———小鼠抗體的分類及生產(chǎn)技術(shù)介紹

小鼠抗體是科研實驗中常用的一種抗體，它主要有IgA、IgD、IgE、IgG和IgM五種類型，下面我就小鼠抗體分類及使用實驗室儀器進行小鼠抗體生產(chǎn)技術(shù)做一下簡單介紹：

小鼠抗體同種型/類、亞類和小鼠抗體同種型

與人類相同，小鼠有五種抗體同種型（IgA、IgD、IgE、IgG和IgM）。每個同種型都有不同的重鏈。同種型也稱為類?？贵w的另一個名稱是免疫球蛋白，因此后綴"Ig'表示抗體類別和亞類。幼稚B細胞產(chǎn)生IgM和IgD。在B細胞成熟過程中，通過同種型轉(zhuǎn)換，成熟的B細胞將產(chǎn)生IgG、IgA或IgE同種型和亞類中的一種。不同的同種型在體內(nèi)具有不同的半衰期，從12小時到8天不等。

小鼠同種型基因

每條重鏈由可變區(qū)和恒定區(qū)組成。恒定區(qū)被指定為不同的基因，盡管它們僅構(gòu)成免疫球蛋白重鏈的一部分。

對于IgG2a和IgG2c同種型：具有Igh1-b等位基因的近交小鼠品系具有IgG2c同種型，而不是IgG2a。除其他同種型外，鼠類重鏈基因座僅具有這兩種同種型基因中的一種。小鼠IgG2a支架有時用于重組抗體表達。

表1列出了小鼠抗體類別、子類、基因名稱以及NCBI和IMGT基因數(shù)據(jù)庫的鏈接。

表2列出了實驗室中一些常用動物物種的不同同種型和亞類基因組。IgG2a在某些小鼠品系中不存在，例如C57BL、SJL和NOD小鼠，它們具有IgG2c。

小鼠抗體分子量

IgA、IgD和IgG的重鏈具有一個具有三個免疫球蛋白(Ig)結(jié)構(gòu)域的恒定區(qū)。例如小鼠IgA重鏈恒定區(qū)有344個氨基酸，小鼠IgG1恒定區(qū)有324個氨基酸。其他類型的重鏈可能具有不同數(shù)量的免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域。例如，分泌型和膜結(jié)合型IgD重鏈恒定區(qū)有兩個Ig結(jié)構(gòu)域。IgE和IgM的重鏈有一個帶有四個免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域的恒定區(qū)。小鼠IgM重鏈恒定區(qū)有475個氨基酸。來自所有同種型的重鏈都有一個帶有單個免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域的可變區(qū)。每個免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域長約110個氨基酸。每條IgD和IgG重鏈約450個氨基酸，每條IgE和IgM重鏈約550個氨基酸。每條輕鏈（kappa或lambda）都有一個恒定的免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域和一個可變的免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域，大約有211到217個氨基酸。常見的IgG同種型的分子量為150KD。在還原條件下，每條重鏈約為50KD，每條輕鏈約為25KD。IgM往往以五聚體或六聚體形式存在，其中IgM分子通過二硫鍵共價連接，從而產(chǎn)生970KD的分子量。由于免疫球蛋白是糖基化的，因此表觀分子量可能與標稱分子量不同，有時甚至區(qū)別較大。

小鼠抗體生產(chǎn)

小鼠是單克隆抗體產(chǎn)生的主要動物宿主，也是多克隆抗體產(chǎn)生的宿主。小鼠單克隆抗體生產(chǎn)也會涉及到實驗室儀器、實驗耗材及一些科研試劑。比如：用外源抗原以及常用的弗氏佐劑或新型水溶性QuickAntibody對小鼠（通常是BALB/c小鼠，進行免疫。小鼠單克隆抗體也可以通過將來自特定小鼠品系的未免疫脾細胞與自身抗體融合直接獲得，如抗SMY12抗體的情況。其他菌株，如C57BL/6、NMRI、C3H和SJL，以及其他佐劑如殼聚糖、LQ或不完全弗氏佐劑，以及過表達免疫原的埃文細胞，也可以使用?；蚬こ绦∈笃废狄部梢宰鳛樗拗鏖_發(fā)特異性抗體，例如通過3Gn-T5基因敲除小鼠開發(fā)了一種對GM3神經(jīng)節(jié)苷脂具有高結(jié)合特異性的IgG單克隆抗體。截至2023年6月5日，科研數(shù)據(jù)庫列出了針對12039個人類基因、7144個小鼠基因、6475個大鼠基因以及來自其他156個物種的11079個基因的254742個小鼠單克隆抗體。

大多數(shù)單克隆抗體是在