微生物的分布與消毒滅菌第1頁/共78頁

微生物與環(huán)境間有著極為密切的關(guān)系，微生物的生命活動依賴于環(huán)境，同時也影響著環(huán)境，研究微生物與環(huán)境之間的關(guān)系，了解它們在自然界的分布，可為人們開發(fā)微生物資源提供理論依據(jù)，以使人們利用微生物在自然界中的作用來改造自然，保護自然。微生物之間，微生物與其他微生物之間，也存在著相互依存，相互制約的關(guān)系，研究它們之間的關(guān)系，使人類更好地利用微生物，為防治人和動植物疾病，為工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)服務(wù)。

第一節(jié)、微生物的生態(tài)第2頁/共78頁

生態(tài)系統(tǒng)：在一定的空間內(nèi)生物的成分和非生物的成分通過物質(zhì)循環(huán)和能量流動互相作用、互相依存而構(gòu)成的一個生態(tài)學(xué)功能單位。生態(tài)學(xué)：研究生物與其周圍生物和非生物環(huán)境之間相互關(guān)系的一門科學(xué)。微生物生態(tài)學(xué)：研究微生物與其周圍生物和非生物環(huán)境之間相互關(guān)系。各種環(huán)境中的微生物的種類、分布；微生物和其它生物的關(guān)系；微生物與物質(zhì)循環(huán)；第3頁/共78頁

自然界中的微生物微生物的特點：個體微小，代謝營養(yǎng)類型多樣，適應(yīng)能力強微生物在自然界中分布廣泛一、微生物在自然界中的分布（一）土壤中的微生物土壤是固體無機物(巖石和礦物質(zhì))、有機物、水、空氣和生物組成的復(fù)合物，是微生物的合適生境。是微生物的大本營。土壤微生物種類多、數(shù)量多、代謝潛力巨大，是主要的微生物源。第4頁/共78頁第5頁/共78頁1）土壤微生物的數(shù)量和分布主要受到營養(yǎng)物、含水量、氧、溫度、pH等因子的影響，并隨土壤類型的不同而有很大變化。2）土壤微生物的數(shù)量和分布受季節(jié)影響；3）微生物的數(shù)量也與于土層的深度有關(guān)，一般土壤表層微生物最多，隨著土層的加深，微生物的數(shù)量逐步減少。4）土壤中的微生物以細菌最多，其次位放線菌和霉菌。土壤中的微生物分布特點第6頁/共78頁土壤中的細菌分類1）、自養(yǎng)菌：硝化桿菌屬、硫桿菌屬，起物質(zhì)轉(zhuǎn)化作用，如固氮、產(chǎn)抗生素；2）、腐物寄生菌：分解動、植物尸體及排泄物等；3）、致病菌：結(jié)核桿菌、痢疾桿菌、霍亂弧菌等。炭疽芽孢桿菌、破傷風(fēng)梭菌、肉毒梭菌可長期存活。第7頁/共78頁（二）水體中的微生物1、江河水1）數(shù)量和種類與接觸的土壤有密切關(guān)系；2）垂直分帶分布3）多是吸附在懸浮在水中的有機物上及水底；4）多能運動，有些具有很異常的形態(tài)（例如柄細菌）；5）靠近城市或城市下游水中的微生物多，并且有很多對健康不利的細菌，因此不宜作為飲用水源；6）水體自身存在自我凈化作用：第8頁/共78頁2、海水1）嗜鹽，真正的海洋細菌在缺少氯化鈉的情況下是不能生長的。2）低溫生長，除了在熱帶海水表面外，在其它海水中發(fā)現(xiàn)的細菌多為嗜冷菌。3）大多數(shù)海洋細菌為G—細菌，并具有運動能力。4）耐高壓（特別是生活在深海的細菌）。5）更明顯的垂直分層分布（透光區(qū)、無光區(qū)、深海區(qū)、超深淵海區(qū)）

第9頁/共78頁水體中的微生物的種類細菌、放線菌、螺旋體、真菌、病毒。受人和動物排泄物污染時：多含大腸埃希菌、糞鏈球菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、變形桿菌，甚至還含有傷寒沙門菌、副傷寒沙門菌、痢疾桿菌、霍亂弧菌、鉤端螺旋菌、肝炎病毒。大腸菌群：37℃，24h能發(fā)酵乳糖，產(chǎn)酸、產(chǎn)氣、需氧或兼性厭氧的革蘭氏陰性菌。我國衛(wèi)生標準是飲用水中細菌總數(shù)≤100/ml,大腸桿菌≤3/1000ml。第10頁/共78頁（三）空氣中的微生物1）無原生的微生物區(qū)系，主要以氣溶膠形式存在2）來源于土壤、水體及人類的生產(chǎn)、生活活動；3）種類主要為真菌的孢子和細菌，一般與其所在環(huán)境的微生物種類有關(guān)；4）數(shù)量取決于塵埃數(shù)量；5）停留時間和塵埃大小、空氣流速、濕度、光照等因素有關(guān)；第11頁/共78頁空氣中的微生物的種類主要是霉菌和放線菌的孢子、酵母、需氧性芽孢桿菌、產(chǎn)色素細菌及某些球菌等。抵抗力較強的病原微生物：溶血性鏈球菌、腦膜炎奈瑟菌、百日咳鮑特菌、流行性感冒病毒、麻疹病毒等。甲型鏈球菌常作為空氣污染的指標第12頁/共78頁（四）極端環(huán)境下的微生物1、嗜熱微生物嗜熱微生物是一類生活在高溫環(huán)境中的微生物，如火山口及其周圍區(qū)域、溫泉、工廠高溫廢水排放區(qū)等。兼性嗜熱菌專性嗜熱菌極端嗜熱菌耐熱菌超嗜熱菌

嗜熱菌的類型：第13頁/共78頁隱蔽熱網(wǎng)菌（Pyrodictiumoccultum）嗜酸熱硫化葉菌（Sulfolobusacidocaldarius）水生嗜熱桿菌(Thermusaquaticus)第14頁/共78頁2、嗜冷微生物嗜冷菌：最適生長溫度低于15℃耐冷微生物：最適生長溫度為20-40℃主要分布于極地、深海、高山、冰窖和冷藏庫3、嗜酸微生物只能上生活在低pH（<4）的條件下耐酸微生物：也可在中性環(huán)境中生長最適生長溫度低于15℃

4、嗜堿微生物專性生活在pH10-11的堿性條件下5、嗜鹽微生物在高鹽濃度下才能生長6、嗜壓微生物在高靜水壓環(huán)境中生長7、抗輻射微生物第15頁/共78頁研究意義：(1)開發(fā)利用新的微生物資源，包括特異性的基因資源；(2)為微生物生理、遺傳和分類乃至生命科學(xué)及相關(guān)學(xué)科許多領(lǐng)域，如：功能基因組學(xué)、生物電子器材等的研究提供新的課題和材料；(3)為生物進化、生命起源的研究提供新的材料。

第16頁/共78頁（五）其他1．原料包裝物中的微生物大量工業(yè)制品都是用用動植物產(chǎn)品作原料來制造的

纖維制品、木制品、革制品、橡膠制品、油漆、卷煙、化妝品等，有些工業(yè)產(chǎn)品如塑料、建筑涂料等也有很多微生物可以分解、利用。包裝用的容器、包裝紙、運輸紙箱等。第17頁/共78頁2．食品、農(nóng)副產(chǎn)品上的微生物由于微生物的生長繁殖而腐爛、變質(zhì)，不能再食用或使用；病原微生物進入人體的重要途徑，引起傳染性疾病；很多微生物在食品、農(nóng)產(chǎn)品上生長后會產(chǎn)生對人有害的毒素；肉毒毒素、黃曲霉素等第18頁/共78頁第19頁/共78頁二、生物體內(nèi)外的正常菌群1、人體的正常菌群在正常人體皮膚、粘膜及外界相通的各種腔道（如口腔、鼻咽腔、腸道和泌尿道）等部位，存在著對人體無害的微生物群，包括細菌、真菌、螺旋體、支原體等。在長期進化過程中，微生物群的內(nèi)部及其與宿主之間互相依存、互相制約，形成一個能進行物質(zhì)、能量等交流的動態(tài)平衡的微生態(tài)系統(tǒng)，常稱之為正常菌群。第20頁/共78頁

人體各部位常見的正常菌群（P113）皮膚：表皮葡萄球菌、類白喉桿菌、綠膿桿菌、恥垢桿菌等口腔：鏈球菌（甲型或乙型）、乳酸桿菌、螺旋體、梭形桿菌、白色念球菌、（真菌）表皮葡萄球菌、肺炎球菌、奈瑟氏球菌、類白喉桿菌等胃：正常一般無菌腸道：類桿菌、雙歧桿菌、大腸桿菌、厭氧性鏈球菌、糞鏈球菌、葡萄球菌、白色念球菌、乳酸桿菌、變形桿菌、破傷風(fēng)桿菌、產(chǎn)氣莢膜桿菌等鼻咽腔：甲型鏈球菌、奈氏球菌、肺炎球菌、流感桿菌、乙型鏈球菌、葡萄球菌、綠膿桿菌、大腸桿菌、變形桿菌等眼結(jié)膜：皮表葡萄球菌、結(jié)膜干燥桿菌、類白喉桿菌等陰道：乳酸桿菌、白色念球菌、類白喉桿菌、大腸桿菌等尿道：表皮葡萄球菌、類白喉桿菌、恥垢桿菌等第21頁/共78頁（1）、營養(yǎng)和代謝作用參與物質(zhì)代謝、營養(yǎng)轉(zhuǎn)化和合成，以及膽汁、膽固醇代謝及激素轉(zhuǎn)化等。大腸埃希菌能合成維生素B復(fù)合物和維生素K。正常菌群的生理作用（2）、免疫作用刺激宿主免疫系統(tǒng)的發(fā)育成熱，工并促進免疫細胞的分裂，產(chǎn)生抗菌素體和佐劑作用，從而限制正常菌群本身對宿主的危害性。（3）、生物屏障與拮抗作用奪取營養(yǎng)、產(chǎn)生脂肪酸和細菌素等從而使病原菌不能定居和致病。（4）、搞癌作用使致癌物質(zhì)和輔助致癌物質(zhì)轉(zhuǎn)化為非致癌物質(zhì)，有一定抑制腫瘤作用；雙歧桿菌。（5）、生長和發(fā)育作用有利于宿主的生長以育和長壽，失調(diào)則使宿主易衰老。第22頁/共78頁

正常菌群與宿主間的生態(tài)平衡是相對的，在特定條件下，這種平衡可被打破而造成生態(tài)失調(diào)，使原來不致病的的正常菌成為條件致病菌。由于正常菌群中各細菌的比例嚴重失調(diào)并導(dǎo)致臨床表現(xiàn)的，稱為菌群失調(diào)癥。條件致病菌：人體的正常微生物菌群一旦進入非正常聚居部位，或生態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變而引起人類疾病的微生物。

菌群失調(diào)第23頁/共78頁菌群失調(diào)的常見誘因（1）由于機體的防衛(wèi)功能減弱,引起自身感染。例如皮膚粘膜受傷（特別是大面積燒傷）、身體受涼、過度疲勞、長期消耗性疾病等，可導(dǎo)致正常菌群的自身感染；（2）不適當?shù)目咕幬锏闹委煛?/p>

長期大量使用抗生素，抗菌藥物不僅抑制致病菌，也作用于正常菌群，使條件致病菌或耐藥菌增殖，如金黃色葡萄球菌、革蘭氏陰性桿菌及假絲酵母菌等。（3）由于正常菌群寄居部位的改變，發(fā)生了定位轉(zhuǎn)移，也可引起疾病。例如大腸桿菌進入腹腔或泌尿道，可引起腹膜炎、泌尿道感染。人體表面的正常菌群，一旦它們進入傷口也會引起感染。第24頁/共78頁菌群失調(diào)的表現(xiàn)一度失調(diào)（可逆性失調(diào)）：去除誘因后，不需治療可自行恢復(fù)。二度失調(diào)（菌中數(shù)量比例失調(diào)）：去除誘因后，失調(diào)狀態(tài)仍然存在。三度失調(diào)（菌群交替癥）：外來菌代替了原有菌群，可導(dǎo)致二重感染（抗菌素菌藥物治療原感染性疾病中產(chǎn)生的一種新的感染）。第25頁/共78頁常見的菌群失調(diào)癥（1）耐藥性葡萄球菌繁殖成優(yōu)勢菌而發(fā)生腹瀉，偶爾發(fā)生致死性葡萄球菌膿毒血癥；（2）變形桿菌和假單胞菌生長旺盛并侵入組織發(fā)生腎炎或膀胱炎；（3）白色念珠菌大量繁殖，引起腸道、肛門或陰道感染，也可發(fā)展成全身感染；（4）艱難梭菌在結(jié)腸內(nèi)大量繁殖，并產(chǎn)生一種腸毒素及細菌毒素，導(dǎo)致假膜性腸炎。第26頁/共78頁可以通過口服某些活的微生物制劑來治療由于正常菌群失調(diào)而導(dǎo)致的腹瀉，例如，含蠟狀芽孢桿菌（Bcereus）的“促菌生”，含地衣芽孢桿菌的“整腸生”等，它們都是通過芽孢桿菌的生長，為腸道重新創(chuàng)造良好的厭氧環(huán)境，促使腸道內(nèi)正常的厭氧菌的生長繁殖，這類活微生物制劑又稱微生態(tài)制劑。微生態(tài)制劑一般用于恢復(fù)腸道內(nèi)的正常生態(tài)環(huán)境，若腸道功能正常，一般不需要服用。第27頁/共78頁三、微生物與生物環(huán)境之間的關(guān)系

在自然界中，各種微生物極少單獨存在，總是較多地聚在一起，也常常與其他生物出現(xiàn)在一個限定的空間內(nèi)，它們之間可能發(fā)生相互作用，并由此構(gòu)成微生物以及微生物與其他生物間非常復(fù)雜而多樣化的關(guān)系?；ド?、第28頁/共78頁（一）、互生定義：兩種生物可以獨立生活。也可以形成相互的聯(lián)合，對一方有利，或雙方都有利。固氮菌和纖維素分解菌，固氮菌和纖維素分解菌，兩者互生關(guān)系較為典型，固氮菌可利用纖維素分解菌產(chǎn)生的有機酸作為碳源和能源而大量繁殖，并進行固氮；使纖維素分解菌也避免因為自身代謝產(chǎn)物積累過多而中毒；同時可利用固氮菌前提的氮素營養(yǎng)物質(zhì)，生長更加旺盛。人及動物與其正常菌群即是互生關(guān)系。根際微生物與高等植物間也為互生關(guān)系第29頁/共78頁（二）、共生定義：兩種微生物緊密地生活在一起，彼此依賴，相互為對方創(chuàng)造有利的生存條件。特點：在生理上相互分工，互換代謝活動的產(chǎn)物；豆科植物與固氮菌共生、非豆科植物與放線菌共生地衣中的真菌和藻類已形成特殊形態(tài)的整體了，在生理上相互依存，真菌營異養(yǎng)生活，藻類制造養(yǎng)料，真菌提供水分、無機鹽供藻類光合作用。

第30頁/共78頁（三）、寄生定義：一種生物侵入另一種生物體內(nèi)吸取自己所需要的營養(yǎng)物質(zhì)進行生長繁殖，在一定的條件下對后者造成損害或死亡的現(xiàn)象。類型：專性寄生、兼性寄生。噬菌細菌：一種細菌可以寄生在另一種細菌體內(nèi)，如食菌蛭弧菌能寄生在大腸桿菌等許多Ｇ-菌體內(nèi)。真菌間：一種真菌寄生在另一種真菌間較普遍，其方式第31頁/共78頁（四）、拮抗定義：一種微生物生命活動中，通過產(chǎn)生某些代謝產(chǎn)物或改變環(huán)境條件，能抑制其它微生物的生長繁殖，或毒害殺死其它微生物的現(xiàn)象。類型：1、非特異拮抗關(guān)系：如乳酸菌能產(chǎn)生乳酸，能抑制腐敗菌的生長，酸菜泡菜不易爛就因如此。2、特異拮抗關(guān)系：一種微生物在生命活動中，能產(chǎn)生某種或某類特殊代謝產(chǎn)物，具有選擇性地抑制或殺死其它種微生物前種菌稱為抗生菌，后者稱為敏感菌，拮抗性物質(zhì)稱抗生素。如青霉素產(chǎn)生與病原菌之間關(guān)系。

第32頁/共78頁（五）、捕食定義：一種大型的生物直接捕捉、吞食其他小型生物來滿足生存需要的現(xiàn)象類型：1、原生動物：捕食水體和土壤中的細菌，放線菌，真菌的孢子及單細胞藻類為食

2、捕食性真菌：捕食線蟲第33頁/共78頁（六）、競爭

兩個種群因需要相同的生長基質(zhì)或其它環(huán)境因子,致使增長率和種群密度受到限制時發(fā)生的相互作用,其結(jié)果對兩種種群都是不利的。第34頁/共78頁第二節(jié)、微生物的消毒與滅菌

影響微生物生長繁殖的因素物理：溫度、輻射、干燥、超聲波、滲透壓和過濾。化學(xué)生物：包括細菌素、噬菌體和抗生素等，一般不作為消毒滅菌的手段。第35頁/共78頁防腐(antisepsis)：在某些化學(xué)物質(zhì)或物理因子作用下，能防止或抑制微生物生長的一種措施消毒(disinfection)：利用某種方法殺死或滅活物質(zhì)或物體中所有病原微生物的一種措施滅菌(sterilization)：指利用某種方法殺死物體中包括芽孢在內(nèi)的所有微生物的一種措施化療(chemotherapy)：利用具有選擇毒性的化學(xué)物質(zhì)如磺胺、抗生素等對生物體內(nèi)部被微生物感染的組織成病受細胞進行治療，以殺死組織內(nèi)的病原微生物或病變細胞，但對機體本身無毒害作用的治療措施。基本概念第36頁/共78頁無菌：指不含任何活菌，只有經(jīng)滅菌處理才能達到無菌狀態(tài)。無菌技術(shù)：是指在進行外科手術(shù)或分離、轉(zhuǎn)接菌及培養(yǎng)時防止其他微生物侵入機體或污染實驗材料的操作方法第37頁/共78頁1、微生物培養(yǎng)的常用器具常用的器具：試管、瓶子、培養(yǎng)皿等1887年，RJPetri

發(fā)明

Petridish第38頁/共78頁高溫干熱滅菌高壓蒸汽滅菌試管、瓶子、培養(yǎng)皿等常用的滅菌方法：常用的器具：第39頁/共78頁2、接種操作無菌操作：火焰附近（酒精燈、煤氣燈）進行第40頁/共78頁2、接種操作無菌操作：在無菌箱或操作室內(nèi)無菌的環(huán)境下進行第41頁/共78頁

一、物理消毒滅菌法

（一）、熱力滅菌法高溫可使微生物的DNA斷裂、核蛋白解體、蛋白質(zhì)變性和膜結(jié)構(gòu)破壞，從而使微生物死亡。干熱滅菌濕熱滅菌第42頁/共78頁1、干熱滅菌干熱滅菌焚燒：直接點燃或在焚燒爐內(nèi)焚燒。滅菌徹底，迅速簡便，但使用范圍有限。灼燒：直接用火焰滅菌。適用于耐熱的器皿，如接種環(huán)等。干烤：在干燥箱中利用熱空氣進行滅菌。通常在160—170℃持續(xù)1-2h。不能超過170℃，否則包裝紙與棉花等纖維物品晚燒焦。被污染的紙張、無經(jīng)濟價值的物品及實驗動物尸體等廢棄物。微生物實驗用的接種環(huán)、接種針、試管、瓶口等。玻璃器皿、瓷器、金屬工具、注射器以及不能遇水的油脂、風(fēng)凡士林等。利用高溫使菌體脫水，蛋白質(zhì)變性，普通細菌：80—100℃，1h；芽孢:160—170℃,2h第43頁/共78頁2、濕熱滅菌

濕熱滅菌效果比干熱滅菌好：蒸汽的穿透力比干熱空氣強，微生物蛋白質(zhì)吸收水分后比干熱狀態(tài)下更易于變性和凝固；蒸氣與物品表面接觸后，凝固成水并放出潛熱，使被滅菌物品溫度迅速提高，可加速微生物的死亡。第44頁/共78頁

高溫對牛奶、酒類、果汁及糖漿及其熱敏感物質(zhì)不適宜，因為高熱破壞了食品的營養(yǎng)與風(fēng)味。①巴氏消毒法具體方法低溫維持法：只要在63℃下維持30min高溫短時法：只要在72℃下維持15—30s超高溫法瞬時法:只要在135-150℃下維持2-6s第45頁/共78頁將待消毒物品如注射器、金屬用具、解剖用具等在水中煮沸15min或更長時間，以殺死細菌或其他微生物的營養(yǎng)體和少部分的芽孢或孢子。②煮沸消毒

如果在水中適當加1％碳酸氫鈉或2％一5％的石炭酸則殺菌效果更好。物品要浸濕，其應(yīng)用受到一定限制第46頁/共78頁③流通蒸汽滅菌法利用阿諾滅菌器或一般蒸籠進行滅菌，流通蒸汽的溫度不超過100℃，經(jīng)15—30min可殺死細菌的繁殖體，但不能全部殺滅芽孢。常用于一般外科器械、注射器、食具等。第47頁/共78頁

對于某些培養(yǎng)基，由于高壓蒸汽滅菌會破壞某些營養(yǎng)成分，可用間隙滅菌法滅菌，即流通蒸汽(或蒸煮)反復(fù)滅菌幾次。④間隙滅菌法

例如第一次蒸煮后殺死微生物營養(yǎng)體，冷卻，培養(yǎng)過夜，孢子萌發(fā)，又第二次蒸煮，殺死營養(yǎng)體。這樣反復(fù)2—3次就可以完全殺死營養(yǎng)體和芽孢，也可保持某些營養(yǎng)物質(zhì)不被破壞。第48頁/共78頁⑤高壓蒸汽滅菌法

高壓蒸汽滅菌的溫度越高，微生物死亡越快。通常情況下溫度為121.3℃，15—30min。衡量滅菌效果的指標十倍致死時間(decimalreductiontime)：即在一定的溫度條件下，微生物數(shù)量十倍減少所需要的時間。熱致死時間(thennaldeathtime)：即在一定溫度下殺死所有某一濃度微生物所需要的時間必須排出鍋內(nèi)冷空氣，P115表，加足水第49頁/共78頁影響濕熱滅菌法的因素1、微生物因素。2、溫度與作用時間。3、pH的影響。4、介質(zhì)的性質(zhì)。不同細菌的耐熱性：繁殖體﹤芽孢；幼齡菌﹤老齡菌；G+菌﹤G-菌；微生物種類和數(shù)量致死溫度：在一定時間內(nèi)，殺死細菌所需的最低溫度值。致死時間：在某一溫度下，殺死細菌所需的最短時間。pH6.0-8.0時，微生物不易被殺死；高于或低于該范圍時，微生物抵抗力下降，特別是酸性時，抗熱性明顯減弱。水分子的極性與細胞膜的極性接近，易穿透細胞膜進入細胞，促進菌體蛋白質(zhì)凝固，加速菌體死亡，含水量較少或含有有機物的需要的滅菌溫度高，時間長。第50頁/共78頁（二）、低溫微生物代謝活動減慢，最后處于停滯狀態(tài)，但仍有生命力。主要用于微生物生長引起的物品防腐，也用于菌種保藏。4～10℃冰箱內(nèi)可保存數(shù)月；-70～-20℃下能長期生存冷凍也能使部分細菌死亡。細菌原生質(zhì)的水分形成結(jié)晶，機械地損傷細胞，并破壞原生質(zhì)的膠體狀態(tài)，造成細菌死亡。特別是冷凍和融化交替進行，破壞更大。迅速冷凍能減少對細菌的損害。冷凍保藏時，盡可能快速冷凍；先將細菌懸于少時保護劑（脫脂牛乳、甘油及二甲基砜等）；低溫真空冷凍干燥。少數(shù)病原菌對低溫敏感，如腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌等，采樣后需保溫并迅速送檢。第51頁/共78頁（三）、輻射作用(radiationSterilization)輻射滅菌是利用電磁輻射產(chǎn)生的電磁波殺死大多數(shù)物質(zhì)上的微生物的一種有效力法。電磁波:微波:通過熱產(chǎn)生殺死微生物的作用；紫外線(UV):使DNA分子中相鄰的嘧啶形成嘧啶二聚體，抑制DNA復(fù)制與轉(zhuǎn)錄等功能，殺死微生物；X射線和y射線:使其他物質(zhì)氧化或產(chǎn)生自由基(OH·、H·)破壞和改變生物大分子的結(jié)構(gòu)，以抑制或殺死微生物。第52頁/共78頁（四）、干燥干燥引起微生物細胞脫水和胞內(nèi)鹽類濃度增高，可導(dǎo)致其死亡。金黃色葡萄球菌、鏈球菌、結(jié)核分枝桿菌、酵母菌等具有一定的抗干燥能力；放線菌、真菌的孢子抗干燥能力較強，但真菌菌絲不耐干燥；芽孢的抵抗力最；飛沫或痰液中的微生物有有機物的保護，可以增強抵抗干燥能力：結(jié)核病菌和呼吸道感染的病菌。藥材、食品、糧食等。第53頁/共78頁（五）、超聲波超聲波可引起細胞破裂，內(nèi)含物外溢，導(dǎo)致細胞死亡。在用超聲波處理菌懸液時，通過產(chǎn)生的高頻震動能使溶液內(nèi)產(chǎn)生空穴，空穴內(nèi)處于真空狀態(tài)。細菌接近或進入空穴時，細胞的內(nèi)外壓力差就會使細胞破碎，達到殺菌的目的。向頻率比低頻率效果好，球菌較桿菌抗性強，芽孢具有更強的抗性。第54頁/共78頁（六）、滲透壓滲透：水或其他溶劑經(jīng)過半透膜而進行擴散的現(xiàn)象；滲透壓：溶劑通過半透膜時受到的阻力。將微生物的細胞置于高滲溶液（20%NaCl），會造成細胞脫水而引起質(zhì)壁分離，使細胞不能生長甚至死亡。將微生物的細胞置于高滲溶液（0.01%NaCl）或水中，水將從溶液進入細胞內(nèi)引起細胞膨脹，以致破裂而死亡。第55頁/共78頁（七）．過濾作用

利用濾器機械地除去液體或空氣中的細菌的方法。適用于不耐熱或不能以化學(xué)方法除菌的液體或氣體：抗生素、毒素、病毒、酶、維生素的溶液，血清及細胞培養(yǎng)液等。缺陷：不能除去病毒、支原體等體積十分小的微生物。第56頁/共78頁常用的細菌濾器1、貝克非濾器2、蔡氏濾器3、玻璃濾器4、膜濾器：廣泛用于醫(yī)藥生產(chǎn)及醫(yī)藥制品的無菌檢查，已納入許多國家藥典?？諝馔ㄟ^無菌棉花加活性炭可得無菌空氣。藥品生產(chǎn)中GMP所要求的無菌車間的空氣則是通過初效、中效和高效濾膜過濾后的凈化空氣。第57頁/共78頁二、化學(xué)消毒滅菌法用化學(xué)藥品來殺死微生物或抑制微生物生長與繁殖的方法。消毒劑：可殺死病原微生物的化學(xué)藥品。防腐劑：用于防止或抑制微生物生長的化學(xué)藥品?；瘜W(xué)治療劑：殺滅或抑制機體內(nèi)病原菌，用于臨床治療的化學(xué)藥物：磺胺、抗生素等。消毒防腐劑對人體組織細胞也有損害作用，只能外用：體表、器械、排泄物和周圍環(huán)境的消毒。第58頁/共78頁常用的消毒劑種類1、重金屬鹽類：重金屬離子易和帶負電荷的菌體蛋白結(jié)合，使之變性、凝固。①紅汞：2%，用于皮膚、黏膜和小創(chuàng)傷消毒。②硝酸銀：1%，用于新生兒滴眼，預(yù)防淋球菌感染。第59頁/共78頁2、氧化劑：可以使菌體酶中的-SH氧化為-s-s-，從而使酶失去活性。①高錳酸鉀：強氧化劑，性質(zhì)穩(wěn)定。0.1%用于皮膚、口腔、蔬菜及水果的消毒。②過氧化氫：通過分解成新生態(tài)氧和自由羥基而發(fā)揮作用，穩(wěn)定性差，3%常用于傷口和口腔黏膜消毒。③過氧乙酸：氧化作用強，對金屬極腐蝕性。0.2-0.5%能迅速殺滅細菌及其芽孢、真菌和病毒，適用于皮膚、塑料、玻璃、纖維制品。第60頁/共78頁3、酚類：作用于細菌的細胞壁和細胞膜，使菌體內(nèi)含物逸出，同時也可使菌體蛋白變性，但對芽孢作用于不大。①石炭酸：2-5%,用于器械、排泄物消毒。②來蘇兒：3-5%,用于器械、排泄物、家具、地面消毒，1-2%,用于手、皮膚消毒第61頁/共78頁4、醇類①乙醇：70-75%濃度與細胞膜的極性接近，能迅速通過細胞膜，溶解膜中脂類，同時使細胞蛋白質(zhì)變性、凝固，從而殺死細菌，但對芽孢作用不大，主要用于皮膚、手、體表等消毒。②苯氧乙醇：2%溶液可用于治療綠膿桿菌感染的表面創(chuàng)傷、灼燒和膿瘍。丙醇、丁醇、戊醇也有強殺菌作用，但不易溶于水，且價格貴。第62頁/共78頁5、醛類①甲醛：37-40%，福爾馬林，防腐劑，保存組織標本；3-8%可殺死細菌及其芽孢、病毒和真菌；1%可用于廠房、無菌室和手術(shù)室等。殺菌作用大于醇類。醛基能與細菌蛋白質(zhì)的氨基酸結(jié)合，使蛋白質(zhì)變性。有腐蝕性、刺激性強、不適用于體表、藥品、食品有關(guān)的消毒②戊醛：2%水溶液中殺死細菌及其芽孢、病毒和真菌，對金屬無腐蝕性，對橡膠、塑料也無損傷。第63頁/共78頁6、烷化劑能夠作用于菌體蛋白或核酸中的-NH2,-COOH、-OH和-SH等，使之烷化反應(yīng)，導(dǎo)致其結(jié)構(gòu)改變、生物學(xué)活性喪失的化學(xué)物質(zhì)，可是作為誘變劑。環(huán)氧乙烷：對細菌及芽孢、病毒、真菌都有較強的殺菌作用，且穿透力強，廣泛用于紙張、皮革、木材、金屬、塑料、化纖制品等滅菌。易燃易爆，當空氣混入達3%時即爆炸，實際應(yīng)用需在密閉容器中，空氣置換成惰性氣體。對人體有一定毒性，嚴禁接觸明火。第64頁/共78頁7、鹵素類氟、氯、溴、碘制劑均有顯著的殺菌效果，但經(jīng)氯和碘常用。①氯：對許多微生物有殺菌作用，包括細菌、真菌、病毒、立克次氏體和原蟲，但不能殺死芽孢，0.2-0.5mg/L氯氣常用于自來水或游泳池的消毒。②漂白粉：次氯酸鈣，在水中分解為次氯酸，產(chǎn)生殺菌作用。10-20%用于地面、廁所、排泄物殺菌和除臭。第65頁/共78頁③碘：能殺死各種微生物及一些芽孢。使蛋白質(zhì)及酶的-SH氧化、使蛋白質(zhì)變性。2.5%碘酊常用于小范圍的皮膚、傷口消毒。第66頁/共78頁8、酸堿類過酸或過堿都會導(dǎo)致微生物代謝障礙甚至死亡。硼酸：洗眼劑；苯甲酸和水楊酸可抑制真菌；乳酸和醋酸：加熱蒸發(fā)用于手術(shù)室、無菌室的空氣消毒；生石灰：加水生成氫氧化鈣用于地面、廁所排泄物消毒。第67頁/共78頁9、表面活性劑陽離子陰離子非離子型陽離子親水基與細菌細胞膜磷脂中的磷酸結(jié)合，而疏水基則伸到膜內(nèi)的疏水區(qū)，引起細胞膜的損傷，使細胞內(nèi)容物漏出，呈現(xiàn)殺菌作用。能殺死多種革蘭氏陽性菌和陰性菌，但對銅綠假單胞菌和芽孢作用弱。新潔爾滅、杜滅芬和洗必泰，0.05-0.1%消毒手、皮膚和手術(shù)器械。陰離子型殺菌效果較弱。第68頁/共78頁10、染料堿性染料的殺菌作用比酸性染料強。堿性染料的陽離子易與細菌蛋白質(zhì)羥基結(jié)合，呈現(xiàn)殺菌作用，對G+菌的效果優(yōu)于G-