臨床感染性疾病的實驗診斷要求

邢志廣

臨床感染性疾病實驗診斷的要求臨床細菌實驗室的任務(wù)：是從臨床感染標本中分離出病原菌并進行準確鑒定，同時指導臨床合理使用抗菌藥物，為臨床感染性疾病的診斷、治療、預后和流行病學調(diào)查以及醫(yī)院內(nèi)感染的監(jiān)控提供可靠的依據(jù)

一診斷對象和診斷目的病原菌的臨床變遷：感染性疾病病原菌的種類不斷發(fā)生變遷，過去威脅人類的傳染病如鼠疫、霍亂、白喉等己明顯減少，相反，由條件致病菌引起的內(nèi)源性感染卻明顯增多。新的病原菌不斷出現(xiàn)，原有的病原菌因變異、耐藥等又重新流行。目前，醫(yī)院臨床實驗室遇到的主要是條件致病菌，它們在機體抵抗力下降，菌群失調(diào)或天然屏障防御功能被破壞時引起感染。診斷對象和診斷目的臨床分離病原菌的鑒定水平

一種細菌鑒定到哪一水平，取決于診斷的目的1.以疾病的病原學診斷為目的一般情況下只需鑒定到細菌的種2.為提供治療方案為目的1）可以進行臨床標本的直接藥物敏感試驗2）還可根據(jù)分離出病原菌種類直接提供選擇抗生素范圍和種類3）不少細菌對某種藥物有天然耐藥性.由于細菌耐藥性的產(chǎn)生及變遷,臨床上對分離的病原菌都要作進一步的藥敏試驗,以期提供更可靠的治療方案.3.以作流行病學研究為目的必須對病原菌鑒定到型(血清型或基因型)的水平.只有這樣才能明確傳染源的所在.4.了解細菌與感染的關(guān)系為目的一種類型的感染可以由不同種細菌引起,一種細菌也可以引起多種類型的感染.現(xiàn)己知以前那些曾經(jīng)被認為不致病的細菌在某些情況下會引起人體的感染.要了解這些細菌的致病菌性,必須進行細致的鑒定.

二診斷試驗選擇鑒定一個細菌,盡可能用一個菌落做全部鑒定試驗.如果一個菌落不夠應考慮采用純培養(yǎng),即挑取單個菌落接種于斜面培養(yǎng)基,經(jīng)過培養(yǎng)即可獲得大量純培養(yǎng)物.對一株細菌準確鑒定應綜合多種特性進行分析.但臨床實驗室每天要處理大量標本,且由于經(jīng)濟原因不可能做很多試驗,進行全面分析鑒定,因而需要選擇一些合理的試驗項目用于常規(guī)檢測.挑選試驗應以既能完成病原學鑒定又使試驗項目盡可能少而快速為原則.二診斷試驗選擇1.選擇有鑒定價值的試驗要對兩種細菌進行鑒別,須選擇一項兩種菌呈現(xiàn)絕然不同結(jié)果的試驗,即一種菌呈現(xiàn)陽性(陽性反應菌株陽性率須大于90%),另一菌為陰性(陰性反應的菌株陽性率應小于10%),這項試驗才有鑒定價值.否則,就沒有鑒定價值.2.選擇簡易、快速、方便的試驗(1)鑒定一種細菌可能有多種特異的方法,沒必要逐一進行試驗,只選其中一或兩種達到目的即可,多選無意義.(2)選擇操作簡便,快速的方法.(3)選用復合培養(yǎng)基,一次操作可同時看幾個生化反應.如此可簡化操作,節(jié)約人力物力.3.綜合考慮試驗的敏感性和特異性敏感性=所有陽性結(jié)果數(shù)/所有感染病人數(shù),試驗敏感性越高,假陰性結(jié)果就越少.特異性=陰性結(jié)果總數(shù)/未感染病人總數(shù),特異性越高,假陽性結(jié)果越少.試驗一敏感性和特異性是相互聯(lián)系的,試驗的敏感性增加,會使特異性下降,反之亦然.三常用診斷流程1雙歧索引細菌的鑒定中經(jīng)常選用的方法.主要針對那些相互區(qū)別比較容易,有較特殊特征的細菌.雙歧索引是表明鑒定思路的一種流程,使用起來非常方便.如革蘭陰性桿菌初步分群的鑒定流程.革蘭陰性桿菌+葡萄糖發(fā)酵－氧化酶非發(fā)酵菌+－

弧菌科腸桿菌科三常用診斷流程

革蘭陽性球菌雙岐索引鑒定三常用診斷流程

微球菌科雙岐索引鑒定三常用診斷流程

鏈球菌屬的雙岐索引鑒定三常用診斷流程奈瑟氏菌屬、布蘭漢菌屬的雙岐索引鑒定

革蘭氏陰性球菌氧化酶+DNA酶+-布蘭漢氏菌屬營養(yǎng)瓊脂上生長+-其他奈瑟氏菌麥芽糖+-腦膜炎奈瑟氏菌淋病奈瑟氏菌三常用診斷流程常見菌的初步分群雙岐索引鑒定臨床分離菌

革蘭染色+-球菌桿菌球菌桿菌觸酶動力DNA酶發(fā)酵+-+-+-+-微鏈李棒卡奈氧化酶非球球斯狀他氏+-發(fā)菌菌特菌布菌弧腸酵科科菌菌蘭菌菌菌屬等漢科科三常用診斷流程3數(shù)字編碼鑒定法編碼是即將所得生化反應模式轉(zhuǎn)化成數(shù)學模式，可以把某一細菌的全部生化反應結(jié)果轉(zhuǎn)化成數(shù)字，經(jīng)查閱檢索手冊又可將該數(shù)字轉(zhuǎn)化成細菌名稱．編碼的原則是：鑒定細菌的各種微量生化反應管組成系列試劑，將生化項目排序并依次進行分組，每組中的每個試驗都有其一個數(shù)值代碼．試驗陽性時結(jié)果用其數(shù)值代碼表示，試驗陰性時結(jié)果用0表示，將每組中各試驗結(jié)果加起來得一總值，這樣按順序各組總值組成的數(shù)碼組合，即為檢索編碼．查編碼手冊，該編碼所對應的細菌名稱即為鑒定結(jié)果．如腸桿菌科細菌生化編碼鑒定．腸桿菌科細菌生化編碼鑒定表組別試驗項目代碼結(jié)果結(jié)果代碼總值硫化氫４－０1苯丙氨酸２－０１葡糖酸鹽１＋１靛基質(zhì)４－０２甲基紅２＋２３枸櫞酸鹽１＋１尿素４＋４３動力２＋２７產(chǎn)氣１＋１賴氨酸４＋４４鳥氨酸２＋２６棉子糖１－０山梨醇４＋４５