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文檔簡介
1.檢驗目的指導腦脊液CSF常規(guī)測定。2.方法原理2.1腦脊液是存在于腦室及蛛網(wǎng)膜下腔中的無色透明液體。由于脈絡叢上皮細胞對血漿中各種物質(zhì)的選擇性分泌和超濾作用,血漿中各種成分對血腦屏障的通透性各有不同。其中最易通過血腦屏障的是氯、鈉、鎂離子及乙;其次為清蛋白、葡萄糖、鈣離子、乳酸、氨基酸、尿素和肌;纖維蛋白原、補體、抗體、某些藥物、膽紅素、膽固醇則極難或不能通過。中樞神經(jīng)系統(tǒng)任何部位發(fā)生器質(zhì)性病變時,如感染、炎癥、腫瘤、外傷、水腫和阻塞等都可以引起腦脊液成分的改變。通過對腦脊液理學檢查,顯微鏡檢查、化學和免疫學檢查及腦脊液病原學檢查,可對疾病的診斷、治療和預后判斷提供依據(jù)。2.2腦脊液(CSF)常規(guī)測定內(nèi)容包括:顏色、性狀、有核細胞計數(shù)、紅細胞計數(shù)、潘氏試驗、細菌等。2.3潘氏(pandys)試驗:CSF中的球蛋白與苯酚結(jié)合,形成不溶性的蛋白鹽而產(chǎn)生白色混濁或沉淀。3.方法性數(shù)如性出、量間確度準性密、敏特1 顏色COLOR)2 透明度(clearity)3 凝固性(coagulabilit)4 腦脊液有核細胞計(CSF—NUCL)
6 中性粒細胞NE)7 淋巴細胞LY)8 單核細胞MO)9 潘氏試驗pandystes)5 腦脊液紅細胞計數(shù)CSF—RBC)4.標本類型4.1標本類型:新鮮CS。4.2標本拒收條件:拒收延遲室溫2h、冷藏6h未送達標本。4.3標本保存與穩(wěn)定性:一般室溫1h內(nèi)完成檢驗,久置可致細胞破壞,影響細胞計數(shù)及分類檢查。5.要求的容器、防腐劑或添加物、儀器、試劑或分析系統(tǒng)5.1標本容器BD無促凝成分紅頭管或潔凈干燥帶蓋玻璃管。5.2試劑5.2.1試劑組分:生理鹽水白細胞稀釋液劉氏快速瑞氏染色液
0.9%Nacl溶液1冰乙酸1ml分析純冰醋+蒸餾水至100ml)A液:曙紅、甲醇B液:亞甲藍潘氏試劑 10苯酚溶液(純苯酚10ml蒸餾水至100m)5.2.2試劑存儲和有效期:試劑名稱生理鹽水冰乙酸1%乙酸10%苯酚溶液劉氏快速瑞氏染色液
存儲條件有效期室溫 1年室溫 2年冷藏 1年室溫 1年室溫 2年
開瓶有效期位置1年 存貨柜/血常規(guī)室操作臺1年 藥品柜1年 試劑冰箱1年 藥品柜6個月 藥品柜/染色操作臺5.3儀器:OLYMPUS光學顯微鏡,血細胞計數(shù)板。6.校準程序(計量學溯源性)不適用7.質(zhì)量控制,控制品使用水平和頻率,允許限的糾正措施不適用8.程序步驟8.1一般性狀檢查輕輕混勻CSF觀察量顏色有凝和明(一般細胞數(shù)≥300μl個時或蛋白增加可產(chǎn)生混濁,并記錄。8.2顯微鏡檢查8.2.1細胞計數(shù)(無凝塊標本)(1)))
總括C,L。作1:1數(shù)數(shù)≥30個/μl時少0)(2:外觀 稀釋粉色/輕度混濁 1:20紅色/混濁 1:50帶血量極高/極度混濁1:100
樣本量 稀釋液/溶解劑20μl 380μl10μl 490μl10μl 990μl)??;)溶解RC:;)沖數(shù))紅數(shù)=細數(shù)2有:(1。(2)m×5n離。(3察L、C。(4。3離的F,200m×5mn離心,吸出上清于一,試上。824瑞氏染當NUL106/μl時進操。渣勻,薄有細分0個L示報。8.3潘氏試驗8.3.1試驗操作:取小試管一支,加入10%的石碳酸水溶液約5ml,用一次性吸管加一滴CSF上清液立即在黑色背景燈照下觀察結(jié)果。8.3.2結(jié)果判定:陰性:清晰透明。弱陽性(±:微呈白霧狀,在黑色背景下才能看到。陽性(+:灰白色云霧狀。(2+:白色渾濁。(3+):白色濃絮狀沉淀。(4+:白色凝塊。9.計算結(jié)果原理9.1顏色9.1.1紅色:常見于穿刺損傷或出血性病變。為區(qū)別蛛網(wǎng)膜下腔出血和穿刺損傷應注意:(1出過4沉。(2看。2黃色可舊網(wǎng)下腦血管、性炎核性腦炎癥黃引。913白色白多細加致見膿膜。914褐色色見膜素。915綠色見膿胞肺球型菌的炎膽紅素和腦。9.2透明度:腦脊液混濁程度與細胞數(shù)量有關,腦脊液中細胞數(shù)超過300×10/L出現(xiàn)。9.3凝固性:結(jié)核性腦膜炎靜置12-24小時后,標本表面有纖細的網(wǎng)膜形成。蛛網(wǎng)膜下腔梗阻時,可產(chǎn)生黃色膠凍狀。9.4潘氏試驗:有腦組織和腦脊髓膜疾患時常成陽性反應如化膿性腦脊髓膜炎、梅毒性中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病、脊髓灰質(zhì)炎、流行性腦炎等。腦出血時多呈陽性反應,如外傷性血液混入腦脊液中,亦呈陽性反應。9.5細胞分類:9.5.1中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變的CSF,細胞可增多,其增多的程度及細胞的種類與病變的性質(zhì)有關。9.5.2中樞神經(jīng)系統(tǒng)病毒感染、結(jié)核性或霉菌性腦脊髓膜炎時,細胞數(shù)可中度增加,常以淋巴細胞為主。9.5.3細菌感染時(化膿性腦脊髓膜炎,細胞數(shù)顯著增加,以中性粒細胞為主。9.5.4寄生蟲病時,可見較多的嗜酸性粒細胞。9.5.4腦室或蛛網(wǎng)膜下腔出血時,腦脊液內(nèi)可見多數(shù)紅細胞。10.生物參考區(qū)間顏色(COLOR) 無色 透 明 度透明(clearity)凝固(coagulabilit)無凝塊 潘氏試(pandys陰性OR弱陽性test)有核細胞計數(shù) 成人(0-8)×106/L中性粒細胞(NE)成人(0-6%)(CSF—NUCL) 兒(0-15×106/L新生兒(0-8%)新生兒(0-30)×106/L淋巴細胞LY) 成人(40-80) 單核細胞MO)成人(15-45%)新生兒(5-35) 新生兒(50-90)紅細胞計數(shù)CSF—RBC)0×10/L(常脊中細主淋細、核胞之為7:3,可細胞。11.警告值、危急值(適用時)12.檢驗結(jié)果可報告區(qū)間13.對超出可報告范圍的結(jié)果的處理13.1如檢到細菌時應議培養(yǎng)認。13.2有不能分類細胞應示上級管另行描報告如腦膜白血病或腫瘤細胞。14.實驗室解釋15.安全防護措施15.1所有樣品按具有潛在傳染性的標本處理。15.2測定后液試于20mL有效浸泡4入入。3原存48小時上
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