CCSC54標(biāo)準(zhǔn)T/cl037—2021強(qiáng)化VC面粉中維生素C含量及其檢測方法TheConcentrationofVitaminCinEnhancedVCWheatFlourandtheMethodofDetermination202172-24實(shí)施2021-12-24發(fā)布中國國際科技促進(jìn)會發(fā)布202172-24實(shí)施TOC\o"1-5"\h\z前言2\o"CurrentDocument"強(qiáng)化VC面粉中維生素C含量及其檢測方法31范圍32規(guī)范性引用文件3\o"CurrentDocument"3強(qiáng)化VC面粉中維生素C含量34檢測原理35試劑和材料35.1試齊I」35.2試劑配制35.3標(biāo)準(zhǔn)品45.4標(biāo)準(zhǔn)溶液配制45.5儀器和設(shè)備4分析步驟5空白試驗(yàn)66結(jié)果計算67精密度68檢出限和定量限6本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》起草。某些內(nèi)容可能涉及專利，本標(biāo)準(zhǔn)的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別這些專利的責(zé)任。為評價強(qiáng)化VC面粉中維生素C的含量，輔助強(qiáng)化VC面粉的規(guī)范化生產(chǎn)，制定本標(biāo)準(zhǔn)。本標(biāo)準(zhǔn)由中國國際科技促進(jìn)會提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)由魯維制藥集團(tuán)有限公司牽頭組織制定。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草單位：魯維制藥集團(tuán)有限公司、山東理工大學(xué)、南京工業(yè)大學(xué)、淄博食藥研究院、華潤圣海健康科技有限公司。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：馮帥、劉青、宋元達(dá)、虞□、馮春曉、邱薈蓉、王彥梅、尹紀(jì)松、韓雪純、任元海。本標(biāo)準(zhǔn)是首次發(fā)布。強(qiáng)化VC面粉中維生素C含量及其檢測方法1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了強(qiáng)化VC面粉中維生素c（抗壞血酸）的含量要求，以及抗壞血酸和脫氫型抗壞血酸總量的檢測方法。2規(guī)范性引用文件本標(biāo)準(zhǔn)中引用的文件對于本標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GB/T6682-2008分析實(shí)驗(yàn)室用水國家標(biāo)準(zhǔn)3強(qiáng)化VC面粉中維生素C含量本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，強(qiáng)化VC面粉中維生素C（包括抗壞血酸和脫氫型抗壞血酸）含量（以C6H8。6計）為每100g面粉中不低于50mg04檢測原理采用1%的乙酸溶液對樣品中的維生素C（抗壞血酸）進(jìn)行提取，提取液經(jīng)L-半胱氨酸-三乙胺溶液還原，用高效液相色譜測定其245nm下的吸光度,其吸光強(qiáng)度與維生素C的濃度成正比，以外標(biāo)法定量。5試劑和材料除非另有規(guī)定，本方法所用試劑均為分析純,水為GB/T6682規(guī)定的一級水。5.1試劑5.1.1乙酸（CH3coOH）：99%o5.L2L-半胱氨酸（C3H7NO2S）：優(yōu)級純。5.1.3磷酸二氫鉀（KH2Po。：色譜純。5.1.4三乙胺（C6H巧2：99%o5.1.5甲醇（CH3OH）：色譜純。5.1.6磷酸（H3Po4）。試劑配制11%乙酸溶液：準(zhǔn)確量取10.10mL的乙酸（濃度為99%）,加水稀釋并定容至1000mL容量瓶中，用0.45pm濾膜過濾后使用。40g/L的L-半胱氨酸-三乙胺溶液：準(zhǔn)確稱取L-半胱氨酸4.00g,加水溶解并轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中，加1mL三乙胺，加水定容至刻度，搖勻后靜置。0.02mol/L磷酸二氫鉀：準(zhǔn)確稱取2.74g磷酸二氫鉀（色譜純，濃度為99.5%）,加水溶解并定容至WOOmL容量瓶中，用磷酸調(diào)節(jié)pH至2.7,用0.45gm濾膜過濾后使用。標(biāo)準(zhǔn)品.1維生素C（C6H8。6）：純度299%。標(biāo)準(zhǔn)溶液配制.1維生素C標(biāo)準(zhǔn)儲備液（10mg/mL）：稱取0.50g維生素C標(biāo)準(zhǔn)品（精確至0.1mg），用1%乙酸溶液（5.2.1）溶解并定容至50mL,臨用前配制。5.4.2維生素C標(biāo)準(zhǔn)工作液：準(zhǔn)確吸取0.000mL、0.125mL、0.250mL、1.250mL、2.500mL、5.000mL維生素C標(biāo)準(zhǔn)儲備液（541）,分別置于一組100mL容量瓶中，用1%乙酸溶液（5.2.1）定容。準(zhǔn)確吸取混勻后的標(biāo)準(zhǔn)溶液20mL于50mL的離心管中，加入10mL的L-半胱氨酸-三乙胺溶液（5.2.2），在500rpm的轉(zhuǎn)速下振蕩Wmino用1%乙酸溶液（5.2.1）將試液轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中，定容至刻度?；靹蚝笕∩锨逡河?.45pm濾膜過濾后待測。此標(biāo)準(zhǔn)工作液系列中抗壞血酸的濃度依次為0ng/mL、5ng/mL、10pig/mL、50pg/mLx100pg/mLx200pg/mLo5.5儀器和設(shè)備.1天平：可以準(zhǔn)確稱至0.0001go離心機(jī)：轉(zhuǎn)速可達(dá)到5000rpm,溫度可調(diào)。容量瓶振蕩器：振蕩速度可達(dá)100-1500rpmo超聲波清洗儀：超聲波頻率可達(dá)40KHZO高效液相色譜儀配有二極管陣列檢測器或紫外檢測器。濾膜：0.45|amo色譜柱及操作條件本標(biāo)準(zhǔn)推薦的色譜柱和色譜操作條件口表1,其他能達(dá)到同等分離程度的色譜柱和色譜條件也可以使用O表1推薦的色譜柱及色譜操作條件項目參數(shù)色譜柱Cl8柱柱柱內(nèi)徑X粒度150mmx4.6mmx5gm柱溫/℃25流動相0.02mol/L磷酸二氫鉀(pH=2.7):甲醇=95:5測定波口/nm245流速/(mL/min)10分析步驟整個檢測過程盡可能在避光的條件下進(jìn)行；如果超聲波清洗儀的功率較高，可以根據(jù)具體情況減少超聲時間或調(diào)低功率，使超聲后提取液的溫度低于50℃o樣品提取準(zhǔn)確稱取約5-10g(精確至0.0001g)混合均勻的試樣于100mL的燒杯中，加入30mL1%乙酸溶液(5.2.1)將樣品轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中，超聲輔助提取5min,然后用1%乙酸溶液(5.2.I)定容至刻度。將盛有上述試樣的容量瓶在500rpm的轉(zhuǎn)速下振蕩10min,然后超聲輔助提取5mino超聲完畢取出，靜置20mino將提取液轉(zhuǎn)移至50mL離心管,于4000rpm的轉(zhuǎn)速下離心10min,取出靜置。試樣溶液的還原準(zhǔn)確吸取上述離心后的上清液20mL于50mL的離心管中，加入10mL的L-半胱氨酸-三乙胺溶液(5.2.2)，在500rpm的轉(zhuǎn)速下振蕩10min。用1%乙酸溶液(521)將試液轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中，定容至刻度?；靹蚝笕∩锨逡河?.45pm濾膜過濾后待測。標(biāo)準(zhǔn)曲線制作以維生素C標(biāo)準(zhǔn)工作液的濃度為橫坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，擬合回歸方程。測定用高效液相色譜儀于紫外波口245nm處對標(biāo)準(zhǔn)工作液和樣品溶液進(jìn)行測定，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到樣品中維生素C的濃度(Rg/mL)0對同一試樣進(jìn)行三次平行實(shí)驗(yàn)測定。標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制以標(biāo)準(zhǔn)工作液的峰面積為縱坐標(biāo)，維生素C的濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線?？瞻自囼?yàn)空白試驗(yàn)指除不加試樣外，采用完全相同的分析步驟、試劑和用量，進(jìn)行的平行操作。6結(jié)果計算試樣中維生素C的含量以毫克每百克表示，按式⑴計算：(1)式中：X——試樣中維生素C的含量，單位為毫克每百克(mg/100g)；V——試樣的最后定容體積，單位為毫升(mL)；——由標(biāo)準(zhǔn)曲線查得的試樣測定液中維生素C的質(zhì)量濃度，單位為微克每毫升(pg/mL)；——由標(biāo)準(zhǔn)曲線查得的空白樣品中維生素C的質(zhì)量濃度，單位為微克每毫升((Jg/mL)；5——使用步驟時的稀釋倍數(shù)；——試樣的質(zhì)量，單位為克(g)；1000——換算系數(shù)(由|Jg/g換算成mg/g的換算因