項目一試驗方案設計園藝技術專業(yè)教學資源庫模塊四組培技術研發(fā)12CONTENTS組培信息搜索試驗方案設計項目一試驗方案設計（一）組培快繁的程序（二）組培快繁類型與再生途徑（三）組培技術路線（四）組培苗的遺傳穩(wěn)定性（五）組培試驗設計方法（六）組培方案撰寫格式二、試驗方案設計園藝植物組織培養(yǎng)什么是組培快速繁殖又稱微體繁殖（微繁），是指利用組織培養(yǎng)技術進行的一種營養(yǎng)繁殖方法，繁殖速度快，數(shù)量大。園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計（一）組培快繁的程序無菌材料的建立試管苗移栽馴化試管苗生根培養(yǎng)培養(yǎng)材料的增殖園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計初代培養(yǎng)繼代培養(yǎng)生根培養(yǎng)馴化移栽

植物組織培養(yǎng)一般過程園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計初代培養(yǎng)：

芽、莖段、葉片、花器等外植體在離體培養(yǎng)條件下誘導愈傷組織、側芽或不定芽、胚狀體過程。園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計繼代培養(yǎng)：更換新鮮培養(yǎng)基來繁殖同種類型的材料（愈傷組織、芽）。馬鈴薯繼代培養(yǎng)園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計生根培養(yǎng)：將芽苗轉接到生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)成為完整植株的過程。園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計馴化移栽：組培苗經(jīng)人工煉苗后移栽到馴化苗床上使之適應露地或保護地條件的過程。軟棗獼猴桃馴化苗園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計不同物種，不同外植體類型，培養(yǎng)基中激素種類不同，培養(yǎng)條件的差異，都會導致試管苗發(fā)生途徑不同。1.嫩芽增殖途徑2.叢生芽增殖途徑3.器官發(fā)生途徑4.胚狀體途徑5.原球莖途徑（二）組培快繁類型與再生途徑園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計莖段新梢大量無菌苗生根培養(yǎng)1.嫩芽增殖途徑園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計2.叢生芽增殖途徑園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計3.器官發(fā)生途徑脫分化再分化愈傷組織芽、芽叢切割芽叢繼代培養(yǎng)大量芽叢試管苗生根培養(yǎng)外植體初代繼代園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計4.胚狀體發(fā)生途徑愈傷組織小孢子游離單細胞器官

胚狀體

試管苗外植體愈傷組織小孢子游離單細胞器官

胚狀體

試管苗對應于種子胚而言。在離體培養(yǎng)過程中產(chǎn)生一種形似胚（具有明顯的根端和芽端），功能與胚相同的結構。園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計5.原球莖途徑類胚組織，縮短的、呈珠粒狀的、由性細胞組成的、類似嫩莖的器官。園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計根、芽胚狀體根、芽愈傷組織芽、根根芽外植體試管苗原球莖根、芽園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計外因（1）外植體（類型、取材部位、采集時期）（2）培養(yǎng)基種類（3）激素（種類、濃度、配比）（4）添加物及糖（種類、濃度）（5）PH值（6）光照（光培養(yǎng)、暗培養(yǎng)、光周期、光質(zhì)）（7）溫度（高溫、低溫、恒溫、變溫）（8）培養(yǎng)方式（固體、液體、振蕩、靜置）影響組培的因素內(nèi)因植物自身特點（三）組培技術路線園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計外植體生長素和細胞分裂素培養(yǎng)基種類PH值和離子濃度溫度與濕度光照培養(yǎng)方式組培技術路線園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計（四）組培苗的遺傳穩(wěn)定性1.影響組培苗遺傳穩(wěn)定性的因素

2.提高遺傳穩(wěn)定性的措施園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計

1.影響組培苗遺傳穩(wěn)定性的因素基因型繼代次數(shù)和時間植株再生方式外源激素園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計2.提高組培苗遺傳穩(wěn)定性的措施（1）采用生長點、腋芽生枝、胚狀體繁殖方式，可有效減少變異；（2）縮短繼代時間，限制繼代次數(shù)，每隔一定繼代次數(shù)后，重新進行初代培養(yǎng)；（3）采集幼齡的外植體材料；（4）采用適當?shù)募に胤N類和較低的濃度；（5）培養(yǎng)基中減少或不使用容易引起誘變的化學物質(zhì)；（6）定期檢測，及時剔除生理、形態(tài)異常苗，并進行多年跟蹤檢測，調(diào)查再生植株開花結實特性，以確定其生物學性狀和經(jīng)濟性狀是否穩(wěn)定。園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計一、單因子試驗二、雙因子試驗（拉丁方設計）三、多因子試驗（正交設計）（五）組培試驗設計方法園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計

2種激素5種濃度的試驗組合Ⅰ

6－BA（mg/L)A1A2A3A4A5

NAA（mg/L)B1B2B4B3B5B1A1B1A2B1A3B1A4B1A5B2A1B2A2B2A3B2A4B2A5B3A1B3A2B3A3B3A4B3A5B4A1B4A2B4A3B4A4B4A5B5A1B5A2B5A3B5A4B5A5園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計2種激素5種濃度的試驗組合ⅡNAA（mg/L)

6－BA（mg/L)低中高

低中高低低低中低高中低中中中高高低高中高高園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計L16(45)正交表正交表的代號試驗方案形成的處理數(shù)試驗因子數(shù)（列號數(shù)）試驗因子的作用劑量水平數(shù)（可容納的水平數(shù)）正交試驗園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計L4(23)正交表

正交試驗園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計L4(23)正交試驗設計

水平因子培養(yǎng)基

NAABA1MS0.11.02B50.52.0正交試驗園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計L4(23)正交試驗方案處理培養(yǎng)基

NAABA1MS0.11.02MS0.52.03B50.12.04B50.51.0正交試驗園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計L9(34)正交表

正交試驗園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計L9(34)正交試驗設計

水平因子培養(yǎng)基

IBABAGA31MS0.51.51.02B51.01.02.03WPM2.02.04.0正交試驗園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計L16(45)正交表

正交試驗園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計

L16(45)誘導蘋果生根正交試驗結果正交試驗園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計篩選及使用最佳組培方案應注意的問題

找準主導影響因子是關鍵。試驗有重復，試材數(shù)量大于30，每處理10瓶，每瓶3塊培養(yǎng)物。試材須在相同培養(yǎng)上繼代培養(yǎng)3代以上，才能保證試驗結果可靠。最佳培養(yǎng)基配方長期使用后，應視培養(yǎng)物的表現(xiàn)適當調(diào)整或校正。園藝植物組織培養(yǎng)二、試驗方案設計（六）組培方案撰寫格式

×××試驗方案1.前言2.正文（1）試驗的基本條件（2）試驗設計（3）操作與管理要求（4）調(diào)查分析的指標與方法3.試驗進度安排與經(jīng)費預算