2.生物工業(yè)菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)

2.1工業(yè)生產(chǎn)常用的微生物及要求2.2工業(yè)微生物菌種的衰退、復(fù)壯與保藏2.3工業(yè)微生物菌種的選育2.4生產(chǎn)菌種的改良2.5種子擴(kuò)大培養(yǎng)本節(jié)思考題1、什么是自然選育？自然選育（自然分離）的一般程序是什么？2.3工業(yè)微生物菌種的選育一、微生物菌種的自然選育

在生產(chǎn)過(guò)程中，不經(jīng)過(guò)人工處理，利用菌種的自然突變而進(jìn)行菌種篩選的過(guò)程叫做自然選育

在過(guò)去40年間曾篩選出許多產(chǎn)生新的有用的次級(jí)代謝物的菌種。這些菌種多半是以經(jīng)驗(yàn)式的篩選方法獲得的。大多數(shù)的抗生素均由放線(xiàn)菌綱產(chǎn)生。

前述介紹放線(xiàn)菌綱為主的分離方法原理和發(fā)展:

選擇性分離方法大致可分為五個(gè)步驟：

含微生物材料的選擇；材料的預(yù)處理；所需菌種的分離；培養(yǎng)；菌落的選擇和純化。小結(jié)：菌種的分離簡(jiǎn)介

一、菌種的來(lái)源根據(jù)資料直接向有科研單位、高等院校、工廠或菌種保藏部門(mén)索取或購(gòu)買(mǎi)；從大自然中分離篩選新的微生物菌種。定方案：首先要查閱資料，了解所需菌種的生長(zhǎng)培養(yǎng)特性。采樣：有針對(duì)性地采集樣品。增殖：人為地通過(guò)控制養(yǎng)分或培養(yǎng)條件，使所需菌種增殖培養(yǎng)后，在數(shù)量上占優(yōu)勢(shì)。分離：利用分離技術(shù)得到純種。發(fā)酵性能測(cè)定：進(jìn)行生產(chǎn)性能測(cè)定。這些特性包括形態(tài)、培養(yǎng)特征、營(yíng)養(yǎng)要求、生理生化特性、發(fā)酵周期、產(chǎn)品品種和產(chǎn)量、耐受最高溫度、生長(zhǎng)和發(fā)酵最適溫度、最適pH值、提取工藝等。三、新種分離與篩選的步驟菌種篩選主要步驟調(diào)查研究及查閱充分的資料

↓

設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案

↓確定采集樣品的生態(tài)環(huán)境

采樣

↓確定特定的增殖條件

增殖培養(yǎng)

↓確定特殊的選擇培養(yǎng)基及可能的

↓定性或半定量快速檢出法

平板分離

↓

原種斜面

↓確定發(fā)酵培養(yǎng)基礎(chǔ)條件

篩選

↓

初篩（1株1瓶）

↓

復(fù)篩（1株3～5瓶）

↓結(jié)合初步工藝條件摸索

再?gòu)?fù)篩（1株3～5瓶）

↓

3～5株

↓

單株純種分離

↓生產(chǎn)性能試驗(yàn)

↓→毒性試驗(yàn)

菌種鑒定從自然界篩選2、采樣季節(jié)：以溫度適中，雨量不多的秋初為好。3、采土方式：在選好適當(dāng)?shù)攸c(diǎn)后，用小鏟子除去表土，取離地面5-15cm處的土約10g，盛入清潔的牛皮紙袋或塑料袋中，扎好，標(biāo)記，記錄采樣時(shí)間、地點(diǎn)、環(huán)境條件等，以備查考。為了使土樣中微生物的數(shù)量和類(lèi)型盡少變化，宜將樣品逐步分批寄回，以便及時(shí)分離。（二）增殖培養(yǎng)為了容易分離到所需的菌種，讓無(wú)關(guān)的微生物至少是在數(shù)量上不要增加，可以通過(guò)配制選擇性培養(yǎng)基，選擇一定的培養(yǎng)條件來(lái)控制。例如碳源利用的控制，可選定糖，淀粉、纖維素，或者石油等，以其中的一種為唯一碳源，那么只有利用這一碳源的微生物才能大量正常生長(zhǎng)，而其它微生物就可能死亡或淘汰。這樣對(duì)下階段的純種分離就會(huì)順利得多。平皿劃線(xiàn)分離法a.連續(xù)劃線(xiàn)分離法b.分區(qū)劃線(xiàn)分離法（四）篩選這一步是采用與生產(chǎn)相近的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件，通過(guò)三角瓶的容量進(jìn)行小型發(fā)酵試驗(yàn)，以求得適合于工業(yè)生產(chǎn)用菌種。（五）毒性試驗(yàn)自然界的一些微生物是在一定條件下產(chǎn)毒的，將其作為生產(chǎn)菌種應(yīng)當(dāng)十分當(dāng)心，尤其與食品工業(yè)有關(guān)的菌種，更應(yīng)