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文檔簡介

免疫組化結果判斷及常見問題的分析演示文稿本文檔共45頁;當前第1頁;編輯于星期日\9點58分(優(yōu)選)免疫組化結果判斷及常見問題的分析本文檔共45頁;當前第2頁;編輯于星期日\9點58分肝臟:CK8理想著色,膽管上皮細胞強陽性,肝細胞呈不同層次陽性。本文檔共45頁;當前第3頁;編輯于星期日\9點58分

panCK(AE1/AE3)在肝臟理想的染色,采用了熱修復。肝細胞膜、膽管強而清晰的著色。背景干凈。本文檔共45頁;當前第4頁;編輯于星期日\9點58分一、特異性染色的判斷1.特定的定位

細胞陽性——根據(jù)靶抗原不同而呈現(xiàn)胞膜型、胞漿型或胞核型間質陽性——表現(xiàn)為細胞外著色,局限性或彌散性2.染色的不均一性陽性細胞的染色分布不均,片狀或點狀散在分布染色強弱不等,顏色深淺反映抗原量的多少3.排除人為造成的非特異性染色

切片的折疊、刀痕,色素沉著,組織細胞壞死。4.顆粒性顯色

DAB顯色在高倍鏡下呈顆粒狀而非均勻著色。本文檔共45頁;當前第5頁;編輯于星期日\9點58分免疫組化標準化照片CK10CD44v6ER本文檔共45頁;當前第6頁;編輯于星期日\9點58分本文檔共45頁;當前第7頁;編輯于星期日\9點58分本文檔共45頁;當前第8頁;編輯于星期日\9點58分本文檔共45頁;當前第9頁;編輯于星期日\9點58分本文檔共45頁;當前第10頁;編輯于星期日\9點58分本文檔共45頁;當前第11頁;編輯于星期日\9點58分合格的免疫組化染色切片

是正確判斷染色結果的基礎和前提

不合格的免疫組化染色切片

容易導致誤判本文檔共45頁;當前第12頁;編輯于星期日\9點58分C-erbB-2優(yōu)良中差本文檔共45頁;當前第13頁;編輯于星期日\9點58分4321ER本文檔共45頁;當前第14頁;編輯于星期日\9點58分子宮內膜PR染色,修復不足子宮內膜PR染色,修復良好

PR本文檔共45頁;當前第15頁;編輯于星期日\9點58分編號陽性片待檢片陰性對照結論12345-+-++-++-+-+---操作失誤,抗體失效非特異性著色陽性片不含靶抗原待檢片不含定位抗原待檢片含定位抗原二、染色結果的判斷本文檔共45頁;當前第16頁;編輯于星期日\9點58分PCNAS-P×400S-P×4001-dayCM4-dayCM陽性強度20×10視野下,隨機選取5個視野,測100個陽性細胞的平均光密度即為此片的陽性強度。三、結果分析本文檔共45頁;當前第17頁;編輯于星期日\9點58分P53陽性細胞百分比計數(shù)100個瘤細胞,其中陽性細胞的比例:<5%(-)5%~30%(+)30%~50%(++)>50%(+++)本文檔共45頁;當前第18頁;編輯于星期日\9點58分PCNABarnes法A:瘤細胞顯色有無及深淺0(不著色)1(淺黃色)2(棕黃色)3(棕褐色)B:顯色細胞的比例1(1%~10%)2(11%~50%)3(51%~80%)4(>80%)評分=A×B0分:陰性1~4分:弱陽性>4分:強陽性本文檔共45頁;當前第19頁;編輯于星期日\9點58分膠原染色陽性面積百分比40×10視野,選取5個視野,計算陽性區(qū)域面積占整個參考面積的百分率。本文檔共45頁;當前第20頁;編輯于星期日\9點58分CD34Weidner法(MVD計數(shù))孤立的棕黃色細胞族代表一條微血管。低倍鏡下找到組織內密度最高區(qū)域。40×10視野下計數(shù)微血管數(shù)目。本文檔共45頁;當前第21頁;編輯于星期日\9點58分K-rasVEGF本文檔共45頁;當前第22頁;編輯于星期日\9點58分附:定量分析——圖象處理系統(tǒng)

1、圖象處理:利用儀器按照不同的目的進行圖象的修正、變換、特征提取和測量。1)“狹義”指消除圖象的模糊不清部分,校正畸變。2)“廣義”包括對圖象的結構分析,提取特征進行測量。

本文檔共45頁;當前第23頁;編輯于星期日\9點58分2、圖象處理系統(tǒng)組成圖象輸入(顯微鏡、掃描儀)圖象處理運算(病理圖文分析軟件)圖象、數(shù)據(jù)輸出

本文檔共45頁;當前第24頁;編輯于星期日\9點58分

3、圖象處理系統(tǒng)功能

幾何形態(tài)學定量分析細胞核、漿的大小、面積、核漿比;細胞分布密度、個數(shù);血管、腺體的面積、密度;間質的面積

免疫組織化學分析按著色灰度分類,計算陽性、陰性細胞的面積含量DNA倍體分析計算正常細胞及腫瘤細胞DNA含量,給出倍體參數(shù)、DNA參數(shù)分布直方圖

AgNOR分析顆粒分析:數(shù)目、大小、面積、比例

本文檔共45頁;當前第25頁;編輯于星期日\9點58分本文檔共45頁;當前第26頁;編輯于星期日\9點58分四、免疫組化異常著色及對策1.非特異性著色及其對策非特異性著色原因對策操作過程沖洗不充分每步沖洗3×5min內源性過氧化物酶3%H2O2封閉內源性生物素使用生物素阻斷試劑盒阻斷電荷吸附非免疫動物血清封閉抗體不純采用單克隆抗體切片制片不當改善取材和制片加試劑后切片干燥防止切片干燥本文檔共45頁;當前第27頁;編輯于星期日\9點58分內源性生物素—腎小管本文檔共45頁;當前第28頁;編輯于星期日\9點58分內源性生物素—淋巴結轉移性甲狀腺腺癌本文檔共45頁;當前第29頁;編輯于星期日\9點58分蛻膜組織部分胞核PR陽性,血管內紅細胞過氧化物酶顯色本文檔共45頁;當前第30頁;編輯于星期日\9點58分嗜酸性粒細胞中細胞色素顯色本文檔共45頁;當前第31頁;編輯于星期日\9點58分吞噬細胞內

含鐵血黃素

本文檔共45頁;當前第32頁;編輯于星期日\9點58分壞死組織著色:AE1/AE3本文檔共45頁;當前第33頁;編輯于星期日\9點58分壞死組織著色本文檔共45頁;當前第34頁;編輯于星期日\9點58分交叉反應:乳腺ki-67組織細胞胞漿著色本文檔共45頁;當前第35頁;編輯于星期日\9點58分黑色素瘤,細胞內含黑色素,呈紫黑色,HE染色本文檔共45頁;當前第36頁;編輯于星期日\9點58分灶狀著色:機械原因著色本文檔共45頁;當前第37頁;編輯于星期日\9點58分CyclinD1套細胞淋巴瘤全片著色本文檔共45頁;當前第38頁;編輯于星期日\9點58分全片著色本文檔共45頁;當前第39頁;編輯于星期日\9點58分邊緣著色本文檔共45頁;當前第40頁;編輯于星期日\9點58分“陰陽臉”著色本文檔共45頁;當前第41頁;編輯于星期日\9點58分氣泡本文檔共45頁;當前第42頁;編輯于星期日\9點58分非特異性著色原因對策操作過程沖洗不充分每步沖洗3×5min內源性過氧化物酶3%H2O2封閉內源性生物素使用生物素阻斷試劑盒阻斷電荷吸附非免疫動物血清封閉抗體不純采用單克隆抗體切片制片不當改善取材和制片加試劑后切片干燥防止切片干燥非特異性著色及其對策本文檔共45頁;當前第43頁;編輯于星期日\9點58分無信號片CD3

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