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乳酸菌多元化應(yīng)用趨勢(shì)第一頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六2012年12月11日星期二2報(bào)告大綱前言1

乳酸菌生理及生態(tài)23乳酸菌應(yīng)用與在機(jī)制4乳酸菌產(chǎn)品發(fā)展趨勢(shì)第二頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六2012年12月11日星期二3乳酸菌(Lacticacidbacteria,LAB)的發(fā)現(xiàn)「乳酸菌之父」梅基尼可夫(IlyaIlyichMechnikov,1845-1916),研究延長(zhǎng)壽命性質(zhì)的乳酸菌他到保加利亞旅游時(shí),發(fā)現(xiàn)當(dāng)?shù)赜性S多超過(guò)百歲的人瑞,于是便開(kāi)始探討當(dāng)?shù)厝碎L(zhǎng)壽的原因。當(dāng)?shù)厝巳鸬娘嬍持?,梅基尼可夫發(fā)現(xiàn)他們有每日飲用「酸乳」的習(xí)慣,而酸乳的效用,其關(guān)鍵便在于酸乳中所含的乳酸菌。日本科學(xué)家代田稔MinoruShirota研究細(xì)菌和良好的腸道健康,一個(gè)平衡腸道細(xì)菌關(guān)鍵人的健康幸福摘錄:國(guó)科會(huì)出生5月16日,1845

死亡7月16日1916年(71歲)

微生物學(xué)家敖德薩大學(xué),哈爾科夫大學(xué)諾貝爾醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)(1908)第三頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六目前已發(fā)現(xiàn)的乳酸菌:共有24屬、381種(至2009/12止)本頁(yè)資料來(lái)自第四頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六2012年12月11日星期二5乳酸菌(Lacticacidbacteria,LAB)特性「乳酸菌」是指能夠代謝糖類(lèi)、產(chǎn)生50%以上乳酸之細(xì)菌,具有這些功能的細(xì)菌人類(lèi)飲用撥酵乳品歷史非常悠久,所以,乳酸菌一直被認(rèn)為是非常安全的菌種(GRAS,generallyreyardedassafe),是最具代表性的腸內(nèi)有益菌。目前普遍認(rèn)為的乳酸菌已由早期的四個(gè)屬(genus)再細(xì)分及擴(kuò)充為24屬、381種(species)(至2003年8月止)。包括了:乳酸桿菌屬(Lactobacillus),腸球菌屬(Enterococcus),雙歧桿菌屬(Bifidobacterium),鏈球菌屬(Streptococcus)等,皆屬于乳酸菌。Source:臺(tái)灣乳酸菌協(xié)會(huì)第五頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六2012年12月11日星期二6乳酸球菌屬Lactococcus雙歧桿菌屬Bifidobacterium鏈球菌屬Streptococcus乳酸桿菌屬LactobacillusGram-positivenon-sporeformingcocci,coccobacilliorrodsaDNAbasecompositionoflessthan53mol%G+C.nonrespiratoryandlackcatalase.Theypossesssuperoxidedismutaseandhavealternativemeanstodetoxifyperoxideradicalsthroughperoxidaseenzymes.AllLABgrowanaerobically,butinthepresenceofO2as"aerotolerantanaerobes".theyobtainenergyonlyfromthemetabolismofsugarsandfermenttolacticacid,ortolacticacid,CO2andethanol.LABhavelimitedbiosyntheticabilityandmustbecultivatedincomplexmediathatfulfillalltheirnutritionalrequirements.Mostarefree-livingorliveinbeneficialorharmlessassociationswithanimals,althoughsomeareopportunisticpathogens.Theyarenormalfloraofhumansintheoralcavity,theintestinaltractandthevagina,wheretheyplayabeneficialrole.

乳酸菌生理特性第六頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六Differentialcharacteristicsoflacticacidbacteria第七頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六Thepathwayof

homolacticacidfermentationThepathwayofheterolacticacidfermentation乳酸菌利用無(wú)機(jī)氮源合成氨基酸的能力十分有限。因此,他們依賴(lài)預(yù)制氨基酸作為氮源生長(zhǎng)介質(zhì)中。氨基酸的要求不同物種間和物種內(nèi)的菌株。一些菌株prototrophic對(duì)于大多數(shù)氨基酸,有些則可能需要13-15個(gè)氨基酸。由于在他們的環(huán)境中自由氨基酸的數(shù)量不足以支持細(xì)菌的生長(zhǎng),細(xì)胞密度高,他們需要一種蛋白水解系統(tǒng),能水解多肽和蛋白質(zhì),以獲得必需的氨基酸。第八頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六Figure10.FermentationsinbacteriathatproceedthroughtheEmbden-Meyerhofpathway.1.HomolacticFermentation2.MixedAcidFermentations2a.ButanediolFermentation.3.ButyricacidfermentationsPropionicacidfermentation第九頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六GenomeatlasofthechromosomeofL.lactisMG1363.ifr.ac.uk12enzymescalledaminotransferases,usedtobreakdowncomplex,branched,ring-shaped,andsulfur-containingaminoacids.Theyareveryimportantforcheeseflavor.Understandingwhichaminoacidsarebrokendownbywhichenzymescouldgivecheesemakersgreatercontroloverflavorandfragranceoftheirfromage.

Thesequencealsoledtotheidentificationof29genesthatarerequiredtobuildthemesh-likepeptidoglycancomponentofthebacterium'scellwall.Inducingsomeoftheseenzymescanacceleratetheslow,expensiveprocessofcheeseripening,duringwhichthecheeseagesanddevelopsitscharacteristicflavor.Learninghowtoselectivelyactivatesomeoftheseenzymescouldrevolutionizethecheesemanufacturingprocess.TheLactococcuslactisssp.lactisgenomehas2,365,589units(bp)ofDNA2,310predictedgenes.64%ofthegeneshaveassignedrolesinthecell,20%matchotherhypotheticalgeneswithunknownfunction.16%ofthegenesareconsideredtobeuniquetothisbacterium第十頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六產(chǎn)品中常見(jiàn)之乳酸菌菌株第十一頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六Afew乳酸菌arepathogenicgenusStreptococcus.Inhumans,Streptococcuspyogenesisamajorcauseofdisease(strepthroat,pneumonia,andotherpyogenicinfections,scarletfeverandothertoxemias鏈球菌性喉炎、猩紅熱、風(fēng)濕熱.Streptococcuspneumoniae肺炎鏈球菌causes大葉性肺炎,中耳炎和腦膜炎口腔鏈球菌造成齲齒引發(fā)心內(nèi)膜炎.第十二頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六2012年12月11日星期二13乳酸菌是最具代表性的腸內(nèi)有益菌Numerically,humansare90%microbial.Gastrointestinalfloracontain:104-1012bacteria/gofcontents500-1000species>3milliongenes/hmp/MicrofloraoftheSkinandNoseMicrofloraoftheThroatTeethBiofilm人體的微生物叢第十三頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六2012年12月11日星期二14腸胃道菌群/images/Amino%20Acids2.jpg第十四頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六ImportantfunctionsoftheGastro-intestinalmicrofloraDigestionandabsorptionofnutrients

MetabolismofxenobioticsandendogenoustoxinsDirectinhibitionofpathogens

Epithelialfunction

Actionontheimmunesystemwithingut資料引用:Gastro-intestinalmicrofloraanditsinfluenceonthehostPublishedon:11/13/2007Author:MichaelaMohnl-BIOMIN第十五頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六BacterialgeneraandtheinfluenceonthehostEubiosis(balancedflora)Dysbiosis(imbalancedflora)

MainFloraSatelliteFloraResidualFlora(>90%)(<1%)

(<0.01%)BeneficialPathogenic

BacteroidaceaePeptostreptococcusEubacteriumPropionibacteriumLactobacillusBifidobacterium109–1010/gE.coliEnterococcusStaphylococcusPseudomonas105–108/gE.coliEnteropathogenProteusBacterioidesfragilisSerpulina/BrachyspiraSalmonellaCampylobacterYersiniaCandida<104/gLacticacidandvolatilefattyacidproducingbacteriaDiseasecausinginfections,toxins,celldamageetcToxins資料來(lái)源:Gastro-intestinalmicrofloraanditsinfluenceonthehostPublishedon:11/13/2007Author:MichaelaMohnl-BIOMIN第十六頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六Eubiosisvs.Dysbiosis“Good"coexistanceofhostandmicroflorasymbiosisProtectionoftheintestinalmucousmembraneagainstinvadingmicroorganismsAntagonisticeffectonundesiredmicroorganismsContributiontomaturationandstimulationofhost'simmunesystemNutrientdigestionVitaminsynthesesProteinsynthesesEubiosis“Bad"coexistanceofhostandmicrofloraDamagetotheintestinalepithelium.Gutwallthickening>reducedresorptionofnutrientsToxicmetabolicsubstances(NH3,bio-geneamines,toxins)Decomposition,increasedgasproduction(CH4,H2S,CO2)WeakeningofimmunesystemImmunereaction>increasedneedofenergyAccelerationofcellturn-over>increasedneedofenergyDysbiosis資料引用:Gastro-intestinalmicrofloraanditsinfluenceonthehostPublishedon:11/13/2007Author:MichaelaMohnl-BIOMIN第十七頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六PossiblereasonswhyeubiosisturnsintodysbiosisSubstantialdietarychangesLow-qualityfeedcomponentsInadequatefeedhygieneFeedTransportationOvercrowdingClimateDiseaseVaccinationetcStressWhenyoufeedtheanimalyoufeedalsothemicrofloraInfluencesdigestivesecretionsandperistalsis資料引用:Gastro-intestinalmicrofloraanditsinfluenceonthehostPublishedon:11/13/2007Author:MichaelaMohnl-BIOMIN第十八頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六1.整腸作用,降低腸pH-可使腸道維持偏酸環(huán)境,促進(jìn)腸道蠕動(dòng),防止便秘、宿便,另外還可防止 有害菌在腸道增生及分泌毒素2.促進(jìn)消化吸收- 可增加了維持生活素B群的合成,可幫助鈣、鐵的吸收,預(yù)防骨質(zhì)疏松。3.可控制膽固醇及降血壓-作用機(jī)轉(zhuǎn)可能是降低腸道的吸收作用、促進(jìn)肝臟排出以及抑制體內(nèi)合 成。angiotensinconvereingenzyme(ACE)4.降低腸道癌病變的概率-研究顯示乳酸菌可藉由其細(xì)胞壁上的多醣成分,強(qiáng)烈吸附腸內(nèi)這些有 害的致癌突變性物質(zhì),并加速排出這些毒素,降低大腸癌的發(fā)生概率。5.強(qiáng)化免疫系統(tǒng)- 可活化腸道部位的巨噬細(xì)胞及淋巴細(xì)胞產(chǎn)生,使免疫球蛋白IGA的厚度 提高,以抑制腫瘤細(xì)胞形成。6.抗氧化、抗老化- 乳酸菌能清理自由基,并藉由改善便秘以解決宿便問(wèn)題,進(jìn)而避免體內(nèi) 毒素的積累,使腸道功能維持在健康正常的狀態(tài)7.改善乳糖不耐癥的代謝障-可分泌乳糖酵素將腸內(nèi)乳糖代謝分解, 對(duì)乳糖不耐癥患者有改善作用8.降低過(guò)敏反應(yīng)- 經(jīng)由調(diào)節(jié)人體免疫反應(yīng),有效緩解花粉癥、 異位性皮膚炎等過(guò)敏性疾病

.hk/resource/health/probiotics.jpg乳酸菌機(jī)能對(duì)胃腸道的益處:第十九頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六第二十頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六第二十一頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六第二十二頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六第二十三頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六可控制膽固醇及降血壓第二十四頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六第二十五頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六第二十六頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六第二十七頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六第二十八頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六第二十九頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六InMRSbrothcontaining,B.longumSPM1207havethehighestcholesterol-reducingactivities.Onaverage,Bifidobacteriumshowedhighercholesterol-reducingactivitiesthanLactobacillus.invitrocholesterol-lowingtest第三十頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六Experimentalanimalsanddiets24Spargue-Dawleyrats,5weeksoldTempature:22±2℃12light/darkcycleHumidity:55±5%Group1Group2Group3NormaldietHigh-cholesteroldiet+salineHigh-cholesteroldiet+B.longumSPM12078rats8rats8rats第三十一頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六+++Fig2EffectofBlongumSPM1207onfecalwatercontent.TryptophanaseactivityUreaseactivityBlongumSPM1207inhibitedtryptophanaseandureaseactivitiessignificantly.Fig5.

invivoinhibitoryeffectsofB.longumSPM1207onfecalharmfulenzymesinratsfedonhigh-cholesteroldiet.Fig3Changesinbodyweightfedexperimentaldietsfor3weeks降低腸管吸收。促進(jìn)肝臟排出,以及抑制體內(nèi)合成等。撥酵乳中的某些peptide會(huì)抑制angiotensinconvereingenzyme(ACE)而使血壓降低.第三十二頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六68位受試者(21-65yrs)隨機(jī)分成三組,每天100gyogurtA組:LactobacillusSN35N95%B組:LactobacillusSN13T98%C組:LactococcusA686.1%第三十三頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六第三十四頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六LAB降膽固醇機(jī)轉(zhuǎn)Lacticacidbacteriainhibitcholesterolsynthesisenzymesandthusreducecholesterolproduction.ThebacteriafacilitatetheeliminationofcholesterolinfecesThebacteriainhibittheabsorptionofcholesterolbackintothebodybybindingwithcholesterolThebacteriainterferewiththerecyclingofbilesaltandfacilitateitselimination第三十五頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六乳酸菌細(xì)菌素的抑制圖譜(PaulRossandColinHilletal.,1998)Lacticin3147乳酸菌素抑菌作用

乳酸菌素是在乳酸菌代謝過(guò)程中合成并分泌到環(huán)境中的一類(lèi)對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌(尤其是親緣性較近的細(xì)菌)具有抑制作用的殺菌蛋白或多肽。而具有殺菌活性的主要是Lantibiotics類(lèi)和大分子熱不穩(wěn)定蛋白(LHLP)乳酸菌素。可有效的抑制革蘭氏陽(yáng)性菌如一些腐敗菌、致病菌和芽孢菌,而對(duì)革蘭氏陰性菌起的作用不大,甚至不起作用。乳酸菌素作用的是細(xì)菌膜。不同的乳酸菌素由于結(jié)構(gòu)不同,其活性和對(duì)細(xì)胞膜的作用方式也不同。第三十六頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六(PaulRossandColinHilletal.,1998)第三十七頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六乳酸菌素高穩(wěn)定性:耐酸、耐高溫。世界衛(wèi)生組織與美國(guó)食品藥物管理局唯一認(rèn)可為相當(dāng)安全的天然食品抑菌劑,耐酸、耐高溫。低穩(wěn)定性:

pH中性與鹼性環(huán)境會(huì)限制其活性膜滲透性:具抗微生物活性,需膜分子(lipidII)

種類(lèi):NisinA,NisinZ,andNisinQ.ClassIIbacteriocins

帶正電荷的小分子蛋白(30~60個(gè)氨基酸殘基)熱穩(wěn)定、高等電點(diǎn)、親水特性不可逆的殺菌作用,在食品中穩(wěn)定、可在人體內(nèi)進(jìn)行生物降解和消化,對(duì)健康無(wú)害且在低厚度下具有活性,可用以控制食品中的某些腐敗菌和病原菌Nisin第三十八頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六

Membrane-permeabilizingactivity.

FIG.3.EffectsofvancomycinondisruptionofthemembranepotentialofBacilluscoagulansJCM2257TcausedbyLnqQ(A)andnisinA(B)第三十九頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六制藥業(yè):藥品保健食品業(yè):健康食品、保健食品、飲料等乳品業(yè):牛奶、優(yōu)酪乳、乾酪等休閑食品業(yè):餅乾、口香糖、谷類(lèi)產(chǎn)品等面包業(yè):乳化劑、菌元飼料業(yè):動(dòng)物用保健產(chǎn)品化妝業(yè):皮膚及身體保養(yǎng)品全球益生菌市場(chǎng):2008:

167.4億美元2010:

預(yù)估達(dá)201.1億美元,增長(zhǎng)率20%食品型態(tài):90%應(yīng)用在乳品,市場(chǎng)集中于歐洲和日本。非食品型態(tài):益生菌膳食補(bǔ)充品市場(chǎng)規(guī)模達(dá)15億美元(占全球680億美元膳食補(bǔ)充品之2.2%),市場(chǎng)集中于亞太、北美及歐洲等。各地區(qū)增長(zhǎng)率(5~25%)遠(yuǎn)高于整體膳食補(bǔ)充品5%之增長(zhǎng)率,發(fā)展力道強(qiáng)勁。資料來(lái)源:食品所ITIS計(jì)劃匯整,2009乳酸菌的應(yīng)用領(lǐng)域及市場(chǎng)第四十頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六2010年,四川?。保担叭f(wàn)噸,產(chǎn)值達(dá)120億元,同比分別增長(zhǎng)25%和277%,居全國(guó)第一2010年,四川全省泡菜加工原料基地規(guī)模達(dá)100萬(wàn)畝以上,帶動(dòng)150多萬(wàn)農(nóng)民人均增收700元。目前,眉山市擁有泡菜加工龍頭企業(yè)60多家,其中年銷(xiāo)售收入上億元的企業(yè)10家,培育了一批國(guó)家級(jí)和省級(jí)農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)化龍頭企業(yè)。今年上半年,四川省泡菜產(chǎn)量達(dá)82萬(wàn)噸,產(chǎn)值達(dá)68億元,同比分別增長(zhǎng)25%和30%。按照規(guī)劃,到2012年,四川將建成標(biāo)準(zhǔn)化泡菜原料生產(chǎn)基地200萬(wàn)畝,產(chǎn)值達(dá)150億元以上,帶動(dòng)農(nóng)民增收10億元以上。植物泡菜產(chǎn)業(yè)第四十一頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六2012年12月11日星期二423%50%1906年2010年全球過(guò)敏人口比例調(diào)整免疫機(jī)能功能第四十二頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六2012年12月11日星期二43141.接觸性過(guò)敏原

-poisonplants-animalscratches4.侵入性過(guò)敏原

-beesting

3.食入性過(guò)敏原、

-medication-nuts-shellfish232.吸入性過(guò)敏原、-在空氣中

-pollen-dust-mold&mildewALLERGICREACTIONS-pollen-latex第四十三頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六2012年12月11日星期二44HygieneHypothesis

DevelopingcountriesNon-allergicallergicSmallfamilysizeAffluent,urbanhomesIntestinalmicroflora-stableHighantibioticuseLoworabsenthelminthburdenGoodsanitation,lowOralfaecalburden

WesternizedcountriesGenesLargefamilysizeRuralhomes,livestockIntestinalmicroflora-variable,transientLowantibioticuseHighhelminthburdenPoorsanitation,highOralfaecalburden第四十四頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六2012年12月11日星期二45過(guò)敏性疾病的誘發(fā)因素誘發(fā)因素谷類(lèi)、水果、蛋、海鮮等花粉、溫度、蟑螂、塵蟎、空氣污染等遺傳飲食環(huán)境父母體質(zhì)第四十五頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六2012年12月11日星期二46遺傳因素70%~80%

過(guò)敏兒

過(guò)敏體質(zhì)

過(guò)敏體質(zhì)

其中一人過(guò)敏體質(zhì)

無(wú)過(guò)敏體質(zhì)

無(wú)過(guò)敏體質(zhì)40%~50%

過(guò)敏兒10%~20%

過(guò)敏兒第四十六頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六2012年12月11日星期二47調(diào)節(jié)型T細(xì)胞的作用Th1Th2免疫力過(guò)敏體質(zhì)不平衡狀態(tài)TCell過(guò)敏困擾減輕平衡狀態(tài)第四十七頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六2012年12月11日星期二48免疫調(diào)控機(jī)轉(zhuǎn)第四十八頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六2012年12月11日星期二49IgE的量增加孩童過(guò)敏的風(fēng)險(xiǎn)就越大ArnaldoCantani,PediatricAllergy,AsthmaandImmunology,Springer2008pp.395第四十九頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六許多研究顯示乳酸菌可刺激腸道黏膜組織,影響?zhàn)つっ庖呦到y(tǒng),其調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)的作用機(jī)制,包括細(xì)胞激素的分泌、調(diào)節(jié)Th1(Thelper1)與Th2(Thelper2)免疫反應(yīng)的平衡、自然殺手細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的活性與抗體的產(chǎn)生等。/news/06/08/01/Peyers.Patches第五十頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六新穎副乾酪乳酸桿菌篩選隨機(jī)放大多形態(tài)(RAPD)DNA鑒定等方法,LT12為一種新穎乾酪乳酸桿菌。該分離株自本地樣本中分離,寄存于美國(guó)農(nóng)業(yè)研究服務(wù)局專(zhuān)利菌種保存中心(編號(hào)NRRL-B50327)。LactobacillusparacaseistrainLT12第五十一頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六菌體之免疫調(diào)節(jié)評(píng)估方法PBMC之來(lái)源e-BioscienceHumancytokineantibodyArray血液捐贈(zèng)者共五名三女

(代號(hào)B、D、E)

二男

(代號(hào)A、C)年齡為25至40歲分析細(xì)胞上清液之IL-4與IFNγ分泌量評(píng)估樣品對(duì)誘發(fā)PBMC之細(xì)胞激素分泌量的影響選取試驗(yàn)組之PBMC上清液第五十二頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六調(diào)節(jié)型T細(xì)胞的作用Th1Th2免疫力過(guò)敏體質(zhì)不平衡狀態(tài)TCell過(guò)敏困擾減輕平衡狀態(tài)IFN-γ

IL-4第五十三頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六各菌體試驗(yàn)樣品刺激PBMC分泌細(xì)胞激素IL-4量a.未試驗(yàn)(因細(xì)胞數(shù)不足)。乳酸菌LGG、LT12及LT-CBT對(duì)PBMC來(lái)源A、B、C、D及E都未誘發(fā)出細(xì)胞激素IL-4PBMC來(lái)源A和來(lái)源B對(duì)對(duì)照組PHA(5μg/ml)有反應(yīng)而分泌出IL-4對(duì)照組LPS(10μg/ml)誘發(fā)來(lái)源A分泌IL-4,對(duì)其他PBMC來(lái)源則無(wú)明顯影響,不同PBMC來(lái)源對(duì)試驗(yàn)樣品之反應(yīng)強(qiáng)度不同,呈現(xiàn)明顯的個(gè)體差異。

試驗(yàn)樣品菌體厚度(CFU/mL)PBMC來(lái)源平均值+SDABCDEIL-4(pg/ml)LGG5*1061.72.60.00.70.01.0+1.15*1071.82.70.00.00.00.9+1.35*1082.11.40.00.00.00.7+1.0LT125*1061.11.30.00.00.00.5+0.75*1071.72.60.00.00.91.0+1.15*1080.03.00.00.00.00.6+1.3LT-CBT5*1060.91.30.00.00.00.4+0.65*1071.40.00.00.00.00.3+0.65*1080.01.20.00.00.00.2+0.5對(duì)照組PHA5μg/ml24.96.90.72.51.07.2+10.2LPS

10μg/ml22.92.00.00.00.05.0+10.1PBSa

0.00.00.00.00.0+0.0Medium

1.40.01.40.00.00.6+0.8第五十四頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六菌體厚度(CFU/mL):5*106各菌體試驗(yàn)樣品刺激PBMC分泌之IFN-γ量菌體厚度(CFU/mL):5*107菌體厚度(CFU/mL):5*108血液捐贈(zèng)者反應(yīng)強(qiáng)度因個(gè)體有明顯差異來(lái)源C的反應(yīng)最強(qiáng),來(lái)源A次之、來(lái)源B和E的反應(yīng)強(qiáng)度相近,來(lái)源D則相對(duì)較低從不同厚度菌量分泌量之高低趨勢(shì)具有一致性。第五十五頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六各菌體試驗(yàn)樣品刺激PBMC分泌之IFN-γ量LGGLT-12LT-CBT5*1085*1085*1085*1075*1075*1075*1065*1065*106LT12相較于其他乳酸菌及不同的菌體厚度下具有較多IFN-γ量。第五十六頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六Humancytokineantibodyarray分析細(xì)胞激素的結(jié)果。(曝光時(shí)間40秒)PBMC來(lái)源C(5*107)-LT12PBMC來(lái)源C(5*107)-LT組合PBMC來(lái)源C空白組PBMC來(lái)源E空白組PBMC來(lái)源E(5*107)-LT12各試驗(yàn)組皆提高了6種細(xì)胞激素的分泌,包括IL-1a、IL-6、IL-10、IFN-γ、MCP-2和TNF-a,其中IL-1a、IFN-γ、MCP-2和TNF-a在空白組并無(wú)表現(xiàn),經(jīng)試驗(yàn)樣品刺激才誘發(fā)出矩陣分析可顯示的分泌量。第五十七頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六矩陣分析LT12與LT組合物對(duì)誘發(fā)PBMC來(lái)源C及E之細(xì)胞激素分泌量結(jié)果顯示LT12、LT組合物在PMBC來(lái)源C或E皆可提高IL-1α、IL-6、IL-10、IFN-γ、MCP-2和TNF-α6種細(xì)胞激素的分泌。Humancytokineantibodyarray分析試驗(yàn)樣品對(duì)PBMC分泌細(xì)胞激素的影響細(xì)胞激素PBMC之上清液a.PBMC來(lái)源C(5*107)-LT12PBMC來(lái)源C(5*107)-LT12組合物PBMC來(lái)源E(5*107)-LT12GCSF000GM-CSF000→+GRO

GRO-α

+

+IL-1α0→+0→+0→+IL-2000IL-3000IL-5000IL-6++++++IL-7000IL-8

+IL-10

+++++IL-13000IL-15000IFN-γ0→+0→+0→+MCP-1

MCP-20→+0→++0→+MCP-300→+0MIG000RANTES

TGF-β1000TNF-α0→+0→+0→+TNF-β000a.試驗(yàn)組分別與同一PBMC來(lái)源的medium組進(jìn)行Array結(jié)果之比較。b.0表示于Arraymembrane上完全沒(méi)有點(diǎn);表示和medium組相較無(wú)變化;

+表示和medium組相較有增加;

++表示和medium組相較有大幅度增加;第五十八頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六

LT12抗氧化能力評(píng)估73%02004006008001,000LT12GrapeseedWhitewine(unit:$)TEAC833820664SampleTEAC(μmoltrolox/g)LactobacillusparacaseistrainLT12833±0.02Grapeseed664.2±12.1Whitewine820±0.03VerhagenJVetal.J.Agric.FoodChem.1996;44:3733-3734J.FoodandDrugAnalysis.2008;Vol.16,No.6第五十九頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六LT12L.paracaseiL.acidophilusTrolox100mg/L0%20%40%60%80%100%61.4%71.9%84.3%DPPH自由基清除能力71.8%第六十頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六開(kāi)發(fā)調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)乳酸菌LT12配方新穎副乾酪乳酸桿菌篩選-抗氧化、抗發(fā)炎、有效引導(dǎo)免疫系統(tǒng)傾向Th1免疫反應(yīng),治療過(guò)敏。保護(hù)乳酸菌能順利通過(guò)胃到達(dá)腸道,并于適當(dāng)?shù)乃猁|值釋放Factor1Factor2第六十一頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六乳酸菌包埋技術(shù)peptide/蛋白質(zhì)復(fù)合物,建立酸鹼值釋放機(jī)制保護(hù)乳酸菌能順利通過(guò)胃到達(dá)腸道,并于適當(dāng)?shù)乃猁|值釋放

膠質(zhì)及多醣類(lèi)包覆,保護(hù)乳酸菌抵抗?jié)穸?、高溫及其他機(jī)械力

此層增加在制程中之穩(wěn)定性及加長(zhǎng)產(chǎn)品上架期限第六十二頁(yè),共七十二頁(yè),編輯于2023年,星期六包埋LT12菌粉耐酸性pH2.1試驗(yàn)時(shí)間(min)00306090120DuolacABC(對(duì)照組)菌數(shù)(cfu/g)7.51095.110961095.11096.5109存活率100%70.8%83.3%70.8%86.7%E菌粉菌數(shù)(cfu/g)4.21094.21094.11094.11094.0109存活率100%100%97.6%97.6%95.2%DuolacLP(對(duì)照組)菌數(shù)(cfu/g)8.31097.01095.51093.71092.9109存活率100%84.3%66.3%

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