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第二十九章雙股RNA病毒第1頁,共25頁,2023年,2月20日,星期一雙股RNA病毒呼腸孤病毒科雙RNA病毒科微雙RNA病毒科單分病毒科第2頁,共25頁,2023年,2月20日,星期一第一節(jié)呼腸孤病毒科(Reoviridae)

第3頁,共25頁,2023年,2月20日,星期一一、分類呼腸孤病毒科分為2個(gè)亞科:光滑呼腸孤病毒亞科(6個(gè)屬)刺突呼腸孤病毒亞科(9個(gè)屬)宿主包括哺乳動(dòng)物、禽類、爬行類、兩棲類、魚類、無脊椎動(dòng)物及植物。第4頁,共25頁,2023年,2月20日,星期一光滑呼腸孤病毒亞科與動(dòng)物疾病有關(guān)的屬環(huán)狀病毒屬輪狀病毒屬東南亞12節(jié)段病毒屬蟹12節(jié)段病毒屬第5頁,共25頁,2023年,2月20日,星期一刺突呼腸孤病毒亞科與動(dòng)物疾病有關(guān)的屬正呼腸孤病毒屬水生呼腸孤病毒屬科州蜱傳熱病毒屬質(zhì)型多角體病毒屬昆蟲雙鏈九片段RNA病毒屬昆蟲非包裹呼腸孤病毒屬第6頁,共25頁,2023年,2月20日,星期一呼腸孤病毒科主要?jiǎng)游锊《炯八录膊?/p>

屬名病毒名稱感染動(dòng)物疾病光滑呼腸孤病毒亞科環(huán)狀病毒屬藍(lán)舌病毒1~26型綿羊、山羊、鹿藍(lán)舌病

非洲馬瘟病毒1~9型馬、驢、騾、斑馬非洲馬瘟

馬腦炎病毒1~7型馬流產(chǎn)、腦炎流行性出血癥病毒1~10型鹿、牛流行性出血熱

巴尼亞姆病毒1~3型妞流產(chǎn)、先天性異常

蜜露馬病病毒馬神經(jīng)癥狀輪狀病毒屬輪狀病毒A~E型幾乎所有動(dòng)物通常有宿主特異性腸炎東南亞12節(jié)段病毒屬版納病毒人神經(jīng)癥狀蟹12節(jié)段病毒屬中華絨螯蟹呼腸孤病毒甲殼類第7頁,共25頁,2023年,2月20日,星期一呼腸孤病毒科主要?jiǎng)游锊《炯八录膊?/p>

屬名病毒名稱感染動(dòng)物疾病刺突呼腸孤病毒亞科正呼腸孤病毒屬哺乳動(dòng)物正呼腸孤病毒多種哺乳動(dòng)物呼吸道病、腹瀉1~4型禽正呼腸孤病毒雞、鴨、鵝、火雞慢性呼吸道病關(guān)節(jié)炎、腸炎科州蜱傳熱病毒屬科州蜱傳熱病毒小型哺乳動(dòng)物、人科州蜱傳熱

埃亞契病毒小型哺乳動(dòng)物、人腦炎水生呼腸孤病毒屬草魚出血熱病毒草魚草魚出血熱第8頁,共25頁,2023年,2月20日,星期一二、主要特性1、病毒顆粒近似球形,直徑80nm,無囊膜。2、有外、中、內(nèi)三層衣殼,均為20面體對稱。3、基因組為線狀雙股RNA,分節(jié)段。10個(gè)節(jié)段(正呼腸孤病毒、環(huán)狀病毒)11個(gè)節(jié)段(輪狀病毒、水生呼腸孤病毒)12個(gè)節(jié)段(科州蜱傳熱病毒、東南亞十二

節(jié)段病毒)4、某些成員有血凝特性。5、易發(fā)生基因重配而產(chǎn)生種及血清型的變異。第9頁,共25頁,2023年,2月20日,星期一三、環(huán)狀病毒屬(Orbivirus)本屬為典型的蟲媒病毒,成員有30多種。對動(dòng)物致病的主要有:非洲馬瘟病毒藍(lán)舌病病毒流行性出血病毒馬腦炎病毒第10頁,共25頁,2023年,2月20日,星期一(一)環(huán)狀病毒的基本特性病毒粒子近似球形,直徑約80nm,沒有脂質(zhì)囊膜。有一個(gè)模糊的外衣殼?;蚪M由10個(gè)雙鏈RNA節(jié)段組成。通過多種嗜血節(jié)肢動(dòng)物在脊椎動(dòng)物宿主中傳播。第11頁,共25頁,2023年,2月20日,星期一1、非洲馬瘟病毒(Africanhorsesicknessvirus,AHSV)非洲馬瘟病毒為非洲馬瘟的病原體。該病是馬屬動(dòng)物的一種急性或亞急性蟲媒傳染病,在非洲撒哈拉沙漠以南是地方性流行病。傳播媒介是庫蠓的某些種類,其中最重要的是擬蚊庫蠓。第12頁,共25頁,2023年,2月20日,星期一非洲馬瘟病毒形態(tài)超薄切片中的病毒粒子直徑為75nm,內(nèi)有一個(gè)致密的核心,直徑約50nm。負(fù)染標(biāo)本內(nèi),病毒粒子的總直徑為60-80nm,衣殼的直徑約55nm,由32個(gè)殼粒組成。第13頁,共25頁,2023年,2月20日,星期一分型非洲馬瘟病毒有9個(gè)血清型:非洲馬瘟病毒1型非洲馬瘟病毒2型非洲馬瘟病毒3型非洲馬瘟病毒4型非洲馬瘟病毒5型非洲馬瘟病毒6型非洲馬瘟病毒7型非洲馬瘟病毒8型非洲馬瘟病毒9型各型之間無交互免疫,不同型病毒的毒力強(qiáng)弱也不相同第14頁,共25頁,2023年,2月20日,星期一理化特性核酸為雙股RNA。對乙醚、氯仿和去氧膽酸鹽有一定抵抗力,抗胰蛋白酶。在pH6-10之間穩(wěn)定,但在pH3時(shí)迅速滅活。血液或血清中的病毒可以長期存活,在4℃甚至室溫條件下存活多年。60℃于30分鐘使其滅活。保存病毒的適宜溫度是4℃或~70℃,馬瘟病毒在-20%~-50℃溫度中較易滅活。第15頁,共25頁,2023年,2月20日,星期一培養(yǎng)雞胚培養(yǎng)各型馬瘟病毒均可經(jīng)卵黃囊接種后于雞胚內(nèi)增殖。鼠腦適應(yīng)株還??稍陔u胚絨毛尿囊膜上生長。細(xì)胞培養(yǎng)馬瘟病毒可在馬腎、綿羊羔腎、雞胚腎等原代細(xì)胞,以及Vero、MS、BHK-21等傳代細(xì)胞系內(nèi)增殖,并出現(xiàn)大型的胞漿內(nèi)包涵體。其中以倉鼠腎細(xì)胞系和猴腎細(xì)胞系最常應(yīng)用。第16頁,共25頁,2023年,2月20日,星期一血凝性某些毒株感染鼠腦的抽提物能夠凝集馬的紅細(xì)胞,紅細(xì)胞凝集的最適條件是pH6.4、37℃孵育2小時(shí)。第17頁,共25頁,2023年,2月20日,星期一病原性自然感染發(fā)生于馬、騾及猴,死亡率95%。馬最敏感,騾次之。驢有一定抵抗力,僅出現(xiàn)溫和的發(fā)熱反應(yīng)。斑馬隱性帶毒者,但不發(fā)病。人亦可感染,表現(xiàn)為腦炎視網(wǎng)膜炎。馬瘟在臨床上習(xí)慣地分為四個(gè)類型,即發(fā)熱型、肺型、心型和混合型。肺型最為嚴(yán)重,體溫升高達(dá)41℃,呼吸、脈搏加快,并出現(xiàn)急性肺水腫的癥狀。病畜可在數(shù)小時(shí)內(nèi)死亡。主要病變是肺水腫和胸腔積水。第18頁,共25頁,2023年,2月20日,星期一微生物學(xué)診斷確診必須依靠病毒分離鑒定以及特異性血清學(xué)檢查。第19頁,共25頁,2023年,2月20日,星期一(1)病毒的分離和鑒定取發(fā)熱期的病馬血液或動(dòng)物的脾臟,制成乳劑,腦內(nèi)接種2~6日齡小鼠分離病毒。接種后5~10天發(fā)病死亡。病毒初步鑒定用補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)。將死亡乳鼠腦組織制成10%乳劑,4℃過夜,離心取上清液作為抗原,與標(biāo)準(zhǔn)陽性血清進(jìn)行補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)鑒定。也可應(yīng)用熒光抗體技術(shù)或瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)進(jìn)行初步鑒定。病毒血清型的鑒定,須用中和試驗(yàn)以及血凝抑制試驗(yàn)。第20頁,共25頁,2023年,2月20日,星期一(2)血清學(xué)試驗(yàn)包括補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、中和試驗(yàn)和血凝抑制試驗(yàn)、ELISA試驗(yàn)等。第21頁,共25頁,2023年,2月20日,星期一補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)抗原由感染(乳)鼠腦或細(xì)胞培養(yǎng)物制備。馬騾感染后7~10天開始出現(xiàn)補(bǔ)體結(jié)合抗體,于感染后2~6周達(dá)最高滴度,此后逐漸下降,約于6個(gè)月左右消失。第22頁,共25頁,2023年,2月20日,星期一瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)抗原由感染(乳)鼠腦或猴腎細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)超聲波裂解后制備。馬匹在感染后2周左右,出現(xiàn)沉淀抗體,4~6個(gè)月后下降并消失。一般出現(xiàn)兩條沉淀線。由于可能出現(xiàn)動(dòng)物種間的非特異性沉淀線,因此必須設(shè)置正??乖?、陽性抗原、正常血清和陽性血清的多種對照。第23頁,共25頁,2023年,2月20日,星期一血凝抑制試驗(yàn)血凝抑制抗體的出現(xiàn)時(shí)間較早,約在熱反應(yīng)后4~5天即可測出,但消失也快,是診斷馬瘟近期感染的一種常用方法。血凝抑制試驗(yàn)的關(guān)鍵,是要制備出高質(zhì)量的血凝抗原。第24頁,共

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