X精品※試卷※X精品※試卷※※推薦※下載※※推薦※下載※專題14現(xiàn)代生物科技專題核心主干速通關(guān)、記準(zhǔn)核心知識筑牢滿分根基核心主干速通關(guān)、記準(zhǔn)核心知識筑牢滿分根基、基因工程和蛋白質(zhì)工程1掌.握基因工程的3種工具:限制性核酸內(nèi)切酶識別特定核苷酸序列并在特定位點切割 分子切開磷酸二酯鍵產(chǎn)生黏性末端或平末端。連接酶連接兩個 片段形成磷酸二酯鍵。載體有質(zhì)粒、入噬菌體的衍生物、動植物病毒等。2.掌握基因工程的操作流程:（1獲）取目的基因的3種途徑:①從基因文庫中獲取。②利用 技術(shù)擴增。③通過化學(xué)方法人工合成。（2基）因表達(dá)載體的構(gòu)建:①目的基因。②啟動子 聚合酶識別和結(jié)合部位驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄。③終止子 聚合酶脫離部位終止轉(zhuǎn)錄。④標(biāo)記基因:鑒別受體細(xì)胞中是否導(dǎo)入含有目的基因的基因表達(dá)載體。（3將）目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:導(dǎo)入方法根據(jù)生物的種類不同而不同:①植物農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法。②動物顯微注射技術(shù)導(dǎo)入受精卵）③微生物感受態(tài)細(xì)胞法 處理）（4目）的基因的檢測與鑒定:①檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞 分子雜交技術(shù)。②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出 分子雜交技術(shù)。③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì):抗原-抗體雜交技術(shù)。④個體生物學(xué)水平鑒定:根據(jù)表達(dá)性狀判斷。技術(shù)原理 雙鏈復(fù)制。條件引物、模板、 聚合酶、四種脫氧核苷酸。過程變性f復(fù)性f延伸。結(jié)果目的基因呈指數(shù)形式擴增約為 為擴增循環(huán)次數(shù)）與體內(nèi) 復(fù)制不同不需要解旋酶需耐高溫的 聚合酶。4.蛋白質(zhì)工程:原理中心法則的逆推。（2實）質(zhì):改造基因。（3產(chǎn)）物:產(chǎn)生自然界中沒有的新蛋白質(zhì)。二、細(xì)胞工程1.植物組織培養(yǎng):（1條）件:離體,一定營養(yǎng)物質(zhì),激素（生長素、細(xì)胞分裂素）等。（2培）養(yǎng)基狀態(tài):固體培養(yǎng)基。（3植）物組織培養(yǎng)的目的不同,培養(yǎng)階段也就不一樣:①若生產(chǎn)人工種子則培養(yǎng)到胚狀體階段。②若提取細(xì)胞產(chǎn)物則培養(yǎng)到愈傷組織階段。③若培育新個體則應(yīng)培養(yǎng)到試管苗階段。2植.物體細(xì)胞雜交:植物體細(xì)胞雜交技術(shù)將不同的植物體細(xì)胞在一定條件下融合成雜種細(xì)胞并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的過程。不管是染色體數(shù)、基因組數(shù),還是染色體組都采用直接相加的方法計算。酶解法用纖維素酶和果膠酶處理去除細(xì)胞壁。（3誘）導(dǎo)原生質(zhì)體融合:物理法（離心、振動、電激）、化學(xué)法（聚乙二醇）。（4原）生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志——再生出新的細(xì)胞壁。（5雜）種植物細(xì)胞培育成功的原理:植物細(xì)胞的全能性。.動物細(xì)胞培養(yǎng)的特殊營養(yǎng)條件:液體培養(yǎng)基加入動物血清、血漿等。（2通）入氧氣以滿足代謝的需要。通入二氧化碳以維持培養(yǎng)液的H.動物體細(xì)胞核移植技術(shù):（1流）程圖:

供體體細(xì)胞一細(xì)胞培養(yǎng)采集培養(yǎng)至.去核卵母細(xì)胞供體體細(xì)胞一細(xì)胞培養(yǎng)采集培養(yǎng)至.去核卵母細(xì)胞MU中期夫供體細(xì)胞（核）注入、電刺激融合■重組

一晶的/藤育袍胎卵母細(xì)胞 胚胎移植性別:與提供細(xì)胞的個體相同1克隆 代孕性狀:與提供細(xì)胞核的個體基本相同〕動物" 母體原理動物細(xì)胞核的全能性。（3卵）母細(xì)胞去核的方法:顯微操作法。（4供）體細(xì)胞:傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞。因為10代以內(nèi)的細(xì)胞能保持正常的二倍體核型。（5細(xì)）胞核移植技術(shù)中也可將供體細(xì)胞直接注入去核卵母細(xì)胞中。5.動物細(xì)胞融合:原理細(xì)胞膜的流動性、細(xì)胞增殖。誘導(dǎo)方法物理法、化學(xué)法和生物法滅活的病毒）6單.克隆抗體:（1三）種細(xì)胞特點不同:①免疫后的淋巴細(xì)胞能分泌抗體不能增殖。②骨髓瘤細(xì)胞能大量增殖不能分泌抗體。③雜交瘤細(xì)胞既能分泌抗體又能大量增殖。（2兩）次篩選的目的不同:第一次篩選:通過選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。第二次篩選:通過克隆化培養(yǎng)、抗體檢測,篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。三、胚胎工程1.操作對象:早期胚胎或配子（生殖細(xì)胞、受精卵和早期胚胎細(xì)胞）。2實.質(zhì):在體外條件下,對動物自然受精和早期胚胎發(fā)育條件進行的模擬操作。3理.論基礎(chǔ):哺乳動物受精機制和早期胚胎發(fā)育的規(guī)律。技術(shù)體外受精技術(shù)、胚胎移植技術(shù)、胚胎分割技術(shù)。5.胚胎移植過程中的四個解讀:（1排）卵是指卵子從卵泡中排出。受精過程大反應(yīng)頂體反應(yīng)、透明帶反應(yīng)、卵細(xì)胞膜反應(yīng)。（3區(qū)）別兩個標(biāo)志:受精標(biāo)志:卵細(xì)胞膜和透明帶的間隙可以觀察到兩個極體。

受精完成標(biāo)志:雌雄原核融合成合子。防止多精入卵受精的兩大屏障透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)。2“鹽”:無機鹽和有機鹽6.培養(yǎng)液的成分6.培養(yǎng)液的成分V2“酸”:氨基酸和核甘酸2“素”:維生素和激素2“液體”:水和血清.胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)（1胚）胎移入的基礎(chǔ):哺乳動物發(fā)情排卵后,同種動物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的。胚胎收集的基礎(chǔ)哺乳動物的早期胚胎形成后在一定時間內(nèi)不會與母體子宮建立組織上的聯(lián)系而是處于游離狀態(tài)。移入胚胎存活的基礎(chǔ)受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。（4保）留遺傳特性的基礎(chǔ):供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系,但供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受影響。四、生態(tài)工程1.生態(tài)工程的原理:（1物）質(zhì)循環(huán)再生原理。物種多樣性原理。協(xié)調(diào)與平衡原理。（4整）體性原理。（5系）統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理。2生.態(tài)工程基本原理的判斷方法:強調(diào)物質(zhì)循環(huán)、廢物利用、減輕環(huán)境污染一物質(zhì)循環(huán)再生原理。體現(xiàn)物種多營養(yǎng)關(guān)系復(fù)雜一物種多樣性原理。強調(diào)生物與環(huán)境的協(xié)調(diào)與平衡涉及環(huán)境承載力一協(xié)調(diào)與平衡原理。涉及自然、經(jīng)濟和社會指整個系統(tǒng)如林業(yè)生態(tài)工程建設(shè)一整體性原理。（5涉）及結(jié)構(gòu)、功能,分布式、集中式、環(huán)式一系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)決定功能原理（系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理）。（6涉）及系統(tǒng)組分的比例關(guān)系、總體功能大于各部分之和,指系統(tǒng)內(nèi)部,如互利共生一系統(tǒng)整體性原理（系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理）。易錯易混須規(guī)避 ■知星融黝酬?下列有關(guān)基因工程和細(xì)胞工程的敘述正確的是②③④⑥⑧

①重組 技術(shù)所用的工具酶是限制酶、連接酶和運載體。②沒有與目的基因重組的質(zhì)粒也可以進入受體細(xì)胞。③蛋白質(zhì)工程是在分子水平上對基因進行操作?？尚纬呻s交分子。④用人胰高血糖素基因制成探針檢測胰島細(xì)胞中可形成雜交分子。⑤轉(zhuǎn)基因抗蟲棉植株抗蟲效果的鑒定必須通過分子檢測。⑥外植體應(yīng)進行消毒處理以防止雜菌污染。⑦脫分化和再分化過程需要考慮不同激素的濃度比例同時還需要避光處理。⑧制備單克隆抗體時需要誘導(dǎo)免疫的淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合。⑨選擇高度分化的動物體細(xì)胞進行培養(yǎng)有利于獲得大量細(xì)胞。下列有關(guān)胚胎工程和生態(tài)工程的敘述正確的是③④⑤⑧。①為獲取更多的卵母）細(xì)胞要對供體母羊注射促性腺激素使其同期發(fā)情。②早期胚胎的培養(yǎng)液中含有維生素、激素等多種能源物質(zhì)。③采用胚胎分割技術(shù)產(chǎn)生同卵多胎數(shù)量是有限的。④早期胚胎培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液通常都需要加入血清。⑤胚胎干細(xì)胞可以從早期胚胎和原始性腺中分離獲得。⑥體外受精后的一定時間內(nèi)收集供體原腸胚用于胚胎分割。⑦單一人工林比天然混合林穩(wěn)定性低易爆發(fā)病蟲害一一協(xié)調(diào)與平衡原理。⑧林業(yè)生態(tài)工程建設(shè)既考慮種樹又考慮生活問題一一整體性原理。高考真題再演練檢測實戰(zhàn)能力定位主攻方向高考真題再演練檢測實戰(zhàn)能力定位主攻方向?全國卷I）回答下列問題博耶 和科恩） 將非洲爪蟾核糖體蛋白基因與質(zhì)粒重組后導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞中進行了表達(dá)。該研究除證明了質(zhì)粒可以作為載體外,還證明了 答_出兩點即可）。體外重組的質(zhì)?？赏ㄟ^ 參與的 方法導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞而體外重組的噬菌體 通常需與組裝成完整噬菌體后才能通過侵染的方法將重組的噬菌體 導(dǎo)入宿主細(xì)胞在細(xì)菌、心肌細(xì)胞、葉肉細(xì)胞中,可作為重組噬菌體宿主細(xì)胞的是 。 （3真）核生物基因（目的基因）在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)時,表達(dá)出的蛋白質(zhì)可能會被降解。為防止蛋白質(zhì)被降解,在實驗中應(yīng)選用 的_大_腸__桿_菌_作__為_受_體細(xì)胞,在蛋白質(zhì)純化的過程中應(yīng)添加 的_抑_制_劑_。 【解析】（1體）外重組的質(zhì)粒進入受體細(xì)胞才能使子代細(xì)胞具有目的基因,故體外重組的質(zhì)粒,必須可以進入受體細(xì)X精品※試卷※胞。目的基因是具有遺傳效應(yīng)的 片段必須可在原核細(xì)胞中表達(dá)才能使受體細(xì)胞獲得新性狀。2外源基因?qū)胛⑸锸荏w細(xì)胞的方法是先用a處理大腸桿菌使其成為感受態(tài)細(xì)胞然后讓重組表達(dá)載體分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合在一定溫度下促進感受態(tài)細(xì)胞吸收 分子完成轉(zhuǎn)化過程。噬菌體屬于專門侵染細(xì)菌的病毒,而心肌細(xì)胞和葉肉細(xì)胞均屬于真核細(xì)胞,故可作為重組噬菌體宿主細(xì)胞的是細(xì)菌。（3由）于大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)含有可以分解目的基因表達(dá)的蛋白質(zhì)的酶,故實驗中需要選用蛋白酶缺陷型的大腸桿菌,蛋白質(zhì)純化時需要抑制蛋白酶的活性。答案:（1體）外重組的質(zhì)粒可以進入受體細(xì)胞;真核生物基因可在原核細(xì)胞中表達(dá)（2）轉(zhuǎn)化外殼蛋白（或噬菌體蛋白）細(xì)菌（3蛋）白酶缺陷型蛋白酶2 20比全國卷0）2018年《細(xì)胞》期刊報道中國科學(xué)家率先成功地應(yīng)用體細(xì)胞對非人靈長類動物進行克隆獲得兩只克隆猴——“中中”和“華華”。回答下列問題:（1）“中中”和“華華”的獲得涉及核移植過程,核移植是指 。_通_過_核_移_植_方_法_獲_得的克隆猴,與核供體相比,克隆猴體細(xì)胞的染色體數(shù)目 填_“_減_半_”“（加倍”或“不變”）。（2）哺乳動物的核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植,胚胎細(xì)胞核移植獲得克隆動物的難度 填__“_（大于”或“小于” ）體細(xì)胞核移植,其原因是 。 （3在）哺乳動物核移植的過程中,若分別以雌性個體和雄性個體的體細(xì)胞作為核供體,通常,所得到的兩個克隆動物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目 填_“_相_同_”或（“不相同”）,性染色體組合 填_“_相_同_”或（“不相同”）。【解析】（1）核移植是指將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核,移入一個已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎,這個胚胎最后發(fā)育為動物個體;通過核移植方法獲得的克隆猴的細(xì)胞核來自供體,因此克隆猴體細(xì)胞的染色體數(shù)目和核供體一致。（2）胚胎細(xì)胞核移植的難度小于體細(xì)胞核移植,原因是動物胚胎細(xì)胞分化程度低,恢復(fù)其全能性相對容易。哺乳動物雌性個體和雄性個體的體細(xì)胞染色體中的常染色體相同性染色體前者是后者是因此分別以雌性個體和雄性個體的體細(xì)胞作為核供體,通常所得到的兩個克隆動物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目相同,性染色體組合不相同。答案:（將1）動物的一個細(xì)胞核,移入一個已去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中不變（2）小于胚胎細(xì)胞分化程度低,恢復(fù)全能性相對容易（3相）同不相同201全國卷I）某一質(zhì)粒載體如圖所示外源插入m或中會導(dǎo)致相應(yīng)的基因失活r表示氨芐青霉素抗性基因 表示四環(huán)素抗性基因）。有人將此質(zhì)粒載體用BamHI酶切后與用BamHI酶切獲得的目的基因混合加入連接酶進行連接反應(yīng)用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化有的被轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種,分別是含有環(huán)狀目的基因、含有質(zhì)粒載體、含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌。※推薦※下載※X精品※試卷※X精品※試卷※※推薦※下載※※推薦※下載※回答下列問題（1質(zhì)）粒載體作為基因工程的工具,應(yīng)具備的基本條件有 答_出_兩_點_即_可_）_。_而（作為基因表達(dá)載體,除滿足上述基本條件外,還需具有啟動子和終止子。（2如）果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進行篩選,在上述四種大腸桿菌細(xì)胞中,未被轉(zhuǎn)化的和僅含環(huán)狀目的基因的細(xì)胞是不能區(qū)分的,其原因是 并__且 ;___和 的__細(xì)_胞__也_是__不_能區(qū)分的,其原因是 。_在_上_述_篩_選_的_基_礎(chǔ)_上_,_若_要_篩_選_含_有_插_入_了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌單菌落,還需使用含有 的_固_體_培_養(yǎng)_基_。__基因工程中某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體其 復(fù)制所需的原料來自 。【解題指導(dǎo)】解答本題的關(guān)鍵有兩點:（1理）解基因工程中載體的特點。（2熟）悉導(dǎo)入重組質(zhì)粒的微生物的篩選方法。【解析】本題考查基因工程的相關(guān)知識。（1質(zhì)）粒被選用為基因工程的載體是因為:具有一個或多個限制酶切點;具有自我復(fù)制能力;帶有標(biāo)記基因;對宿主細(xì)胞無害。（2未）轉(zhuǎn)化的和僅含環(huán)狀目的基因的細(xì)胞都不能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長,故這兩種不可區(qū)分。含有質(zhì)粒載體和含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的細(xì)胞在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)