一.大綱要求技術(shù)的原理及應(yīng)用二.根本內(nèi)容〔一〕.根本概念biopsy病理檢查，以明確病變的性質(zhì)。冰凍切片快速診斷(frozensextion)：用不經(jīng)固定的穎標(biāo)本，快速冷凍至-18進(jìn)展切片、HE20～30min細(xì)胞學(xué)檢查〔cytology態(tài)學(xué)的觀看，并作出定性診斷。目前主要用于腫瘤的診斷，推斷有無(wú)腫瘤細(xì)胞，是良性或惡性。也用于某些內(nèi)部器官炎癥性疾病的診斷和激素水平的判定等?！睭E染色HE醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中最根本也是應(yīng)用最廣泛的染色方法。染色結(jié)果：細(xì)胞核呈藍(lán)色，胞質(zhì)、肌肉、結(jié)締組織、紅細(xì)胞和嗜伊紅顆粒呈不同程度的紅色。鈣鹽和微生物也可染成藍(lán)色或藍(lán)紫色組織化學(xué)技術(shù)〔histochemistrytechniqueHE染片內(nèi)不易區(qū)分的病變或物質(zhì)。免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry制備的特異性抗體加在組織切片上，使之與相應(yīng)的抗原結(jié)合。特異性抗體通過(guò)某種方式連結(jié)辣根過(guò)氧化酶或堿性磷酸酶。顯色劑在酶的作用下氧化沉淀，將抗體所檢測(cè)的抗原在組織切片上顯示出來(lái)。生物芯片技術(shù)(biochiptechnique)：是將大量具有生物識(shí)別功能的分子或生物樣品有序的點(diǎn)陣排列在支持物上并與標(biāo)記的檢測(cè)分子同時(shí)反響或雜交，通過(guò)放射自顯影、熒光掃描、化學(xué)發(fā)光或酶標(biāo)顯示可獲得大量有用的生物信息的技術(shù)?；蛐酒?genechipDNA物外表上，產(chǎn)生二維DNA探針陣列，然后與標(biāo)記的樣品進(jìn)展雜交，通過(guò)檢測(cè)雜交信號(hào)來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)生物樣品快速、高效的檢測(cè)。組織芯片(tissuechip)：又稱組織微列陣(tissuemicroarray)，是將數(shù)十個(gè)、數(shù)百個(gè)乃至上千個(gè)小的組織片整齊地排列在某一載體〔通常是載玻片〕而成的微縮組織片。FISH從而對(duì)組織、細(xì)胞中待測(cè)的核酸進(jìn)展定性、定位和相對(duì)定量分析的一種爭(zhēng)論方法。應(yīng)用不同的探針可顯示某一種物種的全部基因、某一染色體染色片段及單拷貝序列，結(jié)合共聚焦激光顯微鏡可對(duì)間期核及染色體進(jìn)展三維構(gòu)造爭(zhēng)論。比較基因組雜交技術(shù)〔CGH：根本原理用不同的熒光染料分別標(biāo)記正常人基因組DNA腫瘤細(xì)胞DNA，然后與正常人中期染色體雜交，通過(guò)檢測(cè)染色體上兩種熒光〔紅、綠〕的相DNADNADNA流式細(xì)胞技術(shù)〔FCM高速準(zhǔn)確的定量分析和分類。原代培育〔primaryculture：由體內(nèi)直接取出組織或細(xì)胞進(jìn)展培育。傳代培育(subculture)：把細(xì)胞自原代培育的培育瓶中分別、稀釋，而移至另一的培育瓶中的操作程序，即為傳代或再培育，以便持續(xù)培育，得到大量同種細(xì)胞或建成細(xì)胞株，維持細(xì)胞種連續(xù)。蛋白質(zhì)組(proteome):指基因組表達(dá)的全部蛋白質(zhì)及其存在方式?！瞤roteomics式。其內(nèi)容包括鑒定蛋白質(zhì)的表達(dá)、存在方式(修飾方式)、構(gòu)造、功能和相互作用等?！捕?臨床病理根本學(xué)問(wèn)活檢不能用電灼取材?；顧z的分類及目的：活檢分三類：⑴術(shù)前活檢：在治療性手術(shù)前或其它治療〔如放療或化療〕前所作的活檢。常規(guī)甲醛固定，石蠟包埋，HE3～7⑵術(shù)中活檢：在治療性手術(shù)或探查性手術(shù)進(jìn)展中所作的活檢。用不固定的穎標(biāo)本快速冷凍切片，20～30min內(nèi)完成定性診斷，以便指導(dǎo)手術(shù)的進(jìn)展。其準(zhǔn)確率僅在80％左右，不及石蠟切片。其目的：①確定病變的性質(zhì)，以便確定手術(shù)方案；②了解病變的狀況，以便確定手術(shù)的范圍；③確定所取的標(biāo)本是否含有預(yù)定的組織器官或病變。⑶術(shù)后活檢：對(duì)治療性手術(shù)切除的組織器官進(jìn)展較全面的病理學(xué)檢查。常規(guī)甲醛固定，石蠟包埋，HE3～7淋巴結(jié)活檢要留意：①有多組淋巴結(jié)腫大，避開(kāi)取腹股溝淋巴結(jié)，由于這組淋巴結(jié)的慢性非特異性炎癥和纖維化最常見(jiàn)，形態(tài)背景簡(jiǎn)潔，不利于特異性病變的診斷；②同一個(gè)區(qū)域有多個(gè)淋巴結(jié)腫大，避開(kāi)取最小的淋巴結(jié)；③要將淋巴結(jié)完整摘除，切忌將其切成多個(gè)不規(guī)章10％福爾馬林固定，勿用酒精；⑤固定前要將淋巴結(jié)切開(kāi)。0.2～0.3cm1～1.5cm21cmx1cmx0.2cm為好，以免鋪張?jiān)噭?；②?duì)于皮膚、腔道器官及囊壁組織等應(yīng)剪成細(xì)條，較長(zhǎng)時(shí)可卷成同心圓狀；③骨組織需先經(jīng)過(guò)脫鈣處理；④組織塊如有血液、粘液、糞便等污物，先用水沖洗干凈再取材；⑤腫瘤標(biāo)本取材，應(yīng)選腫瘤主體、腫瘤鄰近組織及腫瘤兩端的切緣〔假設(shè)管道器官〕分別取材，應(yīng)留意切取腫瘤與正常組織交界處；⑥穎組織需保存時(shí)，應(yīng)用錫箔紙包好，快速過(guò)液氮，于－70o標(biāo)本固定：⑴.常用固定液及配制方法：1〕單純固定液：①甲醛，也稱福爾馬林，一般作為固定液使用的是10％的福爾馬林。配制10ml90ml4％pH7.2～7.480％～95％濃度為好。酒精作為固定劑不利于染色質(zhì)的固定，要證明細(xì)胞內(nèi)的脂肪、類脂質(zhì)及色素存在的標(biāo)本不能用酒精固定?；旌瞎潭ㄒ海孩貯-FBouinZenker；④Carnoy4％carnoy固定液等。95％酒精。4腫瘤和器官的切開(kāi)方法：⑴腫塊：沿最大徑線切第一刀，勿完全切斷，以保持標(biāo)本的完整性。假設(shè)腫塊較大，可相間1cm⑵甲狀腺：沿標(biāo)本的最大直徑作第一個(gè)切面。⑶肺葉：通過(guò)病灶或腫塊作冠狀切面。⑷食管：沿病灶對(duì)側(cè)縱行剪開(kāi)管壁。假設(shè)整個(gè)周徑為病變累及，則沿最薄處剪開(kāi)。⑸胃：沿胃大彎自賁門(mén)側(cè)剪開(kāi)，由于病變多位于胃小彎。假設(shè)病變位于胃大彎，則沿胃小彎剪開(kāi)。⑹腸：沿病灶對(duì)側(cè)剪開(kāi)腸壁。假設(shè)不能確定病灶位置，則沿腸系膜附著緣剪開(kāi)。YT⑼腎：通過(guò)腎門(mén)作冠狀切面。脾：通過(guò)脾門(mén)與脾長(zhǎng)軸垂直切第一刀，然后相距1－2cm作多個(gè)平行切面。乳腺：將皮面對(duì)下，通過(guò)腫塊中點(diǎn)與乳頭連線切第一刀。假設(shè)腫塊較大，可相距1cm作多個(gè)平行切面。勿切斷皮膚，以保持標(biāo)本的完整性。淋巴結(jié)：通過(guò)淋巴結(jié)門(mén)作冠狀切面。假設(shè)淋巴結(jié)最大徑線超過(guò)2cm，則沿著最大徑線垂直方向在該徑線中點(diǎn)切第一刀，必要時(shí)相距0.5cm平行切其次刀。勿完全切斷，以保持標(biāo)本的完整性。肝：沿病灶最大徑線切第一刀。假設(shè)病灶較大，則相距1～2cm作多個(gè)平行切面。勿完全切斷，以保持標(biāo)本的完整性。胰腺：無(wú)論標(biāo)本大小如何，均沿胰腺縱軸的垂直方向作橫切面。常用特別染色方法及應(yīng)用：⑴結(jié)締組織染色：膠原纖維染色：Masson三色染色法染膠原纖維，結(jié)果是膠原纖維呈藍(lán)色，肌纖維和紅細(xì)VG網(wǎng)狀纖維染色用氨性銀溶液浸染能使網(wǎng)狀纖維變成黑色，又稱為嗜銀染色。其在腫瘤病可見(jiàn)網(wǎng)狀纖維，在肉瘤則是銀染陽(yáng)性的物質(zhì)分隔單個(gè)瘤細(xì)胞；②推斷原位癌與早期浸潤(rùn)癌，前者基地膜完整，后者基底膜斷裂崩解。彈力纖維染色常用于皮膚組織的增殖變化、老年性肺氣腫顯示纖維斷裂、變性或萎縮、高血壓病時(shí)小動(dòng)脈管壁彈力纖維的特別增生等，對(duì)彈力纖維瘤的診斷有打算作用。糖類染色：CarnoyPAS內(nèi)空泡的性質(zhì)、糖原貯積病的診斷及某些透亮細(xì)胞腫瘤的鑒別診斷有重要作用。粘液物質(zhì)染色可用愛(ài)先藍(lán)〔AB〕PAS別和證明細(xì)胞內(nèi)是否含有粘液，如鑒別粘液瘤、粘液肉瘤、脂肪肉瘤、胃腸道低分化腺癌等。粘液物質(zhì)，ABPAS組織中脂類的顯示法脂質(zhì)的抱負(fù)固定液是甲醛鈣或中性緩沖甲醛，脂肪染色用冰凍切III但對(duì)脂肪肉瘤的診斷無(wú)明顯價(jià)值。用剛果紅或甲基紫顯示淀粉樣物質(zhì)；普魯士藍(lán)反響可顯示含鐵的色素。冰凍切片檢查的原則：臨床需依據(jù)病理報(bào)告來(lái)打算手術(shù)的方式或范圍時(shí)才送標(biāo)本作冰凍檢查。剖腹探查僅僅為了活檢時(shí)，不能在取出小塊組織后就匆忙關(guān)腹，須待冰凍報(bào)告見(jiàn)到病變組織才能關(guān)腹。免疫組織化學(xué)檢測(cè)的作用：①顯示組織切片內(nèi)是否存在某種抗原；②顯示該抗原存在于組織或細(xì)胞什么部位；③在同等染色條件下，通過(guò)比較陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)量或強(qiáng)度，可作半定量分析。電子顯微鏡技術(shù)：電子顯微鏡簡(jiǎn)稱電鏡，包括透射式電鏡和掃描式電鏡兩種根本類型。透射式電鏡主要用于觀看細(xì)胞內(nèi)部的微小構(gòu)造，檢查組織要求超薄切片，即切片的厚度應(yīng)在50nm左右，不能超過(guò)100nm。掃描電鏡不需要超薄切片。透射電鏡技術(shù)可以觀看細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞器、細(xì)胞骨架或大分子水平的變化，在病理診斷中主要用于腎臟的細(xì)針穿刺活檢標(biāo)本，來(lái)進(jìn)展腎小球腎炎的分型和腫瘤細(xì)胞分化的方向及細(xì)胞器的變化。掃描電鏡用于觀看細(xì)胞外表的微小構(gòu)造和相互關(guān)系?！踩?病理常用技術(shù)激光共聚焦掃描顯微鏡〔Confocallaserscanningmicroscopy〕可以從組織細(xì)胞水平直接進(jìn)入亞細(xì)胞水平觀看，且可利用計(jì)算機(jī)及圖像處理系統(tǒng)對(duì)組織、細(xì)胞及亞細(xì)胞構(gòu)造進(jìn)展斷層掃描，三維立體空間構(gòu)造再現(xiàn)，將形態(tài)學(xué)爭(zhēng)論從平面圖像水平提高到三維立體水平，圖像清楚明媚；還可在觀看培育細(xì)胞形態(tài)構(gòu)造的同時(shí)，直接顯示活體細(xì)胞內(nèi)的代謝變化等。組織芯片的特點(diǎn)：①體積小、信息含量大，可依據(jù)不同需要進(jìn)展組合和設(shè)計(jì)；②既可以用于形態(tài)學(xué)觀看、也可用于免疫組織化學(xué)染色、原位雜交、熒光原位分子雜交〔FISH〕等原位組織細(xì)胞學(xué)觀看和爭(zhēng)論，具有高效、快速、低消耗、良好的自身內(nèi)比照和可比性強(qiáng)；③可批量制作組織芯片及其試驗(yàn)結(jié)果的計(jì)算機(jī)分析。顯微切割技術(shù)：目前主要使用的是液壓把握手動(dòng)顯微切割〔顯微操作儀〕和激光捕獲顯微切割。用于切割的材料可以是冰凍組織切片、石蠟切片、細(xì)胞涂片、細(xì)胞鋪片、細(xì)胞爬片等。顯微切割的應(yīng)用：①細(xì)胞基因突變及微衛(wèi)星變異的爭(zhēng)論；②細(xì)胞基因拷貝數(shù)的變化和甲基化RT－PCR；④比較基因組雜交；⑤cDNA〔芯片。FISH的應(yīng)用：①基因定位與基因制圖；②基因診斷；③間期細(xì)胞遺傳學(xué)FISH在腫瘤生物學(xué)中的應(yīng)用：①腫瘤細(xì)胞遺傳學(xué)；②基因定位；③病毒基因插入基因組局部的檢測(cè)；④基因的擴(kuò)增與缺失。蛋白質(zhì)組〔proteome〕技術(shù)的組成、蛋白質(zhì)組學(xué)的爭(zhēng)論領(lǐng)域的組成及蛋白質(zhì)組學(xué)在腫瘤爭(zhēng)論中的應(yīng)用：蛋白質(zhì)組技術(shù)主要由蛋白質(zhì)分別、蛋白質(zhì)鑒定和生物信息學(xué)三局部組成。①用于蛋白質(zhì)分別技術(shù)方面的有雙向凝膠電泳(2DE)、雙向“高效”柱層析等。②用于蛋白質(zhì)鑒定的技術(shù)如質(zhì)譜技術(shù)、凝膠圖像分析、蛋白質(zhì)和多肽的Ｎ端、Ｃ端測(cè)序及氨基酸組成分析等。③用于分析大量數(shù)據(jù)的生物工程信息學(xué)等。其中雙向凝膠電泳(twodimensionalpolyacrylamidegels,2－D)和質(zhì)譜技術(shù)(massspectrometry,MS)是蛋白質(zhì)組學(xué)爭(zhēng)論最重要的核心技術(shù)。3征爭(zhēng)論;②差異顯示蛋白質(zhì)組學(xué),即對(duì)腫瘤等疾病有廣泛應(yīng)用前景的蛋白質(zhì)表達(dá)水平的比較;③應(yīng)用質(zhì)譜技術(shù)和酵母雙雜交體系對(duì)蛋白質(zhì)間相互作用的爭(zhēng)論。蛋白質(zhì)組學(xué)在腫瘤爭(zhēng)論中的應(yīng)用：①查找腫瘤特異標(biāo)志物蛋白,建立并完善腫瘤蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)庫(kù)；②分子通路信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制爭(zhēng)論:蛋白質(zhì)組技術(shù)也給細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的爭(zhēng)論帶來(lái)的思路；③無(wú)創(chuàng)傷與早期診斷；④分類鑒定:通過(guò)蛋白質(zhì)的變化對(duì)腫瘤進(jìn)展分類也是蛋白質(zhì)組學(xué)的重要用途之一；⑤推斷預(yù)后；⑥選擇藥物靶標(biāo)。三.典型試題舉例及分析〔一〕選擇題以下說(shuō)法正確的選項(xiàng)是沿食管病灶同側(cè)縱行剪開(kāi)管壁。假設(shè)整個(gè)周徑為病變累及，則沿最厚處剪開(kāi)。假設(shè)病變位于胃大彎，則取材時(shí)沿胃小彎剪開(kāi)。對(duì)送檢的腸組織取材，假設(shè)不能確定病灶位置，則沿腸系膜附著緣的對(duì)側(cè)剪開(kāi)。肝癌標(biāo)本，沿病灶最小徑線切第一刀，假設(shè)病灶較大，則相距1～2cm作多個(gè)平行切面。以上都不是〔答案：B〕分析：對(duì)于食管的病變應(yīng)沿病灶對(duì)側(cè)縱行剪開(kāi)管壁。假設(shè)整個(gè)周徑為病變累及，則沿最薄處剪開(kāi)；對(duì)于腸道病變沿病灶對(duì)側(cè)剪開(kāi)腸壁，假設(shè)不能確定病灶位置，則沿腸系膜附著緣剪開(kāi)；對(duì)1～2cm胃臟標(biāo)本正確的取材方法是：首先沿胃小彎剪開(kāi)，然后觀看病灶的位置取材。1－2cm一般沿胃大彎剪開(kāi)，然后觀看病灶的位置取材沿著胃臟的幽門(mén)或賁門(mén)隨機(jī)剪開(kāi)，找到病灶，然后隨機(jī)取材。以上都不是〔C〕胃大彎，則沿胃小彎剪開(kāi)。肝臟腫瘤標(biāo)本正確的取材方法是首先分別分別左右肝葉然后隨機(jī)在腫瘤中心松軟處取材。沿肝臟最大長(zhǎng)徑間隔1－2cm平行切開(kāi)，在腫瘤與非腫瘤交界處取材。沿肝臟橫徑隨機(jī)切開(kāi)，將病灶隨機(jī)切成多個(gè)不規(guī)章碎塊，任選取其中一塊即可。細(xì)針穿刺是最好的取材方法。以上都不是?！睟〕1～2cm行切面。而腫瘤標(biāo)本取材原則，應(yīng)選腫瘤主體、腫瘤鄰近組織及腫瘤兩端的切緣〔假設(shè)管道器官〕分別取材，應(yīng)留意切取腫瘤與正常組織交界處。細(xì)針穿刺穿刺到的是格外少的一點(diǎn)組織，B用電鏡檢查的標(biāo)本用哪種固定液A10％福爾馬林B70％酒精C95％酒精D4％戊二醛Ecarnoy〔答案：D〕分析：10％福爾馬林、80％～95％濃度是單純固定液，它們都可以用于固定大多數(shù)做常規(guī)切片的組織，但酒精作為固定劑不利于染色質(zhì)的固定，要證明細(xì)胞內(nèi)的脂肪、類脂質(zhì)及色素存在的標(biāo)本不能用酒精固定；95％酒精用于固定細(xì)胞涂片、刷片；70％酒精不用于固定標(biāo)本；carnoyD4％戊二醛用于固定做電鏡檢查的標(biāo)本。組織塊取材的厚度以多厚為宜〔答案：A〕A0.2～0.3cmB1～1.5cmC2～3cmD任憑E按需要〔答案：A〕0.2～0.3cm1～1.5cm21cmx1cmx0.2cm以免鋪張?jiān)噭?。以下說(shuō)法正確的選項(xiàng)是用于免疫組織化學(xué)的切片越大越好，以便觀看對(duì)于皮膚、腔道器官及囊壁組織等取材應(yīng)剪成細(xì)條即使組織塊有血液等污物也不應(yīng)用水沖洗，以免組織細(xì)胞特有的抗原喪失DE以上都不是〔答案：B〕1cmx1cmx0.2cm對(duì)于皮膚、腔道器官及囊壁組織等應(yīng)剪成細(xì)條，較長(zhǎng)時(shí)可卷成同心圓狀；取材時(shí)組織塊如有血液、粘液、糞便等污物，先用水沖洗干凈再取材；腫瘤標(biāo)本取材，應(yīng)選腫瘤主體、腫瘤鄰近組織及腫瘤兩端的切緣〔假設(shè)管道器官〕分別取材，應(yīng)留意切取腫瘤與正常組織交界處；MassonA膠原纖維B網(wǎng)狀纖維C淀粉樣物質(zhì)D脂肪E以上都不是〔答案：A〕分析：Masson三色染色法用于染膠原纖維；嗜銀染色染網(wǎng)狀纖維；剛果紅或甲基紫用于顯示III以下哪種特別染色有助于鑒別卵巢纖維瘤與膜細(xì)胞瘤AMassonB嗜銀染色CPASDIIIE剛果紅染色〔答案：D〕分析：膜細(xì)胞瘤內(nèi)有黃色類脂區(qū)，瘤細(xì)胞內(nèi)或瘤細(xì)胞間有類脂小滴，蘇丹III染色這些類脂小滴呈橘紅色；而卵巢纖維瘤則不會(huì)消滅這種狀況。脂肪染色的標(biāo)本應(yīng)如何處理A無(wú)水乙醇固定B用冰凍切片或炭蠟包埋切片C10％的福爾馬林D4％戊二醛E75％酒精固定〔B〕分析：脂質(zhì)的抱負(fù)固定液是甲醛鈣或中性緩沖甲醛，脂肪染色用冰凍切片或炭蠟包埋切片；酒精不能用于固定要證明細(xì)胞內(nèi)的脂肪、類脂質(zhì)及色素存在的標(biāo)本；10％的福爾馬林用于固HE4％戊二醛用于固定用于電鏡檢查的標(biāo)本。用哪種特別染色可以顯示淀粉樣物質(zhì)AIIIBCDEPAS〔D〕分析：蘇丹III染色染脂肪；嗜銀染色顯示網(wǎng)狀纖維；普魯士藍(lán)反響顯示含鐵的色素；剛果紅或甲基紫顯示淀粉樣物質(zhì)；PAS鼻咽癌組織應(yīng)選哪種標(biāo)記ACKBVimentinCLCADCgAECD68〔A〕分析：CKVimentinLCA標(biāo)記淋巴細(xì)胞，可用于淋巴瘤的診斷、鑒別；CgA標(biāo)記物，可用于神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的關(guān)心診斷、鑒別：CD68為組織細(xì)胞標(biāo)記物，可用于與組織細(xì)胞來(lái)源相關(guān)的疾病的關(guān)心診斷，如惡纖組等。AFP黑色素細(xì)胞瘤B乳腺癌C肝細(xì)胞癌D宮內(nèi)膜癌E鼻咽癌〔C〕分析：肝細(xì)胞癌和內(nèi)胚竇瘤的標(biāo)記物為AFP；黑色素細(xì)胞的標(biāo)記物為HMB45、S-100；ER、PR。以下哪組選項(xiàng)可以區(qū)分癌和肉瘤ACKEMABCKVimentinCCD68VimentinDEMACgAELCAGFAP〔B〕LCA〔淋巴細(xì)胞標(biāo)記物CgA為神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)記物；GFAP為神經(jīng)組織標(biāo)記物。以下哪一項(xiàng)不是上皮性標(biāo)記物ACKBEMACCEADmac387ECK19〔D〕分析：CK、EMA、CEA、CK19均為上皮性標(biāo)記物；mac387為組織細(xì)胞標(biāo)記物?，F(xiàn)在最常用的免疫組織化學(xué)的方法是ASPABCCLSABDSABCEEnVision〔E〕分析：EnVision法是一高敏感性顯色系統(tǒng)，把傳統(tǒng)的二抗、三抗分別孵育合為一次孵育，由于不再有二抗與三抗通過(guò)生物素結(jié)合，故整個(gè)系統(tǒng)不受內(nèi)源性生物素的干擾，避開(kāi)了非特異SP、ABC、LSAB、SABC有關(guān)免疫組織化學(xué)應(yīng)用以下哪一項(xiàng)為哪一項(xiàng)正確的A免疫組織化學(xué)技術(shù)是鑒別良惡性腫瘤的有效方法之一B．免疫組織化學(xué)技術(shù)應(yīng)用對(duì)腫瘤的預(yù)后沒(méi)有幫助C．免疫組織化學(xué)技術(shù)是幫助區(qū)分組織學(xué)來(lái)源的有效方法之一D．免疫組織化學(xué)技術(shù)還可以確定腫瘤的臨床分期E．以上都不是〔C〕分析：免疫組織化學(xué)主要檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞間的正?；蛱貏e物質(zhì)，以確定某些腫瘤的組織發(fā)生及類型，以及估價(jià)免疫損傷性疾病的性質(zhì)、發(fā)病機(jī)制和預(yù)后。腫瘤的臨床分期主要是依據(jù)TMN法：原位腫瘤大小、有無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。免疫組織化學(xué)不能確定腫瘤的臨床分期。透射式電鏡要求切片的厚度A30－60nmB130－160nmC200nmD沒(méi)有嚴(yán)格的要求E越薄越好〔A〕分析：透射式電鏡主要用于觀看細(xì)胞內(nèi)部的微小構(gòu)造，檢查組織要求超薄切片，即切片的厚50nm100nm。以下說(shuō)法不正確的選項(xiàng)是A組織芯片體積小、信息含量大，可依據(jù)不同需要進(jìn)展組合和設(shè)計(jì)BC顯微切割技術(shù)用于切割的材料可以是冰凍組織切片、細(xì)胞涂片、細(xì)胞鋪片、細(xì)胞爬片等，但不能是石蠟切片DE激光共聚焦掃描顯微鏡可在觀看培育細(xì)胞形態(tài)構(gòu)造的同時(shí)，直接顯示活體細(xì)胞內(nèi)的代謝變化〔C〕分析：顯微切割技術(shù)用于切割的材料可以是冰凍組織切片、細(xì)胞涂片、細(xì)胞鋪片、細(xì)胞爬片等，也可以是石蠟切片。ConfocallaserscanningmicroscopyA可在觀看培育細(xì)胞形態(tài)構(gòu)造的同時(shí)，直接顯示活體細(xì)胞內(nèi)的代謝變化形態(tài)學(xué)爭(zhēng)論從平面圖像水平提高到三維立體水平，圖像清楚明媚可利用計(jì)算機(jī)及圖像處理系統(tǒng)對(duì)組織、細(xì)胞及亞細(xì)胞構(gòu)造進(jìn)展斷層掃描，再現(xiàn)三維立體空間構(gòu)造以上皆不是〔A〕分析：Confocallaserscanningmicroscopy可在觀看培育細(xì)胞形態(tài)構(gòu)造的同時(shí)，直接顯示活體細(xì)胞內(nèi)的代謝變化等。FISH在腫瘤生物學(xué)中的應(yīng)用A腫瘤細(xì)胞遺傳學(xué)BC病毒基因插入基因組局部的檢測(cè)D基因的擴(kuò)增與缺失E以上都是〔E〕分析：FISH在腫瘤生物學(xué)中的應(yīng)用包括：①腫瘤細(xì)胞遺傳學(xué)；②基因定位；③病毒基因插入基因組局部的檢測(cè)；④基因的擴(kuò)增與缺失?！捕趁~解釋：活體組織檢查冰凍切片快速診斷比較基因組雜交技術(shù)〔CGH〕HE基因芯片熒光原位分子雜交染色體分析技術(shù)〔FISH〕蛋白質(zhì)組學(xué)細(xì)胞學(xué)檢查名詞解釋答案參考根本概念〔三〕簡(jiǎn)答題簡(jiǎn)述淋巴結(jié)活檢要留意的事項(xiàng)。進(jìn)展冰凍切片檢查的原則。簡(jiǎn)述組織取材的一般原則。最常用于固定病理活檢標(biāo)本的是哪種固定液？如何配制？網(wǎng)狀纖維染色即嗜銀染色在腫瘤病理診斷中的作用。簡(jiǎn)述在免疫組化染色前為何要對(duì)組織切片進(jìn)展抗原修復(fù)。蛋白質(zhì)組學(xué)在腫瘤爭(zhēng)論中有何應(yīng)用？簡(jiǎn)述免疫組織化學(xué)的作用。簡(jiǎn)述FISH簡(jiǎn)述組織芯片的特點(diǎn)。答案及分析：1.①有多組淋巴結(jié)腫大，避開(kāi)取腹股溝淋巴結(jié)，由于這組淋巴結(jié)的慢性非特異性炎癥和纖維化最常見(jiàn)，形態(tài)背景簡(jiǎn)潔，不利于特異性病變的診斷；②同一個(gè)區(qū)域有多個(gè)淋巴結(jié)腫大，避開(kāi)福爾馬林固定，勿用酒精；⑤固定前要將淋巴結(jié)切開(kāi)。活檢時(shí)，不能在取出小塊組織后就匆忙關(guān)腹，須待冰凍報(bào)告見(jiàn)到病變組織才能關(guān)腹。0.2～0.3cm1～1.5cm21cmx1cmx0.2cm為好，以免鋪張?jiān)噭?；②?duì)于皮膚、腔道器官及囊壁組織等應(yīng)剪成細(xì)條，較長(zhǎng)時(shí)可卷成同心圓狀；③骨組織需先經(jīng)過(guò)脫鈣處理；④組織塊如有血液、粘液、糞便等污物，先用水沖洗干凈再取材；⑤腫瘤標(biāo)本取材，應(yīng)選腫瘤主體、腫瘤鄰近組織及腫瘤兩端的切緣分別取材，應(yīng)留意切取腫瘤與正常組織交界處；⑥穎組織需保存時(shí)，應(yīng)用錫箔紙包好，快速過(guò)液氮，于－70O答案：10％福爾馬林；配制：1409①區(qū)分上皮性和非上皮性腫瘤，在惡性上皮性腫瘤的癌巢四周可見(jiàn)網(wǎng)狀纖維，在肉瘤則是銀染陽(yáng)性的物質(zhì)分隔單個(gè)瘤細(xì)胞；②推斷原位癌與早期浸潤(rùn)癌，前者基底膜完整，后者基底膜斷裂崩解。經(jīng)甲醛液固定、石蠟包埋的組織，其組織中的抗原蛋白與甲醛產(chǎn)生交聯(lián)，使組織中抗原的打算簇被封閉，抗體難以和抗原充分結(jié)合。因此需要對(duì)組織切片進(jìn)展抗原修復(fù)，目的是翻開(kāi)組織抗原蛋白與甲醛的交聯(lián)，暴露組織抗原，以提高組織抗原的檢出率。①查找腫瘤特異標(biāo)志物蛋白,建立并完善腫瘤蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)庫(kù)；②分子通路信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制選擇藥物靶標(biāo)。①顯示組織切片內(nèi)是否存在某種抗原；②顯示該抗原存在于組織或細(xì)胞的部位；③在同等染色條件下，通過(guò)比較陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)量或強(qiáng)度，可作半定量分析。原理：是應(yīng)用熒光標(biāo)記物標(biāo)記堿