微生物菌種分離和鑒定技術(shù)中國醫(yī)藥行業(yè)協(xié)會網(wǎng)址：目前一頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點微生物純培養(yǎng)分離技術(shù)獲得純培養(yǎng)物對微生物學(xué)研究至關(guān)重要。純培養(yǎng)物是指來源于同一單細胞的細胞群體。液體培養(yǎng)基菌懸液連續(xù)稀釋培養(yǎng)容器中僅含1個菌體單個菌體純培養(yǎng)物固體培養(yǎng)基無菌土豆片(1881年)很多細菌不能在土豆上生長肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（明膠固化）明膠高溫易溶化不能37°C培養(yǎng)瓊脂固體培養(yǎng)基(1882年)一直沿用至今方法冗長結(jié)果不穩(wěn)定易污染目前二頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點微生物純培養(yǎng)分離技術(shù)純培養(yǎng)物分離方法固體培養(yǎng)基分離涂布平板法平板劃線法平板傾注法稀釋搖管法液體培養(yǎng)基分離單細胞（孢子）分離選擇培養(yǎng)分離目前三頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點涂布平板法1、少量樣品加到平板中央（1mL）2、玻璃三角涂棒浸入酒精3、沾有酒精的涂棒在火焰上灼燒后使其冷卻4、無菌涂棒將樣品均勻涂布瓊脂培養(yǎng)基表面，適當(dāng)條件下培養(yǎng)目前四頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點平板劃線法斜線法曲線法方格法放射法四格法目前五頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點平板劃線法斜線法：用接種環(huán)以無菌操作挑取菌懸液一環(huán)，先在平板培養(yǎng)基的一邊作第一次平行劃線3-4條，再轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿70°角，并將接種環(huán)上剩余物燒掉，待冷卻后通過第一次劃線部分作第二次平行劃線，再用同法通過第二次平行劃線部分作第三次平行劃線和通過第三次平行劃線部分作第四次平行劃線。曲線法：將挑取有樣品的接種環(huán)在平板培養(yǎng)基上作連續(xù)劃線。目前六頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點平板傾注法對起始樣品進行連續(xù)10倍稀釋，將高稀釋倍數(shù)的樣品與冷卻至適當(dāng)溫度的溶化瓊脂培養(yǎng)基倒入無菌平皿后混合均勻，培養(yǎng)后獲得單菌落。培養(yǎng)基表面菌落為圓形，而培養(yǎng)基內(nèi)部菌落呈豆?fàn)罨蛲哥R狀。目前七頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點稀釋搖管法適合厭氧菌的純培養(yǎng)物分離無菌瓊脂培養(yǎng)基試管加熱使瓊脂熔化后冷卻并保持在50℃左右待分離的菌種用這些試管進行梯度稀釋搖勻、冷凝在瓊脂柱表面傾倒一層滅菌液體石蠟和固體石蠟的混合物培養(yǎng)后，菌落形成在瓊脂柱的中間目前八頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點液體培養(yǎng)基分離不能在固體培養(yǎng)基上生長的微生物仍需要用液體培養(yǎng)基分離來獲得純培養(yǎng)。稀釋法是液體培養(yǎng)基分離純化常用的方法。在同一個稀釋度的許多平行試管中，大多數(shù)（一般應(yīng)超過95%）表現(xiàn)為不生長。

目前九頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點單細胞（孢子）分離單細胞（或單孢子）分離法是采取顯微分離法從混雜群體中直接分離單個細胞或單個個體進行培養(yǎng)以獲得純培養(yǎng)。較大的微生物，可采用毛細管提取單個個體。個體相對較小的微生物，需采用顯微操作儀，在顯微鏡下用毛細管或顯微針、鉤、環(huán)等挑取單個微生物細胞或孢子以獲得純培養(yǎng)。單細胞分離法對操作技術(shù)有比較高的要求。目前十頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點單細胞（孢子）分離目前十一頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點選擇培養(yǎng)基分離傳統(tǒng)選擇性培養(yǎng)基血平板：適于各類細菌的生長，一般細菌檢驗標(biāo)本的分離，都應(yīng)接種此平板。巧克力血平板：其中含有V和X因子，適于接種疑有嗜血桿菌、奈瑟菌等的標(biāo)本。中國藍平板或伊紅美藍平板：可抑制革蘭陽性細菌，有選擇地促進G-菌生長，是較好的弱選擇性培養(yǎng)基。麥康凱平板：具中等強度選擇性，抑菌力略強，有較少革蘭陰性菌不生長。SS瓊脂：有較強的抑菌力，用于志賀菌和沙門菌的分離。堿性瓊脂：用于從糞便中分離霍亂弧菌及其它弧菌。血液增菌培養(yǎng)基：用于從血液、骨髓中分離常見病原菌。營養(yǎng)肉湯：用于標(biāo)本及各類細菌的增菌新型顯色培養(yǎng)基：利用微生物自身代謝產(chǎn)生的酶與相應(yīng)顯色底物反應(yīng)顯色的原理來檢測微生物的培養(yǎng)基。目前十二頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點微生物快速分離、計數(shù)方法PetrifilmPlate(3M)目前十三頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點微生物快速分離、計數(shù)方法3MPetrifilmPlateAerobicCountPlateColiformCountPlateRapidColiformCountPlateE.coli/ColiformCountPlateEnterbacteriaceaeCountPlateYeastandMoldCountPlateStaph.aureusExpressCountPlateEnvironmentalListeriaPlate目前十四頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點微生物快速分離、計數(shù)方法CompactDry(NISSUI)目前十五頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點微生物快速分離、計數(shù)方法CompactDry(NISSUI)目前十六頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點微生物菌種鑒定技術(shù)分類等級界（Domain）門（Phylum）綱（Class）科（Family）屬（Genus）種（Species）三界系統(tǒng)發(fā)育樹細菌真核生物古菌“種”微生物基本分類類群目前十七頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點微生物菌種鑒定技術(shù)“種”的定義：一個種（基因型種）是有相似G+C組成并通過DNA雜交試驗判斷有70%或更大相似性的菌株的集合。表征分類（Phenoticsystem）數(shù)值分類（NumericalTaxonomy）系統(tǒng)發(fā)育分類（Phylogenetic）多相分類（Polyphasictaxonomy）鑒定（Identificaiton）根據(jù)相似性或親緣關(guān)系確定分類類群（分類單元）確定新的分離物屬于已知分類單元的過程。目前十八頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點微生物菌種鑒定技術(shù)微生物菌種檢驗微生物菌種鑒定目標(biāo)菌檢驗：它是不是某一種菌?未知菌種鑒定:它是什么菌？控制菌：大腸埃希菌（Escherichiacoli）大腸菌群（Coliform）沙門菌（Salmonella）銅綠假單胞菌（Pseudomonasaeruginosa）金黃色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）梭菌（Clostridium）白假絲酵母（Candidaalbicans）致病菌：大腸埃希菌（Escherichiacoli）大腸菌群（Coliform）沙門菌（Salmonella）金黃色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）單核細胞增生李斯特氏菌（Listeriamonocytogenes）阪岐腸桿菌（Enterobactersakazaki）致賀氏菌（Shigella

）副溶血性弧菌（Vibrioparahaemolyticus）空腸彎曲菌（Campylobacterjejuni）產(chǎn)氣莢膜梭菌（Clostridiumperfringens）蠟樣芽孢桿菌（Bacilluscereus

）規(guī)范的檢測鑒定方法常規(guī)鑒定目前十九頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點常規(guī)鑒定首先掌握菌株的基本特征，如細胞的形狀、革蘭氏染色及其他形態(tài)學(xué)特征；營養(yǎng)類型、需氧性等生理生化特征。在此基礎(chǔ)上查閱分類（鑒定）手冊，確定菌株屬于哪一大類（群、組），進行特征測定。根據(jù)測定結(jié)果逐步縮小菌株的歸屬范圍，初步確定科、屬。如菌株需鑒定至種，則進一步測定種的鑒別特征。如鑒定結(jié)果涉及新的分類單元，則進行包括基因型在內(nèi)的全面鑒定。目前二十頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點用于鑒定的形態(tài)學(xué)特征特征微生物類群細胞形狀所有主要類群細胞大小所有主要類群菌落形態(tài)所有主要類群超微結(jié)構(gòu)特征所有主要類群染色行為細菌、一些真菌纖毛和鞭毛所有主要類群運動機制滑行細菌，螺旋體內(nèi)生孢子形狀和位置形成內(nèi)生孢子細菌孢子形態(tài)和位置細菌、藻類、真菌細胞內(nèi)含物所有主要類群顏色所有主要類群目前二十一頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點用于鑒定的生理生化特征碳源和氮源運動性細胞壁組成滲透耐性能源氧關(guān)系發(fā)酵產(chǎn)物最適pH和生長范圍一般營養(yǎng)類型光合作用色素最適生長溫度和范圍鹽需求及耐性發(fā)光次級代謝產(chǎn)物形成能量轉(zhuǎn)換機制對代謝抑制劑和抗生素的敏感性貯藏內(nèi)含物目前二十二頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點微生物菌種鑒定的問題隨著分類學(xué)的發(fā)展，微生物分類越來越多的以核酸序列系統(tǒng)發(fā)育分析來建立新的分類單元和對原有分類單元進行調(diào)整。產(chǎn)生新的問題：將有越來越多的分類單元不能只以表型特征進行鑒別，必須結(jié)合基因型測定才能鑒定。目前二十三頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點微生物菌種鑒定技術(shù)表征（表型）特征形態(tài)特征生理和代謝特征生態(tài)特征遺傳（基因型）特征蛋白質(zhì)比較核酸堿基組成核酸序列多相鑒定技術(shù)PolyphasicIdentificationTechnologyErkoStackebrandt,DSMZ,Braunschweig,Germany分子標(biāo)尺目前二十四頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點微生物菌種鑒定技術(shù)伯杰氏鑒定細菌學(xué)手冊

Bergey'sManualofDeterminativeBacteriology

伯杰氏系統(tǒng)細菌學(xué)手冊Bergey'sManualofSystematicBacteriology

1923(1)、1925(2)、1930(3)、1934(4)、1939(5)、1948(6)、1957(7)、1974(8)、1994(9)1984-1989(1)、2001-2010(2)目前二十五頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點微生物菌種多相鑒定技術(shù)基因型鑒定技術(shù)GenotypeIdntificationG+Cmol%,RAPD,SSCP,DGGE,LAMP,RFLP,DNA-DNA

hybridization,repPCR,16SrDNA,26SrDNAD1/D2,5.8SrDNAITSregion,β-tubulingene,calmodulingene,gyrAgene,pheSgeneetc.DNABarcodinggenesequenceanalysis,Multi-LocusSequenceAnalysis(MLSA)目前二十六頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點基因型鑒定技術(shù)水平不同指紋圖譜和DNA分析技術(shù)的鑒定水平目前二十七頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點2007年Aspergillusbrasiliensissp.nov.新種發(fā)表多相鑒定實例ATCC16404黑曲霉Aspergillusniger2008年ATCC16404鑒定為

Aspergillusbrasiliensis

sp.nov.

2010年USP將ATCC16404更名

2010年WDCM將ATCC16404更名

圖：ATCC16888和ATCC16404的培養(yǎng)特征和顯微形態(tài)a′nosVarga,Sa′ndorKocsube′,Bea′taTo′th,etal.Aspergillusbrasiliensissp.nov.,abiseriateblackAspergillusspecieswithworld-widedistribution.InternationalJournalofSystematicandEvolutionaryMicrobiology,2007,57:1925–1932圖:Rep-PCR條碼系統(tǒng)發(fā)育樹(DiversiLab平臺)Figure2:DendrogramofRep-PCRBarcoding(DiversiLabPlatform).注：圖片來源于ReclassificationofATCC?16404TMandATCC?9642TMasAspergillusbrasiliensis.PharmaceuticalMicrobiologyForumNewsletter,2008,Vol.14(10):2-14表

ITS序列特殊位點堿基差異TableDifferenceofbasepositioninITSsequence目前二十八頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點2007年Aspergillusbrasiliensissp.nov.新種發(fā)表ATCC16404黑曲霉Aspergillusniger2008年ATCC16404鑒定為

Aspergillusbrasiliensis

sp.nov.

2010年USP將ATCC16404更名

2010年WDCM將ATCC16404更名

圖:基于曲霉黑色組β-微管蛋白基因序列的N-J樹Figure:Neighbour–joiningtreebasedonβ-tubulinsequencedataofAspergillussectionNigri..注：圖片來源于Aspergillusbrasiliensissp.nov.,abiseriateblackAspergillusspecieswithworld-widedistributionInternational.JournalofSystematicandEvolutionaryMicrobiology,2007,57:1925–1932圖1:基于ITSDNA序列的黑色曲霉N-J樹Figure1:ANeighborJoiningTreeofBlackAspergillibasedonTheirITSDNASequences.注：圖片來源于ReclassificationofATCC?16404TMandATCC?9642TMasAspergillusbrasiliensis.PharmaceuticalMicrobiologyForumNewsletter,2008,Vol.14(10):2-14目前二十九頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點各種標(biāo)準(zhǔn)中仍將繼續(xù)采用ATCC16404作為質(zhì)控菌株。各類標(biāo)準(zhǔn)中，其它被指定為參考菌株的黑曲霉菌株(CMCC(F)98003)

,需要重新復(fù)核鑒定。黑曲霉？目前三十頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點CMCC(F)98003標(biāo)準(zhǔn)菌株CMCC(F)98003保藏于中國醫(yī)學(xué)細菌菌種保藏管理中心。2005年開始,CMCC(F)98003作為絲狀真菌的代表菌株被《中國藥典》(第8版)指定為標(biāo)準(zhǔn)菌株。目前在公開的文獻中,未能檢索到該菌株的分離和鑒定研究信息。目前三十一頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點形態(tài)學(xué)鑒定CYA培養(yǎng)基,25°C培養(yǎng)7dBiolog鑒定生長濁度試驗ITSrDNA區(qū)序列分析ITS4:5-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3ITS5:5-GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGG-3β-微管蛋白基因序列分析Bt2a:5-GGTAACCAAATCGGTGCTGCTTTC-3Bt2b:5-ACCCTCAGTGTAGTGACCCTTGGC-3多相鑒定CMCC(F)98003黑曲霉Aspergillusniger反應(yīng)體系：100μL,10×擴增緩沖液10μL;DNA模板1μL;dNTP(每種2.5mmol/L)8μL;引物(10μL/L)各2.5μL;TaqDNA聚合酶(2.5U/μL)1.3μL;無菌超純水補足總體積100μL。反應(yīng)程序：94°C5min;94°C1min,55°C1min,72°C1min,30個循環(huán);72°C10min,4°C保存。目前三十二頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點形態(tài)學(xué)鑒定鑒定結(jié)論圖

25°C培養(yǎng)7d菌種的宏觀形態(tài)和顯微形態(tài)FigMacromorphologyandmicromorphologyon25°C,7d注:A菌落形態(tài);B:分生孢子梗形態(tài)(×100);C:分生孢子形態(tài)(×400).Note:A:Colonymorphology,B:Conidiophoremorphology(×100);C:Conidialmorphology(×400).CMCC(F)98003黑曲霉Aspergillusniger該菌株的形態(tài)學(xué)特征符合黑曲霉A.niger的形態(tài)特征目前三十三頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點Biolog鑒定鑒定結(jié)論注:?:沒有生長;+:生長旺盛;w:微弱(邊界)生長;v:可變.Note:?:Nogrowth;+:Stronggrowth;w:Weakgrowth;v:Variedgrowth.CMCC(F)98003黑曲霉Aspergillusniger表

碳源利用情況TableCarbonSourceUtilization碳源CarbonsourceATCC16888AspergillusnigerATCC16404AspergillusbrasiliensisCMCC(F)98003麥芽糖Maltose+?+β-甲基-D-葡萄糖苷β-Methyl-D-Glucoside+?+D-海藻糖D-Trehalose+?+L-蘋果酸L-MalicAcidv+?α-酮戊二酸α-Ketoglutaricacid?w?苦杏仁苷Amygdalin+?+D-果糖D-Fructose+v+目前三十四頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點ITSrDNA區(qū)序列分析鑒定結(jié)論圖

CMCC(F)98003的ITSrDNA區(qū)序列和β-微管蛋白基因序列PCR擴增結(jié)果FigITSrDNAandβ-tubulingenePCRamplificationresultsofCMCC(F)98003注:M:DL2000marker;1:ITSrDNA區(qū)PCR擴增結(jié)果;2:β-微管蛋白基因PCR擴增結(jié)果.Note:M:DL2000marker;1:ITSrDNAPCRamplificationresult;2:β-tubulingenePCRamplificationresult.CMCC(F)98003黑曲霉Aspergillusniger表

ITS序列特殊位點堿基差異TableDifferenceofbasepositioninITSsequence堿基位點Baseposition140166172173AspergillusbrasiliensisIMI381727CCTCAspergillusnigerATCC16888ATAACMCC(F)98003ATAA注:以18S和ITS1區(qū)之間的TTACCG序列中的第一個“C”為1位點.Note:ThefirstCinthebordersequence(TTACCG)of18SandITS1isheredefinedasposition1.目前三十五頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點ITSrDNA區(qū)序列分析鑒定結(jié)論CMCC(F)98003黑曲霉Aspergillusniger以18S和ITS1區(qū)之間的TTACCG序列中的第一個“C”為1位點。140166172、173目前三十六頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點ITSrDNA區(qū)序列分析鑒定結(jié)論CMCC(F)98003黑曲霉Aspergillusniger圖

基于ITS區(qū)rDNA序列的黑色組曲霉的NJ系統(tǒng)發(fā)育樹FigANeighborJoiningTreeofAspergillussectionNigri.basedonTheirITSDNASequences注:圖中發(fā)育樹節(jié)點只顯示Bootstrap值大于50%數(shù)值,圖例為遺傳距離.Note:Numbersabovebranchesarebootstrapvalues.Onlyvaluesabove50%areindicated.Bar,geneticdistance.CMCC(F)98003與與A.nigerATCC16888聚類在分類距離最近的一個分支上,序列相似性達100%。CMCC(F)98003與黑色組的其他種序列同源性也具有很高的相似性,序列同源性均在98.6%?100%之間。目前三十七頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點β-微管蛋白基因序列分析鑒定結(jié)論CMCC(F)98003黑曲霉Aspergillusniger圖

基于β-微管蛋白基因序列的黑色組曲霉的NJ系統(tǒng)發(fā)育樹FigNeighbour-joiningtreebasedonβ-tubulinsequencedataofAspergillussectionNigri注:圖中發(fā)育樹節(jié)點只顯示Bootstrap值大于50%數(shù)值,圖例為遺傳距離.Note:Numbersabovebranchesarebootstrapvalues.Onlyvaluesabove50%areindicated.Bar,geneticdistance.CMCC(F)98003與黑曲霉A.nigerCBS554.65T序列同源性為100%。CMCC(F)98003與黑色組的其他種序列同源性均在94.7%以下。目前三十八頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點結(jié)合形態(tài)學(xué)、碳源利用情況和ITSrDNA序列系統(tǒng)發(fā)育分析等多相鑒定的結(jié)果,將CMCC(F)98003鑒定為黑曲霉。鑒定結(jié)論CMCC(F)98003黑曲霉Aspergillusniger目前三十九頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點微生物菌種鑒定技術(shù)進展快速檢驗、鑒定技術(shù)PCR-SSCPDDGEREAL-TIMEPCRLAMPFT-IR快速檢驗、鑒定系統(tǒng)BIOLOGAutomaticIdentificationSystemAPIIdentificationSystemVITEKVIDAS菌株分型鑒定系統(tǒng)目前四十頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點PCR-SSCPPCR-SSCP是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)與單鏈DNA非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)相結(jié)合的一種用于檢測基因突變的方法,利用不同構(gòu)象單鏈DNA在非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳中泳動速率的差異,能快速有效地檢測出DNA短片段中存在的單核苷酸突變,隨凝膠的膠聯(lián)度、濃度及DNA片段長度等因素的變化,會產(chǎn)生不同的分辨率,廣泛應(yīng)用于各種基因多態(tài)性的研究。目前四十一頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點PCR-SSCP目前四十二頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點DDGE變形梯度凝膠電泳（DDGE）能把長度相同而核苷酸順序不同的雙鏈DNA片段分開。這種方法利用了DNA分子從雙螺旋型變成局部變性時會下降的現(xiàn)象，不同DNA片段發(fā)生這種變化所需梯度不同。此方法可作為測序的初始步驟在雜合個體中分離等位基因。DDGE分離能力很強，可以把僅差1bp的DNA片段分開。目前四十三頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點REAL-TIMEPCR原理：實時熒光定量PCR技術(shù)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。目前四十四頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點LAMP核酸環(huán)介導(dǎo)等溫擴增技術(shù)（LAMP）主要是針對靶基因的六個不同的區(qū)域，基于靶基因3‘端的F3c、F2c和Flc區(qū)以及5’端的Bl、B2和B3區(qū)等6個不同的位點設(shè)計4種引物。具有操作簡單、快速高效、高特異性和高靈敏度的特點。目前四十五頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點LAMP引物設(shè)計目前四十六頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點FT-IR應(yīng)用傅里葉變換紅外光譜方法（FT-IRA）結(jié)合多變量統(tǒng)計分析的手段，可以實現(xiàn)對致病菌進行分類和鑒別。能在菌種(species)甚至菌株(strain)水平上提供可靠的檢定結(jié)果。目前四十七頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點BIOLOG鑒定系統(tǒng)YTMicroPlateGP2MicroPlateGN2MicroPlateANMicroPlateFFMicroPlateMicrostationOmnilog目前四十八頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點BIOLOG鑒定系統(tǒng)Biolog’sTechnologyPlatform:PhenotypingCellularResponseDNARNAPROTEINPHENOTYPEO’Farrell,1975MolecularAnalysesAffymetrix,1993CellularAnalysisBiolog,2000目前四十九頁\總數(shù)六十一頁\編于十八點生化鑒定-VITEK?

VITEK對細菌的鑒定是以每種細菌的微量生化反應(yīng)為基礎(chǔ)，不同種類的VITEK試卡（檢測卡）含有多種的生化反應(yīng)孔。目前VITEK系統(tǒng)的檢測卡有14種，微生物常用的有7種，即：革蘭氏陽性菌鑒定卡（GPI）、革蘭氏陰性菌卡（GNI+）、非發(fā)酵菌卡（NFC）、酵母菌卡（YBC）、厭氧菌卡（ANI）、芽胞桿菌卡（BAC）、奈瑟氏菌嗜血桿菌卡（NHI），以及藥敏檢測卡等。可鑒定405種細菌。