祛痤瘡功能評(píng)價(jià)方法（征求意見稿）

及修訂說(shuō)明（總8頁(yè)）-本頁(yè)僅作預(yù)覽文檔封面，使用時(shí)請(qǐng)刪除本頁(yè)-#附件7：祛痤瘡功能評(píng)價(jià)方法（征求意見稿）保健食品評(píng)價(jià)試驗(yàn)項(xiàng)目、試驗(yàn)原則及結(jié)果判定Items,PrinciplesandResultAssessment試驗(yàn)項(xiàng)目動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表皮厚度毛囊腔面積人體試食試驗(yàn)痤瘡數(shù)目皮損分級(jí)病變積分試驗(yàn)原則動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和人體試食試驗(yàn)所列指標(biāo)均為必做項(xiàng)目。應(yīng)對(duì)臨床癥狀、體征進(jìn)行觀察。在進(jìn)行人體試食試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)對(duì)受試樣品的食用安全性作進(jìn)一步的觀察。結(jié)果判定動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：受試樣品至少兩個(gè)劑量組與模型對(duì)照組比較，表皮厚度與毛囊腔面積均顯著減少，可判定該受試樣品動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性。人體試食試驗(yàn)：試食組大多數(shù)受試者無(wú)新發(fā)痤瘡且原痤瘡皮損程度不加重（有效率三80%）,同時(shí)痤瘡總數(shù)明顯減少（三20%并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異）或病變總積分明顯減少（三20%并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異），可判定該受試樣品具有祛痤瘡的功能。祛痤瘡功能檢驗(yàn)方法MethodfortheAssessmentofEliminantingAcneFunction動(dòng)物實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)動(dòng)物經(jīng)煤焦油涂抹，堵塞毛孔，可引起炎性病變，出現(xiàn)類似人體的痤瘡樣病損。比較給予實(shí)驗(yàn)動(dòng)物受試樣品后，皮損程度（數(shù)目、面積、損傷類型）的變化，可判定該受試樣品是否具有祛痤瘡的作用。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物推薦使用單一性別健康成年雄性兔（新西蘭兔或日本大耳兔），體重±。每組6-8只。劑量分組及受試樣品給予時(shí)間實(shí)驗(yàn)設(shè)三個(gè)劑量組、一個(gè)空白對(duì)照組和一個(gè)模型對(duì)照組，三個(gè)劑量組中應(yīng)包括一個(gè)人體推薦量的5倍。受試樣品給予時(shí)間30天，必要時(shí)可延長(zhǎng)至45天。實(shí)驗(yàn)步驟本實(shí)驗(yàn)采用煤焦油致皮損動(dòng)物模型和造模成功后給予受試物的方法?？瞻讓?duì)照組不做任何處理。實(shí)驗(yàn)組在左耳內(nèi)側(cè)耳管開口處X范圍內(nèi)，使用50%的煤焦油液（液體石蠟稀釋）涂抹，每日一次。右耳作為自身對(duì)照。給藥2周后，如涂抹處出現(xiàn)皮膚干燥和角化過度、粗糙和增厚，粉刺樣皮損，毛囊口隆起、擴(kuò)張及黑色角栓等，說(shuō)明模型成功。將造模成功的動(dòng)物分為受試物3個(gè)劑量組和模型對(duì)照組，受試物可以選擇伴飼或灌胃給予，選擇灌胃時(shí)，模型對(duì)照組使用蒸餾水或去離子水灌胃。末次給予受試物后24h,肉眼觀察涂煤焦油處皮損的改變，照相，取病灶中心組織全層（約x面積），4%甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，連續(xù)切片25張，每隔5張取一張切片（即每只動(dòng)物共取5張切片），常規(guī)HE染色，顯微鏡下進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。觀察指標(biāo)①毛囊腔面積：每張切片隨機(jī)觀察5個(gè)視野，用圖像分析技術(shù)對(duì)其毛囊腔面積進(jìn)行測(cè)量；以平均面積作為該動(dòng)物的毛囊腔面積。②表皮厚度：每張切片隨機(jī)觀察5個(gè)視野，用圖像分析技術(shù)對(duì)其表皮厚度進(jìn)行測(cè)量；以平均厚度作為該動(dòng)物的表皮厚度。數(shù)據(jù)處理和結(jié)果判定一般采用方差分析，但需先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，方差齊，則計(jì)算F值。若F值＜,結(jié)論為各組均數(shù)間差異無(wú)顯著性；若F值2（即PW）,結(jié)論為各組均數(shù)間差異有顯著性，需進(jìn)一步使用多個(gè)實(shí)驗(yàn)組和一個(gè)對(duì)照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。對(duì)非正態(tài)分布或方差不齊的數(shù)據(jù)需進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)分布或方差齊的要求后，用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析；若經(jīng)變量轉(zhuǎn)換仍不能達(dá)到正態(tài)分布或方差齊的目的，則改用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果判定：受試樣品至少兩個(gè)劑量組的表皮厚度和毛囊腔面積均較模型對(duì)照組有明顯改善（有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異），可判定該受試樣品祛痤瘡動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性。人體試食試驗(yàn)受試者納入標(biāo)準(zhǔn)選擇臨床痤瘡I—III度的自愿受試患者，男女均可。臨床痤瘡按皮損程度分度標(biāo)準(zhǔn)：I度：粉刺為主，有少量丘疹和膿皰，總病灶數(shù)少于30；II度：有粉刺，中等數(shù)量的丘疹和膿皰，總病灶數(shù)為31-50；III度：有大量丘疹和膿皰，偶見大的炎性皮損，總病灶數(shù)為51-100，結(jié)節(jié)少于3個(gè)；IV度：結(jié)節(jié)/囊腫性痤瘡或聚合性痤瘡，總病灶數(shù)超過100個(gè)，結(jié)節(jié)/囊腫多于3個(gè)。受試者排除標(biāo)準(zhǔn)年齡在14歲以下或65歲以上者，妊娠或哺乳婦女，及對(duì)本保健食品過敏者。合并有心、肺、腦血管、肝、腎和造血系統(tǒng)等嚴(yán)重性疾病及精神病患者。短期內(nèi)服用與受試功能有關(guān)的物品，影響到對(duì)結(jié)果的判斷者。未按規(guī)定服用受試樣品的受試者，資料不全影響功效或安全性判斷者。痤瘡臨床分級(jí)為IV度者。試驗(yàn)設(shè)計(jì)及分組要求采用自身和組間兩種對(duì)照設(shè)計(jì)。按受試者的痤瘡情況隨機(jī)分為試食組和對(duì)照組，盡可能考慮影響結(jié)果的主要因素如年齡、性別、病程等，進(jìn)行均衡性檢驗(yàn)，以保證組間的可比性。每組受試者不少于50例。受試樣品的劑量和使用方法試食組按推薦服用方法、服用量服用受試產(chǎn)品，對(duì)照組可服用安慰劑或采用空白對(duì)照。受試樣品給予時(shí)間30天，必要時(shí)可以延長(zhǎng)至45天。受試者在試驗(yàn)期間停止使用其它口服及外用有關(guān)養(yǎng)顏祛痤瘡的用品。試驗(yàn)期間不改變?cè)瓉?lái)的飲食習(xí)慣，正常飲食。觀察指標(biāo)安全性指標(biāo)：一般狀況包括精神、睡眠、飲食、大小便、血壓等血、尿、便常規(guī)肝、腎功能檢查胸透、心電圖、腹部B超檢查（僅在試驗(yàn)開始前檢查一次）功效性指標(biāo)：檢查受試者試食前后整個(gè)顏面部、胸部和背部痤瘡皮疹改變情況。檢查者對(duì)受試者進(jìn)行視診和觸診，并對(duì)試食前后顏面部、胸部、背部的白頭粉刺、黑頭粉刺、炎性丘疹、膿胞等數(shù)目與位置進(jìn)行記錄。對(duì)白頭粉刺、黑頭粉刺、炎性丘疹、膿胞等各類病變的數(shù)目和皮損程度進(jìn)行分析和評(píng)分。評(píng)分時(shí)對(duì)不同部位的不同病變分別賦分值如下：不同皮膚病變?cè)u(píng)分值：白頭粉刺1分；黑頭粉刺2分；炎性丘疹3分；膿頭丘疹4分；不同部位（區(qū)域）評(píng)分值：將痤瘡按好發(fā)部位分為7個(gè)區(qū)，即I區(qū)-前額、II區(qū)-右頰部、山區(qū)-左頰部：各為2分；IV區(qū)-鼻部、V區(qū)-下頦：各1分；VI區(qū)-胸部、VII區(qū)-上背部：各3分。區(qū)域積分二區(qū)域分值X（白頭粉刺數(shù)“+黑頭粉刺數(shù)x2+炎性丘疹數(shù)x3+膿頭丘疹數(shù)x4）病變總積分=各區(qū)域積分之和有條件的機(jī)構(gòu)可使用圖像分析軟件計(jì)數(shù)痤瘡個(gè)數(shù)和判斷痤瘡類型。但用圖像分析技術(shù)處理時(shí)，要保證試驗(yàn)前和試驗(yàn)后拍照應(yīng)使用同一相機(jī)并在相同的條件下進(jìn)行。數(shù)據(jù)處理與結(jié)果判定對(duì)試食前后痤瘡數(shù)目、皮損程度和積分的變化分別進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，同時(shí)計(jì)算有效率。有效：痤瘡數(shù)量減少三30%、皮損程度減輕至少一度或病變總積分減少三30%。數(shù)據(jù)處理試驗(yàn)數(shù)據(jù)為計(jì)量資料，可用t檢驗(yàn)進(jìn)行分析。凡自身對(duì)照資料可以采用配對(duì)t檢驗(yàn)，兩組均數(shù)比較采用成組t檢驗(yàn)，后者需進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，對(duì)非正態(tài)分布或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)方差齊后，用轉(zhuǎn)換的數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)；若轉(zhuǎn)換數(shù)據(jù)仍不能滿足正態(tài)方差齊要求，改用t′檢驗(yàn)或秩和檢驗(yàn)；但變異系數(shù)太大（如CV>50%）的資料應(yīng)用秩和檢驗(yàn)。有效率采用X2檢驗(yàn)分析。四格表總例數(shù)小于40，或總例數(shù)等于或大于40但出現(xiàn)理論數(shù)等于或小于1時(shí)，應(yīng)改用確切概率法。結(jié)果判定試食組大多數(shù)受試者無(wú)新發(fā)痤瘡且原痤瘡皮損程度不加重（有效率三80%），同時(shí)痤瘡總數(shù)明顯減少（三20%并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異）或病變總積分明顯減少（三20%并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異），可判定該受試樣品具有祛痤瘡的功能。祛痤瘡功能評(píng)價(jià)方法修訂說(shuō)明一、承擔(dān)單位四川大學(xué)華西公共衛(wèi)生學(xué)院分析測(cè)試中心為本項(xiàng)目的牽頭單位。本單位是國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序和方法》（GB15193）、《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》（2003年版）等多項(xiàng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和技術(shù)規(guī)范的起草單位之一，是衛(wèi)生部認(rèn)定的保健食品功能學(xué)檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)，在保健食品功能學(xué)評(píng)價(jià)及其方法研究、相關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)與技術(shù)規(guī)范的起草和方法驗(yàn)證等方面有豐富的經(jīng)驗(yàn)。二、主要工作過程本項(xiàng)目于2009年11月啟動(dòng)。由四川大學(xué)華西公共衛(wèi)生學(xué)院分析測(cè)試中心牽頭成立項(xiàng)目協(xié)作組，四川省疾病預(yù)防控制中心和北京市疾病預(yù)防控制中心為本項(xiàng)目的協(xié)作單位。2009年12月到2010年2月進(jìn)行了廣泛的文獻(xiàn)調(diào)研和意見征詢等前期工作，2010年2月底召開了《祛痤瘡功能評(píng)價(jià)程序與檢驗(yàn)方法》修訂課題協(xié)作組第一次工作會(huì)議，根據(jù)前期調(diào)研和該課題立項(xiàng)時(shí)確定的主要目標(biāo)和擬修改的主要內(nèi)容，對(duì)祛痤瘡功能評(píng)價(jià)程序與檢驗(yàn)方法修訂的原則以及具體的修訂內(nèi)容等進(jìn)行了充分的討論，制定了工作計(jì)劃、進(jìn)度安排和初步的修訂方案。其后又分別征求了相關(guān)專家和檢測(cè)機(jī)構(gòu)的意見，對(duì)修訂方案初稿再次進(jìn)行了修改。2010年4~8月由四川大學(xué)華西公共衛(wèi)生學(xué)院分析測(cè)試中心負(fù)責(zé)、四川省疾病預(yù)防控制中心、北京市疾病控制中心配合，按修訂方案進(jìn)行了動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究。并于2010年8月31日在北京由國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局許可司組織的保健食品功能學(xué)評(píng)價(jià)程序與檢驗(yàn)方法修訂中期匯報(bào)與討論會(huì)上匯報(bào)了該項(xiàng)目的進(jìn)展情況和存在問題。根據(jù)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果和中期匯報(bào)會(huì)上專家的意見，2010年10月召開了《祛痤瘡功能評(píng)價(jià)程序與檢驗(yàn)方法》修訂課題協(xié)作組第二次工作會(huì)議，重點(diǎn)討論了動(dòng)物試驗(yàn)方法的修改和指標(biāo)選擇方面的問題，尤其是能否將圖像分析方法納入的問題，同時(shí)對(duì)祛痤瘡功能人體試食試驗(yàn)方法修訂的原則以及具體的修訂內(nèi)容等作了進(jìn)一步的討論。其后，由四川省疾病預(yù)防控制中心、北京市疾病控制中心再次對(duì)動(dòng)物試驗(yàn)進(jìn)行了驗(yàn)證試驗(yàn)。在此基礎(chǔ)上形成了《祛痤瘡功能評(píng)價(jià)程序與檢驗(yàn)方法（初稿）》，在征求相關(guān)專家和檢測(cè)機(jī)構(gòu)的意見后，對(duì)該修訂稿再次進(jìn)行了修改。2011年3月召開了課題協(xié)作組第三次工作會(huì)議。其后，對(duì)動(dòng)物試驗(yàn)是否納入評(píng)價(jià)程序的問題進(jìn)行了進(jìn)一步研究，并廣泛征求了相關(guān)單位的意見，2011年9月召開了課題協(xié)作組第四次工作會(huì)議，綜合實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果和各方意見最終形成了《祛痤瘡功能評(píng)價(jià)程序與檢驗(yàn)方法（征求意見稿）》。會(huì)后又再次征求了相關(guān)檢測(cè)機(jī)構(gòu)和專家的意見，并對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的問題進(jìn)行了更深入的研究，進(jìn)一步修改和完善了此“征求意見稿”修訂稿。2012年7月4日和8月2日SFDA兩次組織了對(duì)幾個(gè)功能評(píng)價(jià)方法修訂稿的專家論證會(huì)，根據(jù)多數(shù)專家的意見，再次對(duì)此“征求意見稿”作了進(jìn)一步的修改與完善。三、編制原則1．合法性原則：修訂工作符合國(guó)家相關(guān)法律法規(guī)并遵循相關(guān)管理部門的政策要求?？茖W(xué)性原則：修訂工作遵循科學(xué)性的原則，廣泛征求相關(guān)領(lǐng)域?qū)＜业囊庖姴⑦M(jìn)行文獻(xiàn)調(diào)研，各項(xiàng)技術(shù)指標(biāo)應(yīng)具有科學(xué)依據(jù)并經(jīng)科學(xué)驗(yàn)證。先進(jìn)性原則：注意國(guó)內(nèi)管理部門發(fā)布的新管理措施，兼顧了技術(shù)發(fā)展的前瞻性。實(shí)用性原則：從保護(hù)公眾身體健康的角度出發(fā)，充分考慮國(guó)情，兼顧我國(guó)保健食品功能檢測(cè)機(jī)構(gòu)的水平，對(duì)內(nèi)容進(jìn)行客觀量化和具體明確化，盡量提高可操作性。5．協(xié)調(diào)性原則：盡可能與本規(guī)范的其他部分一致，注意合理性與有效性、通俗性和規(guī)范性之間的關(guān)系。四、確定相關(guān)技術(shù)內(nèi)容及新舊技術(shù)規(guī)范的對(duì)比序號(hào)原規(guī)范現(xiàn)規(guī)范修訂理由序號(hào)內(nèi)容序號(hào)內(nèi)容11動(dòng)物實(shí)驗(yàn)（全部?jī)?nèi)容）新增（根據(jù)討論、論證和實(shí)驗(yàn)研究、驗(yàn)證試驗(yàn)等結(jié)果）21受試者納入標(biāo)準(zhǔn)選擇臨床痤瘡I—III度的自愿受試患者，男女均可。受試者納入標(biāo)準(zhǔn)選擇臨床痤瘡I—III度的自愿受試患者，男女均可。臨床痤瘡按皮損程度分度標(biāo)準(zhǔn)：I度：粉刺為主，有少量丘疹和膿皰，總病灶數(shù)少于30；II度：有粉刺，中等數(shù)量的丘疹和膿皰，總病灶數(shù)為31-50；III度：有大量丘疹和膿皰，偶見大的炎性皮損，總病灶數(shù)為51-100,結(jié)節(jié)少于3個(gè)；IV度：結(jié)節(jié)/囊腫性痤瘡或聚合性痤瘡，總病灶數(shù)超過100個(gè)，結(jié)節(jié)/囊腫多于3個(gè)。因?yàn)榧{入標(biāo)準(zhǔn)中出現(xiàn)了臨床分級(jí)，故應(yīng)將分級(jí)的相關(guān)內(nèi)容前移至此，以便于操作。另外，本臨床分級(jí)系新的分級(jí)方法32受試者排除標(biāo)準(zhǔn)增加“痤瘡臨床分級(jí)為IV度者”。重度痤瘡不宜僅服用保健食品3皮膚油份的測(cè)定：用刪除皮膚油份測(cè)定內(nèi)容。皮膚油份的

干凈棉球蘸蒸餾水清潔被測(cè)皮膚部分（以顏面部為主），擦干15分鐘后測(cè)定皮膚油份，測(cè)定參照標(biāo)準(zhǔn)：油份：9-27為正常、<9為低油、>27為高油.改為：檢查受試者試食前后整個(gè)顏面部、胸部和背部痤瘡皮疹改變情況。檢查者對(duì)受試者進(jìn)行視診和觸診，并對(duì)試食前后顏面部、胸部、背部的白頭粉刺、黑頭粉刺、炎性丘疹、膿胞等數(shù)目與位置進(jìn)行記錄。個(gè)體差異很大，且皮膚油份高低與痤瘡并沒有必然聯(lián)系。4痤瘡皮疹：觀察受試者試食前后整個(gè)顏面部位的痤瘡皮疹改變情況。試食前后分別記錄顏面部白頭粉刺、黑頭粉刺、炎性丘疹、膿包、囊腫、結(jié)節(jié)數(shù)目及皮損的程度。對(duì)白頭粉刺、黑頭粉刺、炎性丘疹、膿胞等各類病變的數(shù)目和皮損程度進(jìn)行分析和評(píng)分。評(píng)分時(shí)對(duì)不同部位的不同病變分別賦分值如下：不同皮膚病變?cè)u(píng)分值：白頭粉刺1分；黑頭粉刺2分；炎性丘疹3分；膿頭丘疹4分；不同部位（區(qū)域）評(píng)分值：將痤瘡按好發(fā)部位分為7個(gè)區(qū)，即I區(qū)-前額、II區(qū)-右頰部、山區(qū)-左頰部：各為2分；IV區(qū)-鼻部、V區(qū)-下頦：各1分；VI區(qū)-胸部、VII區(qū)-上背部：各3分。區(qū)域積分二區(qū)域分值X（白頭粉刺數(shù)“+黑頭粉刺數(shù)x2+炎性丘疹數(shù)X3+膿頭丘疹數(shù)x4）病變總積分二各區(qū)域積分之和有條件的機(jī)構(gòu)可使用圖像分析軟件計(jì)數(shù)痤瘡個(gè)數(shù)和判斷痤瘡類型。但用圖像分析技術(shù)處理時(shí)，要保證試驗(yàn)前和試驗(yàn)后拍照應(yīng)使用同一相機(jī)并在相同的條件下進(jìn)行。新增皮膚病變?cè)u(píng)分、區(qū)域積分和“病變總積分”指標(biāo)，在一定程度避免了人為主觀因素的影響，提高了結(jié)果評(píng)價(jià)的客觀性