第一節(jié)有效成分的提取(tíqǔ)與別離一、有效成分的提取(tíqǔ)〔一〕溶劑提取(tíqǔ)法溶劑(róngjì)提取法溶解規(guī)律溶劑類型提取方法第一頁，共52頁。1〔二〕水蒸氣蒸餾法適用范圍：水蒸氣蒸餾是別離(biélí)和純化與水不相混溶的揮發(fā)性有機物常用的方法。第二頁，共52頁。2〔三〕升華法適用于有升華性質(zhì)(xìngzhì)的成分。升華(shēnghuá)法提取咖啡因第三頁，共52頁。3二、有效成分的別離和精致〔一〕系統(tǒng)溶劑別離法〔二〕兩相溶劑萃取法原理：〔三〕沉淀法〔四〕吸附(xīfù)法〔五〕鹽析法〔六〕透析法第四頁，共52頁。4第二節(jié)結(jié)晶(jiéjīng)和重結(jié)晶(jiéjīng)1.結(jié)晶的條件4.純度的判斷3.結(jié)晶的方法2.溶劑的選擇結(jié)晶(jiéjīng)與重結(jié)晶(jiéjīng)第五頁，共52頁。5第三節(jié)色譜別離(biélí)法一、吸附色譜法吸附色譜法吸附劑洗脫劑被分離的物質(zhì)基本原理操作方式第六頁，共52頁。61.硅膠一種酸性吸附劑，使用于別離中性和酸性成分〔1〕用法〔2〕型號2.氧化鋁由氫氧化鋁(qīnɡyǎnɡhuàhuà)灼燒而得，分為堿性、中性和酸性三種〔1〕用法〔2〕型號吸附劑第七頁，共52頁。73.活性炭非極性吸附劑作用別離氨基酸、糖類(tánɡlèi)和苷類等水溶性成分第八頁，共52頁。8極性順序：石油醚<環(huán)己烷<二硫化碳<四氯化碳<三氯乙烷<苯<甲苯<二氯甲烷<乙醚氯仿<乙酸乙酯<正丁醇<丙酮<乙醇<甲醇<吡啶<酸<水混合(hùnhé)溶劑洗脫(xǐtuō)劑第九頁，共52頁。91.極性吸附劑被別離得化合物極性基團(jītuán)極性越大、數(shù)量越多吸附力越強，共軛雙鍵越多吸附力越強。2.非極性吸附劑極性越小吸附力越強。被別離(biélí)得物質(zhì)第十頁，共52頁。10操作(cāozuò)方式柱色譜(sèpǔ)薄層(báocénɡ)色譜第十一頁，共52頁。11中藥(zhōngyào)柱層析設(shè)備第十二頁，共52頁。12二、分配(fēnpèi)色譜法分配(fēnpèi)色譜法根本(gēnběn)原理正相分配色譜反相分配色譜正相色譜極性物質(zhì)吸附強非極性物質(zhì)吸附弱后出先出反相色譜極性物質(zhì)吸附弱非極性物質(zhì)吸附強先出后出第十三頁，共52頁。13〔一〕根本原理〔二〕支持劑〔三〕分配(fēnpèi)色譜種類正相分配(fēnpèi)色譜反相分配(fēnpèi)色譜〔四〕操作方式1.紙色譜2.分配(fēnpèi)薄層色譜3.分配(fēnpèi)柱色譜第十四頁，共52頁。14〔一〕聚酰胺結(jié)構(gòu)(jiégòu)聚酰胺色譜法第十五頁，共52頁。15〔二〕根本理論(lǐlùn)－氫鍵吸附強度的影響因素1.溶劑種類2.化合物結(jié)構(gòu)〔1〕形成氫鍵的基團越多，吸附越牢?！?〕形成氫鍵基團的位置不同，吸附強度不同?！?〕芳香化程度(chéngdù)越高，共軛程度(chéngdù)越多吸附性越強?！?〕形成分子內(nèi)氫鍵那么吸附強度減弱。第十六頁，共52頁。16聚酰胺柱色譜(sèpǔ)洗脫(xǐtuō)劑聚酰胺操作步驟：裝柱上樣洗脫第十七頁，共52頁。17四、離子交換(lízǐjiāohuàn)色譜法離子交換(lízǐjiāohuàn)色譜法原理(yuánlǐ)操作裝柱上樣洗脫第十八頁，共52頁。18五、大孔吸附(xīfù)樹脂法大孔吸附樹脂法影響分離的因素洗脫劑的選擇應(yīng)用分離原理第十九頁，共52頁。19六、凝膠色譜法1.分類2.別離(biélí)原理3.應(yīng)用七、高效液相色譜法八、氣相色譜法島津GC2010

第二十頁，共52頁。20第四節(jié)天然藥物(yàowù)化學(xué)成分結(jié)構(gòu)測定一、結(jié)構(gòu)測定的主要程序分子式分子結(jié)構(gòu)波譜確認確定純度結(jié)構(gòu)測定第二十一頁，共52頁。21純度(chúndù)鑒定推測母體(mǔtǐ)結(jié)構(gòu)類型功能基情況分子量分子式確實(quèshí)定波譜、化學(xué)方法推測出結(jié)構(gòu)式人工合成進行確認結(jié)構(gòu)測定的程序第二十二頁，共52頁。22純度確定--最根本(gēnběn)的條件檢查(jiǎnchá)純度的方法：外觀、顏色、形態(tài)是否均一；測定各種物理常數(shù)，如熔點、沸點、比旋光度、折光率等，這些物理常數(shù)都反映了化合物的純度。如果可能是物，用結(jié)構(gòu)的對照品進行對照測定或測定它們的共熔點等；也可對照文獻報導(dǎo)值〔注意各種測定條件的一致性〕薄層層析〔三種展開系統(tǒng)和三種顯色方法〕高效液相層析；第二十三頁，共52頁。23●某些成分或功能基，可以和一些特定(tèdìng)試劑產(chǎn)生各種顏色或沉淀，有助于判斷化合物類型和功能基：生物堿類大都能和生物堿沉淀試劑產(chǎn)生沉淀；羥基葸醌類遇堿呈紅色；鹽酸一鎂粉試劑能和許多黃酮類化合物呈色。化學(xué)方法(fāngfǎ)—輔助手段第二十四頁，共52頁。24●鑒別功能基的化學(xué)反響：三氯化鐵反響、三氯化鋁反響等等。利用在酸水或堿水中的溶解度情況，提示該化合物堿性功能基或酸性功能基的存在以及(yǐjí)有無內(nèi)酯、內(nèi)酰胺結(jié)構(gòu)。利用在酸水或堿水中的溶解度情況，提示該化合物堿性功能基或酸性功能基的存在以及(yǐjí)有無內(nèi)酯、內(nèi)酰胺結(jié)構(gòu)。第二十五頁，共52頁。25●化學(xué)降解法將復(fù)雜分子通過氧化、復(fù)原等化學(xué)反響，降解為幾個結(jié)構(gòu)比較簡單又穩(wěn)定的小分子化合物，通過對降解產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)鑒定，再按降解機理合理地推導(dǎo)(tuīdǎo)出原來可能的化學(xué)結(jié)構(gòu)式。第二十六頁，共52頁。26化學(xué)降解法●特點：需用化合物量大；反響劇烈；主要產(chǎn)物得率少又費時；現(xiàn)在(xiànzài)較少應(yīng)用，僅保存一些比較簡單規(guī)律性又較強的降解反響●衍生物制備－用化學(xué)方法研究結(jié)構(gòu)的一種常用手段，對結(jié)構(gòu)推定有一定意義。第二十七頁，共52頁。27波譜(bōpǔ)方法—主要手段UVIRMSNMR四大光譜第二十八頁，共52頁。28紫外光譜用波長在200～400nm之間的連續(xù)(liánxù)光掃描記錄下來的圖譜，吸收帶比較寬；紅外光譜用波長在800nm～20μm之間的連續(xù)(liánxù)光掃描記錄下來的圖譜，譜線比較鋒利；光譜(guāngpǔ)第二十九頁，共52頁。29島津2450/2550PC傅立葉變換(biànhuàn)紅外光譜儀光譜(guāngpǔ)儀器第三十頁，共52頁。30核磁共振儀質(zhì)譜儀第三十一頁，共52頁。31測定范圍：波數(shù)200～400nm之間作用：提供根本骨架信息(xìnxī);樣品中雜質(zhì)的測定定量分析特點：液態(tài)樣品才能測定；常規(guī)紫外光譜儀價格低廉；樣品用量少〔只需5-10μg〕紫外光譜(guāngpǔ)(Ultra-Violet,UV)第三十二頁，共52頁。32生色團產(chǎn)生紫外吸收的不飽和基團，如C=C,C=O,O=N=O等；助色團：其本身是飽和基團〔常含有(hányǒu)雜原子〕，它連到生色團上時，能使后者吸收波長變長或吸收強度增加，如-OH,-NH2,-Cl等；深色位移：由于基團取代或溶劑效應(yīng)，最大吸收波長變長，也叫紅移〔redshift〕；淺色位移：由于基團取代或溶劑效應(yīng)，最大吸收波長變短，也叫藍移〔blueshift〕；紫外光譜(guāngpǔ)(Ultra-Violet,UV)第三十三頁，共52頁。33具有相同根本骨架化合物的UV光譜(guāngpǔ)相同，但并非是同一化合物；第三十四頁，共52頁。34測定范圍波數(shù)600～4000cm-1之間，其中1600cm-1以上為化合物的特征基團區(qū)，1000-500cm-1為指紋區(qū)。作用主要用于定性分析，功能基確實認，芳環(huán)取代類型的判斷(pànduàn)等。優(yōu)點：任何氣態(tài)、液態(tài)、固態(tài)樣品均可測定；每種化合物都有紅外吸收；常規(guī)紅外光譜儀價格低廉；樣品用量少〔只需5-10μg〕紅外光譜(guāngpǔ)(Infra-Red,IR)第三十五頁，共52頁。35特征基團區(qū)指紋區(qū)三要素：位置(wèizhi)、強度、峰形第三十六頁，共52頁。36-OHCH3OH-C-O-第三十七頁，共52頁。37C=O第三十八頁，共52頁。38●如果被測定物是物，只要和對照品做一張共紅外光譜圖，二者紅外光譜完全一致那么為同一物質(zhì)；●如無對照品也可檢索有關(guān)(yǒuguān)紅外光譜數(shù)據(jù)圖譜文獻。第三十九頁，共52頁。39●1945年，F(xiàn).Bloch和E.M.Purcell幾乎同時(tóngshí)發(fā)現(xiàn)了核磁共振現(xiàn)象，獲得1952年諾貝爾物理獎。●核磁共振儀器的開展：406090100300500600750MHz●核磁共振：●天然藥物化學(xué)成分以有機物為主，分子結(jié)構(gòu)中必然有C、H原子，它們的結(jié)合類型、化學(xué)環(huán)境不同，均可用NMR測定，是天然化合物結(jié)構(gòu)測定的重要手段。氫核磁共振(hécíɡònɡzhèn)〔1H-NMR)譜碳核磁共振(hécíɡònɡzhèn)〔13C-NMR)譜核磁共振譜(NuclearMagneticResonance,NMR)第四十頁，共52頁。40●氫核磁共振〔1H-NMR)譜：化學(xué)位移范圍：在0～20ppm三大要素(yàosù)：化學(xué)位移(ppm)、偶合常數(shù)(J)及峰面積。靈敏度高，樣品用量少〔1～5mg〕，測試時間短●碳核磁共振〔13C-NMR)譜：化學(xué)位移范圍：在0～250ppm要素(yàosù)：化學(xué)位移(ppm)靈敏度較低，樣品用量較多〔5～20mg〕，測試時間長第四十一頁，共52頁。41第四十二頁，共52頁。42C=OC=C-OCH2溶劑(róngjì)C=C第四十三頁，共52頁。43DEPT-135第四十四頁，共52頁。44適用范圍：信號過于復(fù)雜(fùzá)、重疊嚴重時，而對結(jié)構(gòu)推斷產(chǎn)生困難時，可以簡化譜圖，有助判斷；特點：對測試儀器要求比較高〔超導(dǎo)核磁共振儀〕；譜圖測試價格比較貴；測試時間長，樣品用量比較多〔只需5～20mg〕二維核磁共振(hécíɡònɡzhèn)譜第四十五頁，共52頁。45

NOESY第四十六頁，共52頁。46HMQC第四十七頁，共52頁。47作用：用于確定分子量；求算分子式；提供其他的結(jié)構(gòu)信息；特點：適宜測定極性偏小和中等極性的化合物；常規(guī)(chángguī)質(zhì)譜儀價格比較廉價，一些特殊質(zhì)譜儀很昂貴；樣品用量少〔只需5～10μg〕質(zhì)譜〔MS〕第四