糖尿病實驗室診斷習題1、用于糖尿病分型的自身免疫標志物有那些？2、微量白蛋白尿和臨床白蛋白尿的如何分類。3、如何確診糖尿病？4、什么是糖尿病前期、IFG、IGT?5、簡述ACR及特點?2糖尿病實驗室診斷糖尿病診治中應用的實驗室檢測項目。實驗室檢測項目在糖尿病中的應用。3糖尿病實驗室診斷糖尿病診治中應用的實驗室檢測項目

用于糖尿病的診斷、代謝控制水平和治療效果的觀察判定中常用的檢測項目：

葡萄糖，OGTT，酮體，HbAlc，糖化血清白蛋白(果糖胺)，尿白蛋白測定(尿白蛋白排泄率，尿白蛋白／尿肌酐比值)，肌酐，尿素，內生肌酐清除率以及血脂等

用于糖尿病分型的自身免疫標志物檢測項目：

谷氨酸脫羧酶自身抗體(autoantibodytoglutamicaciddecarboxylase，GAD65)，胰島細胞自身抗體(isletcellautoantibody，ICA)，胰島素自身抗體(autoantibodytoinsulin，IAA)，酪氨酸磷酸化酶自身抗體(autoantibodytotyrosinephosphatasesIA-2AandIA-2BA)等。

用于反映和了解胰島β細胞功能的檢測項目：

血清(漿)胰島素，C肽等。4糖尿病實驗室診斷葡萄糖檢測

分析前因素：臨床常用的檢測血葡萄糖的標本類型有：

全血(毛細血管血或靜脈血)、血漿、血清等。臨床通常采用靜脈血血漿(清)作為檢測對象。

同體積全血中的葡萄糖濃度比血漿葡萄糖低約12％～15％!

5糖尿病實驗室診斷糖酵解

全血標本中的葡萄糖在室溫情況下可由于糖酵解作用而每小時降低約5％—7％。未添加抑制劑時，必須在采集標本后1h內分離出血漿(清)并進行葡萄糖檢測。分離后的血清葡萄糖25oC可穩(wěn)定4—8h；4oC可穩(wěn)定72h。6糖尿病實驗室診斷糖酵解抑制劑

氟化鈉（可單獨用；也可與草酸鹽或EDTA合用）碘化鋰（可單獨用；也可與肝素合用)。這兩種糖酵解抑制劑可擴散入紅細胞，分別抑制糖酵解過程中的烯醇化酶(氟化鈉)或葡萄糖—3—磷酸脫氫酶(碘化鋰)。

7糖尿病實驗室診斷建議

1、檢測血中葡萄糖通常采用加入糖酵解抑制劑的靜脈血血漿(清)標本。2、全血標本中的葡萄糖濃度在室溫情況下可由于糖酵解作用而降低。未添加糖酵解抑制劑時，必須在采集標本后1h內分離出血清，進行葡萄糖檢測。

8糖尿病實驗室診斷3．分析后因素：

分析檢測結果時應注意：血葡萄糖濃度可受飲食、藥物、應激等多種因素影響，如咖啡、吸煙、某些藥物(如甾體類，噻嗪類，雌激素，甲狀腺素，苯妥英等)以及創(chuàng)傷、心肌梗死、休克、感染、吸收異常、精神緊張等。9糖尿病實驗室診斷FPGfastingplasmaglucose空腹血葡萄糖

分析前因素

患者檢測前應禁食8—14h。體內血葡萄糖水平1d之內有周期變化，下午的血葡萄糖值比上午高。

通常檢測血葡萄糖取早上空腹標本。

10糖尿病實驗室診斷建議

空腹血葡萄糖是了解體內葡萄糖水平的重要檢測項目。檢測前應禁食8—14h。一般早上空腹進行。11糖尿病實驗室診斷2、分析后因素:FPG4．1～5．6mmol／L可視為血葡萄糖水平正常。FPG≥5．6mmoL／L的個體應接受OGTT，這可以提高糖尿病或糖尿病前期的檢出率。12糖尿病實驗室診斷建議FPG>5．6mmol／L的個體應接受口服OGTT，以提高糖尿病或糖尿病前期的檢出率。13糖尿病實驗室診斷OGTTOGTT(oralglucosetolerancetest)，葡萄糖耐量試驗OGTT主要用于IGT、糖尿病的診斷和某些臨床研究中。OGTT是診斷糖尿病時的主要檢測項目之一，比FPG的臨床敏感性更高。

14糖尿病實驗室診斷分析前因素：患者于OGTT前應禁食8—14h。檢測當日盡可能停用各種藥物，檢測期間應取坐位，不要吃東西和吸煙。成人口服75g無水葡萄糖粉(以300—400ml水沖服)，兒童為1．75mg／kg體重(總量不超過75g)?？诜咸烟乔?0min和口服后2h分別采靜脈血標本檢測。15糖尿病實驗室診斷糖尿病的確診OGTT2h血葡萄糖<7．8mmol／L可視為糖耐量正常。如果有糖尿病臨床表現(xiàn)，１）任意時刻血葡萄糖≥11．1mmol／L，２）FPG≥7．ommol／L，３）OGTT的2h血葡萄糖≥11．1mmoL／L，并經(jīng)另一日再次檢測(以上3個項目中任意之一)證實，結合臨床表現(xiàn)，應考慮糖尿病的診斷16糖尿病實驗室診斷建議：OGTT比FPG的臨床敏感性更高，是診斷糖尿病時的主要檢測項目之一17糖尿病實驗室診斷糖尿病前期、IFG、IGT在尚未達到糖尿病診斷標準但血葡萄糖水平超過正常的一組患者中，１）糖尿病前期

FPG在5．6mmol／～7．0mmol／L之間

OGTT2h在7．8mmol／L～

11．1mmoL／L之間。這種狀態(tài)又稱作糖尿病前期。２）IFG

FPG≥5．6mmol／L但OGTT2h血葡萄糖<7．8mmol／L為單純性空腹血葡萄糖受損(IFG)。３）IGT

FPG<5．6mmoL／L但OGTT的2h血葡萄糖在7．8～11．1mmol／L之間為單純性IGT。18糖尿病實驗室診斷

SMBG(self-monitoringofbloodglucose)，血葡萄糖自我監(jiān)測便攜式血液葡萄糖檢測儀(簡稱血糖儀)在SMBG中得到廣泛應用。血糖儀檢測結果不能應用于糖尿病的診斷。血糖儀的應用存在不少問題，主要有：1)患者如何準確使用血糖儀；2)血糖儀的檢測準確性和檢測精密性；3)不同血糖儀甚至同一型號血糖儀之間測定值的可比性；4)血糖儀測定值與醫(yī)院檢驗部門之間的一致性等等。血糖儀的測定結果應統(tǒng)一以血漿葡萄糖濃度表示。血糖儀測定值>4．2mmoL／L時與醫(yī)院檢驗部門之間的差異應<15％；血糖儀測定值≤4．2mmol／L時的差異應<0．83mmol／L。19糖尿病實驗室診斷便攜式血液葡萄糖檢測儀原理與缺陷:便攜式血液葡萄糖檢測儀最常用技術是GDH-PQQ(葡萄糖脫氫酶吡咯喹啉醌)技術缺點：是不能將血葡萄糖與其他糖類物質區(qū)別開來,使檢測結果高于真實值,從而掩蓋低血糖造成嚴重后果.國家食品藥品監(jiān)管局已建議盡量避免使用GDH-PQQ技術的血葡萄糖檢測產品.20糖尿病實驗室診斷建議:應對糖尿病患者進行必要的操作培訓，幫助使用者準確應用。便攜式血液葡萄糖檢測儀的測定結果應統(tǒng)一以血漿葡萄糖濃度表示測定值)，>4．2mmoL／L時與醫(yī)院檢驗部門之間的差異應<15％；測定值≤4．2mmoL／L時的差異應<0．83mmol／L。由于便攜式血液葡萄糖儀檢測的是毛細血管血葡萄糖，而且存在檢測結果的不精密性和相互之間不一致性等問題，所以不能應用于糖尿病的診斷。

21糖尿病實驗室診斷二、糖化蛋白血中的蛋白與糖作用后形成含糖基化的衍物稱為糖化蛋白糖化蛋白形成的程度與血糖濃度、高血糖持續(xù)時間以及蛋白結構上能結合糖的氨基酸數(shù)量有關。測定糖化蛋白能夠反映相對較長一段時間內血糖的濃度。22糖尿病實驗室診斷(一)HbA(glycosylatedhemoglobin)，糖化血紅蛋白１）HbAl又稱GHb，是紅細胞內血紅蛋白與血中糖化合物相結合的產物。糖化血紅蛋白A通常占總血紅蛋白的5％—8％，由HbAla(約占1．6％)、HbAlb(約占0．8％)和HbAlc(約占3％—6％)3種成分組成。HbAlc是其中最重要的亞組分，占HbAl的70％～90％，是結合了葡萄糖的血紅蛋白A。23糖尿病實驗室診斷HbAlc與并發(fā)癥HbAlc的含量與體內近6～8周血葡萄糖的平均水平相關（近二個月）。為觀察了解血糖水平與糖尿病并發(fā)癥的關系，美國曾對1型糖尿病患者進行了大規(guī)模的糖尿病控制和并發(fā)癥臨床試驗(DCCT)；英國也對2型糖尿病患者進行了糖尿病前瞻性研究(UKPDS)。DCCT的結果表明，HbAlc每降低一個百分點，可使糖尿病慢性并發(fā)癥的危險性降低35%～45％。24糖尿病實驗室診斷建議HbAlc是觀察了解糖尿病患者血糖控制水平的重要指標。

25糖尿病實驗室診斷1．分析前因素：檢測樣品多采用全血。檢測標本不受飲食和采血時間的影響。26糖尿病實驗室診斷

2．分析中因素：檢測GHb的方法主要有色譜層析方法和檢測單克隆抗體的免疫化學方法等。GHb測定結果應以HbAlc形式報告。由于不同的GHb測定方法可得到不同的GHb測定值，檢測實驗室應采用可溯源到國際臨床化學聯(lián)合會(IFCC)推薦的檢測HbAlc的方法(參考方法為HPLC—MS高效液相-質譜測定法；HPLC-CE高效液相色譜-毛細管電泳)或DCCT采用的方法，即采用經(jīng)過美國國家糖化血紅蛋白標準化計劃(NGSP)認可的HbAlc檢測系統(tǒng)(包括檢測的儀器、試劑、校準物和方法)27糖尿病實驗室診斷建議11、檢測實驗室應了解檢測HbAlc方法可能存在的影響因素。12、檢測HbAlc應采用可溯源到IFCC推薦方法或NGSP認可的檢測系統(tǒng)。13、HbAlc檢測實驗室應參加能力比對計劃或室間質評；檢測的批內CV應<5％(最好<3％)；每次最好能同時檢測2個不同值的質控標本；測定結果應以HbAlc形式報告。28糖尿病實驗室診斷3．分析后因素：國際糖尿病協(xié)會(IDF)、歐洲糖尿病學會(EASD)、美國糖尿病學會(ADA)和IFCC先后達成共識，提出HbAlc的檢測方法應該標準化；公認IFCC提出的參考方法；報告的結果單位為mmolHbAlc／mol血紅蛋白，采用IFCC的方法或從NGSP方法導出等。這些觀點正在逐步為臨床所接受。新單位的使用,使原來的%被mmol/mol取代,例如3.4%將成為34mmol/mol．29糖尿病實驗室診斷HbAlc應用我國糖尿病專家建議糖尿病的治療目標是HbAlc保持在<6．5％；如果>7．5％，則必須調整或重新制定治療計劃。糖尿病患者應常規(guī)定期進行HbAlc檢測：每年至少測2次；若治療未達到目標或調整治療方案，則應每3個月至少測定1次。HbAlc檢測結果與糖尿病并發(fā)癥的危險性密切相關，而且檢測結果(方法)準確、穩(wěn)定，優(yōu)于葡萄糖檢測，許多專家推薦將HbAlc的檢測結果用于糖尿病的診斷，并為ADA接受。30糖尿病實驗室診斷國際專家委員會已經(jīng)推薦將HbAlc檢測結果(≥6．5％)作為糖尿病的重要診斷依據(jù)，理由是：１）HbAlc檢測無需空腹；２）HbAlc診斷糖尿病與空腹血糖相比，其特異性及穩(wěn)定性更好；在美國有９９％的實驗室使用NGSP認可的方法，已達到全美HbAlc檢測一致性，中華醫(yī)學會糖尿病分會已開始對現(xiàn)有與糖尿病診斷有關的HbAlc數(shù)據(jù)進行收集和分析，并擬開展全國范圍研究，相信不久會有適用我國HbAlc作為診斷糖尿病標準。31糖尿病實驗室診斷建議16、HbAlc檢測結果可用于糖尿病的糖代謝狀況評估。17、HbAlc檢測結果報告單位逐步改為mmolHbAlc／mol血紅蛋白，可采用IFCC的方法或從NGSP方法導出。32糖尿病實驗室診斷分析檢測結果時注意事項：近期內大量失血的患者因出現(xiàn)大量新生紅細胞，可使HbAlc假性降低；溶血性貧血、大紅細胞性貧血或脾切除后，都可影響HbAlc的水平；妊娠時HbAlc水平降低，妊娠中、后期，往往比非妊娠時降低2％；異常血紅蛋白(HbF/HbS／HbC)可能對某些檢測方法產生干擾。33糖尿病實驗室診斷糖化血清蛋白(果糖胺)血清蛋白與糖形成的酮胺化合物稱為糖化血清蛋白(通常又稱為果糖胺)。白蛋白血清半衰期約20d，因而糖化血清白蛋白的檢測有助于了解檢測前約2周的血糖控制情況?？箟难?、尿酸、膽紅素等對某些方法可產生檢測干擾。臨床應用中存在的問題主要有：檢測的標準化尚存在問題；一些檢測方法的特異性不高；尿酸鹽和高脂血癥的干擾等等。34糖尿病實驗室診斷建議

糖化血清白蛋白是觀察了解糖尿病患者血糖控制水平的有價值的指標，但其臨床價值仍需得到更多的大規(guī)模臨床試驗證實。35糖尿病實驗室診斷四、尿白蛋白糖尿病是引起終末期晚期腎病的主要病因。檢測尿中白蛋白尤其是早期出現(xiàn)的尿白蛋白，有利于早期發(fā)現(xiàn)糖尿病腎病和進行早期干預治療，以延緩糖尿病腎病的發(fā)生和發(fā)展。出現(xiàn)尿白蛋白也是1型和2糖尿病患者心血管疾病發(fā)病和死亡的危險性增加的標志。36糖尿病實驗室診斷1．分析前因素：檢測標本以定時尿(如24h尿或夜尿)為佳，也可以采用隨機尿[以尿白蛋白量與尿肌酐比值(μg／mmol肌酐或μg／mg肌酐，ACR)比值報告]。定時尿防腐劑的選擇：可選用硼酸(約5g)等作為防腐劑。定時尿的留?。?4h尿可選擇早7點(或固定時間點)時將尿液排出，棄去；7點(或固定時間點)以后的尿液全部收集于一個已添加相應防腐劑的大容器內，至第2天早7點(或固定時間點)將最后一次尿液收集于容器中。準確量取尿量后進行檢測。37糖尿病實驗室診斷微量白蛋白尿和臨床白蛋白尿的分類38糖尿病實驗室診斷ACR及特點ACR(albumin／creatinineratio)，尿白蛋白／肌酐比值特點1、減少尿量和尿內含物質的變異的影響。

2、由于尿肌酐的排泌量相對恒定，不受尿量影響，更有助于減少尿量變化等引起的變異3、不受時間限制，可隨時測定4、尿ACR已成為尿白蛋白檢測報告的主要方式。39糖尿病實驗室診斷其他腎功能檢測項目糖尿病患者應該定期檢測血肌酐、尿素并計算內生肌酐清除率，以了解腎小球功能，尤其是已患有早期糖尿病腎病(尿白蛋白)者。因為糖尿病腎病進一步發(fā)展可以導致腎功能惡化，甚至出現(xiàn)尿毒癥。肌酐檢測是臨床化學檢驗最常見的項目之一。40糖尿病實驗室診斷建議檢測血肌酐是了解糖尿病患者腎臟功能的一項重要臨床檢測項目。常規(guī)血肌酐檢測方法偏倚應<5％，總的分析誤差應<8％s41糖尿病實驗室診斷血脂檢測項目高LDL膽固醇血癥、高甘油血癥和低HDL血癥是糖尿病性脂代謝紊亂的特征表現(xiàn)。糖尿病是心血管疾病的重要危險因素：2型糖尿病患者中心血管疾病發(fā)病率較高，是死亡的重要原因1型糖尿病患者心血管疾病的發(fā)病危險也有所增加。因此，必須重視對糖尿病性血脂紊亂的診斷和治療。血脂檢測是糖尿病性血脂紊亂的診斷和治療的一項重要臨床工作。糖尿病患者的血脂檢測與健康人血脂篩查所用的方法一致。臨床評估糖尿病患者的血脂情況應包括血總膽固醇、LDL膽固醇、HDL膽固醇，甘油三酯和載脂蛋白等的定量分析。檢測要求和結果判斷可參照我國糖尿病防治指南和血脂異常防治建議，以及全美膽固醇教育計劃(NCEP)成人治療組Ⅲ(ATPⅢ)。42糖尿病實驗室診斷建議

血脂檢測是糖尿病性血脂紊亂的診斷和治療的一項重要臨床工作。檢測要求和結果判斷可參照我國糖尿病防治指南和血脂異常防治建議以及ATPⅢ。43糖尿病實驗室診斷自身抗體檢測項目1型糖尿病發(fā)病機制主要是由于胰腺β細胞受到自身免疫損傷所致。1型糖尿病的自身抗體主要包GAD65、ICA、IAA和IA-2A／IA-2BA等。上述抗體的檢測對糖尿病的分型有參考意義。能顯著提高診斷1型糖尿病的臨床敏感性和特異性。聯(lián)合檢測這些抗體有助于提高1型糖尿病的檢出率。44糖尿病實驗室診斷建議檢測血中GAD65、ICA、IAA和IA-2A／IA-2BA等胰島細胞自身免疫抗體有助于糖尿病的分型。45糖尿病實驗室診斷胰島素、C肽血清胰島素和C肽濃度的測定是糖尿病分型、糖尿病患者胰島功能和胰島素抵抗的評價的主要檢測項目之一。測定空腹葡萄糖／胰島素比值對空腹低血糖的病因診斷和鑒別診斷中具有重要價值。胰島素檢測會受外源性胰島素影響，而C肽則不受此影響。雖然測定血中C肽有助于了解內源性胰島素分泌的總量，但由于血清C肽的生物半衰期約是胰島素的10倍，難以準確反映胰島素的急劇變化，對提示胰島素分泌模式的意義可能有限。檢測血清胰島素已有50多年的歷史，但至今還沒有標準化的檢測方法。胰島素和C肽檢測多采用免疫分析方法，公認的參考范圍沒有完全確立。由于缺少標準化，抗血清的特異性不高，存在與胰島素原程度不同的交叉反應，這些都使得胰島素和C肽檢測的可靠性受到一定影響。臨床應用時，應考慮建立檢測條件下的參考范圍。46糖尿病實驗室診斷檢測血中葡萄糖通常采用加入糖酵解抑制劑的靜脈血血漿(清)標本患者檢測前應禁食8—14h48糖尿病實驗室診斷FPG4．1～5．6mmol／L可視為血葡萄糖水平正常。FPG≥5．6mmoL／L的個體應接受OGTT，這可以提高糖尿病或糖尿病前期的檢出率。49糖尿病實驗室診斷糖尿病的確診如果有糖尿病臨床表現(xiàn)，１）任意時刻血葡萄糖≥11．1mmol／L，２）FPG≥7．ommol／L，３）OGTT的2h血葡萄糖≥11．1mmoL／L，另一日再次檢測(以上3個項目中任意之一)證實，結合臨床表現(xiàn)，應考慮糖尿病的診斷50糖尿病實驗室診斷糖尿病前期、IFG、IGT１）糖尿病前期

FPG在5．6mmol／～7．0mmol／L之間

OGTT2h在7．8mmol／L～

11．1mmoL／L之間。這種狀態(tài)又稱作糖尿病前期。２）IFG

FPG≥5．6mmol／L但OGTT2h血葡萄糖<7．8mmol／L為單純性空腹血葡萄糖受損(IFG)。３）IGT

FPG<5．6mmoL／L但OGTT的2h血葡萄糖在7．8～11．1mmol／L之間為單純性IGT。51糖尿病實驗室診斷HbAlc的含量與體內近6～8周血葡萄糖的平均水平相關（近二個月）。DCCT的結果表明，HbAlc每降低一個百分點，可使糖尿病慢性并發(fā)癥的危險性降低35%～45％。報告的結果單位為mmolHbAlc／mol血紅蛋白,新單位的使用,使原來的%被mmol/mol取代52糖尿病實驗室診斷微量白蛋白尿和臨床白蛋白尿的分類白蛋白排泌標本mg／24hμg／minμg／mg肌酐或

mg／mmol肌酐健康人尿<30<20<30(<3.O)微量白蛋白尿30—30020—20030—300(3.0—35.0)臨床白蛋白尿>300>200>300(>35.0)

53糖尿病實驗室診斷ACR及特點ACR(albumin／creatinineratio)，尿白蛋白／肌酐比值特點1、減少尿量和尿內含物質的變異的影響。

2、由于尿肌酐的排泌量相對恒定，不受尿量影響，更有助于減少尿量變化等引起的變異3、不受時間限制，可隨時測定4、尿ACR已成為尿白蛋白檢測報告的主要方式54糖尿病實驗室診斷血清胰島素和C肽濃度的測定是糖尿病分型、糖尿病患者胰島功能和胰島素抵抗的評價的主要檢測項目之一。測定空腹葡萄糖／胰島素比值對空腹低血糖的病因診斷和鑒別診斷中具有重要價值。55糖尿病實驗室診斷實驗室檢測項目在糖尿病診治中的應用56糖尿病實驗室診斷1型糖尿病的實驗室檢測1型糖尿病與自身免疫引起的胰島β細胞損傷有關。常見的自身免疫抗體有：GAD65、ICA、IAA、IA-2A和IA-2BA等。實驗室檢測可發(fā)現(xiàn)：(1)高血糖；(2)尿酮、血酮增高；(3)血清胰島素和C肽水平降低；(4)GAD65、