10、基因重組與基因工程自然界生物的基因重組DNA重組技術基因工程10.1自然界生物的基因重組（一）同源重組（二）非同源重組轉座子與跳躍基因10.2DNA重組技術（一）DNA分子的加工與工具酶限制性內切酶與連接酶分子剪刀和分子針線2、核酸雜交技術熒光原位雜交顯示端粒DNA的變性與復性3、基因圖譜和DNA序列分析（1）限制性作圖與RFLP限制酶A、B限制酶A限制酶B2kb3kb5kb2kb8kb3kb7kbAB2kb5kb3kb基因圖（DNA測序儀顯示的堿基排列順序)（2）DNA序列分析已完成測序工作的生物面包酵母蛔蟲果蠅芥菜人類基因組計劃主要應用了4方面相互配合與補充的研究方法和技術：1.用RFLP等標記出包含大約1Mb的超大片段進行定位作圖2.用RFLP把超大片段分割成10多個包含100kb的大片段，做出它們的物理圖3.用酵母人工染色體(YACs）或其他載體構建包含其中小片段的一系列重疊的克隆，約0.5～1.0Mb4.對小片段逐個進行測序，進而實現對整個染色體的測序和作圖1992年，酵母3號染色體DNA的全部315357個堿基序列的測定，這是人類完成的第一條真核生物染色體DNA的全序列。1995年，科學家們獲得了人類第3、第16和第22號染色體的高密度物理圖。1996年，科學家們完成酵母其他15條染色體的堿基序列測定。1997年，大腸桿菌基因組序列測定宣告完成。1999年12月1日，科學家們宣布，人類第22號染色體，含3.34×107個堿基序列的測定已經全部完成，這是人類完成的第一條人類自身染色體的全序列測定。2000年6月26日，人類基因組工作框架圖完成，標志著功能基因組時代的到來?？茖W家們對人類基因組的性質和作用的認識在不斷地深化。未來：健康領域、基礎科學研究領域……2、PCR技術10.3基因工程（一）基因工程的基本原理和方法基因工程的實現主要分為三個步驟：第一步：目的基因的分離或制備：人工分離生物基因組群中目的基因及內切酶定位切割或人工酶促合成第二步：重組DNA：選擇載體及目的基因與載體基因重組第三步：導入與表達：重組DNA導入受體細胞，目的基因表達出目的效應和性狀實現以上三步需要進行以下工作：1)尋找目標基因2)取得目標基因3)基因的載體問題：現主要有質粒載體、病毒載體、脂質載體、原生質載體（2）轉基因生物的生產轉基因小鼠：導入人類基因，具有較強的學習能力。在迷宮實驗中，轉基因鼠覓食本領比普通鼠要高許多，同時對迷宮中食物存放地點記憶更清楚。1、特殊蛋白質的大量生產乳汁中分泌人凝血因子IX的轉基因山羊

美國轉基因豬，其體內含有人類的基因，乳汁含有人體蛋白fatorⅧ。只需300～600只這樣的母豬就能滿足全世界對這種蛋白的需求。人胰島素從豬和牛的胰臟提取，獲得100g胰島素需800－1000kg的牛胰臟?，F在用基因工程方法在大腸桿菌中表達產生。人生長激素具有物種特異性，只能用人的生長激素來治療侏儒癥。以前從尸體腦垂體中提取，來源非常有限，現在用基因工程方法在大腸桿菌中表達產生。干擾素體外培養(yǎng)人體細胞來生產，產量低，成本高，現用重組大腸桿菌生產。

不易腐爛的番茄

2、動物植物的遺傳改良抗蟲植物化學農藥兔毛棉花在我國培育成功：用兔的一種角蛋白轉化棉花，棉花纖維質量好，具有兔毛般的光澤。（2）種系基因治療：將外源基因導入性細胞、受精卵、早期胚細胞——轉基因人3、轉基因生物的安全問題（1）轉基因生物的環(huán)境風險（2）轉基因生物的安全和倫理問題其它：基因資源、基因武器復習題1、解釋：同源重組限制性內切酶基因克隆