關(guān)于細(xì)胞周期的調(diào)控與檢測第1頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月

生命是如何生長、生存、繁衍和死亡？在每一個生命個體中都存在一個精密的程序，或生物鐘。生物鐘決定著細(xì)胞是否、何時生長、分裂、或死亡。這就是細(xì)胞周期調(diào)控機制，它在相關(guān)基因的控制下，依據(jù)一定的規(guī)則和節(jié)奏運行著，調(diào)控細(xì)胞的生長、分裂和死亡。在胚胎細(xì)胞，細(xì)胞周期保持快速運行，在一些成年細(xì)胞中其運行慢得多，而在神經(jīng)元細(xì)胞周期幾乎完全不運行。在生長過程中的細(xì)胞，如果細(xì)胞周期不能運行，結(jié)果是死亡。而在成熟細(xì)胞，細(xì)胞周期不正確的運行，結(jié)果則是腫瘤的發(fā)生。細(xì)胞周期(cellcycle)細(xì)胞周期調(diào)控(cellcycleregulation)“細(xì)胞周期”也稱“細(xì)胞分裂周期”，是指一個細(xì)胞經(jīng)生長、分裂而增殖成兩個所經(jīng)歷的全過程，通常可分為若干階段，即G1期、S期、G2期和M期。細(xì)胞在G1期完成必要的生長和物質(zhì)準(zhǔn)備，在S期完成其遺傳物質(zhì)——染色體DNA的復(fù)制，在G2期進(jìn)行必要的檢查及修復(fù)以保證DNA復(fù)制的準(zhǔn)確性，然后在M期完成遺傳物質(zhì)到子細(xì)胞中的均等分配，并使細(xì)胞一分為二。一、基本概念介紹第2頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月2001NobelPrizeLelandH.Hartwell1970s“Checkpoint”Yeastgenetics~100CDCgenesStartgeneTimHunt1980sCyclinsSeaUrchinsPaulM.Nurse1970sCDKsyeast二、歷史回顧第3頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月生命復(fù)制之謎的揭開

（1）1858年建立細(xì)胞理論：生命的基本形式是細(xì)胞，機體由細(xì)胞構(gòu)成，細(xì)胞的生長復(fù)制形成了生物體的生長繁衍，細(xì)胞的異?；蛩劳鰧?dǎo)致機體的疾病或死亡。

（2）1951年發(fā)現(xiàn)了細(xì)胞分裂周期：G1SG2MG0細(xì)胞生長中有兩種形式----有絲分裂期和細(xì)胞間期細(xì)胞周期細(xì)胞間期有絲分裂期（M期）DNA合成前期（G1期）DNA合成期（S期）DNA合成后期（G2期）前期中期后期末期第4頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月（3）隨著成熟刺激因子（maturationpromotingfactor,MPF），細(xì)胞周期素（cyclin），細(xì)胞周期素依賴性蛋白激酶(cyclin

dependentkinase，CDK)的發(fā)現(xiàn)使對細(xì)胞周期及與腫瘤的發(fā)生發(fā)展關(guān)系的研究有了很大進(jìn)展。第5頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月三、細(xì)胞周期各時相的動態(tài)變化１、G1期（DNA合成前期，指有絲分裂完成到DNA合成之前的一段時間）

RNA在此期大量合成，導(dǎo)致蛋白質(zhì)量明顯增加。S期所需的DNA復(fù)制相關(guān)的酶系，如DNA聚合酶，G1期向S期轉(zhuǎn)變相關(guān)的蛋白質(zhì)如觸發(fā)蛋白、鈣調(diào)蛋白、細(xì)胞周期蛋白等均在此期合成。蛋白質(zhì)的磷酸化作用在G1期開始增加，這將有利于G1晚期染色體結(jié)構(gòu)成分的重排。非組蛋白、一些蛋白激酶在G1期也可發(fā)生磷酸化，已知大多數(shù)蛋白激酶磷酸化發(fā)生于其絲氨酸或蘇氨酸、酪氨酸部位。

第6頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月觸發(fā)蛋白是一種不穩(wěn)定蛋白，它對細(xì)胞從G1期進(jìn)入S期是必須的。只有當(dāng)其含量積累到臨界值，細(xì)胞周期才能朝DNA合成方向進(jìn)行。鈣調(diào)蛋白是真核細(xì)胞內(nèi)重要的鈣受體，它調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)鈣的水平，鈣調(diào)蛋白的含量，在G1晚期可達(dá)峰值，用抗鈣調(diào)蛋白藥物處理細(xì)胞，可延緩其從G1期到S期的進(jìn)程。G1期蛋白質(zhì)量的增加，可能與蛋白質(zhì)合成增強有關(guān)，而另一原因則可能使其降解的減弱。第7頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月２、S期（DNA合成期，從DNA合成開始到DNA合成結(jié)束的全過程，是細(xì)胞增殖周期的關(guān)鍵階段）S期是細(xì)胞進(jìn)行大量DNA復(fù)制的階段，組蛋白及非組蛋白也在此期大量合成，最后完成染色體的復(fù)制（１）DNA復(fù)制需要多種酶的參與包括DNA聚合酶、DNA連接酶、胸腺嘧啶核苷酸激酶、核苷酸還原酶等。隨著細(xì)胞由G1期進(jìn)入S期，這些酶的含量或活性可顯著增高（２）DNA復(fù)制具有嚴(yán)格的時間順序通常，GC含量較高的DNA序列在早S期復(fù)制，晚S期復(fù)制的主要為ＡＴ含量高的DNA序列；就染色體而言，常染色體的復(fù)制較異染色體要早，典型的例子如人類女性的細(xì)胞中，當(dāng)其它染色體都被復(fù)制完以后，才開始進(jìn)行純化的X染色體復(fù)制。第8頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月（３）S期是細(xì)胞合成的主要時相

此時細(xì)胞質(zhì)中可出現(xiàn)大量的組蛋白mRNA，新合成的組蛋白從胞質(zhì)進(jìn)入胞核，與復(fù)制后的DNA迅速結(jié)合，繞成核小體，進(jìn)而形成具有兩條單體的染色體。除了蛋白質(zhì)合成以外，在S期細(xì)胞中不斷進(jìn)行著組蛋白的持續(xù)磷酸化。（４）中心粒的復(fù)制也在S期完成

原本垂直的一對中心粒發(fā)生分離，各自在其垂直方向形成一個子中心粒，由此形成的兩對中心粒在以后的細(xì)胞周期進(jìn)程中，將發(fā)揮微管組織中心的作用，紡錘體微管，星體微管的形成均與此相關(guān)。第9頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月３、G2期（DNA合成后期，從DNA復(fù)制完成到有絲分裂開始前的時期，為有絲分裂

進(jìn)行物質(zhì)條件）

為細(xì)胞分裂準(zhǔn)備期，細(xì)胞中合成一些與M期結(jié)構(gòu)功能相關(guān)的蛋白質(zhì)，與核膜破裂，染色體凝集相關(guān)的成熟促進(jìn)因子在此期合成。微管蛋白G２期合成達(dá)高峰，為M期紡錘體微管的形成提供了豐富的來源。已經(jīng)復(fù)制的中心粒在G2期逐漸長大，并開始向細(xì)胞兩極分離。４、M期（有絲分裂期，細(xì)胞經(jīng)過分裂將染色體平均分配到兩個子細(xì)胞中）在此期細(xì)胞中，染色體凝集后發(fā)生姊妹染色單體的分離，核膜核仁破裂后再重建，胞質(zhì)中有紡錘體收縮環(huán)出現(xiàn)，隨著兩個子核的形成，胞質(zhì)也一分為二，由此完成細(xì)胞分裂。第10頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月G1期：為DNA合成準(zhǔn)備所需要的RNA、蛋白質(zhì)、脂類、糖類等G1早期：細(xì)胞的生長G1晚期：為S期的DNA合成做準(zhǔn)備S期（DNA合成期）

DNA合成(復(fù)制)染色體蛋白的合成：組蛋白、非組蛋白等中心粒的復(fù)制G2期（DNA合成后期）有活躍的RNA和蛋白質(zhì)合成微管蛋白，促有絲分裂因子（MPF）中心粒向兩極移動M期（有絲分裂期）

DNA、RNA、蛋白質(zhì)合成停止。細(xì)胞發(fā)生一系列形態(tài)變化、結(jié)構(gòu)建成。將加倍的DNA平均分配到兩個子細(xì)胞中第11頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)胞周期調(diào)控研究過程的重要事件---MPF的發(fā)現(xiàn)：最早發(fā)現(xiàn)，MPF是一種在G2期形成、能促進(jìn)M期啟動的調(diào)控因子，稱之為促細(xì)胞成熟因子或促細(xì)胞分裂因子（MPF)。MPF由調(diào)節(jié)亞單位細(xì)胞周期素（cyclin）和催化亞單位細(xì)胞周期素依賴性蛋白激酶（CDK）組成。1、細(xì)胞周期調(diào)控蛋白（cellcycle-regulatingprotein)四、細(xì)胞周期的調(diào)控第12頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月2）細(xì)胞周期調(diào)控蛋白的種類A、CDK類蛋白激酶：CDK與細(xì)胞周期素結(jié)合才具有激酶的活性，故名細(xì)胞周期素依賴性蛋白激酶(cyclin-dependentkinase，CDK)。作用：CDK可將特定蛋白磷酸化，促進(jìn)細(xì)胞周期運行。在動物中已知7種CDK，CDK1-7。B、細(xì)胞周期素（cyclin)特點：在細(xì)胞周期中呈周期性變化。作用：能與CDK結(jié)合，激活CDK，間接調(diào)節(jié)細(xì)胞周期運行。已知30余種，在脊椎動物中為cyclinA1-2、B1-3、C、D1-3、E1-2、F、G、H等。第13頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月Cyclins與CDKs結(jié)合后，CDKs才具有活性，它們兩者的結(jié)合使細(xì)胞周期有序進(jìn)行。具體結(jié)合方式如下：第14頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月C、細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制因子(CKI)CKI對細(xì)胞周期起負(fù)調(diào)控作用，分為：Ink4:P16ink4a,P15ink4b,P18ink4c,P19ink4d。特異性抑制cdk4-cyclinD1,cdk6-cyclinD1。Kip：P21cip1、P27kip1、P57kip2，抑制大多數(shù)CDK的激酶活性。P21cip1還能與DNA聚合酶δ的輔助因子PCNA結(jié)合，直接抑制DNA的合成。作用機制：未完全清楚，大多數(shù)CKI是通過直接與Thr160/161磷酸化后的CDK-cyclin復(fù)合物密切結(jié)合，直接抑制其蛋白激酶活性?，F(xiàn)較為肯定的是p21，其調(diào)控水平在基因轉(zhuǎn)錄的層面，當(dāng)DNA損傷和細(xì)胞衰老時，具有轉(zhuǎn)錄因子作用的p53增高，抑制其蛋白激酶活性，阻滯細(xì)胞周期的進(jìn)行。第15頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月CDKactivating活性位點抑制位點第16頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月第17頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月由于某些環(huán)境因素的作用細(xì)胞周期出現(xiàn)故障或差錯，這些信號可是細(xì)胞停留在某些點上，稱為限制點。主要檢驗點：G1/S限制點：DNA是否損傷？細(xì)胞外環(huán)境是否適宜？細(xì)胞體積是否足夠大？在酵母中稱start點，在哺乳動物中稱R點(restrictionpoint)。S期限制點：DNA復(fù)制是否完成？G2/M限制點：DNA是否損傷？細(xì)胞體積是否足夠大？中-后期限制點：紡錘體組裝限制點。2、細(xì)胞周期限制點（checkpoint）第18頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月Fourcheckpoints第19頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月3、調(diào)控細(xì)胞周期的內(nèi)、外源信號系統(tǒng)

單細(xì)胞生物的增殖取決于營養(yǎng)，多細(xì)胞生物細(xì)胞的增殖與信號途徑有關(guān)。A、生長因子：是與細(xì)胞增殖有關(guān)的信號物質(zhì)，已知幾十種，多數(shù)能促進(jìn)細(xì)胞增殖，又稱有絲分裂原（mitogen），如EGF、NGF。作用方式：旁分泌。信號通路：ras途徑，cAMP途徑、磷脂酰肌醇途徑。B、抑素（chalone)是一種由細(xì)胞自身產(chǎn)生、分泌的，對細(xì)胞增殖起抑制作用的糖蛋白，與膜上的受體結(jié)合，引起信號轉(zhuǎn)換及在胞內(nèi)傳遞，影響細(xì)胞周期相關(guān)的蛋白的表達(dá)。具有嚴(yán)格的組織特異性和細(xì)胞周期階段特異性。作用于G1期的抑素可阻止細(xì)胞進(jìn)入S期，稱S因子。作用于G2期的抑素可阻止細(xì)胞進(jìn)入M期，稱M因子。第20頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月五、細(xì)胞周期得以進(jìn)行的兩大機制

細(xì)胞周期得以進(jìn)行的核心機制是在一系列cyclin時相起伏的調(diào)控下，相應(yīng)的CDK依次激活，驅(qū)使細(xì)胞通過G1,S,G2期，達(dá)到M期，細(xì)胞一分為二，實現(xiàn)忠于親代的細(xì)胞復(fù)制。這一過程的順利完成取決于是否啟動（啟動機制）和能否忠于運行（監(jiān)控機制），達(dá)到忠實復(fù)制，是細(xì)胞周期調(diào)控的兩大生物學(xué)機制。第21頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月1、細(xì)胞周期的啟動機制

細(xì)胞周期能否啟動進(jìn)行細(xì)胞增殖，主要的調(diào)控點在G1期，它決定細(xì)胞是否通過G1期進(jìn)入S期。這一調(diào)控點首先在芽殖酵母的研究中被認(rèn)識，人們稱其為“起始點”（START）。一旦細(xì)胞通過start,它們勢必進(jìn)入S期，完成整個細(xì)胞分裂周期。因此start有人稱之為酵母細(xì)胞周期的“決定點”。在人體細(xì)胞增殖中，在G1期存在相似的調(diào)控機制。在G1期較晚時，也有一個決定點，稱為“限制點”（restrictionpoint），與酵母的START功能類似，不同的是，人類細(xì)胞是否通過“限制點”，進(jìn)入細(xì)胞周期，主要受與細(xì)胞增殖有關(guān)的細(xì)胞外生長因子的調(diào)控，而不是營養(yǎng)素。只要有相應(yīng)的生長因子存在，細(xì)胞就能通過R點進(jìn)入S期，完成整個細(xì)胞周期。回到G0/1期。相反，如果細(xì)胞在G1期就缺乏相應(yīng)的生長因子，細(xì)胞周期的運行將停止在R點，此時細(xì)胞進(jìn)入“安靜狀態(tài)，稱之為G0期。第22頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月連接信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與細(xì)胞周期有兩條途徑，一是cyclin－D/CDK4，二是cyclinE/CDK2。二者都是G1期進(jìn)行的限速步驟，即cyclinD或cyclinE的過度表達(dá)，均能縮短G1期時間或加速G1期進(jìn)行第23頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月2、細(xì)胞周期的監(jiān)控機制

DNA損傷檢測點抑癌基因p53在人類細(xì)胞周期G1期檢測點起著關(guān)鍵性作用。還存在G2期檢測點。時相次序監(jiān)測點MPF(有絲分裂促進(jìn)因子)，可以誘導(dǎo)所有細(xì)胞周期時相的細(xì)胞核發(fā)生染色體凝集。SPF(S期促進(jìn)因子)，只能誘發(fā)G1期細(xì)胞進(jìn)入S期而不能使G2期細(xì)胞進(jìn)入M期。第24頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月六、細(xì)胞周期的界面機制1、細(xì)胞周期與DNA修復(fù)所有的真核細(xì)胞中都高度保守者這一整套完整的精密機制，承擔(dān)著DNA損傷、錯誤地發(fā)現(xiàn)，并將其信號傳遞給相應(yīng)的機制，，去阻滯細(xì)胞周期的運行，并同時進(jìn)行DNA損傷的修復(fù)。然后視修復(fù)情況，細(xì)胞基因的突變。決定繼續(xù)分裂或死亡，執(zhí)行一系列細(xì)胞的重要生命活動。DNA修復(fù)方式切除修復(fù)錯配修復(fù):將局部一段錯配的寡核苷酸鏈切除，重新合成之堿基切除修復(fù)核苷酸切除修復(fù)全基因組切除修復(fù)轉(zhuǎn)錄切除修復(fù)第25頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月2、細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡細(xì)胞凋亡存在有細(xì)胞周期特異性，不同因素誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡發(fā)生在細(xì)胞周期不同的時相3、細(xì)胞周期與細(xì)胞分化細(xì)胞周期不僅與細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡有關(guān)，還調(diào)控著細(xì)胞分化第26頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月第27頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月1、細(xì)胞周期與腫瘤的關(guān)系目前從多方面對腫瘤進(jìn)行了深入研究（流行病學(xué)、病因?qū)W、遺傳），腫瘤是多因素，多步驟，多階段的。但是腫瘤的惡性增生從生物學(xué)角度看，主要表現(xiàn)在兩方面：一是腫瘤細(xì)胞的不滅性，即細(xì)胞凋亡障礙；二是細(xì)胞增殖失控，程序發(fā)生紊亂，只是增殖超常加快。這兩方面均已成為腫瘤發(fā)生發(fā)展研究的熱點。通過研究發(fā)現(xiàn)了1.存在于正常細(xì)胞內(nèi)的原癌基因發(fā)生錯誤轉(zhuǎn)變?yōu)榘┗?.一些基因失活后正常細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榘┘?xì)胞—抑癌基因。經(jīng)過70年代的癌基因時代，80年代的抑癌基因時代90年代的多基因時代或癌基因蛋白網(wǎng)絡(luò)時代，提出了一系列的理論：腫瘤多步驟里論、DNA修復(fù)理論、細(xì)胞凋亡理論，進(jìn)一步闡明細(xì)胞周期核心機制、細(xì)胞周期啟動機制、細(xì)胞周期檢測點機制。七、腫瘤與細(xì)胞周期第28頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月2、

腫瘤細(xì)胞中細(xì)胞周期檢控機制的破壞細(xì)胞周期中檢測DNA損傷的檢測點至少有兩處：一處在G1-S過渡期：控制進(jìn)入S期的檢測點，防止DNA受損細(xì)胞進(jìn)入S期的DNA復(fù)制。另一處在G2-M過渡期：控制進(jìn)入M期的檢測點，防止受損的DNA和未完成復(fù)制的DNA進(jìn)入有絲分裂。這些DNA損傷檢測點的主要機制有二：一是p53依賴性機制，另一是p53非依賴性機制每一個完整的檢測點應(yīng)由四部分組成，即發(fā)現(xiàn)或傳感器（detect或sensor）、制動或拘留（stoporarrest）、修復(fù)（repair）、決定（decision，divideordeath）。理論上說監(jiān)測點的任何一部分出了問題，都會導(dǎo)致功能的異常，結(jié)果是遺傳不穩(wěn)定，基因受損的細(xì)胞存活和復(fù)制或細(xì)胞遺傳物質(zhì)的改變，如此細(xì)胞多步驟進(jìn)化，最終成為失控性生長的腫瘤細(xì)胞。第29頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月3、腫瘤細(xì)胞中細(xì)胞周期驅(qū)動機制的破壞細(xì)胞周期監(jiān)測點功能的減弱，導(dǎo)致突變基因的累積和正常細(xì)胞的進(jìn)化，只有當(dāng)這些累積的突變基因破壞了細(xì)胞周期驅(qū)動機制，細(xì)胞才能進(jìn)入失控性生長的境界。人們把細(xì)胞周期驅(qū)動機制比作一輛汽車或引擎，驅(qū)使其運行的因素好比“油門”；制動器運行的機制猶如“剎車”。持續(xù)地踏住“油門”或“剎車”失靈，終將失控。這正是致變因素導(dǎo)致基因突變，檢測點基因突變，突變基因累積，驅(qū)動機制失控的必然結(jié)果。腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中，監(jiān)控機制破壞的典型例子是P53基因的突變。大約50%的人類腫瘤都存在P53基因的突變，說明DNA損傷檢測點在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中，具有重要的位置。第30頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月From:BritishJ.Cancer87:129-133第31頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月1:222-231MutationofG1/Sregulatorsinhumancancer第32頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月八、常用的細(xì)胞周期檢測方法流式細(xì)胞術(shù)PI(碘化丙錠),可以與細(xì)胞內(nèi)DNA和RNA結(jié)合,采用RNA抑制劑將RNA消化后,通過流式細(xì)胞術(shù)檢測到的與DNA結(jié)合的PI的熒光強度直接反映了細(xì)胞內(nèi)DNA含量的多少。由于細(xì)胞周期各時相的DNA含量不同,因此,通過流式細(xì)胞術(shù)PI染色法對細(xì)胞內(nèi)DNA含量進(jìn)行檢測時,可以將細(xì)胞周期各時相區(qū)分為G1/G0期,S期和G2/M期,并可通過特殊軟件計算各時相的百分率:G1/G0期具有二倍體細(xì)胞的DNA含量(2N),G2/M期具有四倍體細(xì)胞的DNA含量(4N),S期的DNA含量介于二倍體和四倍體之間。值得注意的是,PI不能通過細(xì)胞膜完整的細(xì)胞(如活細(xì)胞和早期凋亡細(xì)胞),在標(biāo)本制備時,必須先用乙醇或其他破膜劑增強細(xì)胞膜的通透性,才能使PI進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)與細(xì)胞內(nèi)的核酸結(jié)合。乙醇通常為終濃度為70%的冷乙醇。第33頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月將腫瘤細(xì)胞以1×106接種于60mm培養(yǎng)板，80％匯合后傳代。24－72小時后用胰酶消化收集細(xì)胞，PBS洗兩遍，棄上清，加入70％預(yù)冷乙醇中，吹打均勻，4℃固定12小時以上。PBS洗滌去乙醇，1000rpm,5min，洗兩遍。0.5mlPBS重懸細(xì)胞，加入PI和

RNaseA至終濃度50μg/ml，37℃溫浴30min。用流式細(xì)胞儀測定周期。

PI：碘化丙啶，以PBS配成1mg/ml，4℃保存。

RNaseA：10mg/mlD、方法：第34頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月G2MG0G1s02004006008001000G0G1sG2MDNAAnalysisDNAcontentCount2N4NNormalCellCycle

PurdueUniversityCytometryLaboratories第35頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月G1SphaseG2MG1121DNAcontentTheCellCycleDNAcontentbyflowcytometryDeconvolutionintocellcyclephasesG0/1G2/MSEvents第36頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月MeasurementofsubG0/1apoptoticparticlesDNAcontentEventsEventsG0/1G2/MSApoptosis第37頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月4hr,control28hr,irradiatedG1:94.1%S:1.5%G2/M:4.4%G1:94.1%S:1.1%G2/M:4.8%G1:60.6%S:34.9%G2/M:4.5%G1:96.6%S:1.6%G2/M:1.8%10%1%90%4%28hr,control28hr,aphidicolin第38頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月Ohr6hr12hr18hr24hr93.5%86.5%58.5%21.0%2%Inductionofp21resultsinparallellossofNPATfoci,down-regulationofhistonegeneexpressionandinhibitionofSphaseentry(1)2hr4hr6hr8hr10hr12hr14hr24hr0hrG1:47.2%S:34.2%G2/M:18.7%G1:46.3%S:34.9%G2/M:18.8%G1:51.9%S:29.8%G2/M:18.4%G1:56.1%S:23.9%G2/M:20.1%G1:57.8%S:17.8%G2/M:24.5%G1:58.5%S:12.5%G2/M:29.0%G1:60.2%S:6.8%G2/M:33.0%G1:60.0%S:3.9%G2/M:36.1%G1:62.1%S:2.4%G2/M:35.5%B.A.第39頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月2、BrdU摻入法