上海交通大學微生物實驗課件實驗四培養(yǎng)基的使用特點和微生物接種方法演示文稿本文檔共23頁；當前第1頁；編輯于星期一\22點47分（優(yōu)選）上海交通大學微生物實驗課件實驗四培養(yǎng)基的使用特點和微生物接種方法本文檔共23頁；當前第2頁；編輯于星期一\22點47分微生物培養(yǎng)Culture：在一定的條件下培養(yǎng)、繁殖得到的微生物群體混合培養(yǎng)物：含有多種微生物的培養(yǎng)物；純培養(yǎng)物：只有一種微生物的培養(yǎng)物；Pureculture通常情況下只有純培養(yǎng)物才能提供可以重復的結果純培養(yǎng)技術是進行微生物學研究的基礎！本文檔共23頁；當前第3頁；編輯于星期一\22點47分一、用固體培養(yǎng)基分離純培養(yǎng)培養(yǎng)基：液體培養(yǎng)基；固體培養(yǎng)基；1.5%-2.5%半固體培養(yǎng)基；0.2%-0.75%瓊脂本文檔共23頁；當前第4頁；編輯于星期一\22點47分一、用固體培養(yǎng)基分離純培養(yǎng)菌落（colony）：

單個（或聚集在一起的一團）微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長、繁殖到一定程度可以形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結構的子細胞生長群體眾多菌落連成一片菌苔（lawn）本文檔共23頁；當前第5頁；編輯于星期一\22點47分無菌操作：火焰附近（酒精燈、煤氣燈）進行本文檔共23頁；當前第6頁；編輯于星期一\22點47分

不同微生物在特定培養(yǎng)基上生長形成的菌落或菌苔一般都具有穩(wěn)定的特征（形狀、顏色等），可以成為對該微生物進行分類、鑒定的重要依據(jù)本文檔共23頁；當前第7頁；編輯于星期一\22點47分菌落的描述：形態(tài)、表面和邊緣特征本文檔共23頁；當前第8頁；編輯于星期一\22點47分本文檔共23頁；當前第9頁；編輯于星期一\22點47分同一細菌在不同的培養(yǎng)平板上形成不同的特征菌落本文檔共23頁；當前第10頁；編輯于星期一\22點47分一、用固體培養(yǎng)基分離純培養(yǎng)使微生物在固體培養(yǎng)基平板上形成單個菌落的基本方法：1、稀釋倒平板法2、涂布平板法3、平板劃線法4、厭氧微生物的分離本文檔共23頁；當前第11頁；編輯于星期一\22點47分本文檔共23頁；當前第12頁；編輯于星期一\22點47分一、用固體培養(yǎng)基分離純培養(yǎng)1、稀釋倒平板法2、涂布平板法操作較麻煩，對好氧菌、熱敏感菌效果不好！使用較多的常規(guī)方法，但有時涂布不均勻！本文檔共23頁；當前第13頁；編輯于星期一\22點47分利用L棒進行涂布本文檔共23頁；當前第14頁；編輯于星期一\22點47分3、平板劃線法本文檔共23頁；當前第15頁；編輯于星期一\22點47分3、平板劃線法本文檔共23頁；當前第16頁；編輯于星期一\22點47分二、選擇培養(yǎng)分離

抑制大多數(shù)其它微生物的生長；

使待分離的微生物生長更快；對微生物群落中數(shù)量占少數(shù)的微生物的分離純化沒有一種培養(yǎng)基或一種培養(yǎng)條件能夠滿足自然界中一切生物

生長的要求，在一定程度上所有的培養(yǎng)基都是選擇性的。本文檔共23頁；當前第17頁；編輯于星期一\22點47分三、選擇培養(yǎng)分離1.利用選擇平板進行直接分離待分離的微生物生長，其它微生物的生長被抑制

高溫下培養(yǎng)：分離嗜熱細菌；

培養(yǎng)基中不含N：分離固氮菌；

培養(yǎng)基加抗生素：分離抗性菌；本文檔共23頁；當前第18頁；編輯于星期一\22點47分1.利用選擇平板進行直接分離

顏色反應：分離特定的菌株；

牛奶平板：分離蛋白酶產(chǎn)生菌；待分離的微生物的生長特征明顯不同于其它微生物本文檔共23頁；當前第19頁；編輯于星期一\22點47分常用的選擇培養(yǎng)基沙門菌常用的培養(yǎng)基：亞硫酸鉍瓊脂平板(BS):含有煌綠、檸檬酸鉍銨、亞硫酸鈉、硫酸亞鐵，具有強選擇性，分離沙門氏菌HE（Heetoen)：檸檬酸鐵銨、去氧膽酸鹽、硫代硫酸鈉、麝香草酚藍和復紅，分離腸道致病菌本文檔共23頁；當前第20頁；編輯于星期一\22點47分麥康凱培養(yǎng)基乳糖、膽鹽，弱選擇性，中性紅,分離腸道致病菌中性紅指示劑pH感應范圍6.8（紅色）到8.0（黃色）分解乳糖產(chǎn)酸，菌落顏色呈紅色沙門氏菌、志賀氏菌不分解乳糖，菌落顏色與培養(yǎng)基相同膽鹽有助于沙門氏菌的生長，抑制其他細菌大腸桿菌？沙門氏菌？常用的選擇培養(yǎng)基本文檔共23頁；當前第21頁；編輯于星期一\22點47分克氏雙糖鐵蛋白胨；牛肉膏；酵母膏；乳糖；葡萄糖；氯化鈉；檸檬酸鐵銨；硫代硫酸鈉；瓊脂；酚紅為指示劑，黃色為產(chǎn)酸，紅色為產(chǎn)堿觀察克氏雙糖接種后斜面、底層產(chǎn)酸、產(chǎn)氣、產(chǎn)H2S的情況，大腸桿菌斜面？沙門氏菌斜面？本文檔共23頁；當前第22頁；編輯于星期一\22點47分接種劃線菌種：大腸桿菌、沙門菌