水中有機(jī)物污染的測(cè)定第1頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六根據(jù)酚類(lèi)能否與水蒸氣一起蒸出，分為揮發(fā)酚和不揮發(fā)酚。酚類(lèi)為原生質(zhì)毒，屬高毒物質(zhì),人體攝入一定量會(huì)出現(xiàn)急性中毒癥狀;長(zhǎng)期飲用被酚污染的水，可引起頭痛、出疹、瘙癢、貧血及各種神經(jīng)系統(tǒng)癥狀。當(dāng)水中含酚0.1~0.2mg/l，魚(yú)肉有異味；大于5mg/l時(shí)，魚(yú)中毒死亡。含酚濃度高的廢水不宜用于農(nóng)田灌溉，否則會(huì)使農(nóng)作物枯死或減產(chǎn)。常根據(jù)酚的沸點(diǎn)、揮發(fā)性和能否與水蒸氣一起蒸出，分為揮發(fā)酚和不揮發(fā)酚。通常認(rèn)為沸點(diǎn)在230℃以下為揮發(fā)酚，一般為一元酚；沸點(diǎn)在230℃以上為不揮發(fā)酚。酚的主要污染源有煤氣洗滌、煉焦、合成氨、造紙、木材防腐和化工行業(yè)的工業(yè)廢水。揮發(fā)酚第2頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六第3頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六水中揮發(fā)酚的測(cè)定4-氨基安替比林分光光度法：適用于工業(yè)廢水，濃度高于0.5mg/L。溴化容量法：適用于車(chē)間排放口或未經(jīng)處理的總排放污水口廢水，高濃度含酚廢水。測(cè)定方法氯仿萃取法：適用于飲用水、地面水，濃度低于0.5mg/L時(shí)。第4頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六4-氨基安替比林分光光度法也叫直接分光光度法（GB7490-87)

一、實(shí)驗(yàn)原理

用蒸餾法使揮發(fā)性酚類(lèi)化合物蒸餾出，并與干擾物質(zhì)和固定劑分離，由于酚類(lèi)化合物的揮發(fā)速度是隨鎦出液體積而變化，因此，鎦出液體積必須與試樣體積相等。被蒸餾出的酚類(lèi)化合物，于ph10.0±0.2介質(zhì)中，在鐵氰化鉀存在下，與4-氨基安替比林反應(yīng)生成橙紅色的安替比林染料，顯色后，在30min內(nèi)于510nm波長(zhǎng)處才，測(cè)定其吸光度。第5頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六試劑

二、儀器和試劑分光光度計(jì)500ml全玻璃蒸餾器500ml錐形分液漏斗50ml比色管移液管、吸量管10%(m/v)硫酸銅溶液磷酸溶液(p=1.70g/ml)酚貯備液(1.00g/l)緩沖溶液(ph≈10.7)2%(m/v)4-氨基安替比林溶液8%(m/v)鐵氰化鉀溶液儀器第6頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六第7頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六HerecomesyourfooterPage8三、采樣及排除干擾

采樣及樣品樣品應(yīng)貯于硬質(zhì)玻璃瓶中。在樣品采集現(xiàn)場(chǎng)，應(yīng)檢測(cè)有無(wú)游離氯等氧化劑的存在，若有發(fā)現(xiàn)，則應(yīng)及時(shí)加入過(guò)量硫酸亞鐵去除。采集后一，樣品應(yīng)及時(shí)加磷酸酸化至PH約為4.0，并加適量硫酸銅，同時(shí)應(yīng)將樣品冷藏。在采集后24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行測(cè)定。第8頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六氧化劑硫化物油類(lèi)有機(jī)或無(wú)機(jī)還原性物質(zhì)（甲醛）

加入過(guò)量硫酸亞鐵

用磷酸將水樣ph調(diào)至4.0，加入適量硫酸銅溶液生成硫化銅去除

用NaOH顆粒將ph調(diào)至12~12.5，用四氯化碳萃取除去

預(yù)蒸餾芳香胺類(lèi)

加硫酸，分次加入50、30、30ml乙醚，合并乙醚層于另一分液漏斗中，分次加入4、3、3mlNaOH,使酚類(lèi)轉(zhuǎn)入NaOH中，合并堿溶液萃取液，移入燒杯，水浴加溫

干擾的排除第9頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六四、實(shí)驗(yàn)步驟預(yù)蒸餾取250ml試樣移入蒸餾瓶中，加數(shù)粒玻璃珠。加數(shù)滴甲基橙指示液。用磷酸溶液調(diào)節(jié)到ph=4（溶液呈橙紅色）。加5ml硫酸銅溶液。連接冷凝器，加熱蒸餾，至蒸餾出約225ml時(shí)，停止加熱，放冷。向蒸餾瓶中加入25ml水，繼續(xù)蒸餾至鎦出液為250ml為止。（1）測(cè)定第10頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六云貴高原

顯色分別取50ml鎦出液于50ml比色管中。加0.5ml緩沖溶液，此時(shí)ph=10.0±0.2。加1.0ml4-氨基安替比林加1.0ml鐵氰化鉀溶液，充分混勻后，放置10min。分光光度測(cè)定于510nm處，用光程為20mm的比色皿。以水為參比，測(cè)量溶液的吸光度?？瞻自囼?yàn)（取250ml水，采用與測(cè)定完全相同的步驟試劑和用量，進(jìn)行平行操作）第11頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六HerecomesyourfooterPage12（2）校準(zhǔn)

校準(zhǔn)系列的制備取8支50ml比色管。分別加入0、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00、10.0、12.5ml酚標(biāo)準(zhǔn)溶液。加水稀釋至標(biāo)線(xiàn)，按上述規(guī)定進(jìn)行測(cè)定。校準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制由除零管外的其他校準(zhǔn)系列測(cè)得的吸光值減去零管的吸光度。繪制吸光度對(duì)酚含量(mg)的曲線(xiàn)。第12頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六HerecomesyourfooterPage13五、計(jì)算方法

揮發(fā)酚的質(zhì)量濃度（mg/L)=m/V×1000式中m—由水樣的校正吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上查得的苯酚含量，mg;V——移取餾出液體積，mL第13頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六溴化滴定法一、方法原理

在過(guò)量溴（由溴酸鉀和溴化鉀產(chǎn)生）的溶液中，使酚與溴生成三溴酚，并進(jìn)一步生成溴代三溴酚。在剩余的溴與碘化鉀作用釋放出游離碘的同時(shí)，溴代三溴酚與碘化鉀反應(yīng)生成三溴酚和游離碘酒，用硫酸鈉溶液滴定釋出的游離碘，并根據(jù)其消耗量，計(jì)算揮發(fā)酚含量（以苯酚計(jì)）。第14頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六二、試劑

（1）無(wú)酚水：實(shí)驗(yàn)用水應(yīng)為無(wú)酚水，于1L水中加入0.2g經(jīng)200℃活化0.5h，充分振搖后，放置過(guò)夜。用雙層中速濾紙過(guò)濾，或加氫氧化鈉使水呈強(qiáng)堿性，并滴加高錳酸鉀溶液至紫紅色，移入蒸餾瓶中加熱蒸餾，收集餾出液備用。注：無(wú)酚水應(yīng)貯于玻璃瓶中，取用時(shí)應(yīng)避免與橡膠制品（橡皮塞或乳膠管）接觸。(2)硫酸銅溶液：稱(chēng)取50g硫酸銅（CuSO4·5H2O）溶于水，稀釋至500ml。(3)磷酸溶液：量取50ml磷酸（20=1.69g/m1），用水稀釋至500ml。(4)甲基橙指示液：稱(chēng)取0.05g甲基橙溶于100ml水中。第15頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六三、測(cè)定步驟

（1）分取100ml餾出液（如酚含量較高，則酌情減量，用水稀釋至l00ml，使含酚量不超過(guò)10mg），置于250ml碘量瓶中，加5ml鹽酸，徐徐搖動(dòng)碘量瓶，從滴定管中滴加溴酸鉀—溴化鉀標(biāo)準(zhǔn)參考溶液至呈淡黃色再過(guò)量50％，記錄用量。（2）迅速蓋上瓶塞，混勻，在20℃放置15min。加入1g碘化鉀，加塞，輕輕混勻后置暗處放置5min，用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定至淡黃色后，加1m1淀粉溶液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色剛好褪去，記錄用量。第16頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六四、計(jì)算發(fā)酚（以苯酚計(jì)，mg/L）=揮發(fā)酚（以苯酚計(jì)，mg/L）=式中：V1—空白試驗(yàn)滴定時(shí)硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液用量（ml）V2—水樣滴定時(shí)硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液用量（ml）；C——硫代硫酸鈉溶液濃度（mol/L）；V——水樣取樣體積（m1）；15.68——（1/6C6H5OH）摩爾質(zhì)量（g/mol）。第17頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六多環(huán)芳烴是指具有兩個(gè)或者兩個(gè)以上的苯環(huán)的一類(lèi)有機(jī)化合物,有些多環(huán)芳烴還含有氮,硫和環(huán)戊烷.常見(jiàn)的多環(huán)芳烴包括:萘,蒽,菲,芘,苯并芘等．簡(jiǎn)單的脂肪烴類(lèi)化合物，在２００度以上即可環(huán)化成苯，在５００度以上的缺氧條件下即可ＰＡＨ．高分子化合物在７００度以上可以熱解生成ＰＡＨ．多數(shù)多環(huán)芳烴具有致癌和致突變作用，是人類(lèi)最早發(fā)現(xiàn)的致癌物．具有強(qiáng)烈致癌作用的多環(huán)芳烴多為四到六環(huán)的稠環(huán)化合物．１９７６年國(guó)際癌癥研究中心列出的９４種可以誘發(fā)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腫瘤的化合物中，有１５種為ＰＡＨ．由于ＢＰ是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的環(huán)境化學(xué)致癌物，而且致癌性很強(qiáng)，故常以之作為ＰＡＨ的代表．它占全部致癌性ＰＡＨ的１％－２０％．多環(huán)芳烴第18頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六第19頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六液相色譜法

一、原理硅膠基底的共價(jià)特性可使許多化學(xué)官能團(tuán)（C8或C18）對(duì)其表面進(jìn)行化學(xué)修飾，使水中半揮發(fā)、不揮發(fā)性有機(jī)污染物得以保留。本法采用以粗顆粒（40μm左右）硅膠為基底的C18鍵作為固相吸附載體，對(duì)水中的PAHS進(jìn)行吸附保留；用二氯甲烷等低極性有機(jī)溶劑洗脫P(yáng)AHS后，用帶紫外檢測(cè)器的高效液相色譜儀進(jìn)行定性和定量。第20頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六二、試劑

（1）流動(dòng)相：甲醇和水甲醇：色譜純，用前通過(guò)濾膜過(guò)濾和脫氣。水：用0.2μm濾膜過(guò)濾。（2）配制標(biāo)準(zhǔn)樣品和水樣預(yù)處理的試劑二氯甲烷：色譜純。四氫呋喃：色譜純。異丙醇：色譜純。硫代硫酸鈉。標(biāo)準(zhǔn)溶液：標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。第21頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六三、儀器

（1）玻璃器：所用玻璃器皿均需經(jīng)鉻酸洗液浸泡，洗凈后自然晾干。采樣瓶：帶磨口玻璃塞的棕色玻璃細(xì)口瓶。尖底濃縮管：最小分度為0.1ml，容積必須進(jìn)行標(biāo)定，帶磨口玻璃塞。25μL微量注射器（液相色譜儀手下工進(jìn)樣器）。量筒：50mL、100mL、和1000mL。（2）樣品前處理裝置固相萃取抽濾裝置（負(fù)壓）或恒流蠕動(dòng)泵（正壓）。真空泵（30L/min）。SPE固相萃取柱：填料為40μm的C18鍵合相（500mg）吸附劑。第22頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六（3）高壓液相色譜系統(tǒng)HPLC恒流泵：流速精度為0.01mL/min。色譜柱：反相98（ODS）分析柱，推薦柱長(zhǎng)為150mm，內(nèi)徑為4.6mm，粒度為5μm，配備40mm相同填料的預(yù)分離柱。熒光檢測(cè)器：具有激發(fā)/發(fā)射光譜掃描功能，同時(shí)具有波長(zhǎng)程序設(shè)置功能。紫外檢測(cè)器：可單獨(dú)使用，也可與熒光檢測(cè)器串聯(lián)使用。數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)：色譜工作站或積分儀。第23頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六第24頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六四、樣品

（1）樣品瓶的準(zhǔn)備用干凈的棕色玻璃瓶作為采樣瓶。（2）水樣采集樣品必須采集在棕色玻璃瓶中，若水中有殘余氯，需在每升水中加入25mg的硫代硫酸鈉除氯；若不能立即進(jìn)行樣品處理，建議在采樣時(shí)每升水樣加入200mL的異丙醇作為樣品穩(wěn)定劑（同時(shí)也作為基體改性劑）。（3）水樣保存水樣應(yīng)置于暗處，4℃冰箱中保存，應(yīng)在24h內(nèi)盡快進(jìn)行樣品預(yù)處理。將吸附后的固相萃取柱直接貯存在冰箱中，在20天內(nèi)將PAHs從固體萃取柱上洗脫下來(lái)，進(jìn)行樣品分析。第25頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六（4）樣品預(yù)處理水樣準(zhǔn)備：量取500～2000mL水樣（根據(jù)配備的液相色譜儀靈敏度和水源污染狀況，可選擇合適的水樣體積）。每1L水樣，加入200ml的異丙醇（也可在采樣時(shí)加入），混合均勻。SPE柱活化及條件化：先用2ml二氯甲烷注入柱子，讓其緩緩流過(guò)，并抽空氣5min，以去除填料中可能存在的干擾物，再加入2ml的甲醇活化柱子，最后用去離子水（加入和水樣相同含量的改性劑）移去活化溶劑（條件化），但注意在對(duì)SPE柱進(jìn)行活化和條件化時(shí)，不可將柱床抽干，以防止填料層產(chǎn)生裂隙，使回收入率降低。水樣富集：以4~5ml/min左右的流速，使水樣全部通過(guò)SPE柱后，加入5ml純水，讓其緩緩?fù)ㄟ^(guò)，以去除水溶性干擾物質(zhì)，通入凈化空氣30min，使已吸附的SPE柱徹底干燥。洗脫與濃縮：將2ml二氯甲烷或四氫呋喃分兩次加入柱管，分別洗下被測(cè)組分，合并后的洗脫液用氮?dú)鉂饪s至0.1ml以下，再定容至0.1~0.5ml，待進(jìn)樣分析。第26頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六五、測(cè)定步驟（1）色譜條件的選擇（根據(jù)儀器型號(hào)、配置狀況，選擇合適的色譜條件）流動(dòng)相：甲醇和水。根據(jù)色譜柱的柱效和分離度，選擇合適的流動(dòng)相配比。如果用甲醇/水體系能滿(mǎn)足樣品的分離要求，就不必再用其他流動(dòng)相體系，如果用純甲醇即可達(dá)到分離效果，就不要用水作為流動(dòng)相成分。洗脫模式及洗脫流速：采用等度洗脫，流動(dòng)相為甲醇：水=80:20，洗脫速率為1.0ml/min。如果分離效果不理想，適當(dāng)增加流動(dòng)相中水的比例，或考慮梯度洗脫。柱箱溫度控制：使用色譜柱溫箱，柱箱溫度為35℃。第27頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六（2）檢測(cè)器波長(zhǎng)設(shè)置熒光檢測(cè)器：本方法首先進(jìn)行激發(fā)和發(fā)射光譜的掃描，根據(jù)所獲光譜圖，找出各化合物的特征激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)，見(jiàn)多環(huán)芳烴最佳的熒光激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)PSHs激發(fā)波長(zhǎng)λex，mm發(fā)射波長(zhǎng)λex，mmFLU226449，BbF302452，BkF302431，BaP297405，Bper302420，IP305500；為獲得較高方法的靈敏度，根據(jù)最優(yōu)化柱系統(tǒng)條件下獲得的各PAHs的保留時(shí)間，進(jìn)行波長(zhǎng)程序設(shè)置，以便使其能在最優(yōu)化的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)下進(jìn)行檢測(cè)。紫外檢測(cè)器：檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm（如果當(dāng)?shù)厮粗斜尘案蓴_嚴(yán)重，影響了檢測(cè)，可選用其他紫外波長(zhǎng)）。數(shù)據(jù)記錄和處理系統(tǒng)：各型色譜工作站均可使用，色譜工作站兼有積分儀功能。同時(shí)還具有雙通道數(shù)據(jù)采集、譜圖再處理及精確的定性定量分析等功能。若采用積分儀，要進(jìn)行合理的參數(shù)設(shè)置，以便記錄下理想的譜圖。第28頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六（3）標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制：本方法使用外標(biāo)法定量。（4）標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備根據(jù)液相色譜儀的線(xiàn)性工作范圍，選擇不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液（至少5個(gè)點(diǎn)），所用標(biāo)準(zhǔn)工作液由混合的PAHS標(biāo)準(zhǔn)液用甲醇稀釋制得。標(biāo)準(zhǔn)液的使用：每個(gè)工作點(diǎn)必須測(cè)定一種或幾種濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液以檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，若某一化合物的測(cè)定值與期望值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差大于10%，則必須重新繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的表示：以響應(yīng)值對(duì)濃度作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，由回歸方程計(jì)算測(cè)定結(jié)果。若采用工作站，只需按已設(shè)定的樣品序列依次進(jìn)樣，計(jì)算機(jī)自動(dòng)存儲(chǔ)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，自動(dòng)計(jì)算每一次進(jìn)樣的測(cè)定結(jié)果。若采用積分儀，可采用常規(guī)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制和樣品測(cè)定結(jié)果的計(jì)算方式。第29頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六（5）樣品測(cè)定進(jìn)樣方式：以注射器人工進(jìn)樣或自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣。進(jìn)樣量：5~25μL。操作：用待測(cè)試樣調(diào)濕微量注射器針頭及針筒，并洗滌三次，緩緩反復(fù)多次盡可能排出針筒內(nèi)氣泡，迅速注射樣品至HPLC柱頭，進(jìn)行HPLC分析，并用甲醇洗滌注射器，以備下次進(jìn)樣。記錄：由色譜工作站完成。第30頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六六、計(jì)算（1）采用色譜工作站，計(jì)算出各組分的含量，單位μg/L。樣品濃度：ρi=ρ0Vt/VS 式中：ρi——試樣中組分質(zhì)量濃度，μg/L。 ρ0——固相萃取洗脫液質(zhì)量濃度，μg/L。 Vt——固相萃取洗脫液濃縮后定容體積，mL。 VS——水樣體積，mL。第31頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六（2）如果采用積分儀樣品濃度：ρi=AiBiVt/VSVi 式中：ρi——試樣中組分質(zhì)量濃度，μg/L。 Ai——試樣中組分的進(jìn)樣量對(duì)峰高（或峰面積）比值，ng/mm(ng/mm2)。 Bi——樣品中組分峰高（或面積），mm(mm2)。 Vt——萃取液濃縮后體積，μL。 Vi——注射樣品的體積，μL。 VS——水樣體積，mL。第32頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六七、注意事項(xiàng)（1）使用標(biāo)準(zhǔn)樣品條件標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)樣體積與試樣體積相同，標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度應(yīng)接近試樣的濃度。標(biāo)準(zhǔn)樣品和試樣盡可能同時(shí)分析，直接與單個(gè)標(biāo)樣比較以測(cè)定濃度。（2）安全所用有機(jī)溶劑甲醇有毒性，四氫呋喃、正己烷易燃，均為易揮發(fā)性試劑，操作時(shí)必須遵守有關(guān)規(guī)定，蒸餾有機(jī)溶劑必須在通風(fēng)柜中進(jìn)行，嚴(yán)禁明火。分析的PAHS為致癌物，因此要有保護(hù)措施。用過(guò)的廢液集中處理后排放。第33頁(yè)，共37頁(yè)，2023年，2月20日，星期六固相萃取-氣相色譜法測(cè)定水中多環(huán)芳烴一、儀器與主要試劑儀器：安捷倫GC-6890(+)氣相色譜儀;固相萃取裝置;Supelco固相萃取過(guò)濾裝；Supe