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紫外熒光分光光度計(jì)UVfluorescencespectrophotometer報(bào)告人:熊哲紫外熒光分光光度計(jì)報(bào)告人:熊哲PPT模板下載:/moban/行業(yè)PPT模板:/hangye/節(jié)日PPT模板:/jieri/PPT素材下載:/sucai/PPT背景圖片:/beijing/PPT圖表下載:/tubiao/優(yōu)秀PPT下載:/xiazai/PPT教程:/powerpoint/Word教程:/word/Excel教程:/excel/資料下載:/ziliao/PPT課件下載:/kejian/范文下載:/fanwen/試卷下載:/shiti/教案下載:/jiaoan/PPT論壇:
目錄CONTENTS原理01影響因素02操作步驟03注意事項(xiàng)04PPT模板下載:/moban/第一章原理3熒光定義:當(dāng)紫外線照射到某些物質(zhì)的時(shí)候,這些物質(zhì)會(huì)發(fā)射出各種顏色和不同強(qiáng)度的可見光,而當(dāng)紫外線停止照射時(shí),所發(fā)射的光也隨之快速的消失,這種光被稱為熒光。第一章原理3熒光定義:4第一章原理熒光光度計(jì)簡(jiǎn)單結(jié)構(gòu)熒光光度計(jì)結(jié)構(gòu)示意圖光源發(fā)出的復(fù)色光,首先經(jīng)過激發(fā)單色器,可以分解為單色光來激發(fā)樣品,樣品受激發(fā)以后,發(fā)射出來的光又是復(fù)色光,所以需要發(fā)射單色器再次將其分解為單色光,檢測(cè)器檢測(cè)發(fā)射出來的光的強(qiáng)度。為了防止激發(fā)光到達(dá)檢測(cè)器影響測(cè)試結(jié)果,發(fā)射單色器和激發(fā)單色器一般成直角排列。
4第一章原理熒光光度計(jì)簡(jiǎn)單結(jié)構(gòu)熒光光度計(jì)結(jié)構(gòu)示意圖光源5第一章原理同步熒光光譜激發(fā)、發(fā)射單色器以一定波長(zhǎng)間隔或能量間隔同時(shí)掃描,以激發(fā)波長(zhǎng)或者是發(fā)射波長(zhǎng)為恒坐標(biāo),以熒光強(qiáng)度(IF)為縱坐標(biāo)作圖,便得同步熒光光譜。同步熒光法按光譜掃描方式的不同可分為恒(固定)波長(zhǎng)法、恒能量法、可變角法和恒基體法。恒能量分析法恒能量同步熒光光譜法在克服拉曼光、提高分析靈敏度方面均有顯著效果。恒能量同步熒光法系在激發(fā)波長(zhǎng)λex和發(fā)射波長(zhǎng)λem的同時(shí)掃描過程中保持兩者一恒定的能量差Δ?關(guān)系。恒能量同步熒光法對(duì)于多環(huán)芳烴的鑒別和測(cè)定特別有利。5第一章原理同步熒光光譜激發(fā)、發(fā)射單色器以一定波長(zhǎng)間隔或6第一章原理熒光強(qiáng)度與溶液濃度的關(guān)系熒光是由物質(zhì)吸收光能后發(fā)射而出,因此,溶液的熒光強(qiáng)度F和溶液吸收光能的程度以及物質(zhì)的熒光頻率有關(guān):K’為常數(shù),取決于熒光物質(zhì)的量子效率Φ,根據(jù)L—B定律:6第一章原理熒光強(qiáng)度與溶液濃度的關(guān)系熒光是由物質(zhì)吸收光能7第一章原理熒光強(qiáng)度與溶液濃度的關(guān)系當(dāng)2.303εbc≤0.05時(shí)(濃度很小,溶液較稀時(shí)),上式括號(hào)內(nèi)第一項(xiàng)以后的
各項(xiàng)均可忽略不計(jì),所以:
對(duì)于一熒光物質(zhì)的稀溶液,當(dāng)I0
及b一定時(shí),即在低濃度(2.303εbc≤0.05)時(shí),溶液的熒光強(qiáng)度與熒光物質(zhì)的濃度呈(線性)正比關(guān)系。然而,如果2.303εbc≥0.05時(shí),則熒光強(qiáng)度和溶液的濃度不呈線性關(guān)系,此時(shí)應(yīng)考慮冪級(jí)數(shù)中的二次方甚至三次方項(xiàng)。隨著溶液濃度的進(jìn)一步加大,將會(huì)出現(xiàn)熒光強(qiáng)度不僅不隨溶液濃度線性增大,甚至隨著濃度的增大而下降的現(xiàn)象,這是由濃度效應(yīng)而導(dǎo)致的。7第一章原理熒光強(qiáng)度與溶液濃度的關(guān)系當(dāng)2.303εbc8第一章原理熒光強(qiáng)度的濃度效應(yīng)內(nèi)濾效應(yīng)。當(dāng)溶液濃度過高時(shí),溶液中雜質(zhì)對(duì)入射光的吸收作用增大,相當(dāng)于降低了激發(fā)光的強(qiáng)度。另一方面,濃度過高時(shí),入射光被液池前部的熒光物質(zhì)強(qiáng)烈吸收后,處于液池中、后部的熒光物質(zhì),則因受到的入射光大大減弱而使熒光強(qiáng)度大大下降;而儀器的探測(cè)窗口通常是對(duì)準(zhǔn)液池中部的,從而導(dǎo)致了所檢測(cè)到的熒光強(qiáng)度大大下降。在較高濃度的溶液中,可能發(fā)生溶質(zhì)間的相互作用,產(chǎn)生熒光物質(zhì)的激發(fā)態(tài)分子與其基態(tài)分子中的二聚物或與其他溶質(zhì)分子的復(fù)合物,從而導(dǎo)致熒光光譜的改變和/或熒光強(qiáng)度的下降。當(dāng)濃度更大時(shí),甚至?xí)纬蔁晒馕镔|(zhì)的基態(tài)分子聚集體,導(dǎo)致熒光強(qiáng)度更嚴(yán)重的下降。假如熒光物質(zhì)的發(fā)射光譜與其吸收光譜呈現(xiàn)重疊,便可能發(fā)生所發(fā)射的熒光被部分再吸收的現(xiàn)象,導(dǎo)致熒光強(qiáng)度下降。溶液的濃度增大時(shí)會(huì)促使再吸收的現(xiàn)象加劇。8第一章原理熒光強(qiáng)度的濃度效應(yīng)內(nèi)濾效應(yīng)。當(dāng)溶液濃度過高時(shí)9第一章原理Thewavelengthisabriefindicationofthearomaticringsizes(e.g.,<290nmformonorings,290-320nmforaromaticringsystemscontainingtwofusedbenzenerings,etc.9第一章原理Thewavelengthisabr10第一章原理儀器結(jié)構(gòu)10第一章原理儀器結(jié)構(gòu)11第一章原理儀器結(jié)構(gòu)11第一章原理儀器結(jié)構(gòu)PPT模板下載:/moban/行業(yè)PPT模板:/hangye/節(jié)日PPT模板:/jieri/PPT素材下載:/sucai/PPT背景圖片:/beijing/PPT圖表下載:/tubiao/優(yōu)秀PPT下載:/xiazai/PPT教程:/powerpoint/Word教程:/word/Excel教程:/excel/資料下載:/ziliao/PPT課件下載:/kejian/范文下載:/fanwen/試卷下載:/shiti/教案下載:/jiaoan/PPT論壇:
目錄CONTENTS原理01影響因素02操作步驟03注意事項(xiàng)04PPT模板下載:/moban/13第二章影響因素影響熒光強(qiáng)度的因素影響熒光強(qiáng)度的因素:pH溶劑溫度其它因素:濃度:熒光與溶液濃度只在很稀的情況下才成立。溶液太濃,由于激發(fā)光束和發(fā)射光束都產(chǎn)生吸收,造成非線性。氧分子的熒光淬滅。如果溶劑沒有除氣時(shí)。光解作用。激發(fā)光束與樣品溶液發(fā)射光解(褪色)反應(yīng)。樣品混合物的光譜重疊,激發(fā)、發(fā)射的譜帶重疊。調(diào)節(jié)狹縫寬度。污染:玻璃容器,移液管等。較小的環(huán)境效應(yīng):重原子效應(yīng),雜質(zhì)淬滅,粘度。13第二章影響因素影響熒光強(qiáng)度的因素影響熒光強(qiáng)度的因素:PPT模板下載:/moban/行業(yè)PPT模板:/hangye/節(jié)日PPT模板:/jieri/PPT素材下載:/sucai/PPT背景圖片:/beijing/PPT圖表下載:/tubiao/優(yōu)秀PPT下載:/xiazai/PPT教程:/powerpoint/Word教程:/word/Excel教程:/excel/資料下載:/ziliao/PPT課件下載:/kejian/范文下載:/fanwen/試卷下載:/shiti/教案下載:/jiaoan/PPT論壇:
目錄CONTENTS原理01影響因素02操作步驟03注意事項(xiàng)04PPT模板下載:/moban/15技術(shù)參數(shù)第三章操作步驟波長(zhǎng)范圍:200-700nm熒光強(qiáng)度:0-1000恒能量差:-2800cm-1狹縫寬度:2.5nm、5nm電壓值:400-1000參考文獻(xiàn):JohnR.Kershaw,etal."FluorescenceSpectroscopicAnalysisofTarsfromthePyrolysisofaVictorianBrownCoalinaWire-MeshReactor."Energy&Fuels14.2(2000).15技術(shù)參數(shù)第三章操作步驟波長(zhǎng)范圍:200-700nm參16配樣第三章操作步驟測(cè)試樣品的濃度應(yīng)使用甲醇稀釋到4ppm或更低(熒光強(qiáng)度與樣品濃度基本線性相關(guān))。取樣取樣前應(yīng)使用甲醇清洗比色皿,并使用擦鏡紙擦干比色皿外壁,比色皿中樣品量達(dá)到最大容量3/4即可,測(cè)試完畢后使用甲醇清洗干凈后(不要放在烘箱中),放置于比色皿盒中。裝樣使用比色皿時(shí)應(yīng)配戴干凈的無粉乳膠手套,拿取比色皿時(shí)應(yīng)拿住比色皿頂端的棱邊,不觸碰比色皿透光部分。16配樣第三章操作步驟測(cè)試樣品的濃度應(yīng)使用甲醇稀釋到4p17第三章操作步驟軟件操作光譜掃描儀器檢定17第三章操作步驟軟件操作光譜掃描儀器檢定18第三章操作步驟Validate(儀器檢定)CaryEclipse主菜單雙擊Validate進(jìn)入這一頁單擊Tests進(jìn)入下一頁測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)選擇頁面18第三章操作步驟Validate(儀器檢定)Car19第三章操作步驟Validate(儀器檢定)激發(fā)波長(zhǎng)精度測(cè)試(氙燈發(fā)射線)。發(fā)射波長(zhǎng)精度測(cè)試(氙燈發(fā)射線)。光譜帶寬精度測(cè)試(激發(fā)狹縫)。光譜帶寬精度測(cè)試(發(fā)射狹縫)。雜散光測(cè)試。水的拉曼峰測(cè)試(激發(fā)波長(zhǎng)350nm)水的拉曼峰測(cè)試(激發(fā)波長(zhǎng)500nm)19第三章操作步驟Validate(儀器檢定)激發(fā)波長(zhǎng)20第三章操作步驟軟件操作儀器設(shè)置:熒光模式掃描類型選擇Synchronous,XMode選擇cm-1模式(由于軟件兼容性問題,需要多次點(diǎn)擊cm-1按鈕),輸入-2800;常用波長(zhǎng)掃描范圍為200nm~700nm(通常250nm~500nm即可獲取足夠數(shù)據(jù)),狹縫寬度均設(shè)置為2.5(也可設(shè)置為5,狹縫寬度越大,信號(hào)強(qiáng)度越高),掃描速率建議使用Slow。20第三章操作步驟軟件操作儀器設(shè)置:熒光模式21第三章操作步驟軟件操作當(dāng)信號(hào)強(qiáng)度太低時(shí),可點(diǎn)擊Setup中Options選項(xiàng),更改Detectorvoltage值,Detectorvoltage值越高,信號(hào)強(qiáng)度越強(qiáng),測(cè)試前調(diào)整到最大信號(hào)強(qiáng)度為600~800即可。退出軟件前保存數(shù)據(jù)。21第三章操作步驟軟件操作當(dāng)信號(hào)強(qiáng)度太低時(shí),可點(diǎn)擊SetPPT模板下載:/moban/行業(yè)PPT模板:/hangye/節(jié)日PPT模板:/jieri/PPT素材下載:/sucai/PPT背景圖片:/beijing/PPT圖表下載:/tubiao/優(yōu)秀PPT下載:/xiazai/PPT教程:/powerpoint/Word教程:/word/Excel教程:/excel/資料下載:/ziliao/PPT課件下載:/kejian/范文下載:/fanwen/試卷下載:/shit
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