第3章消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全潘建平教授第一節(jié)消毒滅菌常用術(shù)語滅菌（sterilization）：殺滅物體上所有微生物

的方法。消毒（disinfection）：殺死物體上或環(huán)境中的

病原微生物的方法。防腐（antisepsis）：防止或抑制皮膚表面細(xì)菌

生長繁殖的方法。清潔（cleaning）：是指通過除去塵埃和一切污

穢以減少微生物數(shù)量的過程。無菌（asepsis）和無菌操作：無菌是無活菌的

意思，多是滅菌的結(jié)果。防止細(xì)菌進(jìn)入人體

或其它物品的操作技術(shù)，稱為無菌操作。第二節(jié)消毒滅菌的方法一、物理消毒滅菌法

（一）熱力滅菌法

1.干熱滅菌法

焚燒；燒灼；干烤；紅外線

2.濕熱滅菌法

巴氏消毒法(pasteurization)；煮沸

法；流動(dòng)蒸汽消毒法；間歇蒸汽滅菌

法(fractionalsterilization)；高壓蒸

汽滅菌法(autoclaving)（二）輻射殺菌法

1.紫外線：265～266nm最強(qiáng)

可使DNA鏈上兩個(gè)相鄰的胸腺嘧啶共價(jià)結(jié)合，形成二聚體，干擾DNA復(fù)制與轉(zhuǎn)錄。

2.電離輻射

3.微波（microwave）（三）濾過除菌法

1.濾菌器(filter）

液體除菌

2.空氣除菌采用生物潔凈技術(shù)（四）干燥與低溫抑菌法濾器和層流室二、化學(xué)消毒滅菌法（一）高效消毒劑（high-leveldisinfectants）

1.含氯消毒劑；2.過氧化物消毒劑；

3.醛類消毒劑；4.環(huán)氧乙烷（二）中效消毒劑（intermediate-leveldisinfectants）

1.含碘消毒劑；2.醇類消毒劑（三）低效消毒劑（low-leveldisinfectants）

1.季銨鹽類；2.氯己定；3.高錳酸鉀固體二氧化氯消毒劑二、室內(nèi)空氣消毒滅菌

1.物理消毒法

①紫外線照射（1.5W/m3，1h）最常用；②濾過除菌：空氣通過孔徑小于0.2m的高效過濾裝置以除去細(xì)菌和帶菌塵埃。

2．化學(xué)消毒法

包括化學(xué)消毒劑噴霧和熏蒸：①過氧乙酸噴霧、熏蒸；②過氧化氫噴霧；③二氧化氯溶液噴灑；④中草藥點(diǎn)燃煙熏。三、手和皮膚的消毒

用肥皂和流動(dòng)水經(jīng)常并正確洗手

病原微生物污染時(shí)應(yīng)用消毒劑消毒。四、黏膜的消毒

五、病人排泄物與分泌物的消毒滅菌

六、病人污染物品的消毒

七、飲水的消毒

八、環(huán)境的消毒

第四節(jié)病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全

生物安全（biosafety）是生物技術(shù)安全（safetyofbiotechnology）的簡稱。

狹義：指現(xiàn)代生物技術(shù)的研究、開發(fā)、應(yīng)用及轉(zhuǎn)基因生物可能對(duì)生物多樣性、生態(tài)環(huán)境和人類健康產(chǎn)生潛在的危害。

廣義：指與生物有關(guān)的各種因素對(duì)社會(huì)、經(jīng)濟(jì)、人類健康及生態(tài)環(huán)境所產(chǎn)生的危害或潛在風(fēng)險(xiǎn)。

病原微生物所致的安全問題，如病原微生物實(shí)驗(yàn)室的安全隱患、生物武器、生物恐怖、重大傳染病的暴發(fā)流行等，也是人類社會(huì)所面臨的最現(xiàn)實(shí)的生物安全問題。

病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全的核心是防擴(kuò)散和防感染。

關(guān)于病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全，我國法令包括對(duì)病原微生物的分類管理，對(duì)實(shí)驗(yàn)室的分級(jí)管理，實(shí)驗(yàn)室感染的控制以及監(jiān)督和法律責(zé)任等。

一、病原微生物的分類

根據(jù)傳染性、感染后對(duì)個(gè)體或者群體的危害程度，病原微生物分為四類：

第一類是指能夠引起人類或者動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物（29種）。

第二類是指能夠引起人類或者動(dòng)物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物（70種）。

二、病原微生物實(shí)驗(yàn)室的分級(jí)級(jí)別處理對(duì)象一級(jí)對(duì)人體、動(dòng)植物或環(huán)境危害較低，不具有對(duì)健康成人、動(dòng)植物致病的致病因子。二級(jí)對(duì)人體、動(dòng)植物或環(huán)境具有中等危害或具有潛在危險(xiǎn)的致病因子，對(duì)健康成人、動(dòng)植物和環(huán)境不會(huì)造成嚴(yán)重危害，具有有效的預(yù)防和治療措施。三級(jí)對(duì)人體、動(dòng)植物或環(huán)境具有高度危險(xiǎn)性，主要通過氣溶膠使人類傳染上嚴(yán)重的甚至是致命的疾病，或?qū)?dòng)植物和環(huán)境具有高度危害的致病因子。通常有預(yù)防治療措施。四級(jí)對(duì)人體、動(dòng)植物或環(huán)境具有高度危險(xiǎn)性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明或未知的危險(xiǎn)的致病因子。沒有預(yù)防治療措施。

一、二級(jí)實(shí)驗(yàn)室不得從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。三級(jí)、四級(jí)實(shí)驗(yàn)室從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。

從事高致病性病原微生物相關(guān)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)應(yīng)當(dāng)有２名以上的工作人員共同進(jìn)行。在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室的同一個(gè)獨(dú)立安全區(qū)域內(nèi)，只能同時(shí)從事一種高致病性病原微生物的相關(guān)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。應(yīng)有健全安全保衛(wèi)制度。

實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)掌握實(shí)驗(yàn)室技術(shù)規(guī)范、操作規(guī)程、生物安全防護(hù)知識(shí)和實(shí)際操作技能。應(yīng)有符合要求的防護(hù)用品，應(yīng)建立健康檔案；進(jìn)行預(yù)防接種。

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有科學(xué)、嚴(yán)格的管理制度，定期對(duì)實(shí)驗(yàn)室設(shè)施設(shè)備、材料等進(jìn)行檢查、維護(hù)和更新，應(yīng)對(duì)廢水、廢氣以及其他廢物進(jìn)行合理處置，防止環(huán)境污染。三、實(shí)驗(yàn)室感染的控制以及監(jiān)督和法律責(zé)任

實(shí)驗(yàn)室感染控制工作包括定期檢查實(shí)驗(yàn)室的生物安全防護(hù)、病原微生物菌（毒）種和樣本保存與使用、安全操作、實(shí)驗(yàn)室排放的廢水和廢氣以及其他廢物處置等實(shí)施情況。

實(shí)驗(yàn)室發(fā)生高致病性病原微生物泄漏時(shí)，預(yù)防、控制措施包括：①封閉被病原微生物污染的實(shí)驗(yàn)室或可能造成病原微生物擴(kuò)散的場所；②開展流行病學(xué)調(diào)查；③對(duì)病人進(jìn)行隔離治療，對(duì)相關(guān)人員進(jìn)行醫(yī)學(xué)檢查；④對(duì)密切接觸者進(jìn)行醫(yī)學(xué)觀察；⑤進(jìn)行現(xiàn)場消毒；⑥對(duì)染疫或者疑似染疫的動(dòng)物采取隔離、撲殺等措施。

監(jiān)督的主要內(nèi)容是監(jiān)督病原微生物實(shí)驗(yàn)室執(zhí)行國家有關(guān)法律、行政法規(guī)、國家標(biāo)準(zhǔn)和要求的記錄、檔案及報(bào)告的情況。

法律責(zé)任的核心是承擔(dān)造成傳染病傳播、流行或者其他嚴(yán)重后果的法律責(zé)