型。

在反定型試劑中增加A2、O及自身紅細胞

A2細胞用于鑒定A2亞型；O細胞用于鑒定是否存在冷凝集素或ABO系統(tǒng)以外的同種抗體影響定型；自身對照用于是否存在自身抗體影響定型。正反定型不一致，需進一步鑒定第八頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三一、人為因素試劑不標準、失效或污染操作中加錯樣本或試劑離心速度不足或過度細胞與血清比例不當(dāng)，結(jié)果判斷錯誤等人工判讀結(jié)果有可能發(fā)生書寫錯誤ABO定型不一致的原因第九頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三二、客觀因素因某種疾?。ㄈ绨籽。?dǎo)致抗原減弱紅細胞發(fā)生多凝集現(xiàn)象或產(chǎn)生類B物質(zhì)抗體效價低（如嬰幼兒、老年人、低免疫球蛋白血癥）血清中有意外抗體，某些藥物干擾等可溶性血型物質(zhì)過多血漿蛋白異常導(dǎo)致紅細胞緡錢狀凝集或假凝集嵌合體血型或近期輸入異型血造成混合外觀凝集第十頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三

正反定型不一致應(yīng)重新檢測（應(yīng)使用洗滌紅細胞）

出現(xiàn)異常結(jié)果的處理辦法

如果重新檢測結(jié)果仍然異常，請資深工作人員協(xié)助

當(dāng)檢測結(jié)果與以往記錄不一致時，應(yīng)重新采集血標本再一次檢測

如果一時無法找到正反定型結(jié)果不一致的原因，患者又需緊急輸血，此時可輸注Rh（D）同型的O型紅細胞第十一頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三

目的：檢出有臨床意義的抗體，并可在配血前有足夠的時間來選擇缺乏相應(yīng)抗原的相配合的血液，避免盲目配血。不規(guī)則抗體的篩選和鑒定

方法：用受檢者血清與試劑紅細胞起反應(yīng)，以發(fā)現(xiàn)在37℃有臨床意義的抗體。第十二頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三

“有臨床意義”的抗體：如果某種特異性抗體曾引起新生兒溶血病、明顯的溶血性輸血反應(yīng)或使輸入的紅細胞存活時間太短，即認為該種抗體有臨床意義第十三頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三抗體篩選的原則抗體篩選試驗應(yīng)盡可能使用包含所有主要血型抗原的篩選紅細胞試驗應(yīng)包括完全抗體和不完全抗體的檢測抗體篩選陽性標本繼續(xù)用相同的試驗方法做抗體鑒定確定抗體特異性后，應(yīng)該確定患者的相應(yīng)抗原為陰性第十四頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三篩選紅細胞的要求由2～3人份的O型紅細胞組成具有盡可能多的抗原，包括：DCEceMNP1SsLeaLebKkFyaFybJkaJkb

盡可能是純合子用于獻血者的血清篩選時，可將兩個篩選紅細胞混合使用，用于患者血清篩檢時必須與兩個篩選紅細胞分別進行試驗。第十五頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三試劑篩選紅細胞：

——特定的O型紅細胞，通常為2-3人份的O型紅細胞成為一套。每套試劑篩選紅細胞中必須有下列抗原：序

Rh-hrKiddMNSsDuffyDiegoKellLewisP號

DCEceJKaJKbMNSsMurFyaFybDiaDibKkLeaLebP11++00+0+++0+0++0+0+0+02+0++0++0+0+/+00+0+0+03++++++0++0+0+00+0++++第十六頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三抗體鑒定用于抗體鑒定的譜細胞由8～16已知血型的O型紅細胞配套組成每個紅細胞具有各自不同的抗原成分每套紅細胞均附有相應(yīng)的紅細胞抗原譜根據(jù)譜細胞的反應(yīng)格局可以鑒定常見的抗體自身細胞檢查：確定患者血清內(nèi)是否有自身抗體或自身抗體與同種抗體并存第十七頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三第十八頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三

第十九頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三

抗體篩選試驗的方法很多，國外以間接抗球蛋白法為金標準，國內(nèi)中小醫(yī)院多采用凝聚胺法，大醫(yī)院多采用微柱凝膠技術(shù)。

微柱凝膠法是簡單、有效檢測不規(guī)則抗體的方法，但無法排除無臨床意義抗體的干擾。

抗體篩選用的紅細胞一定要保存在4℃環(huán)境中，以防紅細胞上抗原丟失。第二十頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三

國外對所有受血者常規(guī)作抗體篩選試驗，并認為抗體篩選是檢測不規(guī)則抗體最可靠、最敏感的方法。

我國規(guī)定凡遇下列情況之一必須做抗體篩選試驗：

交叉配血不合時有輸血史、妊娠史或短期內(nèi)需要接受多次輸血者

如抗體篩選試驗陽性，缺乏譜細胞鑒定其特異性時，可送有條件的單位鑒定。第二十一頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三

輸血前必須嚴格交叉配血，這是防止輸血前檢驗程序中發(fā)生差錯的最后一道“安全崗”。所謂“嚴格”是指，所采用的方法必須能檢出ABO不相容及ABO系統(tǒng)之外的有臨床意義的抗體（IgG抗體）。交叉配血試驗第二十二頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三

主側(cè)交叉：由患者血清和供者紅細胞組成交叉配血的內(nèi)容

次側(cè)交叉：由患者紅細胞和供者血清（漿）組成（由于我國尚未對供者進行抗體篩選，故次側(cè)交叉是有必要的，尤其是輸全血時）

自身對照：由患者自身血清和自身紅細胞組成（自身對照有助于分析解釋交叉配血試驗中出現(xiàn)的陽性結(jié)果）第二十三頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三主側(cè)配血用患者血清與供者紅細胞進行試驗次測配血供血者血清與患者紅細胞進行試驗患者獻血者主側(cè)次側(cè)第二十四頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三交叉配血的要求主側(cè)配血要求：絕對不可以有凝集或溶血現(xiàn)象次測配血要求：供血者血清加受血者紅細胞在允許范圍內(nèi)，可以有凝集現(xiàn)象，但不可以有溶血凝集不凝集第二十五頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三

鹽水法酶法：菠蘿酶，無花果酶，木瓜酶抗球蛋白法經(jīng)典方法，加LISS（低離子介質(zhì)溶液）的方法凝聚胺法微柱凝膠試驗（卡式配血）

————各有優(yōu)缺點交叉配血的方法第二十六頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三※

鹽水法簡便、快捷、價廉，但有局限性：只能檢出ABO、P、Lewis、MN等系統(tǒng)的抗體，此類抗體屬天然抗體，屬IgM；不能檢出Rh、Kell、Kidd、Duffy等系統(tǒng)的抗體，此類抗體由免疫產(chǎn)生，屬IgG。第二十七頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三※酶法對Rh系統(tǒng)較為敏感，但會改變某些血型系統(tǒng)的抗原構(gòu)型，加之不易保存，應(yīng)用受限?！骨虻鞍追ㄊ菣z測IgG抗體最可靠方法，但操作繁瑣※微柱凝膠試驗（卡式配血）靈敏度高、特異性強、結(jié)果直觀，能自動化操作，還能保存。缺點是價格昂貴、耗時長、可出現(xiàn)假陽性，有條件的醫(yī)院可采用。※凝聚胺法對Kell系統(tǒng)之外的大多數(shù)血型系統(tǒng)敏感度高，且操作簡便，快速。第二十八頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三鹽水介質(zhì)配血方法患者獻血者主側(cè)次側(cè)離心看結(jié)果陽性陰性第二十九頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三酶介質(zhì)配血方法酶上海市血液中心血主次側(cè)均加酶患者獻血者主側(cè)次側(cè)第三十頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三離心看結(jié)果陽性陰性37℃37℃水浴30分鐘酶介質(zhì)配血方法第三十一頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三抗球蛋白配血方法患者獻血者主側(cè)次側(cè)37℃37℃水浴30分鐘三洗

第三十二頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三加抗球蛋白離心看結(jié)果陽性陰性抗球蛋白試劑上海市血液中心血抗球蛋白配血方法第三十三頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三

聚凝胺(Polybrene)配血法患者獻血者主側(cè)次側(cè)室溫放置1分鐘Polybrene上海市血液中心血主次側(cè)均加聚凝胺第三十四頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三離心聚凝胺引起紅細胞非特異性凝集陽性陰性重懸液上海市血液中心血主次側(cè)均加重懸液看結(jié)果

聚凝胺(Polybrene)配血法第三十五頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三凝膠卡式檢測法是微柱凝膠技術(shù)與上述所有技術(shù)相結(jié)合的產(chǎn)物1986年由法國人Dr.YvesLappierre發(fā)明1994年獲得美國FDA認證，目前在許多發(fā)達國家已經(jīng)作為常規(guī)技術(shù)應(yīng)用于臨床第三十六頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三戴安娜凝膠卡式檢測法的工作原理凝膠微柱：試管上端、柱體過濾介質(zhì)：顆粒直徑26-103nm的葡聚糖100凝膠，凝膠間縫隙只允許游離紅細胞通過緩沖液：LISS（加或不加抗血清）第三十七頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三將紅細胞和抗血清加在凝膠上部反應(yīng)，離心后觀察凝集的紅細胞，被阻擋在小柱中凝膠的上部或中央，證明發(fā)生凝集反應(yīng)，判斷凝集反應(yīng)陽性游離的紅細胞，被擠過裝有過濾介質(zhì)的小柱，而到達小柱的底部，證明未發(fā)生凝集，判斷凝集反應(yīng)陰性第三十八頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三結(jié)果判讀模式第三十九頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三凝膠法鑒定ABO血型第四十頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三第四十一頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三第四十二頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三第四十三頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三凝膠抗人球試驗

————凝膠凝集試驗與抗人球技術(shù)結(jié)合第四十四頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三凝膠酶試驗

———凝膠技術(shù)與酶技術(shù)結(jié)合第四十五頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三凝膠卡式檢測法的方法評價靈敏度高：凝膠卡式檢測法靈敏度比低離子鹽水法、凝聚胺法都高；與Coombs法相近，但是在實驗的標準化、重復(fù)性方面具有更大優(yōu)勢，更適合常規(guī)的紅細胞血型血清學(xué)檢測避免了試管法中必須清洗紅細胞的煩瑣步驟方法容易掌握，易于標準化塑料卡可以長期保存，也容易銷毀第四十六頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三

歐美國家常用抗球蛋白法或微柱凝膠法，因為白種人中約有9%是Kell（K）陽性，而凝聚胺對Kell系統(tǒng)不敏感。

我國中小醫(yī)院適合用凝聚胺法，因為凝聚胺對Rh系統(tǒng)特別敏感，在我國以Rh系統(tǒng)引起的遲發(fā)性溶血性輸血反應(yīng)最為常見，而漢族人幾乎100%為K抗原陰性，通常不考慮抗-K。第四十七頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三

患者或供者ABO血型定型不正確；患者血清中存在同種抗體，與供者紅細胞上相應(yīng)抗原起反應(yīng)；患者血清中存在自身抗體，與供者紅細胞上相應(yīng)抗原起反應(yīng)；患者血清中白蛋白與球蛋白比例不正常引起的緡錢狀假凝集；

血漿擴容劑的影響或試劑被污染等。主側(cè)交叉配血不相合的原因第四十八頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三

患者或供者ABO血型錯誤（重新定型，檢查患者亞型、輸血史及移植史）主側(cè)（+）、自身（-）、抗體篩選（-），可能原因：

患者血清中有抗體，但篩選細胞上無相應(yīng)抗原（對患者進行抗體鑒定）

供者紅細胞已被致敏（對供者做直抗試驗）第四十九頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三患者血清中的同種抗體與供者紅細胞上相應(yīng)抗原起反應(yīng)（對患者進行抗體鑒定，選擇無對應(yīng)抗原的血液輸注）主側(cè)（+）、自身（-）、抗體篩選（+），可能原因：第五十頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三

患者血清中可能同時存在自身抗體和同種抗體（對患者血清自身吸收及抗體鑒定，用吸收后血清配血）

白蛋白/球蛋白比值不正常（鹽水添加試驗解決緡錢狀假凝集）

血漿擴容劑（如右旋糖酐）的影響（洗滌細胞，或等待擴容劑消失后重新抽取標本）

污染（使用潔凈的器具和符合要求的試劑）主側(cè)（+）、自身（+）、抗體篩選（+），可能原因：第五十一頁，共五十七頁，編輯于2023年，星期三

交叉配血實驗中，離心力、離心時間不當(dāng)，可造成假陰性或假陽性結(jié)果。交叉配血注意問題

恒溫水浴箱溫度不正確也會造成錯誤結(jié)果。

出現(xiàn)溶血應(yīng)判為陽性結(jié)果（標本本身溶血例外）。

受血者交叉配血試驗的血標本必須是輸血前3