第8章革蘭氏陽性球菌第1頁/共46頁細(xì)菌學(xué)各論

了解各種細(xì)菌的形態(tài)、培養(yǎng)特性、致病因子及微生物學(xué)診斷。李丹毒，白結(jié)核，芽孢球菌除淋膜，若問芽孢菌有何，炭腫氣疽破三梭，這些細(xì)菌均陽性，其他細(xì)菌陰性多。第2頁/共46頁第一章革蘭氏陽性球菌

球菌陽性：葡萄球菌、鏈球菌、肺炎球菌陰性：淋球菌、腦膜炎球菌第3頁/共46頁第一節(jié)葡萄球菌屬

Staphylococcus

廣泛存在于自然界，多數(shù)是不致病的腐物寄生菌。致病性葡萄球菌可引起化膿性炎癥、敗血癥、食物中毒等。第4頁/共46頁

分類

（1）金黃色葡萄球菌(S.aureus)：多數(shù)致?。?）表皮葡萄球菌(S.epidermidis)：偶可致?。?）腐生葡萄球菌(S.saprophyticus)：不致病第5頁/共46頁金黃色葡萄球菌S.aureus

一、形態(tài)

球狀，排列成葡萄串狀，無芽孢和鞭毛，個(gè)別形成莢膜。第6頁/共46頁一般特征：

圓形，排列成葡萄串狀，在膿汁或液體培養(yǎng)基中成雙球或短鏈排列，用青霉素可誘導(dǎo)成L型，無芽孢，無鞭毛，某些菌形成莢膜或粘液層，G+需O2兼性厭氧，接觸酶+，氧化酶－，不運(yùn)動，營養(yǎng)要求不高，不在麥康凱上生長，致病株產(chǎn)生金黃色色素。第7頁/共46頁二、培養(yǎng)及生化特性普通培養(yǎng)基上生長良好：濕潤，隆起的圓形菌落，直徑1-2mm，有時(shí)達(dá)4-5mm。菌落顏色依菌株而異，初為灰白色，繼而為金黃色，白色檸檬色。

第8頁/共46頁2.血平板上生長更佳，菌落較大，明顯β溶血，溶血菌株多為致病菌。

第9頁/共46頁3、普通肉湯：均勻沉濁，管底有絮狀沉淀，培養(yǎng)2－3天后，產(chǎn)生菌環(huán)，管底形成多量粘稠沉淀。第10頁/共46頁4.高度耐鹽5.分解葡、乳、麥、蔗糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，致病菌株能分解甘露醇。高鹽培養(yǎng)基糖發(fā)酵試驗(yàn)第11頁/共46頁三、抗原性1.多糖抗原：磷壁酸中的核糖醇?xì)埢且环N半抗原，具有型特異性。據(jù)多糖抗原將葡萄球菌分3個(gè)型：

A型多糖抗原：來自致病菌。（金葡萄球菌）[磷壁酸中的核糖醇?xì)埢鵠B型多糖抗原：來自非致病菌。（表皮葡萄球菌）[甘油殘基]

C型多糖抗原：致病菌非致病菌同有。

第12頁/共46頁2.蛋白質(zhì)抗原：細(xì)胞壁的一種表面蛋白人源菌株含SPA（StaphylococcusproteinA),

能與許多動物血清中的IgG分子的Fc段非特異性結(jié)合，結(jié)合后的IgG仍能與相應(yīng)抗原進(jìn)行特異反應(yīng)。這一現(xiàn)象已廣泛用于免疫學(xué)及診斷技術(shù)。

。第13頁/共46頁四、抵抗力抵抗力較強(qiáng)，能在干燥膿汁或血液中存活數(shù)月，80℃30min可殺死，煮沸迅速死亡，對多種抗生素產(chǎn)生耐藥性。

第14頁/共46頁五、致病性和毒力因子侵襲性疾?。褐饕鸹撔匝装Y。通過各種途徑侵入機(jī)體，導(dǎo)致皮膚或器官的多種感染，甚至敗血癥。毒素性疾?。河善咸亚蚓a(chǎn)生的外毒素引起。毒力因子主要包括酶和毒素，可引起兩類疾?。旱?5頁/共46頁第16頁/共46頁1.溶血素4種α毒素(Alphatoxin)

損傷細(xì)胞膜的毒素，對多種哺乳動物紅細(xì)胞有溶血作用，對白細(xì)胞、血小板、肝細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞等均有損傷作用。第17頁/共46頁β毒素：引起綿羊、牛紅C溶解，兔、雞、馬紅C不溶解，與乳腺炎有關(guān)，具有熱冷溶血現(xiàn)象（37℃溶血，移至4℃時(shí)溶血）。動物分離株多產(chǎn)生β毒素。γ毒素：引起多種動物紅C溶解。δ型：培養(yǎng)時(shí)CO2濃度增加時(shí)出現(xiàn)溶血現(xiàn)象，引起各種動物紅C溶解。第18頁/共46頁2.腸毒素(enterotoxin)

按抗原性不同，分為A、B、C1、C2、C3、D和E7個(gè)血清型，均可引起急性胃腸炎即嘔吐為主要癥狀的食物中毒。第19頁/共46頁3.凝固酶

能使含有抗凝劑的人或兔血漿發(fā)生凝集的酶類物質(zhì)。

（1）游離凝固酶:使液態(tài)纖維蛋白原變成固態(tài)纖維蛋白。

（2）結(jié)合凝固酶:使纖維蛋白原與菌體交聯(lián)而致細(xì)菌凝聚。作用：有助于致病菌株抵抗吞噬細(xì)胞和殺菌物質(zhì)。凝固酶試驗(yàn)+-第20頁/共46頁4.耐熱核酸酶、纖維蛋白溶酶、透明質(zhì)酸酶等

利于細(xì)菌擴(kuò)散。耐熱核酸酶試驗(yàn)-+第21頁/共46頁六、微生物學(xué)診斷標(biāo)本的采集

化膿性病灶采取膿汁、滲出液；敗血癥采取血液；腦膜炎采取腦脊液；食物中毒則分別采集剩余的食物、嘔吐物和糞便。直接涂片檢查分離培養(yǎng)

普通平板培養(yǎng)、血液瓊脂平板、高鹽培養(yǎng)基。第22頁/共46頁生化實(shí)驗(yàn)葡萄糖+，麥+，乳+，蔗+，甘露醇+，靛基質(zhì)－，接觸酶+，硝酸鹽還原+動物致病性試驗(yàn)家兔皮下接種1ml，24h肉湯培養(yǎng)物，可引起局部皮膚潰瘍壞死；靜脈接種0.1-0.5ml，于接種后24-48h死亡，剖檢可見臟器有大小不等膿腫。第23頁/共46頁致病性葡萄球菌有以下4大特點(diǎn)：（1）產(chǎn)生金黃色色素；（2）明顯β溶血；（3）甘露醇發(fā)酵；（4）凝固酶+第24頁/共46頁腸毒素的檢查：

發(fā)生食物中毒時(shí)→將嘔吐物離心取上清→100℃30min破壞其它毒素→注入幼貓靜脈或腹腔→15min-2h內(nèi)出現(xiàn)急性腸炎癥狀，表明有腸毒素存在。第25頁/共46頁第二節(jié)鏈球菌屬

Streptococcus

鏈球菌屬細(xì)菌是化膿性球菌中的另一大類常見細(xì)菌，廣泛分布于自然界，多數(shù)不致病，有些可導(dǎo)致人或動物各種化膿性炎癥、肺炎、乳腺炎、敗血癥。第26頁/共46頁一、分類（一）根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)分

1.屬特異性抗原（P抗原）：核蛋白抗原2.群特異性抗原（C抗原）：多糖抗原3.型特異性抗原：蛋白質(zhì)抗原，又稱表面抗原。多與菌體毒力與免疫力有關(guān)。第27頁/共46頁蘭氏（Lancefield)用溫?zé)岬南←}酸浸出C抗原，與特異性血清作沉淀反應(yīng)，將鏈球菌分為20個(gè)血清群（A-V，缺I和J）。同群鏈球菌間，因表面蛋白質(zhì)抗原不同，又分不同型。蘭氏分群法第28頁/共46頁⑴α型溶血性鏈球菌

菌落周圍有不透明溶血環(huán)。多為條件性致病菌。⑵β型溶血性鏈球菌

菌落周圍形成完全透明的無色的溶血環(huán)。致病力強(qiáng)。（二）根據(jù)溶血現(xiàn)象分類⑶γ型鏈球菌

不產(chǎn)生溶血素，菌落周圍無溶血環(huán)，也稱為不溶血性鏈球菌。無致病性，常存在于乳類和糞便中，偶爾引起感染。

第29頁/共46頁二、形態(tài)圓形或卵圓形，排列成鏈狀或成雙排列，肉湯中生長鏈較長，G+無芽胞，無莢膜（肺炎鏈球菌有莢膜），除個(gè)別D群外均無鞭毛，接觸酶－（葡萄球菌+）第30頁/共46頁三、培養(yǎng)特性

大多數(shù)兼性厭氧，少數(shù)專性厭氧營養(yǎng)要求復(fù)雜，需補(bǔ)充血液、血清、葡萄糖等。血平板上形成灰白色、光滑，濕潤，露珠狀，針尖大小的小菌落，致病菌株多有溶血能力。血清肉湯中易形成長鏈，管底呈絮狀沉淀。第31頁/共46頁四、生化特征

葡萄糖+、蔗糖+、大多數(shù)發(fā)酵乳糖、接觸酶+第32頁/共46頁

五、毒素和酶致病性鏈球菌產(chǎn)生多種毒素和酶，引起多種動物發(fā)病。1．溶血素：有溶解紅C，殺死白C和神經(jīng)C，毒害心肌作用，分為對氧敏感和對氧穩(wěn)定即O和S兩種。

溶血素O（SLO）：為蛋白質(zhì)，對氧敏感，耐熱，遇O2發(fā)生氧化失去溶血力，遇還原劑可恢復(fù)溶血作用,抗原性強(qiáng)。

溶血素S（SLS）：含糖的小分子肽，對氧穩(wěn)定，對熱和酸敏感，無抗原性。第33頁/共46頁2.致熱外毒素（舊稱紅疹毒素）：A群產(chǎn)生的一種外毒素，皮內(nèi)注射引起局部或全身紅疹，有抗原性。3．DNA酶4．溶纖維蛋白酶5．細(xì)胞壁上的脂磷壁酸：使細(xì)菌吸附于粘膜上皮上，其莢膜成分、M蛋白具有抗吞噬作用。第34頁/共46頁致病物質(zhì)

：

脂磷壁酸（LTA）：重要的粘附素

M蛋白：抗吞噬作用一旦病菌大量繁殖則產(chǎn)生鏈球菌溶血素、致熱外毒素等毒性物質(zhì)，透明質(zhì)酸酶、鏈激酶、DNA酶等侵襲性物質(zhì)。六、致病性第35頁/共46頁所致疾病：可引起多種動物發(fā)病無乳鏈球菌（S.agalactiae）停乳鏈球菌(S.dysgalactiae)乳房鏈球菌(S.uberis)馬鏈球菌獸疫亞種(S.equisubsp.zooepidemicus)馬鏈球菌馬亞種(S.equisubsp.equi)豬鏈球菌(S.suis)化膿鏈球菌(S.pyogenes)肺炎鏈球菌(S.pneumoniae)乳腺炎多種動物炎癥及敗血癥馬腺疫人和豬炎癥及敗血癥幼畜炎癥及敗血癥牛乳腺炎第36頁/共46頁豬鏈球菌病第37頁/共46頁豬鏈球菌（Streptococcussuis）2型第38頁/共46頁S.equisubspATCC35246S.suistype2HA9801第39頁/共46頁

五、微生物學(xué)診斷取材：采集適當(dāng)?shù)臉?biāo)本—滲出液、膿汁、乳腺炎乳液、腦脊髓液、尿液和感染組織。涂片鏡檢：可直接涂片，革蘭氏染色鏡檢。分離培養(yǎng):接種血平板，觀察菌落形態(tài)和溶血情況。生理生化試驗(yàn)動物致病性試驗(yàn)：小白鼠腹腔注射0.2-0.5ml24h肉湯培養(yǎng)物，24h－48h死亡。分群定型：必須作血清學(xué)試驗(yàn)第40頁/共46頁

幾種重要的鏈球菌1．無乳鏈球菌，停乳鏈球菌，乳房鏈球菌。都是引起牛，山羊，綿羊乳房炎的病感體，凡是有乳牛地方，有本菌存在。CAMP試驗(yàn)：Christie,Atkins,Much-peterson三個(gè)人名的縮寫。在血平板上先接種一條金色葡萄球菌的劃線，與此線垂直接種乳汁或分離培養(yǎng)物（但不接觸），原來不溶血或溶血不明顯的無乳鏈球菌在有金色葡萄球菌產(chǎn)物存在時(shí)，產(chǎn)生明顯β型溶血。此實(shí)驗(yàn)可以區(qū)分無乳鏈球菌與其它鏈球菌。第41頁/共46頁CAMP試驗(yàn)不是特異的，C、F、G群中有些鏈球菌也可產(chǎn)生CAMP現(xiàn)象。豬放線桿菌也有CAMP現(xiàn)象。（了解）原因：無乳鏈球菌產(chǎn)生CAMP因子，這種因子可接合于被葡萄球菌神經(jīng)磷脂酶C改變了的紅細(xì)胞膜上，引起紅C大量溶解。第42頁/共46頁第43頁/共46頁2．馬鏈球菌獸疫亞種（舊稱獸疫鏈球菌）引起馬的創(chuàng)傷感染，敗血癥、子宮炎、流產(chǎn)；牛乳房炎、子宮炎。豬：敗血癥，關(guān)節(jié)炎，流產(chǎn)；羊：敗血癥，心肌炎，腹膜為，肺炎。雞：敗血癥。3．馬鏈球菌馬亞種（舊稱馬腺疫鏈球菌）引起馬的腺疫，存在于