禾憶制藥四川禾億制藥有限公司禾憶制藥SichuanHerbeasePharmaceuticalCo,Ltd文件名稱理化檢驗(yàn)方法學(xué)驗(yàn)證與確認(rèn)SOP文件編碼SOP-VC-001.00版本號QB-2019文件類型操作標(biāo)準(zhǔn)拷貝號項目職務(wù)簽名日期起草驗(yàn)證專員審核質(zhì)量保證部負(fù)責(zé)人質(zhì)量控制部負(fù)責(zé)人研發(fā)部負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)驗(yàn)證部負(fù)責(zé)人頒發(fā)部門質(zhì)量保證部生效日期年月日分發(fā)部門分發(fā)份數(shù)分發(fā)部門分發(fā)份數(shù)質(zhì)量保證部驗(yàn)證部質(zhì)量控制部研發(fā)部生產(chǎn)部行政部物資管理部人力資源部設(shè)備部財務(wù)部工程部第1頁/共19頁域禾區(qū)制藥SOP-VC-001.00生效日期年月日理化檢驗(yàn)方法學(xué)驗(yàn)證與確認(rèn)SOP版本號QB-2019拷貝號.目的規(guī)范并指導(dǎo)理化檢驗(yàn)方法學(xué)驗(yàn)證或確認(rèn)的實(shí)施操作及其方案、報告編制、檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的合規(guī)性。.適用范圍適用于已有國家標(biāo)準(zhǔn)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究即仿制藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)理化檢驗(yàn)方法確認(rèn)或方法轉(zhuǎn)移確認(rèn)、國內(nèi)無上市品種的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究即創(chuàng)新藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)理化檢驗(yàn)方法驗(yàn)證，包括法定標(biāo)準(zhǔn)提升即版本更換需要理化檢驗(yàn)方法學(xué)確認(rèn)。.引用文獻(xiàn)、資料中國藥典2015版四部9101藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則制藥工藝驗(yàn)證實(shí)施手冊（化學(xué)工業(yè)出版社出版，何國強(qiáng)主編）4.職責(zé)人員職責(zé)驗(yàn)證部負(fù)責(zé)驗(yàn)證資料管理、驗(yàn)證或確認(rèn)方案及其報告的合規(guī)審核。質(zhì)量保證部負(fù)責(zé)審核本文件內(nèi)容、驗(yàn)證或確認(rèn)方案及其報告的合規(guī)審核。研發(fā)部負(fù)責(zé)研發(fā)品種的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)即理化檢驗(yàn)方法的驗(yàn)證或確認(rèn)的起草、實(shí)施質(zhì)量控制部負(fù)責(zé)實(shí)施方法學(xué)驗(yàn)證或確認(rèn)。.定義標(biāo)準(zhǔn)分析方法：指法定分析方法，如藥典（如USP、EP等）或部頒標(biāo)準(zhǔn)方法。非標(biāo)準(zhǔn)分析方法：指新建立的分析方法或變更后的分析方法。方法驗(yàn)證：指實(shí)驗(yàn)室通過實(shí)驗(yàn)設(shè)計和測試，證明被驗(yàn)證的方法（未被收載法定標(biāo)準(zhǔn)）適用于該方法擬定的檢測用途。方法確認(rèn)：指實(shí)驗(yàn)室對法定分析方法或藥典分析方法進(jìn)行確認(rèn)，證明該方法適用于被測樣品的分析。方法轉(zhuǎn)移：指分析方法建立機(jī)構(gòu)建立分析方法并經(jīng)過驗(yàn)證后，轉(zhuǎn)移到其他檢測機(jī)構(gòu)（分析方法接收機(jī)構(gòu)），方法接收機(jī)構(gòu)為了成功的運(yùn)行該分析方法而進(jìn)行的分析方法轉(zhuǎn)移確認(rèn)，如國家檢測機(jī)構(gòu)進(jìn)行的進(jìn)口藥品標(biāo)準(zhǔn)復(fù)核工作。準(zhǔn)確度：準(zhǔn)確度系指用該方法測定的結(jié)果與真實(shí)值或參考值接近的程度，一般以回收率（％）（即測定值/真實(shí)值X100%）表示。準(zhǔn)確度應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)建立。具禾區(qū)制藥SOP-VC-001.00生效日期年月日理化檢驗(yàn)方法學(xué)驗(yàn)證與確認(rèn)SOP版本號QB-2019拷貝號體方法可采用“回收試驗(yàn)法”和“加樣回收試驗(yàn)法”?；厥赵囼?yàn)：空白+已知量A的對照品測定，測定值為M；回收率R=（M-空白）/AX100%。加樣回收試驗(yàn)：以準(zhǔn)確測定藥物含量P的真實(shí)樣品+已知量A的對照品測定，測定值為M；回收率R=（M-P）/AX100%O精密度：精密度系指在規(guī)定的測試條件下，同一個均勻樣品，經(jīng)多次取樣測定所得結(jié)果之間的接近程度。精密度一般用偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差或相對標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。重復(fù)性：在相同條件下，由一個分析人員測定所得結(jié)果的精密度稱為重復(fù)性。分析重復(fù)性：由一位分析人員將同一均勻樣品重復(fù)稱樣制備供試品溶液六份，測定，計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。系統(tǒng)重復(fù)性：在相同條件下，同一份供試品溶液重復(fù)測定六次計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。中間精密度：在同一實(shí)驗(yàn)室，由兩位分析人員在不同時間，使用不同設(shè)備將同一均勻樣品分別重復(fù)稱樣制備供試品溶液六份，測定，計算平均值及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，即為中間精密度。重現(xiàn)性：在不同實(shí)驗(yàn)室，由兩位檢驗(yàn)員將同一均勻樣品分別重復(fù)稱樣制備供試品溶液六份，測定，分別計算平均值及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，即為重現(xiàn)性，條件充許時，才驗(yàn)證此項目。專屬性：專屬性系指在其他成分（如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、輔料等）可能存在下，采用的方法能準(zhǔn)確測定出被測物的特性。如方法不夠?qū)?，?yīng)采用多個方法予以補(bǔ)充。線性：線性系指在設(shè)計的范圍內(nèi)測試結(jié)果與試樣中被測物濃度直接呈正比關(guān)系的程度。范圍：范圍系指能達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性，測試方法適用的高低限濃度測量的區(qū)間。范圍應(yīng)根據(jù)分析方法的具體應(yīng)用和線性、準(zhǔn)確度、精密度結(jié)果和要求確定。耐用性：系指在測定條件有小的變動時，測定結(jié)果不受影響的承受程度。檢測限：系指試樣中被測物能被檢測出的最低量。定量限：指樣品中被測物能被定量測定的最低量，其測定結(jié)果應(yīng)符合準(zhǔn)確度和精

禾區(qū)制藥SOP-VC-001.00生效日期年月日理化檢驗(yàn)方法學(xué)驗(yàn)證與確認(rèn)SOP版本號QB-2019拷貝號密度要求。雜質(zhì)和降解產(chǎn)物用定量測定方法研究時，應(yīng)確定定量限。系統(tǒng)適用性：是指在現(xiàn)有的色譜條件下，儀器的性能，主要以柱效、分離度、重復(fù)性來表示。方法驗(yàn)證、方法轉(zhuǎn)移、方法確認(rèn)的區(qū)別如下表項目主要目的主要內(nèi)容負(fù)責(zé)方適用范圍方法驗(yàn)證證明方法適用于擬定用途，被測樣品質(zhì)量可控按照方法的用途，對方法學(xué)驗(yàn)證參數(shù)（按照藥典4部9101藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則）進(jìn)行全部或部分驗(yàn)證方法建立機(jī)構(gòu)首次建立的方法，有問題需要重新進(jìn)行驗(yàn)證的方法。非藥典分析方法、法定分析方法。方法轉(zhuǎn)移證明方法接收機(jī)構(gòu)能夠成功的操作方法建立機(jī)構(gòu)的經(jīng)過驗(yàn)證的分析方法方法接收機(jī)構(gòu)選擇典型批次的樣品（至少3批）進(jìn)行檢測，并與方法建立機(jī)構(gòu)檢測結(jié)果進(jìn)行比對方法接收機(jī)構(gòu)進(jìn)口藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)復(fù)核，研發(fā)機(jī)構(gòu)轉(zhuǎn)移到質(zhì)量控制部，實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)移方法確認(rèn)證明藥典方法或法定標(biāo)準(zhǔn)方法適用于被測樣品的質(zhì)量控制；證明檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)能正確操作藥典方法或法定分析方法。根據(jù)方法的用途和方法的復(fù)雜程度，選擇性的選擇對檢測結(jié)果影響最大的關(guān)鍵方法學(xué)參數(shù)進(jìn)行考察藥檢所生產(chǎn)企業(yè)按照藥典方法或法定方法進(jìn)行的藥品質(zhì)量檢驗(yàn).需要驗(yàn)證的分析項目：鑒別試驗(yàn)雜質(zhì)定量檢驗(yàn)雜質(zhì)的限度檢查含量測定，包括原料藥或制劑中有效成分的含量，制劑中其他成分（如防腐劑等，中藥中其他殘留物、添加劑等）的測定。藥品溶出度、釋放度等檢查中，其溶出量等的測試也應(yīng)做必要驗(yàn)證。

禾區(qū)制藥SOP-VC-001.00生效日期年月日理化檢驗(yàn)方法學(xué)驗(yàn)證與確認(rèn)SOP版本號QB-2019拷貝號7.驗(yàn)證的內(nèi)容：準(zhǔn)確度、精密度（包括重復(fù)性、中間精密度和重現(xiàn)性）、專屬性、檢測限、定量限、線性、范圍和耐用性。視具體方法擬定驗(yàn)證的內(nèi)容。下表列出的分析項目和相應(yīng)的驗(yàn)證內(nèi)容可供參考。驗(yàn)證內(nèi)容檢驗(yàn)項目鑒別雜質(zhì)測定含量測定及溶出量測定校正因子定量限度準(zhǔn)確度否是否是是精密度重復(fù)性否是否是是中間精密度否是*否是*是專屬性**是是是是是檢測限否否***是否否定量限否是否否是線性否是否是是范圍否是否是是耐用性是是是是是備注::已有重現(xiàn)性驗(yàn)證，不需要驗(yàn)證中間精密度；*：如一種方法不夠?qū)?，可用其他分析方法予以補(bǔ)充；**:視具體情況予以驗(yàn)證；“是”代表該項目需要驗(yàn)證；“否”代表該項目不需要驗(yàn)證。.容量分析法驗(yàn)證內(nèi)容含量測定方法的準(zhǔn)確度A.方法一：在可得到空白樣的前提下，稱取一定量的空白樣（相當(dāng)于方法要求的標(biāo)準(zhǔn)稱樣量減去等量供試品中被測物量），在規(guī)定的范圍內(nèi)，精密加入已知量被測物對照品，制備3個不同濃度的供試品溶液（通常為檢測范圍的上、下限及供試品100%濃度的量），每個濃度平行制備3份供試液，計算回收率及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。B.方法二：在空白樣無法得到時，可使用標(biāo)準(zhǔn)加入法。稱取已知量的供試品，在規(guī)定范圍內(nèi)，精密加入已知量被測物對照品，制備3個不同濃度的混合標(biāo)樣（通常為檢測范

禾區(qū)制藥SOP-VC-001.00生效日期年月日理化檢驗(yàn)方法學(xué)驗(yàn)證與確認(rèn)SOP版本號QB-2019拷貝號圍的上、下限及供試品100%濃度的量；對于不高于標(biāo)示量的濃度，可在加入被測物對照品后進(jìn)行稀釋），每個濃度平行制備3份供試液，計算混合標(biāo)樣與供試品差值的回收率及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。C.方法三：在空白樣無法得到時，也可與另一個已建立準(zhǔn)確度的方法比較計算回收率。上述三種方法中每份供試液均測定1次，計算回收率及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，即得。數(shù)據(jù)要求在規(guī)定范圍內(nèi)，至少用9次測定結(jié)果進(jìn)行評價，例如：3個不同濃度，每個濃度分別制備3份供試品溶液。報告已知加入量的回收率（％），或測定結(jié)果平均值與真實(shí)值（參考值）之比X100%及4X值（4X=每個測定濃度百分含量平均值-100%）。應(yīng)報告回收率、相對標(biāo)準(zhǔn)偏差和平均回收率的95%置信區(qū)間。精密度應(yīng)報告相對標(biāo)準(zhǔn)偏差及剩余標(biāo)準(zhǔn)偏差。sdv應(yīng)報告相對標(biāo)準(zhǔn)偏差及剩余標(biāo)準(zhǔn)偏差。sdv(v)=:四n—2b?mb?m)2Sdd=工（V-ab-%為理論消耗滴定液的體積Sdv（v）為估計標(biāo)準(zhǔn)偏差Sdd為剩余方差a0bs為線性中的截距b0bs為線性中的斜率Vi和叫分別為每次消耗滴定液的體積和含量儀器滴定時，剩余標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)W0.3%手動滴定時，剩余標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)W0.6%中間精密度和重現(xiàn)性數(shù)據(jù)要求應(yīng)報告標(biāo)準(zhǔn)偏差，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，F(xiàn)值和95%置信區(qū)間。專屬性在雜質(zhì)可獲得的情況下，對于含量測定，供試品中可加入雜質(zhì)或輔料，考察測定結(jié)域禾區(qū)制藥SOP-VC-001.00生效日期年月日理化檢驗(yàn)方法學(xué)驗(yàn)證與確認(rèn)SOP版本號QB-2019拷貝號果是否受干擾，并可與未加雜質(zhì)和輔料的試樣比較測定結(jié)果。在雜質(zhì)或降解產(chǎn)物不能獲得的情況下，可將含有雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的試樣進(jìn)行測定，與另一個經(jīng)驗(yàn)證了的或藥典方法比較結(jié)果。線性以測得的體積為縱坐標(biāo)，被測物重量為橫坐標(biāo)作圖。數(shù)據(jù)要求應(yīng)列出回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性圖、斜率和截距的95%置信區(qū)間其他系統(tǒng)誤差：截距其它系統(tǒng)誤差二 100%濃度對應(yīng)的Y值儀器系統(tǒng)誤差儀器系統(tǒng)誤差二（實(shí)際斜率-理論斜率）/理論斜率X100%理論斜率=換算因子/（滴定液摩爾質(zhì)量X滴定液摩爾濃度）儀器滴定時截距應(yīng)W100%測試物消耗的滴定液體積的0.4%。手動滴定時截距應(yīng)W100%測試物消耗的滴定液體積的0.6%。范圍：同儀器分析法“范圍”項下規(guī)定。耐用性典型的變動因素有：滴定儀廠商和型號的改變，滴定管的改變，試劑廠商和批號的改變，滴定液濃度的改變，滴定時室溫的改變，滴定速度的改變等。檢驗(yàn)項目和驗(yàn)證參數(shù)：同儀器分析法檢驗(yàn)項目和驗(yàn)證內(nèi)容”項下規(guī)定。驗(yàn)證項目的限度要求：驗(yàn)證項目的限度要求表1（注：供試品要做預(yù)處理時，各個驗(yàn)證項目的可接收標(biāo)準(zhǔn)視具體情況確定。）j-一一容量方法類別驗(yàn)證參數(shù)酸堿滴定非水滴定氧化還原滴定銀量法絡(luò)合滴定準(zhǔn)確度平均值（%）99.0-101.099.0-101.098.5-101.598.5-101.598.0-102.0RSD(%)<0.33<0.33<0.5<0.5<0.67△X(%)±0.67±0.67±1.0±1.0±1.33分析重復(fù)性RSD(%)<0.33<0.33<0.5<0.5<0.67

禾區(qū)制藥SOP-VC-001.00生效日期年月日理化檢驗(yàn)方法學(xué)驗(yàn)證與確認(rèn)SOP版本號QB-2019拷貝號線性相關(guān)系數(shù)（r）>0.999>0.999>0.999>0.999>0.999每人測得結(jié)果的RSD（%）<0.33<0.33<0.5<0.5<0.67中間精密度所有人測得結(jié)果的RSD（%）<0.33<0.33<0.5<0.5<0.67.儀器分析法驗(yàn)證內(nèi)容準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度系指用該方法測定的結(jié)果與真實(shí)值或參考值接近的程度，一般用回收率（%）表示。準(zhǔn)確度應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)測試。驗(yàn)證方法準(zhǔn)確度應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)建立，至少用9個測定結(jié)果進(jìn)行評價。例如，設(shè)計3個不同濃度，每個濃度各分別制備3份供試品溶液，進(jìn)行測定。準(zhǔn)確度是定量測定的必要條件，因此含量測定、雜質(zhì)定量測定均需驗(yàn)證準(zhǔn)確度。制劑所用的具體方法詳見下表：檢測項目原料制劑備注含量測定方法1：用已知純度的對照品或供試品進(jìn)行測定。方法2：用本法所得結(jié)果與已知準(zhǔn)確度的另一方法測定的結(jié)果進(jìn)行比較。方法1：用含已知量被測物的各組分混合物進(jìn)行測定。方法2：如不能得到制劑的全部組分，可向制劑中加入已知量的被測物進(jìn)行測定。方法3：用本法所得結(jié)果與已知準(zhǔn)確度的另一方法測定的結(jié)果進(jìn)行比較。如該方法已經(jīng)測試并求出精密度、線性和專屬性，在準(zhǔn)確度也可推算的情況下，準(zhǔn)確度可不必再做。雜質(zhì)的定量測定方法1：可向制劑中加入已知量的雜質(zhì)進(jìn)行測定。方法2：如果不能得到雜質(zhì)或降解產(chǎn)物，口本法測定結(jié)果與另一成熟的方法進(jìn)行比較，如藥典方法或經(jīng)過驗(yàn)證的方法。在不能測得雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的響應(yīng)因子或不能測得對制劑的相對響應(yīng)因子的情況下，口制劑的響應(yīng)因子。應(yīng)明確單個雜質(zhì)和雜質(zhì)總量相當(dāng)于主成分的重量比（％）或面積比（％）。

禾區(qū)制藥SOP-VC-001.00生效日期年月日理化檢驗(yàn)方法學(xué)驗(yàn)證與確認(rèn)SOP版本號QB-2019拷貝號例如：測定含量的準(zhǔn)確度，按標(biāo)示量的80%、100%和120%配制3個濃度的溶液。每個濃度分別制備3份供試品溶液，進(jìn)行測定。根據(jù)測定結(jié)果與配制濃度計算出平均回收率以及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。數(shù)據(jù)要求需報告已知加入量的回收率（％），或測定結(jié)果平均值與真實(shí)值之差及其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）或可信限。樣品中待測成分含量和回收率限度關(guān)系見下表。在基質(zhì)復(fù)雜、組分含量低于0.01%及多成分等分析中，回收率限度可適當(dāng)放寬。待測定成分含量回收率限度（％）100%98~10110%95?1021%92?1050.1%90~1080.01%85~11010pg/g（ppm）80~1151Mg/g75~12010pg/kg（ppb）70~125精密度精密度系指在規(guī)定的測試條件下，同一個均勻供試品，經(jīng)多次取樣測定所得結(jié)果之間的接近程度。精密度一般用偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差或相對標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。驗(yàn)證方法精密度可從重復(fù)性、中間精密度、重現(xiàn)性三個層次考察。詳見下表:名稱定義驗(yàn)證方法重復(fù)性在相同條件下，由同一個分析人員測定所得結(jié)果的精密度稱為重復(fù)性。在規(guī)定范圍內(nèi)，取同一濃度（相當(dāng)于100%濃度水平）的供試品，用至少6份的結(jié)果進(jìn)行評價，或設(shè)計3種不同濃度，每種濃度分別制備3份供試品溶液進(jìn)行測定，用9份測定結(jié)果進(jìn)行評價。采用9份測定結(jié)果進(jìn)行評價時，對于化學(xué)藥，一般中

域禾區(qū)制藥SOP-VC-001.00生效日期年月日理化檢驗(yàn)方法學(xué)驗(yàn)證與確認(rèn)SOP版本號QB-2019拷貝號名稱定義驗(yàn)證方法間濃度加人量與所取供試品中待測定成分量之比控制在1:1左右，建議高、中、低濃度對照品加入量與所取供試品中待測定成分量之比控制在1.2:1,1:1,0.8:1左右，對于中藥，一般中間濃度加人量與所取供試品中待測定成分量之比控制在1:1左右，建議高、中、低濃度對照品加入量與所取供試品中待測定成分量之比控制在1.5:1,1:1,0.5:1左右。中間精密度在同一實(shí)驗(yàn)室，在不同時間由不同分析人員用不同設(shè)備測定結(jié)果之間的精密度，稱為中間精密度。考察隨機(jī)變動因素如不同日期、不同分析人員、不同儀器對精密度的影響，應(yīng)設(shè)計方案進(jìn)行中間精密度試驗(yàn)。重現(xiàn)性在不同實(shí)驗(yàn)室之間由不同分析人員測定結(jié)果之間的精密度，稱為重現(xiàn)性。國家藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)采用的分析方法，應(yīng)進(jìn)行重現(xiàn)性試驗(yàn)，如通過不同實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)獲得重現(xiàn)性結(jié)果。協(xié)同檢驗(yàn)的目的、過程和重現(xiàn)性結(jié)果均應(yīng)記載在起草說明中。應(yīng)注意重現(xiàn)性試驗(yàn)用樣品質(zhì)量的一致性及貯存運(yùn)輸中的環(huán)境對該一致性的影響，以免影響重現(xiàn)性結(jié)果。數(shù)據(jù)要求均應(yīng)報告偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差、相對標(biāo)準(zhǔn)偏差或置信區(qū)間。樣品中待測定成分含量和精密度可接受范圍參考表3。在基質(zhì)復(fù)雜、含量低于0.01%及多成分等分析中，精密度接受范圍可適當(dāng)放寬。樣品中待測定成分含量和精密度可接受范圍見下表。在基質(zhì)復(fù)雜、含量低于0.01%及多成分等分析中，精密度接受范圍可適當(dāng)放寬。待測定成分含量重復(fù)性（RSD%）重現(xiàn)性（RSD%）100%1210%1.531%240.1%36

域禾區(qū)制藥SOP-VC-001.00生效日期年月日理化檢驗(yàn)方法學(xué)驗(yàn)證與確認(rèn)SOP版本號QB-2019拷貝號0.01%4810pg/g（ppm）6111Pg/g81610Ng/kg（ppb）1532專屬性專屬性系指在其他成分（如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、輔料、相似化合物等）可能存在下，采用的方法能正確測定出被測物的特性。通常，鑒別反應(yīng)、雜質(zhì)檢查和含量測定方法，均應(yīng)考察其專屬性。如方法不夠?qū)?，?yīng)采用多個方法予以補(bǔ)充。驗(yàn)證方法檢驗(yàn)項目概述驗(yàn)證方法備注鑒別試驗(yàn)鑒別試驗(yàn)用于確認(rèn)被測成分符合其特征。應(yīng)能區(qū)分可能共存的物質(zhì)或結(jié)構(gòu)相似化合物。不含被測成分的供試品，以及結(jié)構(gòu)相似或組分中的有關(guān)化合物，應(yīng)均呈陰性反應(yīng)對于藥品，輔料不得干擾其有效成分的鑒別。雜質(zhì)測定（包括限度檢查和定量測定）作為純度檢查，所采用的分析方法應(yīng)確?？蓹z出被分析物種雜質(zhì)的含量測定，如有關(guān)物質(zhì)、重金屬、有機(jī)溶劑等。因此雜質(zhì)檢查要求分析方法有一定的專屬性。方法1：在雜質(zhì)可獲得的情況下，可向試樣中加入一定量的雜質(zhì)，考察雜質(zhì)與共存物質(zhì)能得到分離和檢出，并具有適當(dāng)?shù)臏?zhǔn)確度與精密度。方法2：在雜質(zhì)或降解產(chǎn)物不能獲得的情況下，專屬性可通過測定含有雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的試樣，與另一個已驗(yàn)證的方法或藥典方法比較結(jié)果?；?qū)υ嚇佑脧?qiáng)光照射，高溫，高濕，酸（堿）水解或氧化的方法進(jìn)行加速破壞，以研究可能的降解產(chǎn)物和降解途徑，并比對破壞前后檢出的雜質(zhì)個數(shù)。必要時可采用二級管陣列檢測和質(zhì)譜檢測，進(jìn)行峰純度檢查。色譜法和其他分離方法，應(yīng)附代表性圖譜，以說明方法的專屬性，并應(yīng)標(biāo)明諸成分在圖中的位置，色譜法的分離度應(yīng)符合要求。含量測定含量測定的目的是得到試樣中被分析物的含量測定或效價的準(zhǔn)確結(jié)果。方法1：在雜質(zhì)可獲得的情況下，可向試樣中加入雜質(zhì)或輔料，考察測定結(jié)果是否受干擾，并可與未加雜質(zhì)和輔料的試樣比較測定結(jié)果。方法2：在雜質(zhì)或降解產(chǎn)物不能獲得的情況下，專屬性可通過測定含有雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的試樣，與另一個已驗(yàn)證的方法或藥典方法比較結(jié)果?；?qū)υ嚇佑脧?qiáng)光照射、高溫、高濕、酸（堿）水解或氧化的方法進(jìn)行加速破壞，用兩種方法進(jìn)行含量測定，比較測定結(jié)果。必要時可采用二級管陣列檢測和質(zhì)譜檢測，進(jìn)行峰純度檢查，證明含量測定成分的色譜峰中不包含其他成分。

域禾區(qū)制藥SOP-VC-001.00生效日期年月日理化檢驗(yàn)方法學(xué)驗(yàn)證與確認(rèn)SOP版本號QB-2019拷貝號檢測限（LOD或DL）檢測限系指試樣中的被測物能夠被檢測出的最低量。藥品的雜質(zhì)測定，應(yīng)通過測試確定方法的檢測限。驗(yàn)證方法檢驗(yàn)項目驗(yàn)證方法雜質(zhì)測定方法1：直觀法用已知濃度的被測物，試驗(yàn)出能被可靠地檢測出的最低濃度或量。方法2：信噪比法用于能顯示基線噪音的分析方法，即把已知濃度試樣測出的信號與空白樣品測出的信號進(jìn)行比較，計算出能被可靠地檢測出的最低濃度或量。一般以信噪比為3:1或2:1時相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定檢測限。方法3：基于響應(yīng)值標(biāo)準(zhǔn)偏差和標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率法按照檢測限（LOD）=3.3HS公式計算。g響應(yīng)因子的標(biāo)準(zhǔn)偏差5=校正曲線的斜率斜率S根據(jù)分析物的校正曲線評估而來，響應(yīng)因子?？刹捎貌煌椒ǐ@得，如：根據(jù)空白溶液的標(biāo)準(zhǔn)偏差測定分析背景的響應(yīng)就是通過分析適量空白溶液并計算其響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)偏差。根據(jù)校正曲線朝品建立校正曲線，其中含有檢測限范圍的分析物，其回歸線的剩余標(biāo)準(zhǔn)偏差或回歸線截距的標(biāo)準(zhǔn)偏差作為標(biāo)準(zhǔn)偏差。數(shù)據(jù)要求應(yīng)附測試圖譜，說明測試過程和檢測結(jié)果，包括準(zhǔn)確度和精密度驗(yàn)證數(shù)據(jù)。定量限（LOQ或QL）定量限系指試樣中的被測物能夠被定量測定的最低量，其測定結(jié)果應(yīng)具有一定的準(zhǔn)確度和精密度。雜質(zhì)和降解產(chǎn)物用定量測定方法研究時，應(yīng)確定方法的定量限。驗(yàn)證方法

域禾區(qū)制藥SOP-VC-001.00生效日期年月日理化檢驗(yàn)方法學(xué)驗(yàn)證與確認(rèn)SOP版本號QB-2019拷貝號檢驗(yàn)項目驗(yàn)證方法雜質(zhì)定量測定方法1：直觀法用已知濃度的被測物，試驗(yàn)出能被可靠地定量測定的最低濃度或量。方法2：信噪比法用于能顯示基線噪音的分析方法，即把已知濃度試樣測出的信號與空白樣品測出的信號進(jìn)行比較，計算出能被可靠地檢測出的最低濃度或量。一般以信噪比為10:1時相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定定量限。方法3：基于響應(yīng)值標(biāo)準(zhǔn)偏差和標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率法按照定量限（LOQ）=10o/S公式計算。g響應(yīng)因子的標(biāo)準(zhǔn)偏差5=校正曲線的斜率?？梢酝ㄟ^下列方法測得：①測定空白值的標(biāo)準(zhǔn)偏差；②采用標(biāo)準(zhǔn)曲線的剩余標(biāo)準(zhǔn)偏差或是截距的標(biāo)準(zhǔn)偏差來代替。斜率S根據(jù)分析物的校正曲線評估而來，響應(yīng)因子?？刹捎貌煌椒ǐ@得，如：（1）根據(jù)空白溶液的標(biāo)準(zhǔn)偏差測定分析背景的響應(yīng)就是通過分析適量空白溶液并計算其響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)偏差（2）根據(jù)校正曲線朝品建立校正曲線，其中含有定量限范圍的分析物，其回歸線的剩余標(biāo)準(zhǔn)偏差或回歸線截距的標(biāo)準(zhǔn)偏差作為標(biāo)準(zhǔn)偏差。線性線性系指在設(shè)計的測定范圍內(nèi)，檢測結(jié)果與試樣中被測物的濃度直接呈正比關(guān)系的程度。線性是定量測定的基礎(chǔ)，涉及定量測定的項目，如雜質(zhì)定量測定和含量測定均需驗(yàn)證線性。驗(yàn)證方法應(yīng)在規(guī)定的測定范圍內(nèi)測定線性關(guān)系?？捎靡毁A備液經(jīng)精密稀釋，或分別精密稱樣，制備一系列供試樣品的方法進(jìn)行測定，至少制備5個濃度的供試品。每一個濃度的樣品1份，每份供試樣品檢測3次，以測得的響應(yīng)信號作為被測物濃度的函數(shù)作圖，觀察是否呈線性，用最小二乘法進(jìn)行線性回歸。必要時，響應(yīng)信號可經(jīng)數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換，再進(jìn)行線性回歸計算。線性驗(yàn)證和準(zhǔn)確度驗(yàn)證需涵蓋最低濃度范圍，見下表:

禾區(qū)制藥SOP-VC-001.00生效日期年月日理化檢驗(yàn)方法學(xué)驗(yàn)證與確認(rèn)SOP版本號QB-2019拷貝號檢驗(yàn)項目需涵蓋的最低濃度范圍制劑含量測定至少標(biāo)示量的80?120%（ICH），核包含50%-150%的濃度制劑含量均勻度至少標(biāo)示量的70?130%（特殊劑型可適當(dāng)放寬）雜質(zhì)的定量測定范圍應(yīng)根據(jù)初步實(shí)測，擬訂為規(guī)定限度的±20%。如果含量測定與雜質(zhì)檢查同時進(jìn)行，用峰面積歸一化法，則范圍應(yīng)為雜質(zhì)規(guī)定限度的-20%至含量限度（或上限）的+20%。推薦包含LOQ-規(guī)定限度的+20%。數(shù)據(jù)要求：應(yīng)列出回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線形圖。范圍范圍系指能夠達(dá)到一定的精密度、準(zhǔn)確度和線性，測試方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間。范圍應(yīng)根據(jù)分析方法的具體應(yīng)用和線性、準(zhǔn)確度、精密度結(jié)果和要求確定，要求見線性內(nèi)容章節(jié)。耐用性耐用性系指測定條件有小的變動時，測定結(jié)果不受影響的承受程度，為使方法可用于常規(guī)檢驗(yàn)提供依據(jù)。開始研究分析方法時，就應(yīng)考慮其耐用性。經(jīng)試驗(yàn)，應(yīng)說明小的變動能否符合系統(tǒng)適用性試驗(yàn)要求，以確保方法有效。如果通過耐用性研究發(fā)現(xiàn)分析方法對某個或某些測試條件敏感或要求苛刻，則建議在方法中予以寫明。?方法耐用性影響因素示例典型影響耐用性的變動因素1.被測溶液的穩(wěn)定性2.樣品的提取次數(shù)，時間等。液相色譜法中的典型影響耐用性的變動因素1.流動相的組成2.流動相的PH值3.不同品牌或不同批號的同類型色譜柱4.柱溫5.流速6.其他

禾區(qū)制藥SOP-VC-001.00生效日期年月日理化檢驗(yàn)方法學(xué)驗(yàn)證與確認(rèn)SOP版本號QB-2019拷貝號氣相色譜法中的典型影響耐用性的變動因素1.不同品牌或不同批號的同類型色譜柱2.固定相3.不同類型的載體4.載氣流速5.柱溫6.進(jìn)樣口和檢測器溫度7.其他?HPLC含量方法耐用性考慮因素下表列出了在評估HPLC含量方法耐用性中部分需考慮的因素及變化范圍，僅供參考，實(shí)際變化范圍可依據(jù)使用條件設(shè)計HPLC中的變動因素變化范圍流動相的組成有機(jī)相的±5%,例如方法規(guī)定流動相緩沖溶液與甲醇的比例為45:55,那么允許使用40:60至50:50范圍的比例。流動相的pH值±0.5%,如果已知pH值為關(guān)鍵影響因素，變化范圍會更小。色譜柱如可能，推薦使用同一品牌的填料可由不同供應(yīng)商填充的色譜柱。可通過回顧實(shí)驗(yàn)分析次數(shù)或方法確定色譜柱的質(zhì)量。柱溫士5℃?溶液的穩(wěn)定性研究溶液的穩(wěn)定性研究用來證明根據(jù)相應(yīng)方法制備的樣品溶液和標(biāo)準(zhǔn)品溶液在規(guī)定的儲存條件下在一定時間內(nèi)保持穩(wěn)定。如果方法中沒有規(guī)定有效期，樣品溶液和標(biāo)準(zhǔn)品溶液需進(jìn)行穩(wěn)定性研究。樣品溶液和標(biāo)準(zhǔn)品溶液根據(jù)方法進(jìn)行配制和分析。在室溫或其他條件下（如冰箱2?8℃）條件下儲存適當(dāng)?shù)臅r間。每個間隔點(diǎn)，用新鮮配制的標(biāo)準(zhǔn)品溶液做對照，測定儲存的樣品溶液和標(biāo)準(zhǔn)品溶液。測定結(jié)果與初始結(jié)果進(jìn)行比較，符合接受標(biāo)準(zhǔn)便可確認(rèn)樣品溶液和標(biāo)準(zhǔn)品溶液在規(guī)定的儲存條件下在規(guī)定儲存時間是穩(wěn)定的。.分析方法驗(yàn)證可接受標(biāo)準(zhǔn)，見下表:

域禾區(qū)制藥SOP-VC-001.00生效日期年月日理化檢驗(yàn)方法學(xué)驗(yàn)證與確認(rèn)SOP版本號QB-2019拷貝號檢驗(yàn)項目驗(yàn)證內(nèi)容可接受標(biāo)準(zhǔn)鑒別試驗(yàn)（HPLC，TLC，GC）專屬性色譜峰/斑點(diǎn)分離鑒別試驗(yàn)（IR/UV）專屬性與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)響應(yīng)相同，能清晰的與相似物質(zhì)區(qū)分含量（HPLC，TLC，GC）活性成分或輔料精密度/重復(fù)性sr產(chǎn)2.0%（原料W1.0%）；心6中間精密度與產(chǎn)2.0%；心12專屬性色譜峰基線分離，無干擾UV：UV特征光譜空白樣品的影響W3.0%峰純度（如認(rèn)為需要）含量測定成分的色譜峰中不包含其他成分。參見準(zhǔn)確度線性相關(guān)系數(shù)rN0.998截距⑴W2.0%（3）剩余標(biāo)準(zhǔn)偏差W2.0%（3）范圍至少標(biāo)示量（100%溶液）的80?120%準(zhǔn)確度回收率（平均值）回收率限度要求見準(zhǔn)確度項下9.1.3回收率的S.rel（n=9,3個濃度，每個濃度三份樣品）SrelW2.0%（nN9,至少3個濃度，每個測3次）穩(wěn)定性供試品溶液在規(guī)定時間內(nèi)變化W2.0%標(biāo)準(zhǔn)品溶液耐用性方法通過系統(tǒng)適用性試驗(yàn)雜質(zhì)的定量測定（副產(chǎn)品/降解產(chǎn)物，對應(yīng)結(jié)構(gòu)體）精密度（重復(fù)性）（心6）不加校正因子情況下限度＜0.1%,SrelW30%0.1W限度W0.2%,SrelW20%0.2W限度W0.5%,SrelW10%0.5W限度＜5%,SrelW5.0%限度三5%,SrelW2.5%

域禾區(qū)制藥SOP-VC-001.00生效日期年月日理化檢驗(yàn)方法學(xué)驗(yàn)證與確認(rèn)SOP版本號QB-2019拷貝號檢驗(yàn)項目驗(yàn)證內(nèi)容可接受標(biāo)準(zhǔn)雜質(zhì)的定量測定（副產(chǎn)品/降解產(chǎn)物，對應(yīng)結(jié)構(gòu)體）精密度（重復(fù)性）（心6）加校正因子情況下0W限度W0.5%,Sr產(chǎn)10%0.5W限度＜2%,SrelW5.0%限度三2%,SrelW2%精密度/中間精密度限度＜0.1%,SrelW40%0.1W限度＜0.2%。SrelW30%0.2W限度＜0.5%,SrelW15%0.5W限度＜5%,SrelW7.5%限度三5%,S