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實(shí)驗(yàn)8環(huán)狀沉淀實(shí)驗(yàn)【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹苛私猸h(huán)狀沉淀試驗(yàn)的原理及用途,學(xué)習(xí)環(huán)狀沉淀試驗(yàn)的操作方法及觀察結(jié)果的方法。【實(shí)驗(yàn)原理】環(huán)狀沉淀試驗(yàn)(ringprecipitationtest)是把可溶性抗原(如血清、細(xì)菌浸出液、毒素等
)加入已含抗體溶液的環(huán)狀沉淀管液面上,當(dāng)對應(yīng)的抗原與抗體相遇,在二者交界面處可出現(xiàn)乳白色環(huán)狀沉淀物,即為陽性反應(yīng)??扇苄钥乖喾Q沉淀原,抗體亦稱為沉淀素。本試驗(yàn)常用于抗原的定性試驗(yàn),如診斷炭疽的Ascoli試驗(yàn)、血跡的鑒別等。【實(shí)驗(yàn)器材】1.器具:沉淀管、毛細(xì)吸管/移液器。2.材料:(1)免疫血清:抗人血清(1:4)。(2)抗原:人血清(1:100)。(3)生理鹽水。【實(shí)驗(yàn)方法】1.排列2支沉淀管,按下表加入各成分。環(huán)狀沉淀反應(yīng)(ml)試管號抗人血清生理鹽水人血清10.2-0.22-0.20.22.室溫下靜置15min,觀察兩液面接觸處,有白色沉淀環(huán)出現(xiàn)者為陽性。3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果:1號管為陽性;2號管為陰性?!咀⒁馐马?xiàng)】1.加抗原時(shí)應(yīng)使沉淀管傾斜,使其緩緩由管壁流下,輕浮于抗體上面,勿使相混,避免氣泡產(chǎn)生。
2.觀察時(shí)將沉淀管平放在眼前,如在小管后面襯以黑紙或手指,使光線從斜上方射入兩液面交界處,則能更清楚地看到沉淀環(huán)。掌握網(wǎng)織紅細(xì)胞玻片法的原理及操作方法,了解動物骨髓造血功能評價(jià)方法。動物骨髓造血功能測定1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.實(shí)驗(yàn)原理
網(wǎng)織紅細(xì)胞(reticulocyte,Ret或Reti)是界于晚幼紅細(xì)胞和成熟紅細(xì)胞之間的過渡型細(xì)胞。因其胞質(zhì)內(nèi)殘存少量核糖體和RNA等嗜堿性物質(zhì),經(jīng)煌焦油藍(lán)等染液活體染色后呈藍(lán)色網(wǎng)織狀或點(diǎn)粒狀,故名網(wǎng)織紅細(xì)胞,可與完全成熟的紅細(xì)胞區(qū)別。骨髓造血越活躍,網(wǎng)織紅細(xì)胞越多,所以計(jì)數(shù)血液里網(wǎng)織紅細(xì)胞可以反映骨髓造血的活躍程度。在造血異常情況下,如溶血性貧血、急性大失血、缺氧、注射貧血小鼠血清時(shí)外周血網(wǎng)織紅細(xì)胞會明顯增高;再生障礙性貧血時(shí)網(wǎng)織紅細(xì)胞減少。一些缺乏造血物質(zhì)引起的貧血,在正確補(bǔ)充了造血物質(zhì)以后就會出現(xiàn)網(wǎng)織紅細(xì)胞升高的反應(yīng)。所以網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)不僅反映骨髓造血功能的活躍程度,幫助貧血的診斷,還能幫助我們判斷某些類型貧血的療效。骨髓中紅細(xì)胞系統(tǒng)發(fā)育過程:多能干細(xì)胞→單能干細(xì)胞→原始紅細(xì)胞→早幼紅細(xì)胞→中幼紅細(xì)胞→晚幼紅細(xì)胞→網(wǎng)織紅細(xì)胞→成熟紅細(xì)胞3.失血性貧血模型的制備
(1)左手抓取固定小鼠。(2)用干棉球蘸取1%肝素溶液,涂抹于眼眶。(3)右手持一根蘸有1%肝素溶液的毛細(xì)管,從眼內(nèi)眥刺入眼底,刺破眶
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