島津液相色譜維護(hù)保養(yǎng)液相色譜基礎(chǔ)知識(shí)SHIMADZU液相色譜：以液體作為流動(dòng)相的色譜分離方法適用于高沸點(diǎn)、大分子、強(qiáng)極性和熱穩(wěn)定性差的化合物的分析流動(dòng)相具有運(yùn)載樣品分子和選擇性分離的雙重作用

氣相色譜：以氣體作為流動(dòng)相的色譜分離方法適用于沸點(diǎn)較低、熱穩(wěn)定性好的中小分子化合物的分析流動(dòng)相只起運(yùn)載樣品分子的能力

液相色譜基礎(chǔ)知識(shí)液相色譜基礎(chǔ)知識(shí)液相色譜流程圖溶劑輸液泵進(jìn)樣器柱溫箱檢測(cè)器數(shù)據(jù)處理液相色譜基礎(chǔ)知識(shí)采用“HPLC”級(jí)溶劑避免使用會(huì)引起柱效損失或保留特性變化的溶劑對(duì)試樣有適宜的溶解度溶劑粘度要小與檢測(cè)器相匹配流動(dòng)相的選擇溶劑等級(jí)水的等級(jí)純化水蒸餾水去離子水波長(zhǎng)(nm)純化水去離子水因?yàn)椴患兾锏拇嬖冢ルx子的吸光率較高純化水中去除了無(wú)機(jī)和有機(jī)的污染物吸光率溶劑等級(jí)溶劑的等級(jí)HPLC級(jí)優(yōu)級(jí)純分析純都經(jīng)過(guò)蒸餾和0.45u的過(guò)濾(除纖維毛,未溶解的機(jī)械顆粒優(yōu)級(jí)純的純度比分析純大,但里面含有防腐劑和抗氧化劑HPLC級(jí)經(jīng)過(guò)0.2u的過(guò)濾,且除去有紫外吸收的雜質(zhì)微量分析、梯度洗脫甲醇乙睛正己烷分析純級(jí)和HPLC級(jí)溶劑的吸光度比較圖溶劑等級(jí)GeneralMaintenanceandTroubleshooting緩沖液的使用

使用前必須過(guò)濾

使用后一定要進(jìn)行清洗，以免造成腐蝕、磨損、阻塞:

用純水沖洗30-60min（1ml/min），再用甲醇沖洗30min易受到細(xì)菌和霉菌的影響

溶劑等級(jí)不能直接用有機(jī)溶劑沖洗島津VP系列輸液泵目的單元流速范圍 特性和應(yīng)用分析LC-10ADVP 0.001-9.999 無(wú)脈動(dòng)，適于

半微量LC和LC-MS

LC-10ATVP 0.001-9.999 非凡的耐用性，適于常量分析*所有單元都既可做高壓梯度又可做低壓梯度液相色譜基礎(chǔ)知識(shí)LC-10ATvp泵：串聯(lián)式往復(fù)泵LC-10ADvp泵：并聯(lián)式微體積往復(fù)泵LC-10ADVP/LC-10ATVP工作原理單向閥結(jié)構(gòu)拋光面透明塑料墊片寶石球單向閥原理吸液沖程排液沖程出口單向閥進(jìn)口單向閥泵頭LC-10ADVP/LC-10ATVP工作原理梯度洗脫形式的選擇液相色譜基礎(chǔ)知識(shí)梯度洗脫：優(yōu)點(diǎn)：可提高分離度、縮短分離時(shí)間、降低最小檢測(cè)量和提高分離精度注意事項(xiàng)：溶劑的純度要高，否則梯度洗脫的重現(xiàn)性差梯度混合的溶劑互溶性要好梯度洗脫應(yīng)使用對(duì)流動(dòng)相組成變化不敏感的選擇性檢測(cè)器（如紫外吸收檢測(cè)器或熒光檢測(cè)器），而不能使用對(duì)流動(dòng)相組成變化敏感的通用型檢測(cè)器（如示差折光檢測(cè)器）1.使用流動(dòng)相溶解樣品--減少溶劑峰，尤其是組分峰靠近溶劑峰時(shí)由為重要--保證樣品在流動(dòng)相中的溶解度，避免樣品在系統(tǒng)中尤其在柱中產(chǎn)生沉淀

2.進(jìn)樣前最好使用0.45um的膜進(jìn)行過(guò)濾如果樣品很臟，要使用0.2um的膜進(jìn)行過(guò)濾樣品處理進(jìn)樣量和檢測(cè)器響應(yīng)的關(guān)系示意圖液相色譜基礎(chǔ)知識(shí)進(jìn)樣體積檢測(cè)器響應(yīng)值定量環(huán)體積的一半3倍定量環(huán)體積全量注入部分注入手動(dòng)進(jìn)樣器的原理圖

裝填狀態(tài)液相色譜基礎(chǔ)知識(shí)進(jìn)樣狀態(tài)交叉污染的原因微量注射器紅色表示殘留樣品手動(dòng)進(jìn)樣法

便捷的方法（不需清洗）1.進(jìn)樣狀態(tài)下插入微量注射器2.切到裝填狀態(tài)3.注入樣品4.切回到進(jìn)樣狀態(tài)柱溫箱分析結(jié)果重現(xiàn)性好提高柱效降低柱壓保證檢測(cè)穩(wěn)定性

液相色譜基礎(chǔ)知識(shí)分析柱的維護(hù)在使用新柱之前，最好用強(qiáng)溶劑在低流量下(0.2-0.3ml/min)沖洗30mins，長(zhǎng)時(shí)間未用的分析柱也要同樣處理定期使用強(qiáng)溶劑沖洗柱子3、使用緩沖鹽時(shí)，要先用水沖洗，再用有機(jī)溶劑沖洗4、凈化樣品5、分離條件6、不使用時(shí)，要蓋上蓋子，避免固定相干枯常用檢測(cè)器紫外檢測(cè)器（包括二極管陣列檢測(cè)器）熒光檢測(cè)器示差折光檢測(cè)器電導(dǎo)檢測(cè)器液相色譜基礎(chǔ)知識(shí)原理：基于被分析組分對(duì)特定波長(zhǎng)紫外光的選擇性吸收定量基礎(chǔ)：比耳定律，A＝KCL優(yōu)點(diǎn)：1）靈敏度高

2）對(duì)溫度和流速不敏感

3）可用于梯度洗提缺點(diǎn)：僅適用于測(cè)定有紫外吸收的物質(zhì)紫外檢測(cè)器二極管陣列檢測(cè)器二極管陣列檢測(cè)器（SPD－M10AVP）-二十一世紀(jì)標(biāo)準(zhǔn)紫外檢測(cè)器色譜定性依據(jù)：保留時(shí)間常規(guī)紫外檢測(cè)器峰純度二極管陣列檢測(cè)器液相色譜基礎(chǔ)知識(shí)

樣品池二極管陣列光柵D2/W燈每一組分可在每一波長(zhǎng)處得到一吸光度值二極管陣列檢測(cè)器1）采集三維譜圖2）峰純度檢驗(yàn)3）光譜庫(kù)檢索4）可以發(fā)現(xiàn)單波長(zhǎng)檢測(cè)時(shí)未測(cè)到的峰二極管陣列檢測(cè)器的優(yōu)點(diǎn)原理：基于被分析組分發(fā)射的熒光強(qiáng)度進(jìn)行檢測(cè)優(yōu)點(diǎn)：1）靈敏度極高，是最靈敏的檢測(cè)器之一

2）選擇性好

3）對(duì)溫度和流速不敏感，可用于梯度洗脫缺點(diǎn)：僅適用于測(cè)定可產(chǎn)生熒光的物質(zhì)可檢測(cè)物質(zhì)：多環(huán)芳烴、霉菌毒素、酪氨酸、色氨酸、卟啉、兒茶酚氨等（具有對(duì)稱共軛體系）熒光檢測(cè)器原理：連續(xù)測(cè)定流通池中溶液折射率來(lái)測(cè)定試樣中各組分濃度。優(yōu)點(diǎn)：通用型檢測(cè)器，缺點(diǎn)：1）對(duì)溫度變化敏感2）對(duì)溶劑組成變化敏感，不能用于梯度檢測(cè)3）屬于中等靈敏度的檢測(cè)器示差折光檢測(cè)器