飼料原料摻假檢測(cè)（華中農(nóng)大）一、飼料原料摻假現(xiàn)狀、形式與檢測(cè)程序

（一）飼料原料摻假現(xiàn)狀國(guó)產(chǎn)魚粉100%摻有植物質(zhì)，50%摻有非蛋白含氮化合物，20%不同程度地?fù)接醒刍蛴鹈?。甚至進(jìn)口魚粉，也有50%摻有非蛋白含氮化合物，20%摻有皮革粉。銷售時(shí)多以“價(jià)格優(yōu)惠”、“送貨上門”、“看樣訂貨”及“回扣”等手段迎合人們心理，而大宗發(fā)貨時(shí)，卻以假充真，面目全非。當(dāng)前飼料原料摻假不僅在魚粉、豆粕、油脂等一些價(jià)格昂貴原料上，也向其它原料擴(kuò)展，而且摻雜物種類繁多，手段五花八門，多不易用常規(guī)法檢出，故更加加大了原料品質(zhì)檢測(cè)的難度。（二）飼料原料摻假、使雜、偽造的含義與形式

1．飼料原料摻假、使雜、偽造的含義

（1）摻假：指在原料中摻入非原料可飼物質(zhì)，以達(dá)以次充好，以假亂真。

（2）使雜：指在原料中摻入非原料不可飼物質(zhì)，以達(dá)以雜增重。

（3）偽造：指以偽代真，名實(shí)不符。

2．飼料原料摻假、使雜、偽造的形式

（1）摻兌：在原料中摻兌非原料物，出售時(shí)冒稱原物者。

（2）替代：以它物部分或全部替代原物者。

（3）著色：以染料著色于非原料物，掩飾摻雜真相者。

（4）偽造：出售與商標(biāo)完全不符的物質(zhì)者。

（三）飼料原料摻雜的檢測(cè)程序確定原料是否摻雜、偽造是一項(xiàng)十分細(xì)致的工作，因?yàn)闄z測(cè)的正確與否，是判斷品質(zhì)優(yōu)劣和是否摻雜的關(guān)鍵。飼料原料摻雜的檢測(cè)一般按照以下程序進(jìn)行。1．調(diào)查了解和掌握當(dāng)前（地）原料摻雜、偽造的基本情況和動(dòng)態(tài)，以達(dá)縮小檢測(cè)范圍，做到心中有數(shù)。2．購入或送檢原料時(shí)，首先應(yīng)采用感觀法、篩分法、容重法等確定是否摻雜。根據(jù)檢測(cè)結(jié)果和經(jīng)驗(yàn)，初步劃定摻雜物范圍。3.根據(jù)初步劃定的摻雜物范圍，可采取顯微鏡檢和快速滴定進(jìn)一步確定摻假的范圍，最后再用化學(xué)檢測(cè)的方法確認(rèn)摻假的種類以及摻假物的含量。二、飼料原料品質(zhì)檢測(cè)與鑒別方法

（一）一般鑒別法

飼料品質(zhì)的一般鑒別法，是指用視覺、嗅覺、觸覺等鑒別原料品質(zhì)的一些方法，故又稱感觀法。

1．視覺法：指通過肉眼或放大鏡觀察原料形態(tài)、顏色、蟲害及霉變的一種方法。如觀察時(shí)若發(fā)現(xiàn)原料結(jié)塊，可能是水分含量過高或發(fā)生了霉變。粉碎、過篩時(shí)若發(fā)現(xiàn)粉料呈球塊，一捻又成粉末時(shí)，除上述原因外，可能與脂肪含量較高，有粘性物質(zhì)存在有關(guān)。正常豆粕應(yīng)呈黃或金黃色，若呈褐、棕褐色或棕黑色，可能加熱過度。要確切判斷，尚需通過脲酶活性等方法進(jìn)一步確定。

2．嗅覺法：原料因發(fā)酵、腐敗，可導(dǎo)致蛋白質(zhì)分解，人為添加非蛋白含氮化合物也可產(chǎn)生揮發(fā)性氨氣味；脂肪酸敗和過熱焦化可產(chǎn)生焦臭味等，都可通過嗅覺判斷。如發(fā)現(xiàn)魚粉有刺激性氨味、哈喇味、霉味，即可判定該魚粉已發(fā)生腐敗、霉變或脂肪酸敗。

3．觸覺法：指原料水分含量可通過手摸、耳聽來判斷。如手插入料堆感覺濕涼，表示原料含水量超標(biāo)。青干草手觸無濕涼感，手搖有沙沙響聲，表明品質(zhì)優(yōu)良。

（二）物理性鑒別法

1．容重測(cè)定：一定體積的原料都有一定重量，故通過檢測(cè)樣和標(biāo)準(zhǔn)樣的容重比較，即可初步判定原料是否摻雜或水分含量是否異常等。

2．比重測(cè)定與浮選技術(shù)：原料不同，比重不同，根據(jù)原料不同比重，選用相應(yīng)比重的浮選液對(duì)其分離，分離物再進(jìn)一步用鏡檢或浮選法確認(rèn)浮選實(shí)例

（1）飼料中有機(jī)與無機(jī)物質(zhì)分離時(shí)，浮選液可選四氯化碳。上浮者為有機(jī)物，下沉者為無機(jī)物。將兩部分分別干燥稱重，即可計(jì)算出兩者的大致比例。

（2）骨粉中肉骨分離，也可選用四氯化碳。上浮者為肉粉，下沉者為骨粉。

（3）玉米粉中分離玉米芯粉時(shí)，一般可選比重1.439的浮選液。上浮者為玉米芯粉，下沉者為玉米粉。

（4）棉籽粕中棉籽殼分離時(shí)，可選用比重1.438的浮選液，上浮者為棉籽殼，下沉者為棉仁粕。

（5）魚粉中水解羽毛粉和海蜇廢棄物分離時(shí)，可選比重1.326的浮選液，上浮者為水解羽毛粉和海蜇廢棄物。若在下沉物中加入四氯化碳，則上浮者為魚肉（極少量水解羽毛粉），下沉者為魚骨。

（三）快速點(diǎn)滴試驗(yàn)

快速點(diǎn)滴試驗(yàn)是指利用飼料的某些特性，或者通過與化學(xué)試劑發(fā)生某種特定反應(yīng)，以檢測(cè)或鑒別原料是否摻假、偽造的一種方法。該法具有快速、準(zhǔn)確、不需特殊設(shè)備，適合于現(xiàn)場(chǎng)操作等特點(diǎn)。三、常見原料的摻雜、偽造的檢測(cè)與鑒定

（一）魚粉的摻假檢驗(yàn)

A．物理方法:

（1）感官檢查法：根據(jù)魚粉成分的形狀、結(jié)構(gòu)、顏色、質(zhì)地、光澤度、透明度、顆粒度等體征來檢查。

①標(biāo)準(zhǔn)魚粉一般為顆粒大小均勻一致，稍顯油膩的粉狀物，可見到大量疏松呈粉末的魚肌纖維及少量的骨刺、魚鱗、魚眼等物；顏色均勻一致，呈淺黃、黃棕或黃褐色；手握有疏松感，不結(jié)塊，不發(fā)粘，不成團(tuán)；有濃郁的烤魚味，略有魚腥味。

②魚粉色澤隨魚種而異，墨罕敦魚粉呈淡黃色或淡褐色，沙丁魚粉呈紅褐色，白魚粉為淡黃色或灰白色。加熱過度或含油脂高者，顏色加深。如果魚粉色深偏黑紅，外觀失去光澤，聞之有焦糊味，為儲(chǔ)藏不當(dāng)引起自燃的燒焦魚粉。如果魚粉表面深褐色，有油臭味，是脂肪氧化的結(jié)果。如果魚粉有氨臭味，可能是貯藏中脂肪變性。如果色澤灰白或灰黃，腥味較濃，光澤不強(qiáng)，纖維狀物較多，粗看似灰渣，易結(jié)塊，粉狀顆粒較細(xì)且多成小團(tuán)，觸摸易粉碎，不見或少見魚肌纖維，則為摻假魚粉，需要進(jìn)一步檢驗(yàn)。

（2）漂浮法：取少許樣品放入潔凈的玻璃杯中，加入10倍體積的水，劇烈攪拌后靜置。觀察水面漂浮物和水底沉淀物，如果水面有羽毛碎片或植物性物質(zhì)（稻混勻后靜置20min，??以便摻入的銨鹽或尿素充分溶于水，備用。另取試管一支，加奈氏試劑2ml（稱KI5g入5ml蒸餾水中，邊攪拌邊滴加25%HgCl2飽和液至稍有紅色沉淀出現(xiàn)。再加入40ml50%NaOH溶液，最后用蒸餾水稀釋至100ml，混勻入棕色試劑瓶保存）。然后沿管壁用滴管滴加上述被檢樣浸出液1~2滴，液面立即出現(xiàn)棕紅色環(huán)，表明有銨鹽摻入。若液面出現(xiàn)白或黃色環(huán)，可疑有尿素?fù)饺?，再用脲酶法進(jìn)行進(jìn)一步檢測(cè)。

（方法二）指示劑觀察脲酶活性法：

a)取10g被檢魚粉于燒杯中，加100ml蒸餾水?dāng)嚢琛⑦^濾，取濾液少許于點(diǎn)滴板上，加2--3滴甲基紅指示劑（0.1g甲基紅溶入100ml95%乙醇中），再滴加2--3滴脲素酶溶液（0.2g脲素酶溶入100ml95%乙醇中）。在40--50℃水浴上加熱1--2min，靜置5min。若點(diǎn)滴板上呈深紅紫色，說明魚粉中摻有尿素。無脲素酶時(shí)，可用下法檢測(cè)。取兩份1.5g被檢魚粉入兩只試管中，其中一只加入少許生黃豆粉，然后兩管各加入5ml蒸餾水，振搖后置60--70℃恒溫水浴鍋中3min，再滴加2--3滴甲基紅指示劑。若加生黃豆粉的試管中呈較深紫紅色，說明魚粉中摻入了尿素。

b)稱取被檢魚粉2--3g入250ml三角瓶中，加蒸餾水100ml，黃豆粉濾液20ml（5g生黃豆粉入100ml水中浸泡1h，過濾），加塞搖勻。置40--50℃水浴鍋內(nèi)溫?zé)?0min（溫度不宜超過45℃，否則脲酶失活）。最后用鑷子取紅色石蕊試紙一條浸入該溶液中，若試紙變藍(lán)，表明被檢魚粉摻有尿素。

（方法三）滴定法測(cè)定尿素酶的活性；

（方法四）格里斯試劑法：原理是在酸性條件下尿素與亞硝酸鈉作用，產(chǎn)生黃色反應(yīng)。若無尿素，則亞硝酸鈉與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮反應(yīng)，其產(chǎn)物與α-萘胺起偶氮作用，呈紫紅色。

檢測(cè)方法：取被檢魚粉1g入燒杯中，加20ml蒸餾水混勻，靜置20min。取上清液3ml入50ml三角瓶中，加1%亞硝酸鈉液1ml、濃H2SO41ml，搖勻后靜置5min。待泡沫消失后，加格里斯試劑（酒石酸89g，對(duì)氨基苯磺酸10g，α-萘胺1g，混勻研碎，置棕色瓶保存）0.5g，搖勻，顯黃色說明被檢樣摻有尿素，顯紫紅色說明未摻。

（2）魚粉中摻入雙縮脲的檢測(cè)：該法依據(jù)雙縮脲在堿性介質(zhì)中可與Cu2+結(jié)合成紫紅色化合物的原理，檢測(cè)魚粉中是否含有雙縮脲。

檢測(cè)方法：稱取被檢魚粉2g入20ml蒸餾水中，攪拌均勻后靜置10min，用干燥濾紙過濾。取濾液4ml入試管中，加6mol/LNaoH溶液1ml，再加1.5%CuSO4液1ml，搖勻后立即觀察，溶液顯藍(lán)色表示未摻，顯紫紅色說明摻有雙縮脲，且顏色越深，摻入比例越大。魚粉中摻入皮革粉的檢測(cè)皮革粉中鉻經(jīng)灰化后部分可變成Cr6+，Cr6+在強(qiáng)酸溶液中能與均二苯胺基脲發(fā)生反應(yīng)，生成紫紅色水溶性鉻—二苯硫代偕肼腙化合物。該反應(yīng)極靈敏，微量鉻即可檢出。

檢測(cè)方法：取被檢魚粉1~2g入瓷坩堝中，炭化后入茂福爐灰化。冷卻后，用少許蒸餾水將灰分濕潤(rùn)，加10ml2NH2SO4溶液使呈酸性。在加數(shù)滴均二苯胺基脲溶液（0.2~0.5g均二苯胺基脲溶入100ml90%乙醇中），片刻后若出現(xiàn)紫紅色，即證明有皮革粉摻入。

注：上述各法同樣適于玉米蛋白粉、飼料酵母等的摻假檢測(cè)。魚粉、家禽副產(chǎn)物中摻入禽糞的檢測(cè)禽糞中含有尿酸，若飼料中混入或摻入禽糞，則可通過檢測(cè)尿酸確認(rèn)。

檢測(cè)方法：少許被檢樣于蒸發(fā)皿中，加入1+1硝酸充分濕潤(rùn)，在水浴鍋上蒸干，若有尿酸存在，則被檢樣外圍呈紅褐色。為確證，可滴加氨水顯紫色（紫尿酸液）。（二）偽劣玉米蛋白粉的識(shí)別

1．偽劣玉米蛋白粉的組成及危害真正玉米蛋白粉為：濕法制玉米淀粉或玉米糖漿時(shí)，原料玉米除去淀粉、胚芽及玉米外皮后剩下的產(chǎn)品，其處觀呈金黃色，帶有烤玉米的味道，并具有玉米發(fā)酵特殊氣味，有蛋白質(zhì)60％及50％以上兩種規(guī)格，一般常規(guī)檢測(cè)外觀、水分、粗蛋白質(zhì)等三個(gè)指標(biāo)，而氨基酸和葉黃素檢測(cè)的幾率很低。

制假分子就是利用常規(guī)檢測(cè)上不足來制造假玉米蛋白粉，一般假貨的組成為蛋白精、玉米粉、小麥粉、色素及少量的真玉米蛋白粉。它們的作用為：用染成黃色的蛋白精（脲醛聚合物）來冒充粗蛋白質(zhì)，用小米粉和玉米粉當(dāng)填充物，再加少量的真玉米蛋白粉，根據(jù)飼料廠的質(zhì)量要求，調(diào)整比例，就可以生產(chǎn)出不同規(guī)格的劣質(zhì)玉米蛋白粉，以較低價(jià)格賣給飼料廠，以次充好，以假亂真，造成飼料質(zhì)量大幅下降。

2．偽劣玉米蛋白粉的識(shí)別方法假玉米蛋白粉中摻入大量的小米粉、玉米粉及蛋白精，因而氨基酸的組成、總量以及葉黃素含量變化很大，有條件的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)一下樣品的氨基酸、氨、葉黃素的含量很容易鑒別真?zhèn)危胀ǖ膶?shí)驗(yàn)室可以采用以下方法來鑒別真?zhèn)巍?/p>

（1）樣品在水中的溶解情況：純的玉米蛋白粉在水中不溶解，迅速沉淀，其水溶液是無色澄清透明的（葉黃素不溶于水），偽劣的玉米蛋白粉在水中懸浮，沉淀很慢，其水溶液呈昏濁狀，甚至呈黃色（摻水溶性色素）

（2）玉米蛋白粉在稀酸稀堿中的變化情況：將約5g的樣品放在燒杯內(nèi)，加50mL水，攪拌片刻，再慢慢加入10mL稀鹽酸（1+3），如樣品表面變成紅色，再慢慢加入氫氧化鈉（30％）10-15mL，紅色變?yōu)辄S色，則此樣品屬偽劣產(chǎn)品。這是因?yàn)槟撤N蛋白精在合成時(shí)與摻入的染料反應(yīng)，生成一種新物質(zhì)，此物在酸或堿的作用下，分子內(nèi)部發(fā)生了重排現(xiàn)象，產(chǎn)生的異構(gòu)體在酸堿中呈不同的顏色。而真正的純玉米蛋白粉在室溫條件下與酸堿作用，外觀無明顯變化。

（3）玉米蛋白粉在變色酸中的顏色變化情況：蛋白精在硫酸的作用下分解生成甲醛，甲醛與變色酸生成一種紫色物質(zhì)。淀粉、蛋白質(zhì)、糖及銨均不干擾此反應(yīng)。

檢驗(yàn)方法：取0.1~0.2g樣品于干燥的50mL燒杯內(nèi)，約加1mL變色酸（1g／L濃硫酸溶液），在電爐上小心微熱至剛產(chǎn)生微煙，取下燒杯，加入10mL水，若溶液變成紫色，則樣品中含蛋白精，屬偽劣產(chǎn)品。

（4）顯微鏡檢查：將樣品置于體視鏡下，放大10-20倍，若發(fā)現(xiàn)有黃色易碎的微粒，將其小心夾出數(shù)粒于20mL燒杯內(nèi)，滴加約0.5mL變色酸（1g／L濃硫酸溶液），電爐上微熱至剛產(chǎn)生微煙，取下后慢慢加水10mL，若溶液變成紫色，則樣品中含蛋白精，屬偽劣產(chǎn)品。

（5）玉米蛋白粉中摻尿素的測(cè)定

（方法一）取50克玉米蛋白粉，加200mL蒸餾水震搖2分鐘，靜止30秒，三層濾紙過濾，取20mL放入50mL三角燒杯中，加入1mol／L的氫氧化鈉溶液10mL，再加入黃豆液數(shù)滴，靜置2-3分鐘，加奈斯勒試劑3滴，如試樣中有黃褐色沉淀生成，則表明有尿素存在。

（方法二）取方法一中濾液20mL，加黃豆粉少許，再加入甲醛紅溶液3滴，在70℃的水浴中加熱2-3分鐘，如出現(xiàn)較深的粉紅色表明有尿素存在。

（6）玉米蛋白粉中摻銨鹽的測(cè)定：同測(cè)摻尿素方法一基本相同，只是不加黃豆液，如有黃褐色沉淀產(chǎn)生，則含銨鹽。把含有銨鹽的蛋白粉溶液用硝酸銀和氯化鋇溶液滴定，如有白色沉淀產(chǎn)生則初步判定有氯化銨和硫酸銨。

（7）用1+1的鹽滴定玉米蛋白粉，如產(chǎn)生暗紅色，則有不明物存在，再進(jìn)行下一步的化驗(yàn)判斷。（三）摻假豆粕的鑒定

1．外觀鑒別法指人用感覺器官對(duì)飼料的外觀形狀、顆粒大小、顏色、氣味、質(zhì)地等指標(biāo)進(jìn)行鑒定。純豆粕呈不規(guī)則碎片狀，淺黃色或淡褐色，色澤一致，偶有少量結(jié)塊，聞?dòng)卸蛊晒逃卸瓜阄?，如果顏色金黃、顆粒均勻，有豆香氣味的是好豆粕。反之，如果顏色灰暗，顆粒不均，有霉變氣味的，不是豆粕，而是摻入了沸石粉、玉米等雜質(zhì)后，顏色淺淡，色澤不一，結(jié)塊多，剝開后用手指捻，可見白色粉末狀物，聞之稍有豆香味，摻雜量大的則無豆香味，如果將假豆粕粉碎后，再與豆粕比較，色差更是顯而易見，真品為淺黃褐色，在粉碎過程中，假豆粕粉塵大，裝入玻璃容器中粉塵會(huì)粘附于瓶壁。而純豆粕則無此現(xiàn)象。

2．外包裝鑒別法顆粒細(xì)、容重大、價(jià)格廉，這是絕大多數(shù)摻雜物所共同的特點(diǎn)，飼料中摻雜了這類物質(zhì)后，必定是包裝體積小，而重量增加。

3．水浸鑒別法取需檢驗(yàn)的豆粕25g放入盛有250mL的玻璃杯中浸泡2-3h，然后用木棒輕輕攪動(dòng)，若摻假可以看出分層，上層為豆餅，下層為泥沙。

4．顯微鏡檢查法取待檢樣品和純豆粕樣品各一份置于培養(yǎng)皿中，并使之分散均勻，分別放于顯微鏡下觀察：純豆粕外殼的表面光滑，有光澤，并有被針刺時(shí)的印記，豆仁顆粒無光澤，不透明，呈奶油色；玉米粒皮層光滑，半透明，并帶有似指甲紋路和條紋，這是玉米粒區(qū)別于豆仁的顯著特點(diǎn)。另外玉米粒的顏色也比豆仁深，呈桔紅色。

5．碘酒鑒別法取少許豆粕放在干凈的磁盤中，鋪薄鋪平，在其上面滴幾滴碘酒，過6分鐘，其中若有物質(zhì)變成藍(lán)黑色，說明可能摻有玉米、麩皮、稻殼等。

6．容重測(cè)量鑒別法飼料原料都有一定的容重，如果有摻雜物，容重就會(huì)發(fā)生改變，因此，測(cè)定容重也是判斷豆粕是否摻假的方法之一。具體方法為：用四分法取樣，然后將樣品非常輕而仔細(xì)地放入1000mL地量筒內(nèi)，使之正好到1000mL刻度處，用匙子調(diào)整好容積，然后將樣品從量筒內(nèi)倒出并稱重，每一樣品重復(fù)做3次，取其平均值為容重，一般純大豆粕容重為594.1—610.2g／L，將測(cè)得的結(jié)果與之比較，如果超出較多，說明該豆粕摻假。

7．生熟豆粕檢查法飼料應(yīng)用熟豆餅做原料，而不用生豆餅。因?yàn)樯癸灪锌挂鹊鞍酌?、皂角素等物質(zhì)，影響畜禽適口性及消化率。

（方法一）試紙法：生豆餅含脲酶，可分解尿素成氨，使溶液呈堿性。故觀察紅色石蕊試紙是否變藍(lán)即可檢測(cè)出大豆餅粕的生熟度。

檢測(cè)方法：取尿素0.1g左右入250ml三角瓶中，加被檢粉料豆餅粉0.1g，再加蒸餾水100ml，加塞在45℃水浴鍋上溫?zé)?h。然后取紅色石蕊試紙一條，浸入上述溶液中，若試紙變藍(lán)，說明豆餅生，不變，說明豆餅熟。

（方法二）酚紅法：生大豆餅粕中含有脲酶，室溫下可將尿素分解成氨，使溶液pH值偏向堿性，從而使酚紅指示劑由黃變紅（酚紅指示劑在pH6.4~8.2時(shí)由黃變紅）。

檢測(cè)方法：取細(xì)度40目以上被檢豆粕0.2g入三角瓶中，加0.02g尿素和1~2滴酚紅指示劑（0.1g酚紅溶入100ml95%乙醇中）。再加20~30ml蒸餾水，振搖后觀察溶液由黃變紅時(shí)間。一般10min以上不顯紅或粉紅者為合格大豆粕。其判斷標(biāo)準(zhǔn)是：

1min內(nèi)顯紅色者表示脲酶活性很強(qiáng)（豆粕生）；

1~5min內(nèi)顯紅或粉紅色者表示脲酶活性強(qiáng)（豆粕生）；

5~15min內(nèi)顯紅或粉紅色者表示脲酶活性弱（合格粕）；

15~30min內(nèi)顯紅或粉紅色者表示脲酶無活性（過熟粕）。

（方法三）尿素—苯酚磺試劑法：該法是指在指示劑苯酚磺（尿素—苯酚磺指示劑應(yīng)呈明亮琥珀色，若呈橘紅色，用0.2mol/LH2SO4調(diào)整。該液最好現(xiàn)配現(xiàn)用。）存在的條件下，以尿素轉(zhuǎn)變成氨的多少及顯色度，定性測(cè)定豆粕中脲酶活性，進(jìn)而確定豆粕生熟度的一種方法。

檢測(cè)方法：取粉碎豆粕粉少許，均勻地平鋪于表面皿中。用滴管吸取尿素—苯酚磺指示劑（1.2g苯酚紅溶于30ml0.2NnaOH溶液中，用蒸餾水稀釋至300ml；加入90g尿素，溶解后再用蒸餾水稀釋至2000ml；加70ml0.2NH2SO4；稀釋至3000ml）浸濕表面皿上的被檢樣，5min后觀察結(jié)果：

無任何紅點(diǎn)出現(xiàn)，再放置25min，若仍無紅點(diǎn)出現(xiàn)，說明被檢餅粕無脲酶活性，餅粕加工過熟。

有少數(shù)紅點(diǎn)，或表面被25%~50%紅點(diǎn)覆蓋，說明豆粕脲酶活性弱，餅粕可用。

表面75%~100%被紅點(diǎn)覆蓋，說明脲酶活性很強(qiáng)，餅粕生，需加熱處理才可用。

（方法四）氨溶解指數(shù)（NSI）法：NSI是指水溶性氮占總氮量的百分率。該法可采用水浴振蕩提取試樣后，通過凱氏定氮法定量測(cè)定。

（方法五）蛋白質(zhì)溶解度（PS）的測(cè)定。

（四）磷酸鹽的鑒別

常見的造假及鑒別方法有：

1．用磷礦粉或農(nóng)用過磷酸鈣假冒磷酸氫鈣磷礦粉是磷礦石磨成的細(xì)粉，灰白、黃棕或白色，含氟量較高，一般在2％左右，不溶于稀酸（稀鹽酸或白錯(cuò)）。農(nóng)用過磷酸鈣呈灰白色或深灰色，與稀酸反應(yīng)后溶液呈灰色，有部分不溶物。而飼料級(jí)磷酸氫鈣與稀酸反應(yīng)平穩(wěn)，無氣味，無沉淀。

2．用石粉或輕質(zhì)碳酸鈣假冒磷酸氫鈣石粉或輕質(zhì)碳酸鈣均可與稀酸反應(yīng)，而反應(yīng)時(shí)放出大量汽泡。反應(yīng)越激烈，汽泡越多，說明產(chǎn)品中含石粉或輕質(zhì)碳酸鈣越多。

3．磷酸鹽摻骨粉或滑石粉假冒磷酸氫鈣在磷酸鉀鹽、鈉鹽、銨鹽、鈣鹽中摻入骨粉的母的是降低其含氟量，摻假后色澤偏灰暗或偏黃褐色，若摻入骨粉50％以上則有骨粉氣味。加入稀酸后，會(huì)產(chǎn)生大量渾濁的泡沫，反應(yīng)后，溶液渾黃，底部有不溶性物質(zhì)存在。

（五）氯化膽堿的真?zhèn)舞b別氯化膽堿為B族維生素（VB4）的一種，常見的有純品，70％水劑，50％及60％粉劑四種，其中以粉劑常見，但摻假嚴(yán)重，質(zhì)量問題最多，用國(guó)標(biāo)GB10818-89（以下簡(jiǎn)稱國(guó)標(biāo)法）檢測(cè)，并不能識(shí)別真?zhèn)?，測(cè)定出的含量液不能真實(shí)的反映內(nèi)在的品質(zhì)。特別是氯化膽堿中間產(chǎn)物——三甲胺的殘留物。

1．感官判定

氯化膽堿50％及60％的粉劑一般為白色或黃褐色（視載體不同而不同）干燥的流動(dòng)性粉末狀顆粒，具有很強(qiáng)的吸潮性，有特殊的臭味而不是氨味。但是，吸收空氣中的二氧化碳和水，能方放出氨臭味，應(yīng)注意。

2．化學(xué)方法判定（主要是前三種）：

（1）銀量法：按GB10818-89（國(guó)標(biāo)法）測(cè)定。

（2）非水滴定法：稱取105℃烘干2h的樣品約1g于100mL干燥的容量瓶中，加甲醇80mL，振蕩15min后用甲醇定容，搖勻，經(jīng)干過濾，吸取濾液25.00mL于三角瓶?jī)?nèi)，沸水浴上蒸干，加冰乙酸40LmL溶解析出物，加5mL乙酸酐，5mL乙酸汞，結(jié)晶紫指示劑2滴，用高氯酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.1mol／L）滴定至溶液呈純藍(lán)色，同時(shí)做空白。

氯化膽堿含量（％）＝139.63×c×（c-c0）／m

（3）定氮法：稱取樣品約3g于250mL干燥的具塞三角瓶中，加水100mL，振蕩15mim，干過濾，吸取濾液10mL，按凱氏定氮法測(cè)定其總含氮量N總，另取10mL濾液于消化管內(nèi)，加水20mL，加氫氧化鈉50mL（400g／L），用100mL10.6％硼酸溶液做吸收液，蒸餾7min，加甲基紅-溴甲酚綠混合指示劑2滴，用鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.1mol／L）滴定至淺紅色，求出含氮量N1

氯化膽堿含量（％）＝（N總－N1）×139.6／14.0＝（N總－N1）×9.97

三甲胺鹽酸鹽的殘留量（％）＝N1×139.6／14.0＝N1×6.83

（4）四苯硼鈉法：稱取樣品約1g于100mL的容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度搖勻，過濾，精確量取10mL于100mL燒杯中，加20mL水，1滴三氯化鋁（10％），20mL四苯硼鈉（2％，優(yōu)質(zhì)純四苯硼鈉2g，加水溶解稀釋到100mL，加2滴0.5mol／L的NaOH搖勻放置24h，過濾。該溶液保質(zhì)期5天），不斷振搖30min，用預(yù)先烘干稱重的坩堝過濾，現(xiàn)洗滌燒杯四次，每次10mL左右，并將濾液一并過濾，將沉淀在105℃烘干2h，取出放入干燥器中冷卻，稱重。

氯化膽堿含量（％）＝沉淀質(zhì)量（g）×329.8／樣品質(zhì)量（g）

（5）雷氏鹽重量法：先將樣品放入105℃干燥箱中干燥至恒重，準(zhǔn)確稱取1g，置于100mL容量瓶中，加水70mL，反復(fù)振搖，然后在約80℃水浴中加熱15min，取出在電動(dòng)振蕩器上振蕩20mon，然后用水定容至100mL，過濾吸取10mL濾液至100mL高腳燒杯中，在冷浴中冷卻到5℃以下，加15mL雷氏鹽溶液[雷氏鹽（二氨基四硫代氰酸鉻銨）甲醛溶液：2％（m／V）]，不時(shí)攪拌反應(yīng)30min，再讓沉淀靜置陳化15min，然后將沉淀定量移入事先在105℃烘至恒重的玻璃砂芯坩堝中，減壓抽率，再用水洗滌沉淀3－4次，每次用水10mL，將裝有沉淀的玻璃砂芯坩堝放入烘箱中，105℃烘2h，稱重。

氯化膽堿含量（％）＝（m2－m1）／m0×3.3045

式中：m0——樣品質(zhì)量，g

m1——已恒重的空玻璃砂芯坩堝濾器的質(zhì)量，g

m2——烘干后的沉淀和坩堝濾器的質(zhì)量，g

3.03045——換算系數(shù)

注意：①在合成氯化膽堿過程中，其中間產(chǎn)物三甲胺鹽酸鹽的殘留量每增加1%，用非水滴定法測(cè)定時(shí)，氯化膽堿的含量就會(huì)升高1.4%，與氯化膽堿真實(shí)含量偏差更大。②摻入硝酸鹽、亞硝酸鹽、尿素、脲醛聚合物等的氯化膽堿不能用定氮法測(cè)定。（六）肉骨粉摻假檢驗(yàn)

1．一杯白開水，可檢出羽毛粉、雞腿皮粉用玻璃杯和白開水進(jìn)行檢測(cè)。把肉骨粉放在透明的玻璃杯或400毫升燒杯中，占四分之一的容量即可。用剛燒開的白開水充滿，加以攪拌，隨著水蒸汽的上升，有經(jīng)驗(yàn)的檢驗(yàn)人員，可根據(jù)溢出的氣味加以判斷。純?nèi)夤欠鄣膯柕朗强救庀慵皠?dòng)物脂肪香味、無異味。如有腥臭味或異味，出現(xiàn)像開水燙死雞時(shí)的味道，說明產(chǎn)品中含有大量羽毛粉或者雞腿皮粉。

2．一杯白開水可檢出玉米胚芽粕聞完后，稍放一會(huì)，玻璃杯中的肉骨粉會(huì)沉淀在底部，如有的產(chǎn)品出現(xiàn)分層，且上層漂浮物在段時(shí)間內(nèi)不沉淀，一般為玉米胚芽粕較多，但經(jīng)過烘炒的玉米胚芽粕則不漂浮，而是沉淀下去，這時(shí)取上清液滴入幾滴碘化鉀溶液，若溶液立即變?yōu)樯钏{(lán)至藍(lán)黑色則說明含植物淀粉。由于玉米胚芽粕的粗蛋白在17％左右，所以產(chǎn)品中的粗蛋白含量就不能達(dá)標(biāo)，從而確定產(chǎn)品可能是以玉米胚芽粕為載體摻有尿素或蛋白精。

3．快速定性分析尿素（無機(jī)氮）利用杯中水過濾后，將清水放入透明杯中，加少許黃豆粉，點(diǎn)甲酚紅變紅為尿素（沒有尿素的產(chǎn)品不變色），但此產(chǎn)品中可能有蛋白精。蛋白精目前國(guó)內(nèi)無有效的方法進(jìn)行鑒別，只能用分析氨基酸的方法來計(jì)算出氨基酸的總和及氨基酸是否平衡，才能確定。用水洗蛋白的檢測(cè)方法無效，因?yàn)榇宋镔|(zhì)不溶于水。

4．蛋白精的檢測(cè)（無機(jī)氮）

鏡撿法：由于蛋白精不溶于水，通過測(cè)真蛋白無法確定它是否存在，進(jìn)行氨基酸平衡分析需要時(shí)間長(zhǎng)、不經(jīng)濟(jì)、且不是一般飼料公司可能做到的，利用鏡檢簡(jiǎn)便易行，快速有效。把肉骨粉用乙醚脫脂干燥過10目篩，然后，用篩下去的部分放在培養(yǎng)皿中，在立體顯微鏡下做鏡檢。蛋白精一般為黃色或白色粉末，在顯微鏡下表現(xiàn)為大小不一，形狀不規(guī)則的顆粒。特征是用探針頭一碰即碎。而肉粉、肉骨粉的細(xì)顆粒是碰不碎的。

5、鏡檢羽毛粉及雞腿皮粉羽毛粉，完全水解的羽毛粉能消除羽毛的特征，即使在顯微鏡下也很難辨認(rèn)。但由于水解設(shè)備存在少量死角部位及其它原因，一般水解羽毛粉樣品中往往有些未徹底水解的羽毛，這些羽毛不同程度地保留了生羽毛的痕跡，如羽毛桿水解不徹底，在顯微鏡下是不規(guī)則管狀，中間透明。有的小羽枝上有分叉，水解徹底的羽毛粉鏡檢時(shí)在立體顯微鏡下若發(fā)現(xiàn)了碎玻璃樣小粒，應(yīng)在生物顯微鏡下仔細(xì)搜索，以找出生羽毛粉的痕跡。一旦查出，說明羽毛粉含量很大。

雞腿皮，在立體顯微鏡下雞腿皮成片狀，卷曲，而肉粉和肉骨粉是顆粒狀。盡管二者顏色接近，但鏡下根據(jù)性狀還是很容易鑒別的。

6、鏡檢豬毛粉和羊毛粉豬毛粉在顯微鏡下成圓柱段狀，長(zhǎng)短基本一樣，主要是由于加工時(shí)用同一型號(hào)的鑼底形成的。羊毛粉在顯微鏡下和豬毛粉基本一樣，但較細(xì)，毛軟，出管狀外，個(gè)別有彎曲形。

7、五分鏡檢出蹄角粉、皮粉、皮革粉蹄角粉在顯微鏡下成結(jié)晶塊，半透明，棱角分明，很容易分辨。（皮粉、皮革粉）鏡檢既方便又快捷，也是省錢的方法。不但對(duì)魚粉、肉粉、肉骨粉進(jìn)行檢測(cè)，而且對(duì)所有飼料原料都能檢測(cè)，特別時(shí)