乙肝病毒解析(jiěxī)

---HBVlargesurfaceprotein

南昌市第八人民醫(yī)院第一頁，共二十六頁。編輯課件病毒血清學(xué)檢測(jiǎncè)指標(biāo)直接(zhíjiē)指標(biāo)：外膜蛋白(表面抗原）、降解或代謝產(chǎn)物蛋白、病毒核酸DNA或RNA間接指標(biāo)：各種抗體IgG、IgM等第二頁，共二十六頁。編輯課件目前乙肝實驗(shíyàn)血清學(xué)檢測的需要狀況：指標(biāo)不少，但是缺少以下關(guān)鍵指標(biāo)1,什么是e-CHB肝炎（e抗原陰性肝炎）血清學(xué)指標(biāo)？２、抗病毒治療沒有實驗室終點(zhōngdiǎn)指標(biāo)，臨床肝炎治療合理用藥指導(dǎo)，避免過度用藥．特別是ＤＮＡ陰性后應(yīng)該持續(xù)多長時間用藥？第三頁，共二十六頁。編輯課件目前臨床(línchuánɡ)乙肝病毒檢測的缺陷１、HBeAg陰性肝炎(小三陽肝炎)的血清學(xué)診斷指標(biāo)缺乏過去認(rèn)為大三陽轉(zhuǎn)小三陽即HBeAg的陰轉(zhuǎn)意味著乙肝病毒復(fù)制降低，傳染性減弱，但是近年國內(nèi)外的研究發(fā)現(xiàn)部分小三陽在血清轉(zhuǎn)化(zhuǎnhuà)（或變異）后病毒仍然復(fù)制，而且預(yù)后更嚴(yán)重。但是目前沒有血清免疫學(xué)指標(biāo)可以檢測小三陽病毒攜帶者是否病毒復(fù)制?。病⑺幬镏委熜Чu價血清學(xué)指標(biāo)缺乏由于HBsAg非常難轉(zhuǎn)陰，而HBVDNA轉(zhuǎn)陰停藥容易反彈，抗病毒治療缺乏終點指標(biāo)！第四頁，共二十六頁。編輯課件抗病毒治療(zhìliáo)效果監(jiān)測臨床上缺乏評估抗病毒治療效果的指標(biāo)。以HBVDNA陰轉(zhuǎn)作為治療的終點不恰當(dāng)，此時停藥病情(bìngqíng)易反復(fù)。第五頁，共二十六頁。編輯課件

小三陽兩種預(yù)后(yùhòu)病毒(bìngdú)休眠\不復(fù)制\預(yù)后好病毒保持(bǎochí)復(fù)制水平\肝硬化\肝癌什么指標(biāo)能夠分辨開?第六頁，共二十六頁。編輯課件抗病毒治療過程(guòchéng)中病毒顆粒消退順序

最先消失(xiāoshī)其次(qícì)消失最后消失DNA陽性大蛋白陽性DNA陰性大蛋白陽性DNA陰性大蛋白陰性第七頁，共二十六頁。編輯課件抗病毒治療(zhìliáo)效果監(jiān)測臨床上缺乏評估抗病毒治療(zhìliáo)效果的指標(biāo)。以HBVDNA陰轉(zhuǎn)作為治療的終點不恰當(dāng)，此時停藥病情易反復(fù)。第八頁，共二十六頁。編輯課件

沒有指標(biāo)預(yù)示治療(zhìliáo)終點期望HBsAg轉(zhuǎn)陰，帶來過高期待，導(dǎo)致過度用藥，增加患者負(fù)擔(dān)以及浪費資源；據(jù)估計每年20-40％左右的治療是“多余(duōyú)”的。ＤＮＡ陰轉(zhuǎn)就停藥，導(dǎo)致過早停藥，引起病情反彈第九頁，共二十六頁。編輯課件尋找比外周血DNA檢測(jiǎncè)更合適的指標(biāo)大部分人熟悉的“乙肝兩對半”檢測，其實并非乙肝病毒的傳染物質(zhì)和致病物，乙肝兩對半”只能反映一個人是否感染過乙肝，卻不能直接深入地揭示乙肝病毒在人體內(nèi)的復(fù)制(fùzhì)和致病情況，也就不能更好地指導(dǎo)臨床用藥和制訂治療方案。有效的辦法──乙肝病毒DNA定量試驗，但是外周血中DNA陰轉(zhuǎn)已經(jīng)不能作為治療終點還有比DNA更好的標(biāo)志物嗎第十頁，共二十六頁。編輯課件HBeAg陰性(yīnxìng)活動期肝炎HBeAg陰性活動期肝炎(ɡānyán)臨床診斷現(xiàn)狀：(1)傳統(tǒng)“兩對半”指標(biāo)不能反映此類患者HBV復(fù)制程度；(2)缺乏指導(dǎo)合理治療的指標(biāo)；(3)HBVDNA檢測不易于各級醫(yī)療機構(gòu)廣泛開展；(4)臨床上急需能夠反映HBV復(fù)制程度及指導(dǎo)治療的血清學(xué)指標(biāo)。

第十一頁，共二十六頁。編輯課件解決方案通過研制針對復(fù)雜構(gòu)象結(jié)構(gòu)的大蛋白的單抗直接檢測大蛋白反式激活域大蛋白是外周血中唯一可以(kěyǐ)檢測的病毒反式激活因子大蛋白與肝內(nèi)病毒復(fù)制密切相關(guān)，和病情反彈密切相關(guān)，是抗病毒治療的輔助終點指標(biāo)第十二頁，共二十六頁。編輯課件大蛋白檢測可以彌補(míbǔ)目前項目的不足

-----檢測Dane顆粒、管狀病毒顆粒大蛋白與肝內(nèi)病毒(bìngdú)復(fù)制（不是外周血）密切相關(guān)用于e抗原檢測的補充大蛋白晚于血液內(nèi)ＤＮＡ消退，早于HBsAg消退大蛋白直接導(dǎo)致肝細(xì)胞損傷，直接毒性作用大蛋白具有反式激活增強病毒復(fù)制作用第十三頁，共二十六頁。編輯課件HBV-LHBs臨床(línchuánɡ)使用的意義

-----e抗原的補充１、病毒攜帶者體內(nèi)病毒復(fù)制的確切血清學(xué)指標(biāo)，特別是e抗原變異或轉(zhuǎn)化后可作為e抗原的補充。

2、大蛋白具有反式激活病毒復(fù)制的能力，大蛋白存在與否可預(yù)測病情反彈，大蛋白轉(zhuǎn)陰是病毒清除(qīngchú)的最早跡象，可以作為抗病毒治療終點輔助指標(biāo)。第十四頁，共二十六頁。編輯課件HBV的表面抗原的組成(zǔchénɡ)不存在(cúnzài)單獨前Ｓ１蛋白，前Ｓ１是大蛋白一部分第十五頁，共二十六頁。編輯課件乙肝病毒包膜蛋白研究進(jìn)展1995-2004年發(fā)現(xiàn)大蛋白前S區(qū)有復(fù)雜構(gòu)象結(jié)構(gòu)，是被發(fā)現(xiàn)具有拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)的第一個病毒(bìngdú)外膜蛋白1996－９８年發(fā)現(xiàn)大蛋白具有反式激活病毒復(fù)制的作用2002年發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致肝細(xì)胞病變及凋亡的主要原因是大蛋白（致病性蛋白）2003年Nature發(fā)表文章總結(jié)其反式激活機理2004年國際上進(jìn)行大蛋白特殊拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)研究2004年成功構(gòu)建針對構(gòu)象型表位的單克隆抗體第十六頁，共二十六頁。編輯課件反式激活蛋白在同一條核酸鏈上起調(diào)控基因表達(dá)作用的核酸序列稱為順式作用元件(yuánjiàn)；反式激活（transactivation）,既某一基因的編碼蛋白轉(zhuǎn)而激活同一基因的遠(yuǎn)離部位，或另一基因的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)。研究發(fā)現(xiàn)乙肝病毒的一些組成蛋白具有反式激活作用。第十七頁，共二十六頁。編輯課件蛋白質(zhì)DNA

反式激活(jīhuó)作用第十八頁，共二十六頁。編輯課件大蛋白試劑臨床(línchuánɡ)研究1、HBVDNA陽性(yángxìng)標(biāo)本中HBV－LP的陽性符合率考核單位HBVDNA（＋）HBV－LP（＋）例（次）數(shù)例（次）數(shù)比例（％）北京地壇醫(yī)院126825494.78北京地壇醫(yī)院2（治療系列）115214998.03解放軍傳染病研究所17013579.41遼寧沈陽傳染病醫(yī)院14313493.71浙江省湖州中心醫(yī)院（治療系列）213312896.24合計84878392.33注：1阿德福韋抗病毒治療患者(huànzhě)43例，共檢出HBVDNA陽性152次；

2拉米夫定抗病毒治療患者51例，共檢出HBVDNA陽性133次。第十九頁，共二十六頁。編輯課件2、不同HBVDNA拷貝數(shù)中HBV－LP陽性率以及(yǐjí)OD值比較大蛋白試劑(shìjì)臨床研究組別HBVDNA大蛋白試劑結(jié)果HBVDNA拷貝數(shù)例數(shù)陽性例數(shù)陽性率（％）大蛋白OD1＜104(陰性)842321.380.266±0.0442104432967.440.416±0.0813105634673.020.504±0.2054106242187.500.898±0.1805107171694.121.275±0.31961082323100.001.428±0.238注：解放軍傳染病研究所，HBVDNA拷貝數(shù)對數(shù)值(shùzí)與HBV－LPOD值的相關(guān)系數(shù)r=0.945第二十頁，共二十六頁。編輯課件大蛋白試劑臨床(línchuánɡ)研究組別HBVDNA大蛋白試劑結(jié)果HBVDNA拷貝數(shù)例(次)數(shù)陽性例(次)數(shù)陽性率（％）陽性含量均值（ng）1103544888.8917.602104383797.3724.693105585696.5530.444106656396.9255.465＞106808010086.61合計/29528195.25/注：北京地壇醫(yī)院(yīyuàn)與沈陽傳染病醫(yī)院(yīyuàn)匯總，其中北京地壇醫(yī)院(yīyuàn)為阿德福韋抗病毒治療患者標(biāo)本。HBVDNA拷貝數(shù)對數(shù)值與HBV－LP含量（ng）的相關(guān)系數(shù)3、不同(bùtónɡ)HBVDNA拷貝數(shù)中HBV－LP陽性率以及含量比較r=0.935第二十一頁，共二十六頁。編輯課件大蛋白試劑臨床(línchuánɡ)研究第二十二頁，共二十六頁。編輯課件大蛋白試劑(shìjì)臨床研究考核單位HBVDNA（＋）HBV－LP（＋）HBeAg（＋）北京地壇醫(yī)院沈陽傳染病醫(yī)院例數(shù)例數(shù)比例（％）例數(shù)比例（％）39136894.1217745.275、HBVDNA、HBeAg與HBV－LP三者在乙肝患者中的比較(bǐjiào)第二十三頁，共二十六頁。編輯課件浙江湖州中心醫(yī)院拉米夫定治療(zhìliáo)監(jiān)測HBV－LP可以(kěyǐ)作為一個評估抗病毒治療效果以及判定治療終點的指標(biāo)，能夠合理的指導(dǎo)患者的用藥，避免過早停藥導(dǎo)致的病情反復(fù)。第二十四頁，共二十六頁。編輯課件第二十五頁，共二十六頁。編輯課件內(nèi)容(nèiróng)總結(jié)乙肝病毒解析

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