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文檔簡介
關(guān)于二級菌種和三級菌種的制備第1頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三二級菌種和三級菌種接種第2頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三第三章二級菌種和三級菌種的制備
食用菌生產(chǎn)多采用三級菌種繁育體系,也有采用二級菌種繁育體系的。經(jīng)過擴大培養(yǎng),增加菌絲體的適應(yīng)能力,使其粗壯;并檢驗菌種生活力、純度;擴大菌種數(shù)量,滿足生產(chǎn)需要。第3頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三第三章二級菌種和三級菌種的制備第一節(jié)培養(yǎng)料的配制與滅菌第二節(jié)接種與培養(yǎng)第三節(jié)質(zhì)量鑒定第四節(jié)液體菌種生產(chǎn)和使用第4頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三第一節(jié)培養(yǎng)料的配制與滅菌一、培養(yǎng)料的配制二、培養(yǎng)料的滅菌第5頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三一、培養(yǎng)基的配制㈠培養(yǎng)料配制的原則㈡培養(yǎng)料常用配方㈢培養(yǎng)料配制工藝流程第6頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三㈠培養(yǎng)料配制的原則●要選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì)●營養(yǎng)物質(zhì)配制的比例要適當(dāng)●選擇經(jīng)濟(jì)使用來源廣泛的原料●適宜的酸堿度第7頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三㈡培養(yǎng)料常用配方
常用的配方為78:20:1:1
78:指供應(yīng)碳源的主料,包括木屑、玉米芯、秸稈、稻草等。
20:指米糠、麩皮。
1:指糖。
1:石灰、石膏等第8頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三㈡培養(yǎng)料常用配方木屑培養(yǎng)基棉籽殼、蔗糖培養(yǎng)基玉米芯、花生殼培養(yǎng)基第9頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三
木屑培養(yǎng)基
﹡闊葉樹木屑78%,米糠或麩皮20%,蔗糖1%,石膏粉1%。第10頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三木屑培養(yǎng)基
﹡闊葉樹木屑93%,米糠或麩皮5%,蔗糖1%,尿素0.4%,碳酸鈣0.4%,磷酸二氫鉀0.2%。第11頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三木屑培養(yǎng)基
﹡闊葉樹木屑75%,麩皮22%,蔗糖1.5%,石膏粉1.4%,維生素B10.1%。
適用于平菇、鳳尾菇、木耳、猴頭、靈芝、金針菇、榆黃蘑等菌種的培養(yǎng)。
第12頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三棉籽殼、蔗糖培養(yǎng)基
﹡棉籽殼78%,麩皮20%,蔗糖1%,石膏粉1%。第13頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三棉籽殼、蔗糖培養(yǎng)基
﹡棉籽殼96%,蔗糖2%,過磷酸鈣1%,石膏粉1%。
適用于平菇、鳳尾菇、毛木耳、金針菇等菌種的培養(yǎng)。第14頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三玉米芯、花生殼培養(yǎng)基
﹡玉米芯%,米糠或麩皮20%,蔗糖1%,石膏粉1%。第15頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三玉米芯、花生殼培養(yǎng)基
﹡玉米芯80%,米糠10%,玉米粉8%,石膏粉1%,磷酸二氫鉀0.2%。
第16頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三玉米芯、花生殼培養(yǎng)基
﹡花生殼78%,米糠20%,蔗糖1.5%,石膏粉1%。
適用于平菇、香菇、木耳、猴頭、靈芝等菌種的培養(yǎng)。第17頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三㈢培養(yǎng)料配制工藝流程●稱料●拌料●調(diào)節(jié)pH●分裝培養(yǎng)料●分裝容器的封口第18頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三●稱料
將預(yù)處理過的培養(yǎng)料(以不刺破容器為準(zhǔn),過4目的篩子),按生產(chǎn)規(guī)模進(jìn)行稱取。先稱主料,后稱輔料。第19頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三●拌料
將不溶性的料干混均勻,可溶性的料加少量的水配成母液,邊潑澆邊混拌,含水量為60%。第20頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三第21頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三●調(diào)節(jié)pH
將培養(yǎng)料堆悶0.5~1.0h后,測定酸堿度,因為滅菌后pH下降1~1.5,所以高調(diào)1~1.5,調(diào)致6.5~7.0較為合適。第22頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三●分裝培養(yǎng)料
分裝培養(yǎng)料時,邊裝邊壓,松緊適中(中下部稍松,上部稍緊),然后平整料面,在料中央打洞。第23頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三第24頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三第25頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三第26頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三第27頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三﹡料中央打洞的目的
1.增加培養(yǎng)料與空氣的接觸面積以利菌絲生長;
2.便于固定接種塊;
3.讓部分菌種掉進(jìn)洞內(nèi),增加接種點,縮短發(fā)菌周期。第28頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三●分裝容器的封口
﹡瓶裝容器的封口:罐頭瓶用12㎝×12㎝×0.004㎝的低壓聚乙烯或聚炳烯膜封口;
﹡袋裝容器的封口:用無棉蓋體封口、擰口、折口等。第29頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三第30頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三第31頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三第32頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三第33頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三第34頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三二、培養(yǎng)料的滅菌●常壓蒸氣滅菌●高壓蒸氣滅菌●滅菌效果的檢驗第35頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三●常壓蒸氣滅菌
當(dāng)?shù)蛯优囵B(yǎng)料的溫度達(dá)到100℃時,保持8~12h,培養(yǎng)料內(nèi)的雜菌已被徹底殺死。第36頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三●高壓蒸氣滅菌
在121~128℃、0.11~0.14MPa下,木屑、棉耔殼培養(yǎng)料保持1~1.5h,谷粒培養(yǎng)料則需2.0~2.5h。第37頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三●滅菌效果的檢驗
隨機抽樣,置于25~30℃的條件下,培養(yǎng)3~5d,若沒有雜菌長出,說明滅菌徹底。第38頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三
第二節(jié)接種與培養(yǎng)一、接種設(shè)備的使用規(guī)程二、二級菌種和三級菌種的接種三、二級菌種和三級菌種的培養(yǎng)第39頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三
一、接種設(shè)備的使用規(guī)程●接種室使用規(guī)程●超凈工作臺使用規(guī)程●接種箱(室)的雜菌檢查第40頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三●接種室使用規(guī)程
1.使用前半小時,把所需物品搬入接種場所噴霧消毒,關(guān)閉門窗,開啟紫外線燈照射0.5h。
2.穿上工作服和鞋,戴好口罩、帽,用2%來蘇爾洗手。
第41頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三
3.操作前,用酒精棉球擦手。操作時,減少空氣波動。兩人操作時應(yīng)配合默契,用完的廢棉球等應(yīng)丟到廢物桶內(nèi)。
4.接種結(jié)束及時收拾臺面,然后用石炭酸噴灑。第42頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三
5.注意安全。如棉塞著火,用手緊握或用濕布撲滅,勿吹。若有帶菌物灑落,用抹布沾石炭酸,收拾到廢物桶內(nèi),用酒精棉球擦手后再繼續(xù)操作。第43頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三●超凈工作臺使用規(guī)程1.把超凈工作臺用75%酒精擦凈。2.搬入培養(yǎng)料和菌種。3.接種工具事先高溫滅菌備用。雙手用酒精棉球擦凈。4.開動機器約20min后,接種區(qū)空氣凈化完成,即可接種。第44頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三
5.操作時,動作輕盈,頭、手盡量置于接種材料的下風(fēng)側(cè),接種用具放在臺面兩側(cè)。
6.接種結(jié)束,移去接種材料,再停止運轉(zhuǎn)。7.如經(jīng)常使用,每2~3個月檢查一次空氣的無菌程度。如不合標(biāo)準(zhǔn),應(yīng)及時更換超細(xì)纖維過濾板。第45頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三●接種箱(室)的雜菌檢查1.制備6支PDA或牛肉膏的斜面或平板。
2.斜面打開棉塞,直立放置0.5h。培養(yǎng)皿開蓋5min,并在接種過程中和接種完畢時,進(jìn)行同樣檢查。寫明標(biāo)簽,檢查熏蒸、噴霧消毒藥液及紫外線燈光殺菌的效果。3.將檢查的6支斜面或6個培養(yǎng)皿,置于30℃下培養(yǎng)48h,檢查菌落生長數(shù)。
第46頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三
4.平板內(nèi)≤3個菌落,斜面上無菌落的為合格。否則為污染嚴(yán)重。霉菌多時,用石炭酸噴霧后用甲醛熏蒸。如細(xì)菌多,可用乳酸和甲醛交替熏蒸。第47頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三二、二級菌種和三級菌種的接種●接種的無菌操作規(guī)程●二級菌種的接種●三級菌種的接種●塑料袋接種●幾種簡易的接種方法第48頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三●接種的無菌操作規(guī)程
1.按種空間徹底滅菌。凡是菌種所暴露的部位或通過的空間,都必須是無菌區(qū)。
2.酒精燈火焰封口(瓶口或管口)。3.接種工具灼燒后冷卻,再取菌種,所取菌種不得在火焰旁停留,也不要通過火焰,以免菌種燒傷。4.封口物,不要隨便放在臺面上,管口或瓶口不得和其他物體接觸。第49頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三5.接種工具徹底灼燒滅菌(包括進(jìn)入試管的其他部位)。
6.接種過程中,管口或瓶口,應(yīng)立即燒灼,以燒死多數(shù)雜菌。在操作時,試管口或瓶口不得離開火焰附近,在無菌區(qū)即可。7.燒灼的接種工具冷卻后,取少許菌種迅速抽出。注意不要碰到管、瓶壁,取出時不可通過火焰,以免燒死菌絲。第50頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三8.
將取出的菌種迅速送入待接袋(或)內(nèi)培養(yǎng)料的孔內(nèi)。
9.抽出接種工具,將管口(或瓶口)在火焰上燒灼,立即封口。第51頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三●二級菌種的接種
把試管菌種接入二級菌種培養(yǎng)料中的過程稱為二級菌種接種。二級種要求純度高、質(zhì)量好。第52頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三●二級菌種的接種
﹡接種前的準(zhǔn)備
﹡二級菌種的接種第53頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三﹡接種前的準(zhǔn)備
1.一級種選擇:選擇種性純正,健壯、濃密、整齊的一級種。2.接種箱(室)消毒:用84噴灑后再開紫外燈20min。用酒精棉球擦管(瓶)外面,管口、瓶口和棉塞都要在火焰上烘烤。第54頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三一點接種
切取2㎝菌種,迅速送入菌種瓶內(nèi)的接種穴上,立即封口。每支一級菌種可接5~8瓶二級種。
第55頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三兩點接種
先在接種穴內(nèi)放一塊菌種,后在接種穴口上放一塊菌種。每支斜面菌種可接二級菌種3~5瓶。第56頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三接種箱、超凈臺第57頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三接種箱、超凈臺第58頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三接種箱、超凈臺第59頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三第60頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三●三級菌種的接種
把二級菌種接入三級菌種培養(yǎng)料中的過程稱為三級菌種接種。三級菌種用玻璃瓶或塑料袋生產(chǎn)。第61頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三●三級菌種的接種﹡接種前的準(zhǔn)備﹡三級菌種的接種﹡塑料袋接種﹡幾種簡易的接種方法第62頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三﹡接種前的準(zhǔn)備
把所需物品搬入接種箱(室)中,將二級種橫置于接種架上,待接種的料瓶(袋)臥放。然后對接種場所進(jìn)行消毒處理。第63頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三﹡三級菌種的接種
用酒精棉球擦拭瓶外壁,以火焰瓶口。夾取燃著的酒精棉球,燒灼二級種瓶口、瓶頸內(nèi)壁,進(jìn)行瓶口消毒。用灼燒后的鑷子扒去老菌皮,搗碎菌料,火焰封口,放在接種瓶架上。第64頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三
單人操作時,左手執(zhí)料瓶,右手拔去棉塞用小指和手掌夾住,掀起封口紙一個小角。右手執(zhí)接種工具,灼燒后,取2㎝大小原種塊。迅速投入料瓶內(nèi)。一般每瓶二級種可接40~80瓶三級種。第65頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三﹡三級菌種的接種第66頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三第67頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三﹡塑料袋接種
由于塑料袋質(zhì)軟,袋口不能直立,又不能接近火焰,操作不不埂。最好在無菌條件較好的接種箱(帳)內(nèi)接種。接種時采用單人或雙人操作法進(jìn)行接種。第68頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三第69頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三﹡幾種簡易的接種方法1.蒸氣接種法2.電爐接種法3.扇形多頭酒精燈接種法
第70頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三1.蒸氣接種法⑴原理⑵方法第71頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三⑴原理
需要小接種室和一套蒸氣發(fā)生器。電爐上放一鋁鍋,作為蒸氣發(fā)生器,在鍋蓋中央挖一個直徑10厘米的圓孔,蒸氣在圓孔內(nèi)集中向外擴散,把含有雜菌的空氣排開,形成無菌區(qū)。第72頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三第73頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三⑵方法
接種前,向空中噴水,使空中孢子隨水滴沉降。將培養(yǎng)料趁熱搬進(jìn)接種室,待料溫降至30℃以下時開始接種。在此之前將水燒開,把接種工具等放入水中煮沸15分鐘、然后即可接種。第74頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三
兩人配合,一人左手握菌種瓶(或管),右手拿接種工具,負(fù)責(zé)將菌種接入待接的瓶、袋內(nèi),另一人將待接的瓶、袋開塞或開口,接入菌種后立即封口。菌種瓶口、接種工具,待接瓶口(或袋口)及棉塞,不得離開蒸氣,以免感染雜菌。瓶口要稍向下傾斜。兩人接種,一次可接500~800瓶。第75頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三2.電爐接種法
800~1000瓦電爐,用薄鐵皮做一個內(nèi)徑30~50㎝,高40~60㎝的圓筒,罩在電爐外即成。這樣熱流集中于筒頂口形成一個無菌區(qū),其范圍和熱力遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過酒精燈火焰。一套設(shè)備可供3~4人同時操作。操作時,盡可能縮短時間,以避免燙死菌絲。第76頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三第77頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三三、二級菌種和三級菌種的培養(yǎng)
需放置在適宜的環(huán)境條件下進(jìn)行培養(yǎng)。菌種的培養(yǎng)實質(zhì)是對菌絲體的培養(yǎng)。第78頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三三、二級菌種和三級菌種的培養(yǎng)●培養(yǎng)的重點工作●出現(xiàn)的異?,F(xiàn)象第79頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三●培養(yǎng)的重點工作
1.二級種、三級種接種后,及時移入徹底處理過的培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng),溫度調(diào)致23~25℃,空氣相對濕度65~70%。2.培養(yǎng)2~3d后檢查雜菌。發(fā)現(xiàn)有污染的立即取出。開始每天檢查一次,當(dāng)菌絲覆蓋培養(yǎng)料,并吃料1~2㎝時,每周檢查一次。
第80頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三
3.檢查溫度變化。當(dāng)菌絲快滿瓶(袋)時,將培養(yǎng)溫度降低2~3℃,起到壯菌的作用。4.培養(yǎng)3~5d后檢查成活率。發(fā)現(xiàn)菌種塊沒有萌發(fā)的,應(yīng)剔出單獨放,一周后仍未萌發(fā),要及時進(jìn)行補種。5.培養(yǎng)室要保持空氣新鮮、清潔、遮光,濕度過大時,要進(jìn)行通風(fēng)。
6.殺菌、殺蟲、防鼠工作,貫徹始終。第81頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三
7.菌種(特別是二級菌種)培養(yǎng)好后,及時使用。二級菌種滿瓶后7~10d,菌絲處于快速生長期,適應(yīng)性較強。三級菌種培育好后,要置于低溫、干燥、清潔的室內(nèi)避光保存一個月。第82頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三●菌種培養(yǎng)中出現(xiàn)的異?,F(xiàn)象
培養(yǎng)二級種和三級種時,若能選擇優(yōu)良菌種、合理配方、優(yōu)質(zhì)原料、嚴(yán)格滅菌、遵循無菌操作規(guī)程和科學(xué)培育,可培養(yǎng)出優(yōu)良的二級種和三級種。但因種種因素,會出現(xiàn)異?,F(xiàn)象,如雜菌污染、菌絲不萌發(fā)、不生長或菌絲發(fā)生萎縮衰退等現(xiàn)象。第83頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三●出現(xiàn)異?,F(xiàn)象的處理◆雜菌污染◆斷菌◆退菌◆菌絲徒長◆不吃料第84頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三◆雜菌污染第85頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三◆雜菌污染第86頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三◆雜菌污染第87頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三◆雜菌污染第88頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三◆雜菌污染第89頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三◆雜菌污染﹡雜菌污染的原因﹡防止雜菌污染措施第90頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三﹡雜菌污染的原因
1.如果雜菌在培養(yǎng)料的上、中、下部位同時發(fā)生。是由于培養(yǎng)料滅菌不徹底造成的。2.如果雜菌開始發(fā)生在接種塊上。是母種或原種已被污染,或者是由于接種工具滅菌不徹底造成。3.如果雜菌先在培養(yǎng)基表面發(fā)生。由于接種過程中無菌操作不嚴(yán)格引起的。第91頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三
4.如果雜菌在接種若干天后才發(fā)生,并首先發(fā)生在從瓶口往下生長的菌絲上,說明是從棉塞侵入培養(yǎng)料的。是培養(yǎng)室濕度過大,棉塞受潮,造成霉菌滋生所致。第92頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三﹡防止雜菌污染措施
1.搞好環(huán)境衛(wèi)生。制種人員必須建立起正常的清潔衛(wèi)生制度,不斷清除污物,并加以藥劑消毒,不讓雜菌有滋生的余地。2.處理好原料。嚴(yán)加管理,杜絕任其堆放原料,不加保護(hù),上下受潮霉變、中間生蟲、骯臟不堪的現(xiàn)象。第93頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三
3.調(diào)整含水量和酸堿度。培養(yǎng)料的水分適當(dāng),酸堿度適宜,則發(fā)菌順利,不易生雜菌。常見的毛病是;用水不稱也不量,酸堿度不測更無調(diào)節(jié)。4.保護(hù)培養(yǎng)料。滅過菌的培養(yǎng)料應(yīng)該加以保護(hù)。以為滅過菌,馬虎了事,不遮不蓋,污染嚴(yán)重。
第94頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三
5.嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程。要耐心、細(xì)致,切忌碰擦粘帶。
問題:器械不洗依靠熏,不擦酒精依靠熏,擦了酒精就不用火焰燒,碰擦污物不重?zé)?。?5頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三正確作法
接種的用具、容器,能洗的要洗干凈,能熏的要熏蒸,能擦酒精的要擦酒精,能用酒精燈火焰燒的要用火焰燒。大量的三級種可兩人接種,把好火焰封鎖關(guān),一人持料瓶,一人接種,不離火焰無菌區(qū),配合默契,動作敏捷。第96頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三◆不吃料現(xiàn)象
接入菌種瓶內(nèi)的母種或原種,菌絲不萌發(fā);有些菌種塊上的菌絲雖萌發(fā),但不向料內(nèi)生長,以后逐漸萎縮變黃。第97頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三產(chǎn)生原因
1.培養(yǎng)料配方不合理,配制不科學(xué)。
2.培養(yǎng)料含水量、pH不適合,菌絲不吃料。
3.接種場所處理時,用藥量過多或溫度過高,致使菌絲受藥害死亡。
4.滅菌以后,搶溫接種溫度過高,致使菌絲遇高溫而死亡。第98頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三
5.接種工具未冷卻或菌絲塊靠火焰太近,菌絲被燙死或燒死。
6.接入的母種或原種,在不條件下長期儲藏,菌絲老化失去生長能力。
7.菌種瓶(袋)內(nèi)潛入螨類,咬食菌種塊,致使菌絲消失。
第99頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三第四節(jié)液體菌種生產(chǎn)和使用液體菌種:在無菌條件下,將母種接種于合適的液體培養(yǎng)基中,給予適宜的條件,通過震蕩、攪拌等方式培養(yǎng)出來的菌絲球稱為液體菌種。第100頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三第四節(jié)液體菌種生產(chǎn)和使用一、液體菌種的優(yōu)點二、液體菌種培養(yǎng)液配方三、液體菌種的培養(yǎng)四、液體菌種的使用第101頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三一、液體菌種的優(yōu)點●菌種生產(chǎn)周期短●接于固體料中發(fā)菌快●菌齡整齊一致●接種方便第102頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三二、液體菌種培養(yǎng)液配方
1.葡萄糖30%,豆餅粉2%,玉米粉1%,酵母粉0.5%,磷酸二氫鉀0.1%,碳酸鈣0.2%,硫酸鎂0.05%,pH自然。適于多種食用菌的液體培養(yǎng)。第103頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三
2.可溶性淀粉3~6%、蔗糖1%,磷酸二氫鉀0.3%,硫酸鎂0.15%,酵母膏0.1%,pH值調(diào)至6。適于平菇、香菇、猴頭菇,以平菇最為適宜??扇苄缘砼慰稍黾优囵B(yǎng)液粘度,菌絲球小而多,菌絲球分散性好。第104頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三
3.馬鈴薯20%,葡萄糖2%,硫酸銨0.2%,磷酸二氫鉀0.1%,硫酸鎂0.05%,維生素B110毫克/升,瓊脂0.05%,pH自然。適于培養(yǎng)香菇,菌絲生長快、菌球大、多,周圍有絨毛,絨毛狀菌普遍存在培養(yǎng)液中,有利于播種。第105頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三
4.玉米粉4%,水解魚粉2%,酵母膏0.1%,磷酸二氫鉀0.15%,硫酸鎂0.05%,pH自然。適于培養(yǎng)金針菇,猴頭菌。第106頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三
5.葡萄糖2.5%,酵母膏0.35%,玉米漿(含氮量7.1%)0.18%,磷酸二氫鉀0.1%,硫酸鎂0.05%,氯化鈣0.006%,每升培養(yǎng)液內(nèi)另加硫酸鋅4毫克,硫酸錳5毫克,檸檬酸鐵5毫克,維生素B10.1毫克。適于培養(yǎng)茯苓。第107頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三三、液體菌種的培養(yǎng)
液體菌種的培養(yǎng):采用搖床生產(chǎn)的搖瓶培養(yǎng)法和采用發(fā)酵罐生產(chǎn)的深層培養(yǎng)法。第108頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三●液體菌種的搖瓶培養(yǎng)
搖床室溫在24~26℃,培養(yǎng)72~96h。培養(yǎng)結(jié)束時,因菌種不同,培養(yǎng)液出現(xiàn)不同色澤。平菇,金針菇的培養(yǎng)液呈淺黃色,香菇、猴頭菌的培養(yǎng)液呈黃棕色,清澈透明,有許多菌絲小球,并有菇香。木耳的培養(yǎng)液呈褐色、粘稠,有香甜味。培養(yǎng)液混濁,多是細(xì)菌污染。培養(yǎng)液經(jīng)顯微鏡檢查后。方可用于生產(chǎn)。
第109頁,講稿共118頁,2023年5月2日,星期三
搖床培養(yǎng),只適于固體菌種的接種。液體菌種供發(fā)酵罐接種,或接種于三角瓶內(nèi),每瓶接種10mL,繼續(xù)搖
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