江西環(huán)境工程職業(yè)學(xué)院教案〔課程單元設(shè)計(jì)〕學(xué)時(shí)授課班級(jí)授課時(shí)間月日月日月日月日月日月日星期星期星期星期星期星期節(jié)次節(jié)次節(jié)次節(jié)次節(jié)次節(jié)次授課地點(diǎn)教室+實(shí)訓(xùn)室教學(xué)課題〔單元模塊〕工程五環(huán)境水體中痕量阿特拉津的測(cè)定任務(wù)4環(huán)境水體中痕量多環(huán)芳烴的測(cè)定教學(xué)目標(biāo)〔教學(xué)目的的具體化〕一、知識(shí)目標(biāo)：高效液相色譜法的綜合知識(shí)二、能力目標(biāo)：能自主設(shè)計(jì)方案，并用液相色譜法對(duì)環(huán)境水體中痕量多環(huán)芳烴進(jìn)行測(cè)定，對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析三、其他目標(biāo)：訓(xùn)練學(xué)生運(yùn)用理論知識(shí)分析問(wèn)題的能力，訓(xùn)練學(xué)生具有團(tuán)隊(duì)協(xié)作的能力，訓(xùn)練學(xué)生舉一反三、自主學(xué)習(xí)的能力教學(xué)重點(diǎn)與難點(diǎn)一、重點(diǎn)：多環(huán)芳烴含量的測(cè)定二、難點(diǎn)：方案的制定教學(xué)內(nèi)容及教學(xué)組織教學(xué)內(nèi)容：方案的制定與討論；方案確定與展示；實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證與結(jié)果討論；存在的問(wèn)題及解決方案教學(xué)組織：本學(xué)習(xí)任務(wù)的教學(xué)理論與實(shí)訓(xùn)一體化，以任務(wù)“環(huán)境水體中痕量多環(huán)芳烴的測(cè)定〃來(lái)驅(qū)動(dòng)，通過(guò)任務(wù)布置f明確任務(wù)f完成任務(wù)f任務(wù)評(píng)價(jià)的四步教學(xué)法，完成方案的制定與展示，以及通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證的全過(guò)程。教學(xué)方法與手段教學(xué)方法：?jiǎn)l(fā)式教學(xué)法，任務(wù)驅(qū)動(dòng)法教學(xué)手段：多媒體課件、操作演示、學(xué)生實(shí)訓(xùn)技能訓(xùn)練工程環(huán)境水體中痕量多環(huán)芳烴的測(cè)定作業(yè)完成設(shè)計(jì)方案及實(shí)訓(xùn)報(bào)告工程五環(huán)境水體中痕量阿特拉津的測(cè)定任務(wù)4環(huán)境水體中痕量多環(huán)芳烴的測(cè)定☆任務(wù)布置本次的教學(xué)任務(wù)是環(huán)境水體中痕量多環(huán)芳烴的測(cè)定，每個(gè)小組需制定一個(gè)方案，并通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證。☆明確任務(wù)一、方案的制定與討論學(xué)生明白了任務(wù)要求后，小組成員進(jìn)行分工，并在課余時(shí)間利用圖書(shū)館、網(wǎng)絡(luò)等資源進(jìn)行資料的查閱和搜集。然后每個(gè)小組進(jìn)行資料匯總，最終形成小組初步的方案，并制作成PPT以便進(jìn)行匯報(bào)展示。二、方案展示與知識(shí)講解（一）方案展示通過(guò)方案展示〔PPT〕，考核各小組準(zhǔn)備情況，每個(gè)小組由教師指定一位同學(xué)進(jìn)行方案展示，教師及其他同學(xué)對(duì)該小組進(jìn)行提問(wèn)，并將重點(diǎn)知識(shí)穿插在提問(wèn)中講解清楚。如何配置多環(huán)芳烴標(biāo)準(zhǔn)系列溶液？用什么方法測(cè)定多環(huán)芳烴的含量？實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要注意的事項(xiàng)？水樣的測(cè)定是怎樣一個(gè)過(guò)程？如何進(jìn)行數(shù)據(jù)處理？〔二〕知識(shí)講解水質(zhì)多環(huán)芳烴的測(cè)定液液萃取和固相萃取高效液相色譜法〔HJ478-2021〕2、適用范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測(cè)定水中十六種多環(huán)芳烴的液液萃取和固相萃取高效液相色譜法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于飲用水、地下水、地表水、海水、工業(yè)廢水及生活污水中十六種多環(huán)芳烴的測(cè)定。十六種多環(huán)芳烴〔PAHs〕包括：萘、苊、二氫苊、芴、菲、蒽、熒蒽、芘、苯并［a］蒽、苴屈、苯并［b］熒蒽、苯并［k］熒蒽、苯并［a］芘、茚并［1,2,3-cd］芘、二苯并［a,h］蒽、苯并［ghi］花。液液萃取法適用于飲用水、地下水、地表水、工業(yè)廢水及生活污水中多環(huán)芳烴的測(cè)定。當(dāng)萃取樣品體積為1L時(shí)，方法的檢出限為0.002?0.016Hg/L,測(cè)定下限為0.008?0.064ug/L,詳見(jiàn)表A.1。萃取樣品體積為2L,濃縮樣品至0.1ml,苯并［a］芘的檢出限為0.0004ug/L,測(cè)定下限為0.0016ug/L。固相萃取法適用于清潔水樣中多環(huán)芳烴的測(cè)定。當(dāng)富集樣品的體積為10L時(shí)，方法的檢出限為0.0004?0.0016ug/L,測(cè)定下限為0.0016?0.0064ug/L。3、方法原理〔1〕液液萃取法用正己烷或二氯甲烷萃取水中多環(huán)芳烴〔PAHs〕，萃取液經(jīng)硅膠或弗羅里硅土柱凈化,用二氯甲烷和正己烷的混合溶劑洗脫,洗脫液濃縮后,用具有熒光/紫外檢測(cè)器的高效液相色譜儀別離檢測(cè)。〔2〕固相萃取法采用固相萃取技術(shù)富集水中多環(huán)芳烴〔PAHs〕，用二氯甲烷洗脫,洗脫液濃縮后,用具有熒光/紫外檢測(cè)器的高效液相色譜儀別離檢測(cè)。4、樣品預(yù)處理〔1〕液液萃?、佥腿。簱u勻水樣，量取1000ml水樣〔萃取所用水樣體積根據(jù)水質(zhì)情況可適當(dāng)增減〕，倒入2000ml的分液漏斗中，參加50ul十氟聯(lián)苯，參加30g氯化鈉，再參加50ml二氯甲烷或正己烷，振搖5min,靜置分層，收集有機(jī)相，放入250ml接收瓶中,重復(fù)萃取兩遍,合并有機(jī)相,參加無(wú)水硫酸鈉至有流動(dòng)的無(wú)水硫酸鈉存在。放置30min,脫水枯燥。②濃縮：用濃縮裝置濃縮至1ml,待凈化。如萃取液為二氯甲烷，濃縮至1ml,參加適量正己烷至5ml,重復(fù)此濃縮過(guò)程3次，最后濃縮至1ml,待凈化。③凈化飲用水和地下水的萃取液可不經(jīng)過(guò)柱凈化,轉(zhuǎn)換溶劑至0.5ml直接進(jìn)行HPLC分析。地表水和其他萃取液的凈化：用1g硅膠柱或弗羅里硅土柱作為凈化柱，將其固定在液液萃取凈化裝置上。先用4ml淋洗液沖洗凈化柱，再用10ml正己烷平衡凈化柱〔當(dāng)2ml正己烷流過(guò)凈化柱后，關(guān)閉活塞，使正己烷在柱中停留5min〕。將濃縮后的樣品溶液加到柱上，再用約3ml正己烷分3次洗滌裝樣品的容器，將洗滌液一并加到柱上，棄去流出的溶劑。被測(cè)定的樣品吸附于柱上，用10ml二氯甲烷/正己烷〔1+1〕洗滌吸附有樣品的凈化柱，收集洗脫液于濃縮瓶中〔當(dāng)2ml洗脫液流過(guò)凈化柱后關(guān)閉活塞，讓洗脫液在柱中停留5min〕。濃縮至0.5?1.0ml,參加3ml乙腈，再濃縮至0.5ml以下，最后準(zhǔn)確定容到0.5ml待測(cè)。注1：在萃取過(guò)程中出現(xiàn)乳化現(xiàn)象時(shí)，可采用攪動(dòng)、離心、用玻璃棉過(guò)濾等方法破乳，也可采用冷凍的方法破乳。注2：在樣品分析時(shí)，假設(shè)預(yù)處理過(guò)程中溶劑轉(zhuǎn)換不完全〔即有殘存正己烷或二氯甲烷〕，會(huì)出現(xiàn)保存時(shí)間漂移、峰變寬或雙峰的現(xiàn)象。〔2〕固相萃?、賹⒐滔噍腿18柱安裝在自動(dòng)固相萃取儀上。②活化柱子：先用10ml二氯甲烷預(yù)洗C18柱，使溶劑流凈。接著用10ml甲醇分兩次活化C18柱，再用10ml水分兩次活化C18柱，在活化過(guò)程中，不要讓柱子流干。③樣品的富集：在1000ml水樣〔富集所用水樣體積根據(jù)水質(zhì)情況可適當(dāng)增減〕中參加5g氯化鈉和10ml甲醇，參加50ul十氟聯(lián)苯，混合均勻后以5ml/min的流速流過(guò)已活化好的C18柱。④枯燥：用10ml水沖洗C18柱后，真空抽濾10min或用高純氮?dú)獯礐18柱10min,使柱枯燥。⑤洗脫：用5ml二氯甲烷洗脫浸泡C18柱，停留5min后，再用5ml二氯甲烷以2ml/min的速度洗脫C18柱，收集洗脫液。⑥脫水：先用10ml二氯甲烷預(yù)洗枯燥柱，參加洗脫液后，再加2ml二氯甲烷洗柱，用濃縮瓶收集流出液。濃縮至0.5?1.0ml,參加3ml乙腈，再濃縮至0.5ml以下，最后準(zhǔn)確定容到0.5ml待測(cè)。5、色譜條件

［1）色譜條件I梯度洗脫程序：65%乙懵+35%水，保持27min；以2.5%乙懵/min的增量至100%乙懵，保持至出峰完畢。流動(dòng)相流量：L2ml/mino［2）色譜條件II梯度洗脫程序：80%甲醇+2021,保持2021in；以1.2%甲醇/min的增量至95%甲醇+5%水，保持至出峰完畢。流動(dòng)相流量：L0ml/mino［3）檢測(cè)器紫外檢測(cè)器的波長(zhǎng)：254nm＞22021m和295nmo6、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制11）標(biāo)準(zhǔn)系列的制備取一定量多環(huán)芳燃標(biāo)準(zhǔn)使用液和十氟聯(lián)苯標(biāo)準(zhǔn)使用液0于乙懵中，制備至少5個(gè)濃度點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)系列，多環(huán)芳燃質(zhì)量濃度分別為0.1、0.5、1.0、5.0、10.0ug/ml,貯存在棕色小瓶中，于冷暗處存放。12）初始標(biāo)準(zhǔn)曲線通過(guò)自動(dòng)進(jìn)樣器或樣品定量環(huán)分別移取5種濃度的標(biāo)準(zhǔn)使用液10uL注入液相色譜，得到各不同濃度的多環(huán)芳煌的色譜圖。以峰高或峰面積為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)＞0.999,否那么重新繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。13）標(biāo)準(zhǔn)樣品的色譜圖不同填料的色譜柱，化合物出峰的順序有所不同。下列圖為在本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的色譜條件I下，兩種不同檢測(cè)器串聯(lián)的十六種多LUFLD1A.、=280ora.JTMnm45FLD1LUFLD1A.、=280ora.JTMnm45FLD1C.iwi-工皿=44口nm加 13ID15 20 253D35 40口皿1-聚：3-痂；4一二期苗:5-菲：＜5-.fi:7一十冢聯(lián)苯：熒魚(yú)＜9-俄二加一篇:11一莘并同此1A茶芹同黃森】3一羊并［k］莢慈：14一茶并向花：15—二蕭井瓦可蕙：環(huán)芳煌標(biāo)準(zhǔn)色譜圖。L6茉= 17前井［1/3rd］花環(huán)芳煌標(biāo)準(zhǔn)色譜圖。圖16種多環(huán)芳烴標(biāo)樣的紫外譜圖〔4〕連續(xù)校準(zhǔn)每個(gè)工作日應(yīng)測(cè)定曲線中間點(diǎn)溶液，來(lái)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線。7、樣品的測(cè)定取10口1待測(cè)樣品注入高效液相色譜儀中。記錄色譜峰的保存時(shí)間和峰高〔或峰面積〕。8、空白試驗(yàn)在分析樣品的同時(shí)，應(yīng)做空白試驗(yàn)，即用蒸餾水代替水樣，按與樣品測(cè)定相同步驟分析，檢查分析過(guò)程中是否有污染?！踩辰涣髟u(píng)價(jià)與修正方案學(xué)生代表發(fā)言、評(píng)價(jià)各組根據(jù)其他組和老師的評(píng)價(jià)進(jìn)行修改通過(guò)修改，各組的方案有了進(jìn)一步的完善，已經(jīng)根本具備了實(shí)施的可行性?？纱_定為最終的方案?！钔瓿?/p>