第一節(jié)脂肪酸類化合物

一、概述定義脂肪酸是脂肪族中含有羧基一類化合物。2.分布這類化合物廣泛分布于動(dòng)植物中。3.生物合成以乙酰輔酶A和丙二酸單酰輔酶A為原料而被生物合成，它們在生物體內(nèi)幾乎均以酯形式存在。其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第1頁1．飽和脂肪酸棕櫚酸（16:0）：CH3-(CH2)14-COOH

硬脂酸（18:0）：CH3-(CH2)16-COOH2．不飽和脂肪酸

（1）單不飽和脂肪酸分子中有一個(gè)雙鍵。油酸（18:1）：CH3-(CH2)7-CH=CH-(CH2)7-COOH棕櫚油酸（16:1）：CH3-(CH2)5-CH=CH-(CH2)7-COOH（2）多不飽和脂肪酸分子中有兩個(gè)以上雙鍵。二、脂肪酸結(jié)構(gòu)分類其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第2頁亞油酸（18:2）：CH3-(CH2)4-(CH=CH-CH2)2-(CH2)6-COOHα-亞麻酸（18:3）：CH3-CH2-(CH=CH-CH2)3-(CH2)6-COOHγ-亞麻酸（18:3）：CH3-(CH2)4-（CH=CH-CH2)3-(CH2)3-COOH

花生四烯酸（20:4）：CH3-(CH2)4-(CH=CH-CH2)4-(CH2)2-COOH二十碳五烯酸（20:5）CH3-CH2-(CH=CH-CH2)5-(CH2)2-COOH，EPA二十二碳六烯酸（22:6）：CH3-CH2-(CH=CH-CH2)6-CH2-COOH,DHA分布：含2個(gè)或3個(gè)雙鍵脂肪酸-植物油脂4個(gè)以上雙鍵多不飽和脂肪酸-海洋動(dòng)物脂肪其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第3頁三、脂肪酸理化性質(zhì)1．溶解性

脂肪酸不溶于水，溶于乙醚、己烷、苯、氯仿、熱乙醇等有機(jī)溶劑，可溶于冷氫氧化鈉溶液。2．酸性

脂肪酸含有羧基，可與堿結(jié)合成鹽。3．羥基置換反應(yīng)

羧基中羥基可被鹵素、烴氧基、酰氧基、氨基等置換，分別生成酰鹵、酯、酸酐和酰胺。4．酸敗

脂肪酸在空氣中置久，會(huì)產(chǎn)生難聞氣味，這種改變稱為酸敗。其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第4頁5．顯色反應(yīng)（1）碘酸鉀-碘化鉀試驗(yàn)（2）溴四氯化碳試驗(yàn)（3）高錳酸鉀試驗(yàn)

（4）溴-麝香草酚藍(lán)試驗(yàn)

樣品溶液加溴-麝香草酚藍(lán)試液，呈藍(lán)色。其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第5頁四、脂肪酸提取與分離1．提?。?）有機(jī)溶劑提取法

慣用乙醚、石油醚及環(huán)己烷等親脂性有機(jī)溶劑進(jìn)行提取，回收溶劑即得粗脂肪酸。（2）超臨界流體萃取法

通常在0.1Kpa~5Kpa，溫度30℃~45℃下提取總脂肪酸。其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第6頁2．分離（1）蒸餾法減壓分餾和分子蒸餾兩類方法。（2）丙酮冷凍法原理：碳鏈長度及飽和程度不一樣脂肪酸，在過冷丙酮溶劑中溶解度不一樣，借此到達(dá)分離目標(biāo)。操作：將脂肪酸混合物加到預(yù)先冷至-25℃以下丙酮中，攪拌，濾過，除去結(jié)晶，濃縮后，即得含有較高濃度EPA及DHA。其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第7頁（3）脂肪酸鹽結(jié)晶法

將脂肪酸混合物經(jīng)氫氧化鈉醇溶液皂化為脂肪酸鹽，冷卻，使飽和及單不飽和脂肪酸鹽析出，濾液酸化提取，得高濃度多不飽和脂肪酸。此法適合用于工業(yè)生產(chǎn)。（4）尿素結(jié)晶法

原理：尿素能與脂肪族化合物形成加合物，形成加合物能力與脂肪酸飽和程度相關(guān)，不飽和程度愈低，愈易形成加合物。操作：將脂肪酸混合物與尿素醇溶液混合，保溫?cái)嚢?，冷卻，濾過，得較高濃度EPA和DHA。其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第8頁第二節(jié)有機(jī)含硫化合物芥子苷類-白芥子與黑芥子

芥子苷通式白芥子苷sinalbin黑芥子苷sinigrin其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第9頁芥子苷類化合物特點(diǎn)：1.在植物體內(nèi)通常以鉀鹽形式存在，但有時(shí)也以鈉鹽、銨鹽形式存在。2.水解在中性條件下，以芥子苷酶進(jìn)行水解，先生成葡萄糖和硫代羥肟酸，后者經(jīng)轉(zhuǎn)位最終產(chǎn)生異硫氰酸酯。其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第10頁2.大蒜新素（allitridi）-大蒜

性質(zhì)：淡黃色油狀液體，相對密度1.085，折光率1.580（20℃）。藥理作用：大蒜新素含有抗病原微生物、抗腫瘤、降血脂、去除自由基及保護(hù)肝、胃等作用。CH2=CH—CH2—S—S—S—CH2—CH=CH2

大蒜新素（allitridi）其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第11頁蔊菜（Rorippamontana）全草或花水煮沸，濾過濾液減壓濃縮濃縮液加入乙醇至乙醇含量為75%，過濾沉淀濾液減壓濃縮，10℃下放置，濾過沉淀濾液3.蔊菜素Rorifon

其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第12頁沉淀40%NaOH溶液處理，水洗至中性粗品乙醇重結(jié)晶，硅膠柱色譜，EtOAc洗脫乙酸乙酯洗脫液濃縮，加Et2O至混濁，濾過蔊菜素祛疾作用較強(qiáng)，鎮(zhèn)咳作用次之，平喘作用微弱。用于慢性支氣管炎，可使痰量降低，咳喘減輕。此結(jié)晶不溶于酸或堿溶液，遇碘化鉍鉀呈橙紅色。其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第13頁第三節(jié)氨基酸、環(huán)肽、蛋白質(zhì)和酶使君子氨酸（quisqualicacid）海人草氨酸（kainicacid）使君子（Quisqualisindica）鷓鴣茶（Caloglossaleprieuii）一、氨基酸其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第14頁南瓜子氨酸（cucurbitine）三七素（dencichine）

田七氨酸天門冬素（asparagine）

其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第15頁（二）氨基酸結(jié)構(gòu)與分類中性、酸性和堿性氨基酸氨基和羧基相對位置氨基和羧基數(shù)目α-氨基酸、β-氨基酸、γ-氨基酸等其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第16頁（三）氨基酸理化性質(zhì)性狀無色結(jié)晶，具較高熔點(diǎn)溶解性易溶于水，難溶于有機(jī)溶劑成鹽與強(qiáng)酸、強(qiáng)堿均能成鹽；分子內(nèi)氨基和羧基可相互作用生成鹽其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第17頁等電點(diǎn)當(dāng)將氨基酸溶液調(diào)至某一特定pH值時(shí)，氨基酸分子中羧基電離和氨基電離趨勢恰好相等，這時(shí)溶液pH值稱為該氨基酸等電點(diǎn)。不一樣氨基酸，含有不一樣等電點(diǎn)。在氨基酸等電點(diǎn)時(shí)，其溶解度最小，能夠沉淀析出。

酸性氨基酸2.8~3.2中性氨基酸4.8~6.3堿性氨基酸7.6~10.8其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第18頁茚三酮反應(yīng)與亞硝酸反應(yīng)

除亞氨基酸（脯氨酸、羥脯氨酸）外，α-氨基酸中氨基能與亞硝酸作用，放出氮?dú)猓搔?羥基酸。其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第19頁（四）氨基酸檢識1．理化檢識（1）Ninhydrin反應(yīng)取供試液1ml，加0.2%茚三酮溶液2～3滴，搖勻，在沸水浴中加熱5分鐘，冷卻后，如顯藍(lán)色或藍(lán)紫色，表明含有氨基酸、多肽或蛋白質(zhì)。供試液制備：取中藥粗粉1~2g，加水10~20ml溫浸1小時(shí)，濾過，得濾液。其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第20頁（2）吲哚醌試劑（Isatin反應(yīng)）

(3)1,2－茶醌－4－硫酸試劑（Folin試劑）

其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第21頁2．色譜檢識（1）紙色譜

展開劑：①正丁醇-醋酸-乙醇-水（4:1:1:2）②甲醇-水-吡啶（20:20:4）③水飽和酚（2）薄層色譜展開劑：①正丁醇-醋酸-水（4:1:5，上層）②氯仿-甲醇-17%氨水（2:2:1）③96%乙醇-26%氨水（77:23）④酚-水（3:1）其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第22頁（五）氨基酸提取分離（1）水提法

其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第23頁（2）稀乙醇提取法其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第24頁(1）溶劑法

原理：依據(jù)各種氨基酸在水和乙醇等溶劑中溶解度不一樣，將氨基酸彼此分離。胱氨酸和酪氨酸在冷水中極難溶解，而其它氨基酸易溶，故可將這兩種氨基酸與其它氨基酸分離；酪氨酸在熱水中溶解度大，而胱氨酸在冷、熱水中溶解度均小，借此分離。氨基酸分離其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第25頁（2）成鹽法

其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第26頁其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第27頁（3）電泳法

將總氨基酸水溶液調(diào)至適當(dāng)pH，于電泳槽或紙片上，在一定電場中，中性氨基酸留在原點(diǎn)，帶凈正電荷堿性氨基酸移向陰極，帶凈負(fù)電荷酸性氨基酸則移向陽極，此種現(xiàn)象稱為電泳。氨基酸電泳移速，與氨基酸本身所帶電荷、緩沖液離子性質(zhì)、pH值、粘度、溫度等相關(guān)。溶液pH越靠近等電點(diǎn)，氨基酸凈電荷越低，離子移動(dòng)速度越慢；反之，則加緊。

控制電泳液pH，可使氨基酸完全分離。其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第28頁電壓：0～30kV；分離柱為毛細(xì)管空管，內(nèi)徑100μm；紫外檢測器，檢測波長280nm；緩沖液：5mMNaH2PO4緩沖液（pH3.0）；樣品：色氨酸(0.50g/L)、酪氨酸(飽和)混合稀鹽酸溶液。高效毛細(xì)管電泳儀其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第29頁

總氨基酸水液pH5.5時(shí)陽離子交換樹脂交換氨基酸強(qiáng)度堿性>中性>酸性陰離子交換樹脂交換氨基酸強(qiáng)度酸性>中性>堿性（4）離子交換樹脂法

其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第30頁二、環(huán)肽（cyclopeptides）

1．定義

指由酰胺鍵或肽鍵形成一類環(huán)狀肽類化合物。主要起源于植物、海洋生物和微生物等。

2.生物活性抗腫瘤、抗病毒和免疫調(diào)整作用：didemB-

海洋被囊動(dòng)物(Trididemnumsolidum)

安眠作用：Zizyphine-酸棗仁（Ziziphusjujuba）其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第31頁二、分類IIIIIIA-B=-CHH-，CH（CO）CH2-，-COCH2R1，R2=芳基，烷基R3=氨基酸殘基部分其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第32頁3．環(huán)肽理化性質(zhì)（1）性狀普通易于結(jié)晶，熔點(diǎn)多高于260℃，有旋光性。（2）溶解性易溶于水，可溶于甲醇、氯仿等有機(jī)溶劑。4．環(huán)肽提取分離（1）酸堿法

采取經(jīng)典生物堿提取法，即酸提取液經(jīng)中和、濃縮、堿化后，用硅膠柱色譜分離，不一樣百分比氯仿-甲醇（99:1～70:30）洗脫。適用范圍：Ⅰ型～Ⅲ型環(huán)肽分離。其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第33頁（2）溶劑法甲醇或乙醇提取，提取液濃縮，經(jīng)溶劑（多用醋酸乙酯或氯仿）分離，經(jīng)過硅膠柱色譜、高效液相色譜、制備薄層色譜以及制備衍生物等方法深入分離。此法適合于Ⅴ型和Ⅵ型環(huán)肽分離。其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第34頁5．環(huán)肽檢識

-薄層色譜吸附劑：硅膠G或硅膠H展開劑：氯仿-甲醇（9:1）顯色劑：0.2%茚三酮溶液其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第35頁茜草中環(huán)肽提取與分離其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第36頁其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第37頁三、蛋白質(zhì)和酶一、概述

（一）定義

蛋白質(zhì)為氨基酸經(jīng)肽鍵相連聚合而成得高分子化合物（分子量幾萬～幾百萬），酶為具高度特異催化性蛋白質(zhì)。

蛋白質(zhì)普通作為雜質(zhì)除去（中藥注射劑中有蛋白質(zhì)可引發(fā)異性蛋白過敏）。但有些蛋白質(zhì)具一定生理活性或藥理作用。

天花粉蛋白中期引產(chǎn)菠蘿蛋白酶抗水腫，抗炎雷丸素（蛋白酶）

殺絳及鉤蟲

超氧化歧化酶（SOD）延緩機(jī)體衰老其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第38頁２．蛋白質(zhì)和酶理化性質(zhì)（1）溶解性

多數(shù)蛋白質(zhì)和酶溶于水，不溶于有機(jī)溶劑。蛋白質(zhì)溶解度受pH影響。（2）分子量

蛋白質(zhì)和酶溶液含有親水膠體特征，分子量多在一萬以上，高可達(dá)一千萬左右，為高分子物質(zhì)，不能透過半透膜，此性質(zhì)可用于提純蛋白質(zhì)。（3）兩性和等電點(diǎn)

蛋白質(zhì)分子兩端有氨基和羧基，同氨基酸一樣含有兩性和等電點(diǎn)。其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第39頁（4）鹽析和變性蛋白質(zhì)和酶在水溶液中可被高濃度硫酸銨或氯化鈉溶液鹽析而沉淀，此性質(zhì)是可逆。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)和酶被加熱，或與酸、堿等作用時(shí)，則變性而失去活性，此反應(yīng)不可逆。（5）水解蛋白質(zhì)在酸、堿、酶等作用下可逐步水解，最終產(chǎn)物為各種α-氨基酸。（6）酶解酶含有很高催化性及專屬性。如麥芽糖酶（maltase）只能水解α-苷鍵，而對β-苷鍵無作用。其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第40頁（7）沉淀反應(yīng)①與酸作用：蛋白質(zhì)與鞣質(zhì)、三氯醋酸、苦味酸、硅鎢酸等反應(yīng)產(chǎn)生不溶性物質(zhì)。②與金屬鹽作用：蛋白質(zhì)與各種金屬鹽如氯化高汞、硫酸銅等反應(yīng)產(chǎn)生沉淀。（8）顏色反應(yīng)①Biuret反應(yīng)：蛋白質(zhì)在堿性溶液中與稀硫酸銅溶液作用，產(chǎn)生紅色或紫紅色。②Dansyl反應(yīng)：分子中末端氨基在碳酸氫鈉溶液中與1-二甲氨基萘5-磺酰氯反應(yīng)生成對應(yīng)磺酰胺衍生物，顯黃色熒光其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第41頁3.蛋白質(zhì)與酶提取與分離普通采取水或5%～8%氯化鈉水溶液提取蛋白質(zhì)其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第42頁1．分級沉淀法分離

（1）有機(jī)溶劑分級沉淀法

溶劑：EtOH,MeOH

其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第43頁（2）無機(jī)鹽分級沉淀法

其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第44頁（3）pH分級沉淀法利用蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)時(shí)溶解度最小原理改變pH值進(jìn)行沉淀。

其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第45頁②透析法除去粗蛋白中鹽類及其它小分子雜質(zhì)③超速離心法

不一樣分子量蛋白質(zhì)經(jīng)超速離心，其沉降速度有顯著差異，借以分離不一樣分子量蛋白質(zhì)混合物。④色譜法慣用色譜法有離子交換色譜法、葡聚糖凝膠色譜法等。其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第46頁①加熱沉淀試驗(yàn)

②Biuret反應(yīng)

③Solwaypurple反應(yīng)

3.蛋白質(zhì)與酶檢識薄層吸附劑：硅膠G展開劑：氯仿-甲醇（或丙酮）（9:1）顯色劑：2%茚三酮溶液其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第47頁天花粉蛋白提取其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第48頁ThankYou!其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第49頁第十三章中藥復(fù)方藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究其他成分醫(yī)學(xué)知識專家講座第50頁復(fù)方原意：以兩個(gè)或兩個(gè)以上單方組成方劑

金人成無己《傷寒明理論·序》當(dāng)代人所