本文格式為Word版，下載可任意編輯——細(xì)胞滲透性試驗(yàn)

山東大學(xué)試驗(yàn)報(bào)告2023年9月23日

姓名系年級(jí)組別同組者

科目細(xì)胞生物學(xué)試驗(yàn)題目細(xì)胞滲透性試驗(yàn)學(xué)號(hào)

一、試驗(yàn)?zāi)康?/p>

1.了解溶血現(xiàn)象及其發(fā)活力制

2.了解細(xì)胞膜的滲透性及各類物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的速度。3.把握估測(cè)、比較各類物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞速度的方法。

二、試驗(yàn)原理

細(xì)胞膜是細(xì)胞與環(huán)境進(jìn)行物質(zhì)交換的選擇通透性屏障，是一種半透膜，可選擇性地控制物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞。將紅細(xì)胞放在低滲溶液中，水分子大量滲透到細(xì)胞內(nèi)，可使細(xì)胞脹破，血紅蛋白釋放到介質(zhì)中，溶液由不透明的紅細(xì)胞懸液變?yōu)榧t色透明的血紅蛋白溶液，這種現(xiàn)象稱為溶血。由于溶質(zhì)滲透入細(xì)胞的速度不同，溶血的時(shí)間也不同，因此，發(fā)生溶血現(xiàn)象所用的時(shí)間長(zhǎng)短可作為測(cè)量物質(zhì)進(jìn)入紅細(xì)胞速度的一種指標(biāo)。影響物質(zhì)穿膜能力大小的因素主要有三個(gè)：一是物質(zhì)脂溶性的大小，由于膜骨架是有脂雙層分子構(gòu)成的，所以脂溶性物質(zhì)易于穿過細(xì)胞膜；二是分子體積大小，較小的分子易穿過細(xì)胞膜；三是物質(zhì)帶電狀況，由于細(xì)胞表面一般帶電，不帶電的物質(zhì)易進(jìn)入細(xì)胞。

判定細(xì)胞溶血不溶血的方法：溶血的溶液紅的程度更高，且溶液發(fā)亮，透明度也更高。二是可以在顯微鏡下觀測(cè)細(xì)胞的形態(tài)。細(xì)胞破碎后細(xì)胞形態(tài)并沒有發(fā)生很大的變化，而是膜結(jié)構(gòu)上有一個(gè)小口，膜還是有結(jié)構(gòu)的，只不過體積變小了。

需要說明的等滲溶液中細(xì)胞也會(huì)是破碎的，由于生活狀態(tài)下膜兩側(cè)不斷交換物質(zhì)，代謝產(chǎn)物的積累使細(xì)胞滲透壓的平衡破壞，同時(shí)有些代謝物質(zhì)對(duì)細(xì)胞是有毒性的，所以長(zhǎng)時(shí)間放置會(huì)使細(xì)胞破碎，所以做等滲試驗(yàn)時(shí)間不宜超過1h。

本試驗(yàn)選用紅細(xì)胞作為細(xì)胞膜滲透性的試驗(yàn)材料，將其放入不同的介質(zhì)溶液中，觀測(cè)紅細(xì)胞的變化。

三、試驗(yàn)材料

試劑：雞血，0.85%氯化鈉溶液，0.0085%氯化鈉溶液，0.8mol/L甲醇，0.8mol/L

丙三醇，6%葡萄糖溶液，2%TritonX-100

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科目細(xì)胞生物學(xué)試驗(yàn)題目細(xì)胞滲透性試驗(yàn)學(xué)號(hào)

用具：顯微鏡、粗天平、載破片、蓋玻片、滴管2支、離心管2支、離心機(jī)、

9試管、磁力攪拌器。

四、試驗(yàn)步驟

1、取雞血2-3ml，加0.85%氯化鈉溶液4ml，在1000r/min條件下離心5min（RBC壓積量應(yīng)不少于0.3ml，否則應(yīng)補(bǔ)加雞血）

2、將上述離心的紅細(xì)胞按沉淀量配成50%濃度，總體積量應(yīng)不少于0.6ml3、每組取6支試管分別參與如下溶液各3ml（1）0.85%氯化鈉溶液（2）0.0085%氯化鈉溶液（3）0.8mol/L甲醇（4）0.8mol/L丙三醇（5）6%葡萄糖溶液（6）2%TritonX-100

4、向上述6試管中分別參與50%紅細(xì)胞懸液1滴，用吸管吸打均勻。觀測(cè)各管是否有溶血現(xiàn)象發(fā)生（觀測(cè)時(shí)間一小時(shí)）。記錄溶血時(shí)間并于顯微鏡下觀測(cè)各溶液中細(xì)胞。

五、試驗(yàn)結(jié)果

1.試驗(yàn)結(jié)果記錄表

試管編號(hào)1、3ml0.85%氯化鈉溶液+1滴稀釋雞血2、3ml0.0085%氯化鈉溶液+1滴稀釋雞血是否溶血否時(shí)間結(jié)果分析由于是等滲溶液，細(xì)胞失水吸水達(dá)到平衡，所以未發(fā)生溶血作用0.0085%是極低的低滲溶液，顯著低于雞是28s2紅細(xì)胞細(xì)胞液的濃度，使大量的水進(jìn)入雞紅細(xì)胞，從而使雞紅細(xì)胞溶血

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由于甲醇是脂溶性物質(zhì)，且濃度高，所是15s以甲醇分子迅速擴(kuò)散進(jìn)入雞紅細(xì)胞內(nèi)，從而使紅細(xì)胞迅速脹破由于丙三醇水溶性高，又加分子量相對(duì)

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科目細(xì)胞生物學(xué)試驗(yàn)題目細(xì)胞滲透性試驗(yàn)學(xué)號(hào)3、3ml0.8mol/L甲醇+1滴稀釋雞血4、3ml0.8mol/L丙三醇+1滴稀釋雞血部分溶血18min甲醇更大，所以丙三醇分子進(jìn)入細(xì)胞的速度較慢，發(fā)生溶血所需時(shí)間久，甚至有細(xì)胞不發(fā)生溶血葡萄糖易溶于水，且分子量比丙三醇更5、3ml6%葡萄糖溶液+1滴稀釋雞血部分溶血21min加大，所以葡萄糖分子進(jìn)入細(xì)胞的速度比丙三醇更慢，溶血時(shí)間也更久，或不發(fā)生溶血TritonX-100雖然是高聚物，但是由于它6、3ml2%TritonX-100+1滴稀釋雞血是非離子分子，且它有溶解部分膜蛋白是30s的功能，使細(xì)胞膜的滲透性增加，所以也導(dǎo)致水迅速進(jìn)入雞紅細(xì)胞，使紅細(xì)胞發(fā)生溶血表一不同低滲溶液下的溶血現(xiàn)象

2.試驗(yàn)顯微圖像：

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0.85%的氯化鈉溶液Triton

0.0085%的氯化鈉溶液

丙三醇溶液

溶液

葡萄糖溶液

甲醇溶液

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科目細(xì)胞生物學(xué)試驗(yàn)題目細(xì)胞滲透性試驗(yàn)學(xué)號(hào)

甲醇溶液六種溶液最終的對(duì)比六、

1.從1、2兩個(gè)試管，即0.85％NaCl溶液和0.0085％NaCl溶液的試驗(yàn)結(jié)果可得，血細(xì)胞在低滲溶液中簡(jiǎn)單發(fā)生溶血。同時(shí)，由于兩組試驗(yàn)所得時(shí)間差距極大，也可得出：細(xì)胞膜內(nèi)外溶液濃度差越大，溶血越簡(jiǎn)單發(fā)生。

2.在3號(hào)試管，即0.3mol/L甲醇溶液中，溶血時(shí)間極快，但在顯微鏡下并未觀測(cè)到明顯細(xì)胞體積變小且邊緣出現(xiàn)褶皺的現(xiàn)象，經(jīng)分析得：紅細(xì)胞在甲醇溶液中溶血速度極快，必需在滴血立刻制片，否則血細(xì)胞便會(huì)破碎，無(wú)法觀測(cè)。同時(shí)也可以得出：親脂性的、小分子的非極性分子極易穿過細(xì)胞膜。

3.在5號(hào)試管，即6mol/L葡萄糖溶液中，幾乎不發(fā)生溶血，得出：分子體積大的極性分子不易進(jìn)入細(xì)胞。

4.在6號(hào)試管，即TritionX-100溶液，為一種表面活性劑，可抽取膜質(zhì)蛋白質(zhì)，使細(xì)胞通透性加強(qiáng)，快速溶血，產(chǎn)生絮狀沉淀，使溶液變渾濁。該反應(yīng)也極快發(fā)生，必需在滴血立刻制片，否則血細(xì)胞便會(huì)破碎，無(wú)法觀測(cè)。附查找資料：貧血的分類

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科目細(xì)胞生物學(xué)試驗(yàn)題目細(xì)胞滲透性試驗(yàn)學(xué)號(hào)

1、缺鐵性貧血

缺鐵而影響血紅蛋白合成所引起的貧血，見于營(yíng)養(yǎng)不良2、出血性貧血

急性大量出血(如胃和十二指腸潰瘍病、食管靜脈曲張破碎或外傷等)所引起的。

3、溶血性貧血

紅細(xì)胞過度破壞所引起的貧血，但較少見;常伴有黃疸，稱為“溶血性黃疸〞;

4、巨幼紅細(xì)胞性貧血

缺乏紅細(xì)胞成熟因素而引起的貧血，缺乏葉酸或維生素B12引起的巨幼紅細(xì)胞性貧血，多見于嬰兒和孕婦長(zhǎng)期營(yíng)養(yǎng)不良;巨幼細(xì)胞貧血是指骨髓中出現(xiàn)大量巨幼細(xì)胞的一類貧血。巨幼紅細(xì)胞性貧血量的減少。巨幼細(xì)胞包括原巨幼細(xì)胞、早巨幼細(xì)胞、中巨幼細(xì)胞和巨幼細(xì)胞各不同發(fā)育階段的幼稚紅細(xì)胞。這些巨幼細(xì)胞均比相應(yīng)的正常幼紅細(xì)胞大，漿核比例比正常略高。5、惡性貧血

缺乏內(nèi)因子的巨幼紅細(xì)胞性貧血。6、再生障礙性貧血

伴有胃酸缺乏和脊髓側(cè)柱、后柱萎縮，病程緩慢;造血功能障礙引起的貧血，再生障礙性貧血(AA，簡(jiǎn)稱再障)，是由多種原因引起的骨髓干細(xì)胞、造血微環(huán)境損傷以及免疫機(jī)制改變，導(dǎo)致骨髓造血功能衰竭，出現(xiàn)以全血細(xì)胞(紅細(xì)胞、粒

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