【摘要】目的研究用密封控溫技術(shù)制備薄荷油0口環(huán)糊精包合物的最佳工藝。方法以揮發(fā)油包合率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用正交試驗(yàn)法優(yōu)選最佳工藝條件。結(jié)果最佳的工藝條件為薄荷油與0口環(huán)糊精的比例為1：9,包合時(shí)間2h，包合溫度110°C。結(jié)論此方法可以用于制備薄荷油0-環(huán)糊精包合物?！娟P(guān)鍵詞】薄荷油；0口環(huán)糊精包合物；正交試驗(yàn)；密封控溫PreparationofInclusionCompoundofPennyroyal0-cyclodextrinbySealed-heatingAbstract:ObjectiveTostudytheoptimumconditionsforthepreparationofpennyroyalD0Dcyclodextrininclusioncompoundwiththesealedheatingmethod.MethodsTheinclusionrateofoilwasusedascriterioninthestudy.Theoptimumpreparationconditionswereinvestigatedbytheorthogonaldesign.ResultsTheoptimumprepartionconditionsforinclusionwereestablishedasfollows:oil:0Dcyclodextrinwas1:9.Theinclusiontimeandtemperaturewerefor2handat110C.ConclusionThemethodcanbeusedforpreparationoftheinclusioncompound.keywords:Pennyroyal;0Dcyclodextrininclusioncompound;Orthogonaltest;SealedCheating薄荷油（pennyroyal）為唇形科植物薄荷MenthahaplocalyxBriq.的新鮮莖葉經(jīng)水蒸氣蒸餾，再冷凍、部分脫腦加工得到的揮發(fā)油，為無色或淡黃色的澄清液體。為芳香藥、調(diào)味藥、驅(qū)風(fēng)藥［1］，是一種常用中藥，在中成藥制劑中廣泛應(yīng)用。為了防止其揮發(fā)，提高其穩(wěn)定性，使其粉末化以便于制備各種劑型，可將其制備成0-環(huán)糊精（0CCD）包合物。常用的包合技術(shù)有飽和水溶液法、研磨法、冷凍干燥法、噴霧干燥法等。文獻(xiàn)報(bào)道的薄荷油0-環(huán)糊精包合物的制備多采用飽和水溶液法［2,3］，本文采用的密封控溫技術(shù)［4,5］，是一種新型制備包合物的方法。目前，采用此技術(shù)制備薄荷油0-環(huán)糊精包合物在國(guó)內(nèi)尚無文獻(xiàn)報(bào)道。該技術(shù)的原理是將主、客分子密封于容器內(nèi)，通過控制加熱溫度和時(shí)間等因素，使客分子在一定溫度下?lián)]發(fā)或升華成為氣體分子進(jìn)入主分子空穴中與其相互結(jié)合，當(dāng)溫度降低后，客分子就以實(shí)體物質(zhì)形式借助分子間范德華力、氫鍵或鹽鍵等結(jié)合方式形成包合物。與其他包合方法相比，該技術(shù)制備包合物的特點(diǎn)為：①制備過程中不需加入任何溶劑，包合物中沒有溶媒殘留，后處理方便；②包合速度快，包合率高；③制備工藝簡(jiǎn)便；④對(duì)中藥揮發(fā)油或具有升華性質(zhì)的藥物采用該技術(shù)制備包合物有明顯的優(yōu)勢(shì)。本文使用該技術(shù)制備了薄荷油0□環(huán)糊精包合物并用正交實(shí)驗(yàn)法篩選了工藝條件，用薄層層析法對(duì)包合物進(jìn)行了鑒定。1儀器與試藥101C3型電熱鼓風(fēng)干燥箱（上海實(shí)驗(yàn)儀器廠有限公司）；揮發(fā)油測(cè)定儀（符合《中國(guó)藥典》2005年版要求）；0□環(huán)糊精（中國(guó)醫(yī)藥集團(tuán)上?；瘜W(xué)試劑公司）；薄荷油（中國(guó)榮光石油產(chǎn)品有限公司）；其他試劑均為分析純。2方法2.1包合物的制備根據(jù)正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，取一定量的0□環(huán)糊精和薄荷油，采用等量遞加法于研缽中研勻，裝入安甑中，熔封。控溫加熱規(guī)定時(shí)間，放冷至室溫，置冰箱冷藏過夜，取出安甑內(nèi)包合物，用無水乙醇和蒸餾水洗滌去除未包合的薄荷油和0□環(huán)糊精，置干燥器中干燥，即得薄荷油0□環(huán)糊精包合物。2.2包合物中薄荷油含量的測(cè)定稱取制備的包合物適量，置500ml圓底燒瓶中，加入蒸餾水200ml,按《中國(guó)藥典》2005年版附錄XD揮發(fā)油測(cè)定法項(xiàng)下甲法測(cè)定包合物中薄荷油的含量。2.3薄荷油的空白回收率測(cè)定精密量取薄荷油1.0ml,置500ml圓底燒瓶中，加入蒸餾水200ml,余同2.2項(xiàng)下操作，同法測(cè)定3次，按下式計(jì)算平均空白回收率為93.3%。空白回收率=回收的薄荷油量ml加入的薄荷油量mlx100%2.4包合率計(jì)算按下式計(jì)算出薄荷油包合率。包合率=包合物含油量ml投油量mlx空白回收率X100%2.5正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，以薄荷油與P-CD的比例、包合時(shí)間和包合溫度為考察因素，每個(gè)因素3個(gè)水平，按L9（34）正交表進(jìn)行正交設(shè)計(jì)，以包合率為考察指標(biāo)，對(duì)包合工藝進(jìn)行優(yōu)選。各因素水平見表1。表1因素水平（略）2.6包合物的薄層層析鑒別取制得的包合物0.5g，用95%乙醇2ml溶解、過濾，濾液作為供試品溶液（A）。取薄荷油2滴用95%乙醇2ml溶解作為對(duì)照品溶液（B）。另取包合物經(jīng)水蒸氣蒸餾提取的薄荷油2滴，用95%乙醇2ml溶解得樣品溶液（C）。取A、B、C點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-石油醚（15：85）為展開劑，放入展開槽中5min，再斜行展開。噴1%香莢蘭醛硫酸液顯色，烘干比較樣液A，B，C斑點(diǎn)的異同。3結(jié)果與討論3.1結(jié)果表明，影響薄荷油包合率的因素依次為A>B>C，主要影響因素為A，最佳工藝條件為A2B2C2，即：薄荷油與0-環(huán)糊精的比例為1：9（ml：g），包合時(shí)間為2h，包合溫度為110°C。對(duì)此最佳工藝進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，結(jié)果薄荷油包合率平均達(dá)82.4%（n=3），因此確定該工藝條件為最佳包合工藝條件。結(jié)果見表2?3。表2L9（34）正交表及實(shí)驗(yàn)結(jié)果（略）表3方差分析（略）3.2包合物的薄層層析鑒別結(jié)果表明，薄荷油0-CD包合物（A）在與薄荷油對(duì)照液（B）相對(duì)應(yīng)的位置未出現(xiàn)斑點(diǎn)，提示薄荷油經(jīng)包合后進(jìn)入了0-CD分子腔內(nèi)。包合物經(jīng)水蒸氣蒸餾提取的薄荷油（C）在與薄荷油對(duì)照液（B）相對(duì)應(yīng)的位置上呈現(xiàn)相同顏色的斑點(diǎn)，證明包合后揮發(fā)油的組分基本無變化。3.3由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見，當(dāng)0-環(huán)糊精用量增加到一定程度（1:9）時(shí)，再增加用量（1:10）包合率不再提高，包合時(shí)間也是如此，溫度太高亦不利于薄荷油的包合。長(zhǎng)時(shí)間高溫加熱，有可能使已經(jīng)被包合的薄荷油重新?lián)]發(fā)出來。3.4實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，密封控溫技術(shù)作為一種新型的包合技術(shù)，用于中藥揮發(fā)油的包合，方法簡(jiǎn)便易行，包合效果良好，有著良好的應(yīng)用前景?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】鄭漢臣，蔡少青.藥用植物學(xué)與生藥學(xué)，第4版[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2003：383.覃柳娟，莫少紅，陳曉軍.薄荷油0-環(huán)糊精包合物的制備研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2003,14（6）：348.張幸生.薄荷油0-環(huán)糊精包合物的制備工藝研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2005,16（12）：1270.[4]OguchiT，KojimaK，WatanabeD，eta1.Preparationofinclusioncomplexesof1-adamantano1with heptakis-(2,6-di-O-methy1)-0-cyclodextrin bysealed-heating[J].Yakuzaigaku,1996,56(2)：92.[5]NakaiY,YamamotoK,TeradaK,eta1.Newmethodsforpreparingcyclodextrininc