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文檔簡介
豚鼠——制藥1001豚鼠學(xué)名Caviaporcellus,英文名GuineaPig屬哺乳動物綱、嚙齒目、豚鼠科、豚鼠屬。實驗豚鼠由野生豚鼠馴化而育成。
1780年,Laviser首次用豚鼠做熱原實試驗,之后在科學(xué)研究用動物中占有了突出地位。生物學(xué)特性一般特性:1、生長發(fā)育特征:身體短粗,頭大、
耳朵四肢短小,尾巴只有殘
跡,毛色多樣2、采食行為:草食性,需粗纖維,食量大3、居住習(xí)性:喜活動,愛群居,對外界刺
激敏感4、反應(yīng)能力:聽覺發(fā)達5、抗生素敏感性
:投藥易引起死亡,對
青霉素敏感性為小鼠的1000倍
生物學(xué)特性生理學(xué)特點:1、生殖特點:性成熟早、母鼠懷孕期長,胚胎在母體
發(fā)育完全2、生長發(fā)育:壽命4~5年,最長可達8年,生長發(fā)育快3、體溫調(diào)節(jié):自動調(diào)節(jié)體溫能力差,飼養(yǎng)最適溫度
18~22度4、營養(yǎng)特點:體內(nèi)不能合成維C,飼料中必須添加5、免疫學(xué)特點:易引起變態(tài)反應(yīng)品種和品系近交品系豚鼠目前世界上有12個。由于豚鼠妊娠期較長為68(62~72)天,一胎生得少,一般2~3只,培育一個近交品系需要20~30年,所以近交品系較少。用于醫(yī)學(xué)科研的近交品系純系2號和純系13號。
豚鼠在科學(xué)研究中的應(yīng)用
一、免疫學(xué)
血清中含有豐富的補體,是所有實驗動物中補體含量最多的一種動物,其補體非常穩(wěn)定,免疫學(xué)實驗中所用的補體多來源于豚鼠血清。
適合用于研究速發(fā)型過敏性呼吸道疾病。豚鼠遲發(fā)性超敏反應(yīng)與人類相似,如皮內(nèi)結(jié)核菌素試驗。
二、傳染病研究
豚鼠對多種病原體敏感,常用于病原的分離及診斷。(如豚鼠對結(jié)核桿菌有高度敏感性,感染后的病變酷似人類的進行性結(jié)核病變,是結(jié)核菌分離、鑒別、診斷和各種抗結(jié)核病藥物的篩選以及病理研究最佳動物。)
豚鼠在科學(xué)研究中的應(yīng)用三、藥物學(xué)
豚鼠妊娠期長,胎兒發(fā)育完全,幼鼠形態(tài)功能已成熟,適用于藥物或毒物對胎兒后期發(fā)育影響的試驗。
豚鼠對多種抗生素類藥物非常敏感,是研究抗生素如青霉素的專門動物。
四、營養(yǎng)學(xué)
豚鼠體內(nèi)不能合成維生素C,對其缺乏十分敏感,是研究實驗性壞血病和維生素C生理功能的理想動物模型和維生素C的生物學(xué)檢測的標準動物。豚鼠在科學(xué)研究中的應(yīng)用
五、耳科學(xué)
豚鼠耳殼大,存在明顯的聽覺耳動反射。耳窩對聲波極為敏感,特別是對
700~2000周/秒的純音最敏感。所以豚鼠常用于聽覺和內(nèi)耳疾病的研究。如噪聲對聽力的影響、耳毒性抗生素的研究等。
六、悉生學(xué)
由于可準確查知豚鼠剖腹產(chǎn)時間,幼仔發(fā)育完全,易成活,所以經(jīng)常用于悉生生物學(xué)的研究。
Titl豚鼠動物模型評價??谔阋逜sia-1型滅活疫苗效力的研究口蹄疫(foot-and-mouthdisease,F(xiàn)MD)是由口蹄疫病毒(foot-and-mouthdiseasevirus,F(xiàn)MDV)引起的一種急性熱性高度接觸性傳染病。對各國的畜牧業(yè)有著巨大的危害。目前,強制免疫口蹄疫滅活疫苗是我國用以防控口蹄疫疫病流行和暴發(fā)的主要手段。效力試驗是檢驗疫苗效力的標準化方法,我國用疫苗50%動物保護劑量(50%protectivedoses,PD50)法進行口蹄疫滅活疫苗的效力檢測。建立一種可替代本動物進行口蹄疫滅活疫苗效力檢驗的方法是國內(nèi)外亟待解決的一個問題。Titl豚鼠動物模型評價??谔阋逜sia-1型滅活疫苗效力的研究傳統(tǒng)方法動物來源不方便,需要大量的本動物,成本高,試驗周期長,勞動強度大??谔阋哐鍖W(xué)效力檢測替代方法體外中和抗原反應(yīng)與體內(nèi)免疫反應(yīng)存在差異抗體不能準確反應(yīng)免疫效果仍需使用非口蹄疫疫苗免疫本動物試驗動物替代方法豚鼠測定的PD50與牛的具有很好的相關(guān)性標準容易確定適合規(guī)?;B(yǎng)殖Titl豚鼠動物模型評價??谔阋逜sia-1型滅活疫苗效力的研究
豚鼠效力試驗血清學(xué)試驗綜合評價FMD滅活疫苗效力預(yù)實驗免疫劑量攻毒劑量選擇毒苗豚鼠,牛對6批疫苗進行PD50效力檢驗統(tǒng)計學(xué)分析(R=0.846,P=0.008)極具相關(guān)性Y=1.625x-0.704效力試驗:血清學(xué)試驗:微量細胞中和試驗測定第7,14,21,28天抗體效價抗體效價與免疫劑量正相關(guān)Titl豚鼠動物模型評價??谔阋逜sia-1型滅活疫苗效力的研究
建立模型細胞毒作為攻毒病毒(乳鼠毒攻擊時毒價不均一)預(yù)實驗豚鼠測毒(細胞毒)10^-3——10^-8GPID50為10^5.67/0.25ml1豚鼠免疫劑量1.5ml、1.0ml、0.5ml最適免疫劑量為1.00mlFMD滅活疫苗效力試驗鼠免疫攻毒試驗豚鼠PD50牛免疫攻毒試驗牛PD50線性回歸分析鼠血清學(xué)試驗免疫第7、14、21、28天測抗體效價抗體效價與抗原量呈正相關(guān)Titl豚鼠動物模型評價??谔阋逜sia-1型滅活疫苗效力的研究1、材料與方法1.1疫苗1.2病毒1.3實驗動物1.4豚鼠發(fā)病模型的建立8只分兩組,4只/組FMDV乳鼠毒,0.2mL/只FMDV細胞毒,0.2mL/只肢趾部皮內(nèi)注射觀察10d,記錄豚鼠人工感染后的臨床癥狀,仔細觀察2種病毒引起豚鼠發(fā)病的情況有無明顯差異Titl豚鼠動物模型評價??谔阋逜sia-1型滅活疫苗效力的研究1.5豚鼠測毒試驗(根據(jù)發(fā)病情況用Reed-muech法計算FMDV細胞毒對豚鼠的半數(shù)感染量GPID50)1.6豚鼠免疫劑量試驗共40只,十只/組,1組為對照,其它3組為免疫組對照1.5ml1.0ml0.5ml免疫劑量左后肢股內(nèi)肌肉注射,免疫28天10^3GPID50/0.2mL的FMD細胞毒(0.2ml/只)左后肢趾部皮內(nèi)注射觀察10d,根據(jù)免疫攻毒結(jié)果,確定最適免疫劑量Titl豚鼠動物模型評價??谔阋逜sia-1型滅活疫苗效力的研究1.7口蹄疫滅活疫苗效力試驗6批口蹄疫滅活疫苗豚鼠免疫攻毒試驗牛免疫攻毒試驗40只,10只/組,共4組A1.0mlB0.5mlC0.25mlD0.125ml免疫劑量28天后,連同5只對照用FMDV細胞毒攻毒2.0ml/只觀察10d,用Reed-munch法計算PD5015只,5只/組,共3組a2.0mlb0.67mlc0.22ml21天后,連同5只對照用牛用FMDV細胞毒攻毒2.0ml/只Ti蓄tl豚鼠則動物確模型撒評價腫牛口騾蹄疫As碑ia煮-1型滅姿活疫亦苗效僻力的蔬研究1.爪9豚鼠譽與牛PD建50線性偵回歸站模型錄的建另立豚鼠與牛Asia-1型PD50的測定結(jié)果SPSS軟件對二者進行相關(guān)性和回歸分析建立豚鼠PD50(x)預(yù)測牛PD50(y)的回歸分析方程:y=a+bxt檢驗和F檢驗對建立的線性回歸模型進行檢驗結(jié)果表明豚鼠PD50與牛PD50存在極顯著的線性關(guān)系Ti桐tl豚鼠芒動物塞模型且評價孤??趨⑻阋逜s撿ia盤-1型滅盲活疫治苗效戲力的閑研究1.融8豚鼠鳥血清捏學(xué)實岡驗7d14d21d28d免疫蓋時間每個免疫組隨機選取5只,對照組選2只,進行心臟采血分離血清中和實驗測定FMDV抗體效價抗體裙水平陜與免模疫劑惑量正懷相關(guān)Ti析tl豚鼠推動物裙模型堅評價再??跊鎏阋逜s電ia階-1型滅火活疫嫁苗效并力的圍研究2結(jié)果濾與分薯析2.1豚鼠發(fā)病模型建立FMDV乳鼠毒和細胞毒均全部出現(xiàn)規(guī)律、典型的臨床癥狀乳鼠毒癥狀更明顯,細胞毒更穩(wěn)定2.2豚鼠測毒試驗細胞毒的半數(shù)感染量10^(5.67)/0.2mL(表1)2.3豚鼠免疫劑量試驗1.00mL和1.50mL劑量組都能使豚鼠100%保護,1.00mL為豚鼠最適免疫劑量Ti毫tl豚鼠喬動物瓦模型招評價槳??诨钐阋逜s拒ia借-1型滅茫活疫鉤苗效只力的世研究2.4PD50效力試驗兩批疫苗的豚鼠重復(fù)試驗結(jié)果相差不大試驗具有較好的穩(wěn)定性和重復(fù)性2.5.1豚鼠血清學(xué)試驗第7天抗體出現(xiàn),第28天達到最高,對照組為陰性。2.5.2豚鼠抗體效價與攻毒保護率關(guān)系抗體水平與攻毒保護率成正比,但無明顯臨界值。Ti樂tl豚鼠鴿動物楊模型蓮評價來??谀咸阋逜s墊ia攀-1型滅緊活疫踢苗效哀力的前研究2.狐6口蹄打疫疫溫苗豚老鼠PD50與牛PD50相關(guān)呆性分涌析結(jié)果SPSS軟件進行相關(guān)性分析和回歸分析R=0.846,P=0.008豚鼠PD50與牛之間存在極顯著的正相關(guān)關(guān)系y=1.625x-0.704F檢驗結(jié)果和t檢驗結(jié)果一致結(jié)果表明豚鼠PD50與牛PD50存在極顯著的線性關(guān)系(夕y為牛PD皇50結(jié)果州,x為豚衡鼠PD叢50結(jié)果法)Ti螺tl豚鼠真動物挺模型修評價茄牛口倚蹄疫As煙ia同-1型滅巧活疫口苗效強力的使研究3討論豚鼠效力試驗血清學(xué)試驗綜合敵評價FM遠D滅活謠疫苗囑效力預(yù)實驗免疫劑量攻毒劑量選擇毒苗豚鼠,牛對6批疫苗進行PD50效力檢驗統(tǒng)計學(xué)分析(R=0.846,P=0.008)極具相關(guān)性Y=1.625x-0.704效力居試驗法:血清轎學(xué)試樣驗:微量細胞中和試驗測定第7,14,21,28天抗體效價抗體效價與免疫劑量正相關(guān)為什只么選耀擇替碑代動政物?因需助要大補量的非免蓬疫本動哲物,狂存在銹著動丑物來源牛困難,試診驗成本內(nèi)高,周期毯長等問須題為什貸么不譯用小佳鼠?上世輛紀80年代傍初,Su箭tm怎ol細le甘r等用坐小鼠誼作為奴模型咱動物質(zhì)分析肉免疫礙小鼠活的血嘆清抗津體滴拾度和秩牛抗采攻擊長病毒繡感染尿免疫桑力之濕間的故相互獻關(guān)系短。成它年BA懼LB壺/擋c小鼠怖對FM情DV敏感標,能舟產(chǎn)生嚴特異而性中判和抗似體,但不順能產(chǎn)艙生明項顯的造臨床氧癥狀煉,易趟產(chǎn)生滿耐過顧性;不超滴過5日齡講的乳啊鼠易捉產(chǎn)生FM漂D臨床舅癥狀蠻并發(fā)森生死祥亡。血清百學(xué)試盒驗不亡需要法在動編物舍送內(nèi)進座行有粉毒性浩的操膨作,勇減少授了病轟毒向蒸外界濕散播閥的危決險;不需圍要對拜動物宴進行矛攻毒衛(wèi),消雅除了炕攻毒陵試驗趟給動讓物帶美來的醋損害;還省科去了畜攻毒廟后的天觀察奶期,誦縮短重了試犁驗周奮期郊抗體企滴度農(nóng)測定才使試選驗從您定性(死亡祥或出剝現(xiàn)臨泥床癥棉狀)走向沃了定悄量,智排除錫了人硬為判震定誤拒差或峽試驗美動物阿健康熔狀況矛影響眾試驗檢結(jié)果;與攻殼毒程宅序相漂比,東血清渾學(xué)試煉驗可若以對策試驗蘋樣品雄進行爬保存擾,當嶄產(chǎn)品診上市桶出現(xiàn)增問題威或管栽理機廈構(gòu)要價對疫蔽苗進馬行復(fù)藥檢時債可應(yīng)誤用保它存的溉樣品跌進行雄重復(fù)兇試驗劉。為什孕么不鋸用血則清學(xué)垮檢驗份?1、有農(nóng)的動貓物有躲很高的線抗體哀梯度蹄,但乖攻毒典后仍述然發(fā)烘病;有的組動物題幾乎槽檢測圈不到暫抗體衣,但圍卻受訓(xùn)到了梳保護狹,這奏些現(xiàn)走象表禁明僅午靠抗進體水雪平衡槽量動蟻物是哲否被洗保護朱是欠歉妥的幸。2、測凝定與慶保護缺性反辱應(yīng)就斃不存席在相溪關(guān)性達,這包樣的賠體外現(xiàn)替代己方法貌很難北完全販替代坑本動慨物的狂效力采檢驗劇。3、由膽于不母同試感驗室訴所用囑的檢信測方醬法伯試劑律以及浮判斷標準等方暫面難以犬統(tǒng)一,以愿至這掠類研爬究結(jié)糟果應(yīng)孤用于瘦實際膨生產(chǎn)拖中存祝在困爺難4、另型外,敢檢測雅免疫扮血清槍抗體鄭效價葬須用盼非口碗蹄疫禾疫苗鍋免疫濾動物碧,無法灰從根鳴本上茶取代左本動冊物的嚼使用,動梅物的廳選擇字仍存肚在困躍難。替代欄試驗誤動物帥可以續(xù)模擬索疫苗塌免疫姐接種福后抗擇原在姨體內(nèi)歌通過克網(wǎng)狀列內(nèi)皮歷系統(tǒng)書呈遞性的過胖程盾、細凝胞介姑導(dǎo)的薄免疫臣反應(yīng)歉、冬疫苗討佐劑顯產(chǎn)生貓的效筐應(yīng)和尿靶組標織的損特異士性等嚷體外竭試驗椅無法叮測定倒的過近程。為什濫么用劣豚鼠慘?20世紀20年代練,研帶究發(fā)耕現(xiàn)豚強鼠感甲染口握蹄疫雖病毒港后具有濾和牛倆相似獲的臨富床癥再狀,在紋趾部飯和舌疫面出服現(xiàn)水櫻泡等春組織寸病變優(yōu),從驅(qū)此豚墾鼠成固為口開蹄疫倦病毒厘研究閉的一香種模讓型動羽物。病毒猴后能牙產(chǎn)生特異伴性的其體液肝免疫捕和細威胞免場疫。20疲04年,次郎洪立武用晶豚鼠第對口榮蹄疫絕病毒慎進行勿測毒巨試驗電,結(jié)霸果表鏡明口豎蹄疫剝病毒口可引瘦起豚潑鼠出現(xiàn)努規(guī)律舞性估典型良性發(fā)逆病。20氏08年,尚高旭昂東用嘉豚鼠棄模型料評價鉆??谶€蹄疫河滅活血疫苗獎的效猜力,
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