（二）質粒（plasmid）質粒（plasmid）：是存在于細菌、真菌等微生物細胞中，獨立于染色體外，能進行自我復制并穩(wěn)定遺傳的遺傳因子。三種構型：共價閉環(huán)DNA分子半開環(huán)DNA分子線性DNA分子1.質粒的命名用小寫字母p代表質粒，在p字母后面用兩個大寫字母代表發(fā)現這一質粒的學者或實驗室名稱。如：質粒pBR322是由Bolivar和Rodrigres兩位墨西哥學者所構建。pBR322plasmid發(fā)現者名字編號2.質粒的分類質粒的類型較多，可以根據質粒的功能、復制機制和轉移方式的進行分類。功能F質粒R質粒Col質粒復制機制嚴緊型松弛型轉移方式接合型可移動型自傳遞型大小小型(1.5kb-15kb)大型(60kb-120kb)宿主范圍窄宿主譜型廣宿主譜型功能分類致育因子，決定性別并具有轉移功能。F質粒（fertilityfactor）抗藥性質粒，賦予宿主菌對抗生素的抗藥特性?？梢酝ㄟ^接合進行轉移，使細菌耐藥性迅速播散，耐藥菌株不斷增加。R質粒（resistancefactor）

Col因子（colicinogenicfactor）產大腸桿菌素因子。大腸桿菌素是由E.coli的某些菌株所分泌的細菌素，能通過抑制復制、轉錄或能量代謝等而專一地殺死其它腸道細菌。大腸桿菌素都是由Col因子編碼的。嚴緊型（stringentcontrol）質粒復制受嚴格的控制。松弛型（relaxedcontrol）質粒復制不受嚴格的控制。

拷貝數是指每一細胞中的質粒數量。復制類型F因子這類大質粒的拷貝數只有1~2個，復制受到嚴格的控制。colE1質?？截悢翟?0~20個，復制不受嚴格的控制。經氯霉素處理后，松弛型質?？蛇_1000~3000個/細胞。（1）質粒的大小和拷貝數

堿基對數

kb

嚴緊型、松弛型

（2）質粒的轉移3.質粒的生物學特性質粒質粒大?。╧b）拷貝數自我轉移能力表型特征Col質粒ColE16.610~20無大腸桿菌素EI（膜的變化）ColE27.810~20無大腸桿菌素EII（DNase）ColE37.810~20無大腸桿菌素EIII（核糖體RNase）F因子12.81~2有F性須（Fpilus）R質粒R1001101~2有Cmlr、Strr、Sulr、TetrR64122少數有Strr、TetrpSC1019.31~2無Tetr重組質粒pBR3224.4約20無高拷貝pBR3451.1約20無ColE1型復制注：Cmlr=氯霉素抗性；Strr=鏈霉素抗性；Sulr=磺胺抗性；Tetr=四環(huán)素抗性部分質粒的選擇性特征（3）質粒的復制質粒的復制主要是通過θ型復制和滾環(huán)復制兩種方式之一進行的。以θ型復制為主。在θ型復制中，有單向復制和雙向復制兩種類型。θ型復制滾環(huán)復制（4）質粒的標記選擇性標記（selectablemarkers）：用于鑒別目標DNA（載體）的存在，將成功轉化了載體的宿主挑選出來。抗藥性基因、營養(yǎng)缺陷型基因、抗重金屬基因。最常見的選擇性標記是抗藥性基因，即帶有一種或多種抗生素的抗性基因，可賦予宿主菌抵抗某種抗生素的能力。篩選標記（Screenablemarkers）：用于將特殊表型的重組子挑選出來。主要用來區(qū)別重組質粒與非重組質粒,當一個外源DNA片段插入到一個質粒載體上時,可通過該標記來篩選插入了外源片段的質粒,即重組質粒。選擇性標記篩選標記藍白斑篩選（5）質粒的不親和性

（Incompatibility）兩個質粒在同一宿主菌中不能共存的現象稱為質粒的不相容性。不能共存在一個細胞中的質粒，屬于同一不相容群，能共存的質粒屬于不同的不相容群。質粒不親和性現象（a）在同一個細胞中含有兩種不相容的質粒。（b）