第五章抗體概念：抗體（antibody，Ab）機體受抗原刺激后B細胞分化為漿細胞，由漿細胞分泌的一種能與抗原特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。免疫球蛋白（immunoglobuin，Ig）具有抗體活性或化學結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白

所有的抗體都是免疫球蛋白；而免疫球蛋白不都是抗體。免疫球蛋白與抗體的區(qū)別：第一節(jié)抗體的結(jié)構(gòu)一、基本結(jié)構(gòu)經(jīng)二硫鍵共價結(jié)合2條重鏈(H鏈）和2條輕鏈（L鏈）：四肽鏈結(jié)構(gòu)-S-S-S-SS-SN端C端LLHH（以IgG為例）

1.重鏈（heavychain)：簡稱H鏈，由440～550個氨基酸組成，分子量約55KD～75KD。H鏈含有少量糖類，所以Ig屬于糖蛋白。根據(jù)H鏈的抗原性不同，可將免疫球蛋白（Ig)分為五類。IgG

的H鏈：γ鏈（gamma)IgA

的H鏈：α鏈(alpha)IgM

的H鏈：μ鏈(mu)IgD的H鏈：δ鏈(delta)IgE的H鏈：ε鏈(epsilon)二、重鏈和輕鏈五類免疫球蛋白結(jié)構(gòu)示意圖

2.輕鏈（lightchain）：簡稱L鏈，由211～217個氨基酸組成，分子量約25KD。根據(jù)L鏈的抗原性不同，把L鏈分成二型：κ型，λ型。同一個Ig分子上H鏈同類，L鏈同型，把Ig分子分成五類十型。（一）可變區(qū)（variableregion，V區(qū)）位于L鏈靠近N端的1/2和H鏈的1/4，這個區(qū)段的氨基酸組成、排列順序是可以變化的。超變區(qū)（hypervariableregion，HVR）或互補決定區(qū)（CDR）可分為CDR1，CDR2，CDR3是V區(qū)中氨基酸的組成和排列順序變化頻率更高的區(qū)域，也是抗體與抗原決定簇結(jié)合的部位。二、抗體的功能區(qū)高變區(qū)（互補決定區(qū)CDR）、抗原結(jié)合點、獨特型決定簇統(tǒng)一在此基礎(chǔ)上。（二）恒定區(qū)（constantregion，C區(qū)）

位于L鏈靠近C端的1/2和H鏈靠近C端的3/4區(qū)域，這一區(qū)域的氨基酸組成和排列順序比較穩(wěn)定，所以叫恒定區(qū)，H鏈和L鏈的恒定區(qū)分別稱為CH和CL。重鏈輕鏈N端C端可變區(qū)恒定區(qū)鉸鏈區(qū)二硫鍵（H鏈）（L鏈）(V區(qū))(C區(qū))抗原結(jié)合部位

一、免疫球蛋白的基本結(jié)構(gòu)：抗原（三）功能區(qū)輕鏈VL、

CL（二個）重鏈IgG、IgA、IgD：VH、

CH1

、CH2

、CH3

（四個），IgM、IgE：多了一個CH4功能區(qū)。

（以IgG為例）VL、VH：

結(jié)合抗原CL、CH1：部分遺傳標志CH2：結(jié)合補體、

通過胎盤CH3：結(jié)合細胞（FcR）

含有較大量的Pro，具有柔韌性，可折疊，分別形成T型和Y型;有利于Ig與不同距離的抗原決定簇結(jié)合。-S-S-S-SS-SNNCLHVHCH1CH2CH3（四）鉸鏈區(qū)（Hinge

region）（一）連接鏈（joiningchain，J鏈)(1)化學本質(zhì)：漿細胞分泌的多肽鏈(2)存在：IgM（五聚體）,SIgA（雙體），以二硫鍵的形式結(jié)合在Ig的H鏈上。連接5個單體IgM成五聚體，2個IgA成雙聚體，故J鏈起穩(wěn)定多聚體的作用。

三、抗體的其它結(jié)構(gòu)（二）分泌片（secretorypiece,SP）

1.化學本質(zhì):多肽鏈(70kD)2.來源：黏膜上皮細胞3.作用：

a.幫助IgA穿越黏膜

b.保護sIgA抵抗蛋白酶的水解作用J鏈J鏈分泌片Ig的其他成分木瓜蛋白酶四、抗體的水解片段（一）木瓜蛋白酶水解片段Fab段Fc段木瓜蛋白酶水解片段

IgG→2Fab+1Fc胃蛋白酶（二）胃蛋白酶水解片段F（ab’）2段pFc’段胃蛋白酶水解片段

IgG→F（ab′）2+pFc′第二節(jié)抗體分子的抗原表位指同一種屬內(nèi)所有個體Ig共有的抗原特異性，其抗原表位主要存在于Ig的C區(qū)（CH和CL）。一、同種型

1.類和亞類（根據(jù)H鏈的抗原性不同）

IgG—

γ(gamma)IgA—α(alpha)IgM—μ(mu)IgD—δ(delta)IgE—ε(epsilon)(1)類

(2)亞類

IgG：IgG1，IgG2，IgG3，IgG4

IgA：IgA1，IgA22.型和亞型(根據(jù)輕鏈C區(qū)抗原特異性不同分型)(1)型κ(kappa)型

λ(lambda)型(2)亞型(λ鏈)：

OZ(+)(或λ1)：第190位(亮氨酸)OZ(-)(或λ2)：第190位(精氨酸)Kern(+)(或λ3)：第154位(甘氨酸)Kern(-)(或λ4)：第154位(絲氨酸)

同一種屬內(nèi)不同個體的Ig分子抗原性不同，在同種異體間免疫可誘導免疫反應。這種抗原決定簇主要位于CH和CL。由個體遺傳基因所決定的，故稱為遺傳標記。1.IgG1、IgG2、IgG3的遺傳標記稱Gm,分別稱G1m,G2m,G3m。

2.IgA2的遺傳標記稱Am,分別稱A2m1、A2m2。

3.κ鏈的遺傳標記稱Km,分別稱Km1、Km2、Km2二、同種異型

同一個體不同B細胞克?。贵w形成細胞克?。┧a(chǎn)生的Ig分子，其V區(qū)的抗原特異性也不同。獨特型抗原決定簇存在Ig的V區(qū)，不同特異性的抗體其獨特型也不同除血清中的Ig外，淋巴細胞（T、B細胞）表面的抗原受體也具有獨特型決定簇。三、獨特型

病毒毒素結(jié)合毒素結(jié)合病毒使毒素失去毒性結(jié)合細菌阻止病毒感染細胞抑制細菌吸附第三節(jié)抗體分子的生物學作用一、特異性識別抗原二、通過經(jīng)典途徑激活補體Ab（IgM、IgG）+Ag→C1q→補體經(jīng)典途徑IgG4、IgA和IgE的凝聚物→

補體旁路途徑

(1)介導Ⅰ型超敏反應；(2)調(diào)理作用（opsonization）：IgG+抗原(顆粒性)→FcγR（單核、巨噬細胞及中性粒細胞）→促吞噬細胞吞噬；(3)ADCC：IgG+抗原(靶細胞)→FcγR（NK細胞→

殺傷靶細胞。

三、結(jié)合Fc受體單核吞噬細胞抗原吞噬細胞的調(diào)理作用Fc受體單核吞噬細胞抗原吞噬細胞的調(diào)理作用G表面抗原ADCCADCC效應FNK細胞Fc受體IgGADCC效應ADCC效應NK細胞FADCC效應ADCC效應四、結(jié)合細菌蛋白五、穿過胎盤和黏膜人IgGFc段+葡萄菌A蛋白（SPA)；人IgGFc段+鏈球菌(A、C和G群)G蛋白；而其Fab段活性不變(1)IgA介導的黏膜免疫作用(2)IgG通過胎盤特性：人類的IgG有四種亞型：IgG1、IgG2、IgG3、IgG41.血清中含量最多，占Ig總量的75%；

2.唯一能通過胎盤的抗體（在新生兒抗感染中起重要作用）；第四節(jié)抗體分子的特性和功能一、IgG

3.出生后3個月開始合成，3～5歲達成人水平

(8.0mg/ml～17mg/ml)；4.半衰期長，約23天?？垢腥镜闹饕贵w功能：抗菌抗體抗病毒抗體抗毒素抗體二、IgＭ

1.五聚體，分子量最大，又稱巨球蛋白；

2.人類發(fā)育過程中最早合成的Ig；

3.體液免疫應答最先產(chǎn)生的Ig：感染早期免疫；

4.半衰期5天—血清中特異性IgM水平增高提示有近期感染；

5.IgM不能通過胎盤→臍帶血或新生兒血清中IgM；水平升高表明胎兒有宮內(nèi)感染

6.B細胞膜IgM（mIgM）→體液免疫應答；

特性：1.分兩型血清型：占血清Ig10%~20%分泌型（SIgA）：主要分布于唾液、乳汁等分泌液中2.嬰兒可從母乳中獲得SIgA3.出生后4～6個月合成，青少年時期達成年人水平。功能：SIgA是黏膜局部抗感染的重要抗體。三、IgＡ1.由1個單體構(gòu)成，血清中含量極少；2.作為B細胞上的表面標志。IgD是B細胞的重要表面標志B細胞的分化過程中首先出現(xiàn)SmIgM，后來出現(xiàn)SmIgD它的出現(xiàn)標志著B細胞成熟了。四、IgＤ特性：1.血清中含量極微；2.具親細胞性（親細胞抗體）功能：與I型超敏反應有關(guān)。C4五、IgＥIgGIgMIgA/SIgAIgDIgE存在形式單體五聚體單體/二聚體單體單體相對分子質(zhì)量(×1000)146970160/385184188血清中總Ig百分含量70~755~1015~20＜10.002半衰期235633出現(xiàn)時間出生后三個月出生前出生后四個月晚晚五類抗體的特性比較第五節(jié)單克隆抗體定義：

由一個B細胞雜交瘤細胞系產(chǎn)生的只識別抗原分子上一種抗原決定簇的抗體。一、單克隆抗體技術(shù)的基本原理骨髓瘤細胞—無限增殖；小鼠脾B細胞—合成、分泌特異性抗體。二、單克隆抗體制備的基本方法抗原非分泌性小鼠骨髓瘤細胞脾細胞在PFG作用下細胞融合轉(zhuǎn)移到HAT培養(yǎng)基骨髓瘤細胞被HAT殺死，脾細胞逐漸死亡，融合細胞存活雜交瘤細胞的篩選和克隆建株篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞單克隆抗體的制備示意圖廣泛用于生命科學的各個領(lǐng)域。如：作為診斷試劑用于許多血清學檢測，用于治療腫瘤，自身免疫性疾病，抑制同種異體移植排斥反應。

三、單克隆抗體醫(yī)學上的應用第六節(jié)基因工程抗體

又稱重組抗體,是指利用重組DNA及蛋白質(zhì)工程技術(shù)對編碼抗體的基因按不同需要進行加工改造和重新裝配，經(jīng)轉(zhuǎn)染適當?shù)氖荏w細胞所表達的抗體分子。已被廣泛應用于疾病的臨床診斷、預防和治療及基礎(chǔ)理論研究等領(lǐng)域。

一、人源化抗體

以基因克隆及DNA重組技術(shù)改造鼠源性單克隆抗體，使其大部分氨基酸序列被人源序列所取代，這樣既保留了親本鼠克隆抗體的親合力和特異性，又降低了鼠單克隆抗體的異源性。如：人-鼠嵌合抗體二、全人源化抗體最理想的抗體分子,不含任何鼠源成分。此種抗體不僅完全避免了HAMA的產(chǎn)生，且特異性、親和力不受影響，毒副作用小，已成為治療性抗體藥物發(fā)展的必然趨勢。三、小分子抗體由抗體分子中抗原結(jié)合部位片段組建而成的抗體稱為小分子抗體。（一）單區(qū)抗體

；（二）單鏈抗體

；（三）二硫鍵穩(wěn)定抗體；（四）Fab片段

；四、特殊基因工程抗體（一）雙特異性抗體；（二）催化抗體；（三）抗體融合蛋白；小結(jié)掌握抗體與免疫球蛋白的區(qū)別。掌握抗體的結(jié)構(gòu)與特性免疫檢驗質(zhì)量控制包括定量實驗、半定量實驗和定性實驗三個方面。掌握五類抗體的功能。解釋各類抗體的功能。解釋抗體在人體免疫中所起的作用。習題1產(chǎn)婦初乳中含量最多的Ig是

A．slgAB．IgM

C．IgGD．IgAE．IgE2抗體主要存在于血清瓊脂電泳的

A。α球蛋白區(qū)

B．α球蛋白區(qū)

Cγ球蛋白區(qū)

D巨球蛋白區(qū)

E．白蛋白區(qū)3天然ABO血型抗體屬于

A．IgGD．IgAC．IgMD．IgDE．IgE4下列說法正確的是

A免疫球蛋白就是抗體

B．免疫球蛋白不是抗體

C免疫球蛋白與抗體無關(guān)

D抗體不——定是免疫球蛋白

E．免疫球蛋白不一定是抗體，抗體都是免疫球蛋白5在機體早期免疫防御中發(fā)揮重要作用的Ig是

A．IgMB．IgAC．IgDD．IgGE．1gE6關(guān)于免疫球蛋白的生物學功能，下列錯誤的是

A與抗原特異性結(jié)合

B激活補體

C形成攻膜復合體

D．介導ADCCE親細胞作用7關(guān)于IgM的特性，下列正確的是

A是分子量最小的IgB有鉸鏈區(qū)

C主要在血液中發(fā)揮抗感染作用

D在血內(nèi)含量高、半衰期長

E．激活補體的能力比IgG弱8．血清內(nèi)五類免疫球蛋白的含量由少到多的順序是

AIgD、IgG、IgM、ISE、IgAB．IgA、IgG、IgD、IgE、IgMC．IgG、IgA、IgM、IgD、IgEDISE、IgD、IgM、IgA、IgGE．IgM、IgG、IgA、IgE、IgD9膜表面免疫球蛋白(Smlg)指的是A、T細胞抗原受體B、B細胞抗原受體C、T細胞表面受體D、B細胞補體受體E、免疫活性細胞的抗原受體10免疫球蛋白肽鏈與抗原結(jié)合的功能區(qū)是A、CL、CH1B、CH2C、CH3D、CH3、

E、VH、VL11．木瓜蛋白酶可將IgG水解成何片段A、F(ab’)2B、FCC、FabD、FC及FabE、PEC’11能與肥大細胞和嗜堿性粒細胞結(jié)合的Ig，是

A．IgMB．IgGC．IgAD．IgDE．IgE12能通過胎盤，又能與葡萄球菌A蛋白結(jié)合的免疫球蛋白是A.IgAB．IgGCIgMD.lgEE.IgD13新生兒臍血中哪類Ig水平增高表示有宮內(nèi)感染AIgGBIgMCIgADIgEEIgD14主要在粘膜局部抗感染的Ig是AIgGBIgECIgDDSIgAEIgM15．人類IgG開始合成的時間是

A胚胎15周B新生兒期C出生后3個月D出生后4-6個月E胚胎末期16．免疫接種后首先產(chǎn)生的抗體是AIgMBIgGCIgADIgDE