67.050ICS67.050X04山DB37山東省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由山東省農(nóng)業(yè)廳提出。本標(biāo)準(zhǔn)由山東省農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：山東省農(nóng)業(yè)環(huán)境保護(hù)和農(nóng)村能源總站。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：吳成、王蕾、趙志強(qiáng)、任海雷。液相色譜-串聯(lián)本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了菠菜、豇豆、番茄、甘藍(lán)、黃瓜和韭菜中涕滅威等11種農(nóng)藥及代謝物（參見附錄A)殘留量液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于菠菜、豇豆、番茄、甘藍(lán)、黃瓜和韭菜中涕滅威等11種農(nóng)藥及代謝物殘留量的測(cè)定，其它蔬菜可參照?qǐng)?zhí)行。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB2763食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法3原理4試劑和材料除另有規(guī)定外，所有試劑均為色譜純，水為符合GB/T6682中規(guī)定的一級(jí)水。4.1試劑a)乙腈(CH3CN，75-05-8)。b)甲醇(CH3OH，67-56-1)。c)甲酸(CH2O2，64-18-6)。d)醋酸銨(C2H7NO2，631-61-8)。e)氯化鈉(NaCl，7647-14-5)，分析純，140℃烘烤4h。4.2溶液配制0.1%甲酸+5mmol/L醋酸銨水溶液：準(zhǔn)確移取1mL甲酸和稱取0.385g醋酸銨于1000mL容量瓶中，用水定容至刻度，現(xiàn)配現(xiàn)用。4.3標(biāo)準(zhǔn)品11種農(nóng)藥及代謝物標(biāo)準(zhǔn)品：純度≥95%，標(biāo)準(zhǔn)品信息參照附錄A；4.4標(biāo)準(zhǔn)溶液配制4.4.1標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液分別準(zhǔn)確稱取適量（精確至0.1mg）農(nóng)藥及代謝物標(biāo)準(zhǔn)品于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，配制成100mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液(或購(gòu)買有證標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液)，0～4℃保存，保存期為6個(gè)月。4.4.2中間標(biāo)準(zhǔn)溶液準(zhǔn)確吸取適量的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（4.4.1），用甲醇稀釋配制成10mg/L的7種農(nóng)藥及代謝物中間標(biāo)準(zhǔn)4.4.3混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液準(zhǔn)確吸取適量的中間標(biāo)準(zhǔn)溶液（4.4.2），用甲醇稀釋配制成所需濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，現(xiàn)用4.5材料微孔過(guò)濾膜：有機(jī)系，0.22μm。5儀器和設(shè)備a)液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：配有電噴霧離子源(ESI)；c)組織搗碎機(jī)；d)旋渦混合器；e)均質(zhì)器：轉(zhuǎn)速不低于15000r/min；f)離心機(jī)：轉(zhuǎn)速不低于5000r/min；6試樣制備蔬菜樣品取樣部位按照GB2763附錄A執(zhí)行，將樣品切碎、混勻、均一化，制成勻漿，制備好的試樣均分成兩份，裝入潔凈的盛樣容器內(nèi)，密封并標(biāo)明標(biāo)記。應(yīng)將試樣于-18℃冷凍保存。7分析步驟7.1提取稱取15g試樣（精確至0.01g）于100mL離心管中，加入30mL乙腈，用均質(zhì)器在12000r/min勻漿提取2min，加入6g氯化鈉，再勻漿提取1min，3500r/min離心5min，取上清液約2mL，用0.22μm7.2測(cè)定7.2.1液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜參考條件a)色譜柱：Shim-packXR-ODSⅢ色譜柱，50mm×2b)流動(dòng)相：A為0.1%甲酸+5mmol/L醋酸銨水溶液（4.2B為甲醇，梯度洗脫程f)檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)，多反應(yīng)監(jiān)測(cè)條件參照附錄B；g)加熱塊溫度：400℃;i)干燥氣（N2）流速：15.0L/min，純度≥99.999%；j)霧化氣（N2）流速：3.0L/min，純度≥99.999%；k)電噴霧正離子源(ESI+)接口電壓：4.5kV；電噴霧負(fù)離子源(ESI-)接口電壓：-3.5kV；l)檢測(cè)器電壓：1.74kV。表1梯度洗脫程序A/%B/%90595595907.2.2定性測(cè)定進(jìn)行樣品測(cè)定時(shí)，如果檢出的色譜峰的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)樣品相一致，并且在扣除背景后的樣品質(zhì)譜圖中，所選擇的離子均出現(xiàn)，而且所選擇的離子豐度比與標(biāo)準(zhǔn)樣品的離子豐度比進(jìn)行比較，其允許偏差不超過(guò)表2規(guī)定的范圍，則可判斷樣品中存在該農(nóng)藥及代謝物。如果不能確證，應(yīng)重新進(jìn)樣，以掃描方式（有足夠靈敏度）或采用增加其他確證離子的方式或用其他靈敏度更高的分析儀器來(lái)確證。表2定性時(shí)相對(duì)離子豐度的最大允許偏差相對(duì)離子豐度>50%>20%至50%>10%至20%7.2.3定量測(cè)定本方法采用外標(biāo)法單定量離子對(duì)定量測(cè)定。為減少基質(zhì)的影響，定量用標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)采用基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度應(yīng)與待測(cè)物濃度相近。在儀器最佳工作條件下，對(duì)基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)樣，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，用標(biāo)準(zhǔn)工作曲線對(duì)樣品進(jìn)行定量，樣品溶液中待測(cè)物響應(yīng)值均應(yīng)在儀器測(cè)定的線性范圍。本方法的甲拌磷等7種農(nóng)藥及代謝物標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)多反應(yīng)監(jiān)測(cè)色譜圖參照附錄A中圖A.1，質(zhì)譜圖參照附錄C。7.3空白試驗(yàn)除不稱取試樣外，均按上述步驟進(jìn)行。7.4平行試驗(yàn)按以上步驟對(duì)同一試樣進(jìn)行平行測(cè)定。8結(jié)果計(jì)算和表述液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定結(jié)果可由計(jì)算機(jī)按外標(biāo)法自動(dòng)計(jì)算，也可按式(1)計(jì)算：Φ=V1根A根V3AS2根p...................................(1)ω——質(zhì)量分?jǐn)?shù)，指試樣中各農(nóng)藥及代謝物殘留量，單位為毫克每千克（mg/kgp——標(biāo)準(zhǔn)溶液中農(nóng)藥及代謝物的質(zhì)量濃度，單位為毫克每升（mg/LA——樣品溶液中農(nóng)藥及代謝物的峰面積；AS——農(nóng)藥及代謝物標(biāo)準(zhǔn)溶液中農(nóng)藥及代謝物的峰面積；V1——提取溶劑總體積，單位為毫升（mLm——試樣的質(zhì)量，單位為克（g）；V2——樣品溶液進(jìn)樣體積，單位為微升(μLV3——標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣體積，單位為微升(μL計(jì)算結(jié)果應(yīng)扣除空白值，計(jì)算結(jié)果以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，保留兩位有效數(shù)字，含量超過(guò)1mg/kg時(shí)表示到三位有效數(shù)字。9精密度a)在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值與其算術(shù)平均值的比值（百分率按照b)在再現(xiàn)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值與其算術(shù)平均值的比值（百分率按照10定量限和回收率10.1定量限本方法的定量限(LOQ)參照附錄A。當(dāng)添加水平為L(zhǎng)OQ、2×LOQ、20×LOQ時(shí)，添加回收率參照附錄D。（資料性附錄）涕滅威等11種農(nóng)藥及代謝物中英文名稱、分子式、CAS號(hào)、保留時(shí)間、定量限和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)色譜圖涕滅威等11種農(nóng)藥及代謝物中英文名稱、分子式、CAS號(hào)、保留時(shí)間和定量限，參照表A.1。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)色譜圖參照?qǐng)DA.1。表A.1涕滅威等11種農(nóng)藥及代謝物中英文名稱、分子式、CAS號(hào)、保留時(shí)間和定量限序號(hào)英文名稱分子式CAS號(hào)保留時(shí)間定量限1Acephate2涕滅威亞砜Aldicarb-sulfoxide33-羥基克百威3-Hydroxycarbofuran4涕滅威Aldicarb5水胺硫磷Isocarbophos6Azoxystrobin7Diflubenzuron8Isofenphos-methyl9苯醚甲環(huán)唑Difenoconazole二甲戊樂(lè)靈PendimethalinAbamectin1-乙酰甲胺磷2-涕滅威亞砜3-3-羥基克百威4-涕滅威5-水胺硫磷6-嘧菌酯7-除蟲脲8-甲基異柳磷9-苯醚甲環(huán)唑10-二甲戊樂(lè)靈11-阿維菌素圖A.1涕滅威等11種農(nóng)藥及代謝物標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)色譜圖（資料性附錄）涕滅威等11種農(nóng)藥及代謝物監(jiān)測(cè)離子對(duì)、碰撞氣能量和碎裂電壓涕滅威等11種農(nóng)藥及代謝物監(jiān)測(cè)離子對(duì)、碰撞氣能量和碎裂電壓，參照表B.1。表B.1涕滅威等11種農(nóng)藥及代謝物監(jiān)測(cè)離子對(duì)、碰撞氣能量和碎裂電壓序號(hào)化合物名稱母離子子離子Q/VCE/VQ/V相對(duì)離子1+2涕滅威亞砜+33-羥基克百威+4涕滅威+5+6水胺硫磷+7-8+9苯醚甲環(huán)唑+二甲戊樂(lè)靈++0 0 0（資料性附錄）涕滅威等11種農(nóng)藥及代謝物標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）質(zhì)譜圖涕滅威等11種農(nóng)藥及代謝物標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）質(zhì)譜圖，參照?qǐng)DC.1～圖C.11。圖C.1乙酰甲胺磷質(zhì)譜圖圖C.2涕滅威亞砜質(zhì)譜圖0圖C.33-羥基克百威質(zhì)譜圖000 圖C.4涕滅威質(zhì)譜圖 圖C.5水胺硫磷質(zhì)譜圖0 圖C.6嘧菌酯質(zhì)譜圖0圖C.7除蟲脲質(zhì)譜圖00 圖C.8甲基異柳磷質(zhì)譜圖TIC(+)0圖C.9苯醚甲環(huán)唑質(zhì)譜圖圖C.10二甲戊樂(lè)靈質(zhì)譜圖 449751圖C.11阿維菌素質(zhì)譜圖（資料性附錄）涕滅威等11種農(nóng)藥及代謝物在6種蔬菜中的添加回收率涕滅威等11種農(nóng)藥及代謝物在6種蔬菜中的添加回收率，參照表D.1。表D.1涕滅威等11種農(nóng)藥及代謝物在6種蔬菜中的