顯微鑒定的基本操作技能第1頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五第一節(jié)顯微標本片的制作一、組織透化劑及應(yīng)用（一）定義（二）作用（三）常見的透化劑第2頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五二、組織封藏劑及應(yīng)用三、顯微標本片的制法四、粉末標本片五、表面標本片六、切片制片法七、解離組織標本片第3頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五第二節(jié)顯微測量法一、目鏡測微尺二、載物臺測微尺三、兩尺的關(guān)系及應(yīng)用四、目微尺的標定五、測量方法第4頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五一、目鏡測微尺

放在目鏡筒內(nèi)的一種標尺，為一個直徑18~20mm的圓形玻璃片，中央有相互垂直的兩條線，其上刻有精確的刻度，常為50格或100格，如圖（a）第5頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五二、載物臺測微尺在特制的載玻片中央粘貼一刻有精細尺度的圓形玻片，通常將長1mm（或2mm）精確等分成10（或20）大格，100（或200）小格。每小格長為0.01mm即10μm，用以標定目鏡測微尺，如圖（b）第6頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五第7頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五三、兩尺的關(guān)系及應(yīng)用

臺微尺是標定目微尺的，不能直接用來測量顯微鏡下物體。其每小格10μm，是定值。目微尺是測量尺。每一格的長度是變值，是隨目鏡和物鏡的倍數(shù)變化而改變的，只有在放大倍數(shù)固定之后才能比量出目微尺每一格的相當長度因此，必須借助于臺微尺才能比量出目微尺每格的相當長度。標定好的目微尺才是在標定的倍數(shù)下測量物體的尺子。第8頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五四、目微尺的標定用以確定使用同一顯微鏡及特定倍數(shù)的物鏡、目鏡和鏡筒長度時，目微尺上每一格所代表的長度。

1.將臺微尺放置在載物臺上、將目微尺（正面向上）放入目鏡鏡筒內(nèi)

2.低倍物鏡下，將臺微尺刻度移至視野中央

3.旋轉(zhuǎn)目鏡，使兩尺平行。

4.移動臺微尺，使目微尺零端與臺微尺的某刻度線相重合第9頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五5.再找兩尺的第二條重合刻度線，數(shù)二條重合線間兩尺的小格數(shù)，記錄。如圖（c）6.計算出目微尺每一格在該物鏡條件下相當?shù)拈L度（μm）。

7.計算公式：標定值=兩重合線間臺微尺小格數(shù)X10μm/兩重合線間目微尺小格數(shù)

8.高倍物鏡下標定（進入高倍物鏡只調(diào)細調(diào)）

當測定時要用不同的放大倍數(shù)時，應(yīng)分別標定。

第10頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五五、測量方法

1.將需測量的目的物顯微制片置顯微鏡載物臺上

2.旋轉(zhuǎn)目鏡，使目微尺與測量目的物平行；數(shù)小格數(shù)，記錄。

3.計算實際長度（μm）=測得小格數(shù)X標定值通常是在高倍鏡下測量，但欲測量較長的目的物，如纖維、導管、非腺毛等的長度時，需在低倍鏡下測量。記錄最大值與最小值（μm），允許有少量數(shù)值略高或略低于規(guī)定。例：目鏡為10*，物鏡為40*時，測得淀粉粒直徑占目微尺9小格，則該淀粉粒直徑為3.8μm*9=34.2μm第11頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五第三節(jié)顯微繪圖法一、平描二、纖維描繪器描繪第12頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五1、木栓層2、石細胞3、皮層4、中柱鞘纖維5、韌皮部6、形成層7、木質(zhì)部8、射線9、髓部10、髓部石細胞味連雅連第13頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五黃連（味連）粉末圖黃柏（關(guān)黃柏）粉末圖第14頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五掃描電鏡圖1.花粉粒2.草酸鈣簇晶3.種臍4.氣孔5.花絲非腺毛6.導管第15頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五第四節(jié)常用顯微化學分析一、細胞壁性質(zhì)的鑒別二、細胞內(nèi)含物性質(zhì)的鑒別第16頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五人參顯微第17頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五第18頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五第19頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五圖1-4-4八珍丸

1.黨參(a.乳汁管b.木栓石細胞)2.白術(shù)(草酸鈣針晶)3.茯苓(a.多糖團塊b.菌絲)4.甘草（a.木栓細胞b.晶鞘纖維）5.當歸（紡錘形韌皮薄壁細胞，示斜向交錯網(wǎng)狀紋理）6.白芍（草酸鈣簇晶）7.川芎（草酸鈣圓簇狀結(jié)晶）8.熟地（薄壁細胞，示核狀物）第20頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五典型的植物細胞的構(gòu)造圖1.細胞壁2.葉綠體3.晶體4.細胞質(zhì)5.液泡6.線粒體7.紋孔8.細胞核9.核仁10.核質(zhì)11.細胞間隙第21頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五細胞核質(zhì)體：葉綠體、有色體、白色體線粒體高爾基體核糖體溶酶體貯藏的營養(yǎng)物質(zhì)：淀粉、蛋白質(zhì)、脂肪和脂肪油液泡：細胞液及其內(nèi)含物細胞器細胞質(zhì)后含物生理活性物質(zhì)：酶、維生素、植物激素、殺菌劑等原生質(zhì)體細胞后含物和生理活性物質(zhì)細胞壁典型的植物細胞第22頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五一、細胞壁性質(zhì)的鑒別1.木質(zhì)化細胞壁間苯三酚+濃鹽酸→紅色或紫紅色。

例：導管、木纖維、石細胞。

甘草的導管和纖維

肉桂的纖維和石細胞第23頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五2.木栓化或角質(zhì)化

蘇丹Ⅲ試液→桔紅色。

例：蓖麻的種子、甘蔗的莖皮。

女貞葉表皮角質(zhì)化

第24頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五3.粘液質(zhì)化：釕紅試劑→紅色；

玫紅酸鈉醇試劑→玫瑰紅色。

例：車前子、亞麻子的表皮細胞中。4.礦質(zhì)化

硅質(zhì)能溶于氟化氫，但不溶于醋酸或濃硫酸（區(qū)別于碳酸鈣和草酸鈣）。

例：禾本科植物的莖和葉，木賊莖和硅藻的細胞壁內(nèi)含有大量硅質(zhì)。第25頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五二、細胞內(nèi)含物性質(zhì)的鑒別

草酸鈣結(jié)晶體、碳酸鈣鐘乳體、淀粉粒、菊糖、油脂及類脂化合物、糊粉粒、粘液皆是一些顯微鏡下常見的一些有形而有鑒別意義的植物細胞內(nèi)含物。

第26頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五

淀粉粒的形狀、大小、臍點與層紋是否顯著，以及彼此間的復合狀況，皆隨種屬而有所不同。常見的有單粒淀粉、半復粒淀粉、復粒淀粉。

1.淀粉粒第27頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五鑒別：含有直鏈淀粉的淀粉粒遇稀碘液顯藍紫色，支鏈淀粉則顯紫紅色。圖淀粉粒

1，2，3為山藥的淀粉粒，三角狀卵圓形或矩圓形，臍點短縫狀和人字形。

4，5為絞股藍的淀粉粒，4單粒不規(guī)則橢圓形，5為復粒。第28頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五

2.菊糖

可把觀察材料放在乙醇中浸漬數(shù)天，使之結(jié)晶析出，然后以甘油裝片進行顯微觀察。這樣，就很易看到球狀、半球狀或扇狀或由數(shù)個輻射瓣組成的菊糖結(jié)晶。第29頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五3.脂肪油、揮發(fā)油、樹脂

加蘇丹Ⅲ溶液或紫草試液，均顯橘紅色、紅色或紫紅色。第30頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五

在大多數(shù)情況下，多呈細小結(jié)晶或無定形粒狀，并密集充斥于細胞中（如：玉蜀黍種子中的糊粉粒）。由于蛋白質(zhì)遇碘呈黃色，如加入碘甘油溶液，不但糊粉粒各部更加清晰，同時可進一步確證糊粉粒為蛋白質(zhì)組成。糊粉粒和淀粉粒常在同一細胞中互相混雜。4.糊粉粒

第31頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五Ⅰ.豌豆的子葉細胞1.細胞壁2.糊粉粒3.淀粉粒4.細胞間隙Ⅱ.小麥潁果外部的構(gòu)造1.果皮2.種皮3.糊粉層4.胚乳細胞Ⅲ.篦麻的胚乳細胞1.糊粉粒2.蛋白質(zhì)晶體3.基質(zhì)4.球晶體第32頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五

粘液（mucilage）多含于單子葉植物及錦葵目等類植物地下部份的一些細胞中。常為一折光性較強的粘稠狀液體，無特定形狀。它也是植物體糖類的一種積貯形式。常與草酸鈣針晶束同時并存。5.粘液第33頁，共36頁，2023年，2月20日，星期五6.草酸鈣結(jié)晶體

常見的草酸鈣晶體有簇晶、砂晶、塊晶、棱晶、針晶以及由針狀結(jié)晶集合而成的針晶束。1.簇晶（大黃根莖）2.針晶（半夏塊莖）3.方晶（甘草）4.砂晶（顛茄根）5.棱形及菱形晶體（買麻藤）第34頁，共36頁，2023