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兔子免疫球蛋白M(IgM)ELISAkit說明書兔子免疫球蛋白M(IgM)ELISAkit說明書ELISA試劑盒規(guī)格:規(guī)格:96T可以測90個樣,5個標準孔,1個空白孔規(guī)格:48T可以測42個樣,5個標準孔,1個空白孔【ELISA試劑盒種屬】人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、豬犬、牛羊、雞鴨、植物ELISA試劑盒等?!驹噭┖袡z測目的】用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本?!緲吮尽垦?、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等?!居猛尽靠蒲袑嶒灥阮I(lǐng)域科學研究,不得用于臨床診斷。供應(yīng)商:上海樊克生物有限公司供應(yīng)商:上海樊克生物有限公司計算:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。elisa試劑盒價格,elisa試劑盒說明書,elisa檢測試劑盒兔子免疫球蛋白M(IgM)ELISAkit說明書實驗原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中小鼠絨毛膜促性腺激素水平。用純化的小鼠絨毛膜促性腺激素抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入膠原酶,再與HRP標記的膠原酶抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的膠原酶呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠絨毛膜促性腺激素濃度。兔子免疫球蛋白M(IgM)ELISAkit說明書操作步驟-標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔,在第一、第二孔中分別加標準品100以,然后在第一、第二孔中加標準品稀釋液50以,混勻;然后從第一孔、第二孔中各取100以分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50以,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50以棄掉,再各取50以分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50皿分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50以,混勻后從第七、第八孔中分別取50以加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50以,混勻后從第九第十孔中各取50以棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50以,濃度分別為1800ng/L,1200ng/L,600ng/L,300ng/L, 150ng/L)。-加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40以,然后再加待測樣品10以(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。-溫育:用封板膜封板后置37^溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。-洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。-加酶:每孔加入酶標試劑50以,空白孔除外。-溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50gl,再加入顯色劑B50gl,輕輕震蕩混勻,37^避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50gl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。-測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。兔子免疫球蛋白M(IgM)ELlSAkit說明書Elisa試劑盒操作步驟:3.溫育:用封板膜封板后置37^溫育30分鐘。4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。加酶:每孔加入酶標試劑50以1,空白孔除外。ELISA試劑盒樣品的采集和存儲血清-使用血清分離管,使樣品在室溫下或凝塊一夜之間兩個小時在大約1000X4oCG.測定新鮮制備的血清離心20分鐘立即或存放樣品在-20°C或稀釋后使用80oC。避免反復凍融循環(huán)。血漿采集血漿用EDTA或肝素作為抗凝劑。15分鐘,離心樣品1000XG在2到8攝氏度范圍內(nèi)采集30分鐘。去除血漿和即刻檢測或者儲存樣品液體類標本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。1) 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。2) 血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。3) 尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。4) 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5)組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8^的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。兔子免疫球蛋白M(IgM)ELISAkit說明書試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20mlX1瓶;2酶標試劑6mlX1瓶3酶標包被板12孔X
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