生產(chǎn)設(shè)備清潔后取樣方法和檢驗方法驗證方案 4/13ATVPxxxxxx生產(chǎn)設(shè)備清潔后取樣方法和檢驗方法驗證方案目錄概述目的驗證小組成員與職責(zé)驗證小組成員驗證小組職責(zé)4.驗證正文4.1驗證前確認4.2驗證方法描述4.3驗證內(nèi)容4.3.4.3.2偏差總結(jié)再驗證情況補充與修定評價與結(jié)論附錄概述生產(chǎn)過程中所用的生產(chǎn)設(shè)備均可能有殘留物遺留，為了最大程度的避免由于上一批次生產(chǎn)產(chǎn)品的殘留影響下一批次或其他品種，故必須對生產(chǎn)所用的設(shè)備進行清潔。清潔后要對該清洗方法進行取樣檢測殘留量。一般通常的取樣方法為棉簽擦拭法和淋洗法。目的本驗證方案的目的是考察清洗驗證涉及取樣過程和所用檢測方法的過程，是對人員取樣操作、殘留物轉(zhuǎn)移、測試過程的考察，考察項目最低定量限、線性、綜合回收率等。3.驗證小組成員與職責(zé)3.1驗證小組成員組長：xxx組員：xxx、xxx3.2驗證小組職責(zé)組長：質(zhì)量副總經(jīng)理xxx，負責(zé)批準驗證方案和驗證報告。組員：xxx，參與驗證方案的制定，對驗證操作過程監(jiān)督檢查，收集驗證資料和數(shù)據(jù)，參與起草驗證方案和驗證報告。組員：xxx，負責(zé)參與驗證方案的制定，對所取樣品進行化驗，收集數(shù)據(jù)并報告結(jié)果，審核驗證報告。組員：xxx，負責(zé)審核驗證方案，審核清潔驗證方案和報告，協(xié)助驗證方案的實施，并審核驗證報告。4.驗證正文4.1驗證前確認棉花/棉簽材質(zhì)：棉簽紫外分光光度計編號：校驗有效期□接受□不接受天平編號：校驗有效期□接受□不接受批號：4.2檢測方法描述噴出的溶液量計算單位面積上產(chǎn)品的量。B2.自然晾干不銹鋼板。B3.將棉簽用無水甲醇潤濕，除去棉簽上多余的溶液，按照“擦拭法和淋洗法取樣程序”進行。擦拭區(qū)域選擇整個噴涂面的中心區(qū)域單位面積(5cm×5cm)，整個擦拭采用同一根棉簽。每個濃度平行試驗3次。B4.取樣結(jié)束后，將棉簽分別放入25ml的試管中，用10ml無水甲醇稀釋至刻度，并標注相關(guān)取樣信息。B5.將上述15份樣品溶液和試驗溶液依次按照本方案中描述檢測方法進行測定。B6.回收率計算公式回收率(%)=實際測得值÷理論測得值×100％C.接受標準綜合回收率：≥70%綜合回收率RSD：≤15%D.實驗結(jié)果棉簽擦拭法綜合回收率結(jié)果系列檢測溶液實際測得值μg/ml對應(yīng)試驗濃度實際測得值μg/ml理論加入濃度μg/ml回收率%試驗濃度1123試驗濃度2123試驗濃度3123試驗濃度4123試驗濃度5123平均回收率％≥70%回收率RSD%≤15%備注：1.檢測溶液實際測得值為經(jīng)噴灑、稀釋后得到的檢測樣品；2.對應(yīng)試驗濃度實際測得值為由檢測得到的數(shù)值轉(zhuǎn)換至噴灑至表面上未擦拭前的濃度。E.結(jié)論4.3.2.1淋洗法綜合回收率驗證A.試驗溶液配制精密稱取適量對照品，用甲醇制成5個不同濃度溶液，作為研究溶液。5個不同濃度的溶液及其確定依據(jù)見附錄2描述。B.驗證過程B1.精密吸取1ml試驗溶液置于50ml圓底燒瓶中，并旋轉(zhuǎn)燒瓶使試驗溶液均勻地分布在燒瓶下部內(nèi)表面上。自然干燥或在30℃下溫和干燥。B2.向燒瓶中加入50ml甲醇，使之延壁快速留下，同時不斷轉(zhuǎn)動燒瓶。輕微搖晃燒瓶使溶液均勻。作為測試溶液。每個濃度平行試驗3次。B3.將上述15份樣品溶液和試驗溶液依次按照4.2.1.1檢測方法進行測定。B4.回收率計算公式回收率(%)=實際測得值÷理論測得值×100％C.接受標準綜合回收率：≥70%綜合回收率RSD：≤15%D.實驗結(jié)果淋洗法綜合回收率結(jié)果系列檢測溶液實際測得值μg/ml對應(yīng)試驗濃度實際測得值μg/ml理論加入濃度μg/ml回收率%試驗濃度1123試驗濃度2123試驗濃度3123試驗濃度4123試驗濃度5123平均回收率％≥70%回收率RSD%≤15%E.結(jié)論6.偏差總結(jié)如果出現(xiàn)偏差請詳細記錄，若沒有以N/A表示。7.再驗證情況如果存在下列情形之一時，須進行設(shè)備清潔程序的再驗證。清洗方法發(fā)生本質(zhì)性的改變時；設(shè)備體積、材質(zhì)等參數(shù)發(fā)生改變會影響清潔效果時；8.修改與補充如果出現(xiàn)修訂于補充，請詳細記錄，若沒有以N/A表示。9.評價與結(jié)論根據(jù)獲得的驗證數(shù)據(jù)情況進行評價。10.附錄附錄1線性范圍測試溶液濃度的確定附錄2回收率驗證測試溶液濃度的確定附錄3最大吸收波長掃描圖附錄4線性和范圍關(guān)系曲線附錄1線性范圍測試溶液濃度的確定本次研究線性范圍濃度點確定依據(jù)以LOQ濃度點為最低濃度點，最大允許殘留量（Ld）為最高濃度點來設(shè)定線性范圍的濃度點。最低濃度點確定由于LOQ即為在檢測時該方法能檢測到的最低濃度，故直接將LOQ濃度最為最低濃度點。最高濃度點確定采用擦拭法和淋洗法兩種方式下最大允許殘留量相對應(yīng)于可供檢測時的最高濃度點作為線性研究時的最高濃度。1.擦拭法方式下最高濃度點確定根據(jù)“產(chǎn)品生產(chǎn)設(shè)備清潔程序驗證方案”中計算得到的擦拭法下的最大允許殘留量，Ld為71.3μg/cm2；在清洗后取樣檢測時溶液中濃度為178.25μg/ml。說明：在按25cm2擦拭后取樣后，需要用10ml甲醇溶解后才能測定，在假定DOND3回收率在100%的情況下（即被甲醇100%提?。藭r擦拭前的濃度至少達到178.25μg/ml時方能保證置于最大允許殘留量的限度（Ld為71.3μg/cm2）；故在擦拭法方式下最大允許殘留量對應(yīng)的檢測時濃度為178.25μg/ml。2.淋洗法方式下最高濃度點確定根據(jù)“產(chǎn)品生產(chǎn)設(shè)備清潔程序驗證方案”中計算得到的淋洗法下的最大允許殘留量，最大Ld為109.0μg/ml，最小Ld為32.9μg/ml；該濃度即為在清洗后取樣檢測時的濃度。故在淋洗法方式下最大允許殘留量對應(yīng)的檢測時濃度為109.0μg/ml。本次研究線性范圍濃度點最高濃度點：178.25μg/ml最低濃度點：LOQ（如LOQ小于32.9μg/ml時，以32.9μg/ml為最低濃度）另外中間3個濃度點在范圍內(nèi)最高和最低濃度范圍內(nèi)合理均衡布置附錄2回收率驗證測試溶液濃度的確定本次研究回收率濃度點確定依據(jù)以LOQ濃度點為最低濃度點，最大允許殘留量（Ld）為最高濃度點來設(shè)定回收率的濃度點。擦拭法回收率測試溶液濃度的確定1.最高濃度點最大允許殘留量（Ld）來設(shè)定根據(jù)“產(chǎn)品生產(chǎn)設(shè)備清潔程序驗證方案”中計算得到的擦拭法下的最大允許殘留量，Ld為71.3μg/cm2；在清洗后取樣檢測時溶液中濃度為178.25μg/ml。說明：在按25cm2擦拭后取樣后，需要用10ml甲醇溶解后才能測定，在假定3回收率在100%的情況下（即被甲醇100%提取），此時擦拭前的濃度至少達到178.25μg/ml時方能保證置于最大允許殘留量的限度（Ld為71.3μg/cm2）；由于在按本方案進行模擬擦拭法回收率研究時，需要將取研究溶液10ml噴在20cm×20cm的區(qū)域內(nèi)，然后在5cm×5cm區(qū)域內(nèi)棉簽擦拭取樣，取樣后需要用10ml甲醇溶解后才能測定，考慮到棉簽轉(zhuǎn)移和檢測方法的綜合回收率最低限為70%，故此時研究的溶液濃度須達到4074μg/ml時方能保證在檢測時檢測濃度達到最大允許殘留量的限度（Ld為71.3μg/cm2；擦拭后檢測時濃度178.25μg/ml）；計算如下：178.25μg/ml×（20cm×20cm）×10ml/（（5cm×5cm）×10ml×70%）=4074μg/ml2.最低濃度點以LOQ濃度來設(shè)定：由于在檢測時該方法能檢測到的最低濃度為LOQ，由于在按本方案進行模擬擦拭法回收率研究時，需要將取研究溶液10ml噴在20cm×20cm的區(qū)域內(nèi)，然后在5cm×5cm區(qū)域內(nèi)棉簽擦拭取樣，取樣后需要用10ml甲醇溶解后才能測定，考慮到棉簽轉(zhuǎn)移和檢測方法的綜合回收率最低限為70%，故此時研究的溶液濃度須達到23LOQ時方能保證在檢測時檢測濃度達到最低濃度點以LOQ；計算如下：LOQ×（20cm×20cm）×10ml/（（5cm×5cm）×10ml×70%）=23LOQ3.故設(shè)定的濃度點為（即需要配制的取樣方法和檢驗方法回收率研究溶液濃度）:最高濃度點：4074μg/ml最低濃度點：23LOQ另外中間3個濃度點在范圍內(nèi)最高和最低濃度范圍內(nèi)合理均衡布置淋洗法回收率測試溶液濃度的確定1.最高濃度點最大允許殘留量（Ld）來設(shè)定根據(jù)“產(chǎn)品生產(chǎn)設(shè)備清潔程序驗證方案”中計算得到的淋洗法下的最大允許殘留量，Ld為最小32.9μg/ml；最大109.0μg/ml。該濃度即為在清洗后取樣檢測時的濃度。由于在按本方案進行模擬擦拭法回收率研究時，需要將取研究溶液1ml置于50ml圓底燒瓶中，待干后加入50ml甲醇溶解提取后得到的溶液才能測定，考慮到棉簽轉(zhuǎn)移和檢測方法的綜合回收率最低限為70%，故此時研究的溶液濃度須分別達到2350μg/ml和7786μg/ml時方能保證在檢測時檢測濃度達到最大允許殘留量的限度（Ld為最小32.9μg/ml；最大109.0μg/ml）；計算如下：32.9μg/ml×50ml/70%=2350μg/ml109.0μg/ml×50ml/70%=7786μg/ml2.最低濃度點以LOQ濃度來設(shè)定由于在檢測時該方法能檢測到的最低濃度為LOQ，由于在按本方案進行模擬擦拭法回收率研究時，需要將取研究溶液1ml置于50ml圓底燒瓶中，待干后加入50ml甲醇溶解提取后得到的溶液才能測定，考慮到棉簽