實驗性肝性腦病

實驗目的掌握肝性腦病的概念、發(fā)病機制和臨床表現(xiàn)。掌握氨中毒復制肝性腦病動物模型的方法。熟悉氨在肝性腦病發(fā)病機制中的作用。病因與分類發(fā)病機制誘發(fā)因素實驗原理肝性腦病嚴重肝臟疾患肝臟不能處理毒性代謝產物門-體分流毒性產物繞過肝臟病因與分類一、病因

嚴重肝功能障礙1.晚期肝硬化2.急性重型病毒性肝炎3.晚期肝癌4.嚴重急性肝中毒5.門-體靜脈分流術后第一期：輕微的性格及行為異常記憶力下降，學習、定向障礙(前驅期)三、分期與臨床表現(xiàn)第二期：嗜睡期，精神錯亂、肌張力增高、撲翼樣震顫

(昏迷前期)肝性腦病第三期第三期：昏睡期，精神錯亂、易怒、暴躁(昏睡期)發(fā)病機制

１、氨中毒學說 ２、假性神經遞質學說 ３、血漿氨基酸失衡學說 ４、GABA學說

（一）血氨升高

1、血氨清除不足A、酶系統(tǒng)受損B、底物不足C、消耗大量ATP

75%的氨來源于腸道蛋白質氨基酸氨氧化酶尿素氨尿素酶

2、血氨產生過多（1）腸道產氨增多上消化道出血血液蛋白質分解氨產生增加肝腎綜合征氮質血癥彌散入腸道的尿素↑產氨增多（2）腎臟產氨增多

pH對腎泌氨及腸道吸收氨的影響

NH4+NH3H+OH-（3）肌肉產氨增多肌肉收縮加劇

腺苷酸分解產氨增多

（二）氨對腦的毒性作用

1.干擾腦細胞的能量代謝(氨從四個環(huán)節(jié)干擾腦組織有氧氧化)氨對腦組織的毒性作用

示意圖-能量代謝

①

②

③

④

3.對神經細胞膜有抑制作用干擾Na+-K+-ATPase活性NH3K+內流減少，影響Na+-K+的正常膜分布神經沖動的形成、傳導受抑制二、假性神經遞質學說與正常(真性)神經遞質結構相似，但其功能卻遠較正常神經遞質為弱的一類物質(遞質)正常及假性神經遞質苯丙氨酸酪氨酸酪胺羥苯乙醇胺

苯乙胺氨基酸脫羧酶苯乙醇胺β-羥化酶

假性神經遞質的致病作用

腦干網狀結構是維持意識的基礎。外周感受器的神經沖動腦干網狀結構上行激動系統(tǒng)維持大腦皮層興奮假性神經遞質增多競爭性取代正常神經遞質網狀結構上行激動系統(tǒng)功能障礙昏睡、昏迷

1.血漿氨基酸分類

支鏈氨基酸(branchchainaminoacid,BCAA)：

纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸

芳香族氨基酸（aromaticaminoacid,AAA)：

苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸

三、氨基酸失衡學說氨基酸平衡圖3.0～3.50.6～1.2

2.血漿氨基酸失衡及機制

AAA↑(胰高血糖素↑)

BCAA↓

(胰島素↑)氨基酸代謝不平衡機制示意圖↑胰高血糖素↑↑肌肉、肝臟分解代謝↑骨骼肌內攝取利用增加

3.血漿氨基酸失衡與肝性腦病

AAA:酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸BCAA:亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸

由同一載體轉運而通過血腦屏障

假性神經遞質↑↑↑

苯乙胺苯乙醇胺脫羧酶-羥化酶酪胺羥苯乙醇胺脫羧酶-羥化酶AAA↑BCAA↓血腦屏障5-羥色氨酸5-羥色胺↑羥化酶脫羧酶多巴多巴胺↓去甲腎上腺素↓×××苯丙氨酸酪氨酸色氨酸羥化酶羥化酶脫羧酶-羥化酶血漿氨基酸失衡學說：假性神經遞質學說的補充和發(fā)展。四、γ-氨基丁酸學說

1.GABA來源：

谷氨酸

GABA腸道細菌脫羧酶

突觸間隙GABA↑

神經類固醇類物質↑

GABA受體-配體結合2.毒性作用：抑制性神經遞質血NH3↑GABAsiteBenzodiazepinessiteBenzodiazepinessiteGABAsiteBenzodiazepinessiteBenzodiazepinessiteGABACl-GABA與突觸后神經元的特異性GABA受體結合

↓氯離子通道開放

↓氯離子進入胞內↑

↓神經細胞靜息電位處于超極化狀態(tài)

↓突觸后抑制

↓肝性腦病血氨↑胰高血糖素↑胰島素↑谷氨酰胺↑腦內GABA↑,神經類固醇↑,受體-配體結合↑促進中性AA入腦氨基酸失衡假性神經遞質↑正常神經遞質↓GABA作用↑+谷氨酸誘發(fā)因素消化道出血：食管下端和胃底部靜脈曲張曲張的食管下端靜脈破裂血液中蛋白分解氨產生增加

2.電解質和酸堿平衡紊亂NH3NH4+H+OH-腎小管上皮細胞血液管腔NH3H+NH4+酸中毒時腎小管上皮細胞血液管腔堿中毒時OH-NH3促進氨的生成與吸收

3.感染：細菌及其毒素加重肝實質損傷感染組織蛋白分解內源性氮負荷氨產生增多

4.腎功能障礙：氮質血癥肝性腦病腎功能不全血尿素濃度腸腔內尿素

5.高蛋白飲食蛋白氨及有毒物質↑腸道細菌實驗原理采用大部分肝葉結扎法，造成肝功能嚴重損害，然后經十二指腸輸入氯化銨溶液，使動物體內血氨迅速升高，以致出現(xiàn)震顫、抽搐、昏迷等肝性腦病的癥狀。動物：家兔。器材：常規(guī)動物手術器械、兔臺、5ml和20ml注射器、細導尿管、粗棉線、紗布。

藥品：1%普魯卡因、5%氯化銨溶液。實驗用品1、稱重、固定、腹部正中備皮。實驗步驟2、1%普魯卡因（7~8ml）作上腹壁正中局麻，自劍突下沿腹白線，作上腹正中縱切口約7~8cm，打開腹腔。3、暴露肝臟，切斷鐮狀韌帶和肝胃韌帶，完全游離肝葉。注意事項：游離肝臟要輕柔，剪鐮狀韌帶時勿損傷膈肌!4、結扎肝葉：保留右外葉及尾葉。注意事項：結扎肝葉應靠近根部肝門處，避免損傷肝葉造成出血！5、十二指腸插管。注意事項：朝向十二指腸方向，插入腸腔約4-5cm，必須固定牢固，以防插管滑脫掉入腹腔。6、將細導尿管另一端置于腹腔之外，用止血鉗夾住腹壁，關閉腹腔。每隔5min向插管內注入5％氯化銨溶液5ml，直至動物出現(xiàn)抽搐。注意事項：術后須關閉腹腔，避免腹壓升高導致內臟外溢！實驗分組結扎+生理鹽水：1組不結扎+NH4Cl液：2、3組結扎+NH4Cl液：4、5、6、7組觀察項目實驗前實驗后角膜反射疼痛刺激反應肌張力