試驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)

一、為何要進行微生物學(xué)、寄生蟲控制一）、試驗動物微生物學(xué)、寄生蟲危害急性感染潛在感染工作人員、喂養(yǎng)人員健康威協(xié)人獸共患動物（大批）死亡，造成試驗中止影響試驗結(jié)果準確性和可靠性實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第1頁二）、試驗動物學(xué)微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)控制意義是確保試驗動物質(zhì)量及標準化必要伎倆。管理標準化檢測標準化過檢測以確保試驗動物及工作人員、喂養(yǎng)人員健康確保動物試驗順利進行，試驗結(jié)果準確和可靠實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第2頁二、按試驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)控制分類一）、國外（表一）1、普通健康動物（ConventionalAnimals,CV）2、無特定病原體動物(SpecificPathogenFree,SPF）3、無菌動物（包含悉生動物）二）、國內(nèi)(表二)1、普通動物（ConventionalAnimals,CV）2、清潔動物（CleanAnimals,CL）3、無特定病原體動物(SpecificPathogenFree,SPF）4、無菌動物（包含悉生動物Germfreeanimals,GF;Gnotobioticanimals,GN）實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第3頁普通動物

（Conventionalanimal,CV）一、概念不攜帶所要求人獸共患病病原和動物烈性傳染病病原。是微生物控制級別最低試驗動物；喂養(yǎng)在開放環(huán)境中。二、喂養(yǎng)管理1、建立嚴格消毒防疫制度2、飼料、墊料要消毒并預(yù)防野鼠污染，使用標準顆粒飼料3、飲水要符合城市衛(wèi)生標準4、保持環(huán)境及籠具衛(wèi)生5、限制無關(guān)人員進入動物室6、嚴格處理淘汰及死亡動物三、應(yīng)用因為采取普通動物作試驗時，刺激原因可能誘發(fā)隱性感染動物發(fā)生顯性感染，并出現(xiàn)相關(guān)組織器官結(jié)構(gòu)、生理生化與免疫學(xué)改變，而不一樣程度影響試驗結(jié)果，所以該級動物僅供教學(xué)和科研預(yù)試驗使用

實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第4頁清潔動物

（Cleananimal,CL）一、概念清潔動物（Cleananimal.CL或Cleanconventionalanimal,CCV）除普通級動物應(yīng)排除病原外，不攜帶對動物危害大和對科學(xué)研究干擾大病原。不應(yīng)含有顯著疾病表現(xiàn)、臟器病理改變和異常死亡；種群起源于SPF或無菌剖腹產(chǎn)動物；喂養(yǎng)在溫濕度相對恒定屏障環(huán)境中。二、喂養(yǎng)管理1、全部籠器具、器械、墊料等及喂養(yǎng)、飲水都須滅菌處理2、進出動物室工作人員必須恪守清潔動物室操作規(guī)范，要作淋浴或風淋、穿滅菌衣、戴滅菌手套和口罩等清潔處理三、應(yīng)用CL應(yīng)該排除病原和寄生蟲多于CV，在試驗中受動物疾病干擾較少，其敏感性和重復(fù)性也好，而又比SPF輕易到達質(zhì)量標準，當前，CL在我國已廣泛應(yīng)用于科學(xué)研究和其它用途實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第5頁無特定病原體動物

（Specificpathogenfreeanimal,SPF）一、概念無特定病原體動物（Specificpathogenfreeanimal,SPF）除普通級動物、清潔動物應(yīng)排除病原外，不攜帶主要潛在感染或條件致病和對科學(xué)試驗干擾大病原。種群起源于無菌動物或剖腹產(chǎn)；喂養(yǎng)于屏障環(huán)境或隔離環(huán)境中，實施嚴格病原控制。

COBS、BS、DF=SPF二、喂養(yǎng)管理1、隔離環(huán)境~保種隔離器（Isolator）2、屏障環(huán)境~生產(chǎn)和試驗SPF動物房凈化空氣層流架（又名凈化生物層流架）帶空氣過濾帽喂養(yǎng)盒3、樹立正確觀念，熟悉詳細操作方法和技術(shù)，不能給BS污染造成漏洞實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第6頁三、特征1、生產(chǎn)繁殖性能好，能提供大量健康無病動物2、無干擾動物試驗研究微生物和寄生蟲，所以，能取得可靠試驗結(jié)果，同時，動物試驗過程中動物死亡率低，可用于長久試驗四、應(yīng)用1、研究工作(國際公認標準試驗動物)1)、放射、燒傷研究2)、藥理學(xué)、毒理學(xué)、腫瘤學(xué)、傳染病等學(xué)科應(yīng)用2、血清、疫苗制備3、生物學(xué)判定實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第7頁無菌動物（Germfreeanimal,GF）和悉生動物(Gnotobioticanimal,GN)一、概念一）、無菌動物（Germfreeanimal,GF）要求不攜帶任何以現(xiàn)有伎倆可檢出一切生命體；其起源是普通級動物經(jīng)剖腹產(chǎn)手術(shù)，幼仔實施人工培育或由其它無菌動物代乳，喂養(yǎng)在隔離環(huán)境中二）、悉生動物（Gnotobioticanimal,GN）又稱已知菌動物或已知菌叢動物（Animalwithknownbacterialuflora）,指在無菌動物體內(nèi)人為植入一個或數(shù)種微生物動物。而依據(jù)植入數(shù)目不一樣分為單菌(Monoxenie)、雙菌(Dixenie)、三菌(Trixenie)和多菌動物(Polyxenie)二、喂養(yǎng)管理悉生動物與無菌動物喂養(yǎng)管理相同：均須喂養(yǎng)在隔離環(huán)境中；不一樣是：前者隔離環(huán)境中帶有某一個或幾個已知菌三、特點（P58）一）、形態(tài)學(xué)改變實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第8頁1、消化系統(tǒng)2、血液循環(huán)系統(tǒng)3、免疫系統(tǒng)二）、生理學(xué)改變1、生長發(fā)育：GF禽類比CV生長快；GF豚鼠、家兔比CV生長慢；GF大、小鼠與CV生長相同2、生殖：GF大、小鼠比CV繁殖率高;GF豚鼠、家兔比CV繁殖率低3、壽命：GF比CV壽命長4、代謝：GF不能合成維生素B族和維生素K5、抗輻射能力四、GF、GN在醫(yī)學(xué)研究中應(yīng)用一）、動物模型二）、老年病學(xué)研究三）、心血管疾病研究四）、腫瘤學(xué)研究

實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第9頁五）、免疫學(xué)研究六）、放射生物學(xué)研究七）、微生物學(xué)研究八）、齲齒病研究九）、營養(yǎng)學(xué)研究十）、藥理和毒理學(xué)研究十一）、寄生蟲學(xué)研究十二）、宇航醫(yī)學(xué)研究十三）、其它實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第10頁試驗動物常見感染性疾病一、試驗動物常見病分類(一)依據(jù)對人和動物致病情況1、對人和動物都有較強致病性病原（人獸共患病原）；2、致動物烈性傳染病病原；3、潛在感染或條件致病菌和對科研干擾大病原。（二）、依據(jù)病原菌種類1、病毒感染2、細菌感染3、真菌感染4、寄生蟲感染實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第11頁一、試驗動物傳染病流行基本步驟1、傳染源：患病動物、攜帶病原體動物2、傳輸路徑：1)直接接觸傳輸（水平傳輸、垂直傳輸）2)間接接觸傳輸（非生物性、生物性傳輸媒介）3、易感動物：指對某一傳染病病原體敏感動物試驗動物疾病衛(wèi)生防疫實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第12頁二、試驗動物衛(wèi)生防疫與隔離辦法1、疫菌接種或藥品治療危害1）、干擾試驗結(jié)果：如抗菌素或磺胺類藥品2）、變成潛伏傳染源：如沙門菌、MHV3）、經(jīng)濟上不合算由此，在試驗動物喂養(yǎng)和動物試驗過程中，只能采取嚴格喂養(yǎng)管理和衛(wèi)生防疫制度到達預(yù)防疾病目標。2、試驗動物衛(wèi)生防疫與隔離辦法1）、平時預(yù)防辦法消毒辦法隔離辦法實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第13頁2）、發(fā)覺疫病時撲滅辦法實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第14頁一、檢測要求二、檢測程序三、檢測方法四、檢測規(guī)則五、結(jié)果判定試驗動物微生物及寄生蟲監(jiān)測實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第15頁一、生物學(xué)特征和解剖學(xué)特征二、小鼠在生物醫(yī)學(xué)研究中應(yīng)用三、慣用具種品系四、普通喂養(yǎng)管理方法小鼠實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第16頁

小鼠為哺乳綱、嚙齒目、鼠科、鼠屬、小家鼠種動物。一、生物學(xué)特性和解剖學(xué)特性1、小鼠生物學(xué)特征1）、普通特征：體形??；生長久短、成熟早、繁殖力強；性情溫馴，膽小怕驚；對環(huán)境反應(yīng)敏感；小鼠喜黑暗平靜環(huán)境，習慣于晝伏夜動，其進食、交配、分娩等多發(fā)生在夜間；小鼠有20對染色體和相同數(shù)量連鎖群。2）、生殖生理學(xué)特性：⑴生殖：性成熟：雄鼠為40天,雌鼠為35天;體成熟:雄鼠為75天,雌鼠為65天；發(fā)情與排卵：雌鼠4~5天1次，陰道分泌物涂片改變；發(fā)情后2~3小時排卵受孕；交配：陰栓；小鼠實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第17頁哺乳、離乳：生后1~2小時開始吮乳，13~15天開始采食，19~21天離乳；性別識別；分娩后12~20小時發(fā)情、排卵。⑵生理生化值2、小鼠解剖學(xué)特點：齒式：1003=16；內(nèi)臟：①消化系統(tǒng)：胃、腸、肝（VitC）、膽、胰腺。②呼吸系統(tǒng)：左肺是單葉、右肺是四葉③淋巴系統(tǒng)：脾臟有顯著造血功效，巨核細胞核較大，易被誤認為是瘤細胞；骨髓為紅骨髓，終生造血。④生殖系統(tǒng)：雌鼠：子宮為雙子宮，無宮外孕，乳腺發(fā)達，胸部3對、鼠鼷部2對，⑤小鼠無汗腺。實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第18頁二、在生物醫(yī)學(xué)研究中應(yīng)用因為小鼠體型小、生長快、喂養(yǎng)管理方便、輕易到達標準化，在生物醫(yī)學(xué)研究中得到廣泛應(yīng)用，其使用數(shù)量遠遠超出其它試驗動物。相關(guān)資料表明，美國1982年使用小鼠8000萬只；日本1970年使用小鼠1115萬只，我國1984年、1985年、1998年分別使用小鼠227萬只、244萬只、437萬只。(一)藥品研究1、藥品安全性評價試驗小鼠慣用于藥品急性、亞急性、慢性毒性試驗以及最大耐藥量測定等，"三致"(致畸、致癌、致突變)試驗也慣用小鼠進行。2、生物制品檢定小鼠廣泛地應(yīng)用于血清、疫苗等生物制品檢定，各種藥品效價測定，以及放射性同位素照射劑量與生物效應(yīng)等試驗。實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第19頁3、藥品篩選小鼠價廉易得，常慣用于各種藥品篩選，如抗腫瘤、結(jié)核、瘧疾藥品篩選。4、藥效學(xué)評價試驗慣用小鼠作一些藥品藥效學(xué)和副作用評價，如利用小鼠瞳孔放大作用測試藥品對副交感神經(jīng)和神經(jīng)接頭影響;用聲源性驚厥小鼠評價抗痙攣藥品;用熱板技術(shù)評價止痛藥藥效。(二)腫瘤學(xué)研究1、自發(fā)腫瘤許多小鼠品系能自發(fā)產(chǎn)生腫瘤。據(jù)統(tǒng)計，近交系小鼠中大約有244個品系或亞系都有其特定自發(fā)性腫瘤，AKR小鼠白血病發(fā)病率為90%,C3H小鼠乳腺癌發(fā)病率高達90%～100%。從腫瘤發(fā)生學(xué)上來看，這些自發(fā)性腫瘤與人體腫瘤相近，所以常選取小鼠自發(fā)各種腫瘤模型，進行腫瘤病因、發(fā)病、防治及抗癌藥品篩選研究。實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第20頁2、誘發(fā)性腫瘤小鼠對致癌物敏感，可誘發(fā)各種腫瘤模型，如用甲基膽蒽誘發(fā)小鼠胃癌和宮頸癌；用二乙基亞硝胺誘發(fā)小鼠肺癌等，用于腫瘤防治試驗研究。3、人癌細胞移植胸腺嚴重缺點裸小鼠可接收人類各種腫瘤細胞植人，成為活癌細胞"試管"。是研究人類腫瘤生長發(fā)育、轉(zhuǎn)移和治療最正確試驗動物。4、腫瘤遺傳學(xué)研究腫瘤遺傳學(xué)研究，如原病毒基因組學(xué)說和癌基因假說研究中，小鼠是最慣用試驗動物。(三)遺傳學(xué)研究1、遺傳學(xué)分析小鼠毛色改變各種多樣，其遺傳學(xué)基礎(chǔ)已經(jīng)被研究得比較清楚，因而小鼠毛色常被用作遺傳學(xué)分析中遺傳標識及品系判定依據(jù)。實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第21頁2、基因研究(1)重組近交系小鼠將雙親品系基因自由組合和重組，產(chǎn)生一系列子系，這些子系是小鼠遺傳學(xué)分析主要工具，主要用于研究基因定位及其連鎖關(guān)系。(2)同源突變近交系、同源導(dǎo)人近交系、分離近交系小鼠慣用來研究多態(tài)性基因位點效應(yīng)和功效以及發(fā)覺新等位基因。(3)利用轉(zhuǎn)基因小鼠能夠進行基因功效、表示和調(diào)整方面研究，探索疾病分子遺傳學(xué)基礎(chǔ)和基因治療可能性。3、遺傳性疾病動物模型小鼠因為基因突變可能造成一些遺傳性疾病發(fā)生，如小鼠黑色素病、白化病、家族性肥胖、遺傳性貧血等，均與人發(fā)病相同，可作為研究人類遺傳性疾病動物模型。(四)病原體所致疾病研究1、病毒性疾病小鼠對淋巴細胞性脈絡(luò)叢腦膜炎、脊髓灰質(zhì)炎、流行性感冒、狂犬病、腦炎等疾病病原體敏感，可用作上述試驗研究實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第22頁2、細菌性疾病小鼠可用于沙門菌病、鉤端螺旋體病等細菌性疾病試驗研究。3、寄生蟲疾病小鼠宜作感染血吸蟲、瘧疾、馬錐蟲等寄生蟲疾病研究。(五)免疫學(xué)研究1、制備單克隆抗體使用BALB/c、AKR、C57BL等小鼠免疫后脾細胞與骨髓細胞融合，可進行單克隆抗體制備和研究。2、動物模型實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第23頁

如利用無胸腺裸小鼠缺乏T淋巴細胞免疫功效缺點，用于研究T淋巴細胞功效以及細胞免疫在免疫應(yīng)答反應(yīng)中作用。SCID小鼠是T、B淋巴細胞聯(lián)合免疫缺點動物，對NK細胞、LAK細胞、巨噬細胞和粒細胞等"自然防御"細胞和免疫輔助細胞分化和功效以及它們與淋巴細胞及其分泌淋巴因子相互作用研究非常有益。(六)老年病學(xué)研究小鼠壽命短、個體差異小、價廉易得，在老年病試驗研究中使用僅次于大鼠。用于老年病發(fā)病機理、表現(xiàn)以及防治研究。日本京都大學(xué)胸部疾患研究所老化生物研究室竹田俊男教授，在美國引進AKR/J小鼠(胸腺腫瘤模型小鼠)中發(fā)覺突變小鼠，用時間精心培育成功快速老化模型小鼠(senescenceacceleratedmouse,SAM);SAM系列中一個品系在實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第24頁4~6月齡以前與普通小鼠生長一樣，4~6月齡以后則快速出現(xiàn)老化諸特征。該小鼠是研究老年病理想動物模型，當前己由天津中醫(yī)學(xué)院老年病研究所引進。(七)其它疾病研究1、神經(jīng)系統(tǒng)疾病如亞急性壞死性腦脊髓病、癲癇、心血管疾病(如高血壓)可用小鼠進行。2、呼吸系統(tǒng)疾病小鼠在氫氧化銨噴霧劑刺激下有咳嗽反應(yīng)，可利用此特征研究鎮(zhèn)咳藥品效果。因而，小鼠是研究鎮(zhèn)咳藥首選動物。3、消化系統(tǒng)疾病中毒性肝炎、肝硬化和胰腺炎等也可在小鼠身上復(fù)制成功，進行研究。4、計劃生育雌小鼠適合進行避孕藥品抗生育、抗著床、抗早孕、抗排卵等試驗研究三、小鼠慣用具種及品系(一)、近交系1、BALB/c實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第25頁(1)起源：19，貝格(Bagg)從美國商人歐希爾(Ohio)處購得白化小鼠原種，以群內(nèi)方法繁殖。麥克·多威爾(MacDowell)在1923年開始作近交系培育，至1932年達26代，命名為BALB/c品系。安德爾文特(Andervont)等人使BALB/c廣為傳輸和應(yīng)用。1985年我國從美國NIH引進到中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院試驗動物研究所，為BALB/c第180代。(2)毛色：白化。(3)主要特征：①乳腺腫瘤自然發(fā)生率低，但用乳腺腫瘤病毒誘發(fā)時發(fā)病率高;卵巢、腎上腺和肺腫瘤在該小鼠有一定發(fā)生率。②易患慢性肺炎。③對放射線甚為敏感。④與其它近交系相比，肝、脾與體重比值較大。20月齡雄鼠脾臟有淀粉樣變。⑤有自發(fā)高血壓癥，老年鼠心臟有病變，雌雄鼠都有動脈硬化。⑥對鼠傷寒沙門氏菌補體敏感，對麻疹病毒中度敏感。對利什曼原蟲屬、立克次氏體和百日咳組織胺易感因子敏感。(4)主要用途：廣泛地應(yīng)用于腫瘤學(xué)、生理學(xué)、免疫學(xué)、核醫(yī)學(xué)研究，以及單克隆抗體制備等。實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第26頁2、C57BL(1)起源：19立特(Little)用艾比·拉特洛坡(AbbyLathrop)小鼠株，雌鼠57號與雄鼠52號交配而得C57BLo1937年從C57BL分離出C57BL/6和C57BL/10兩個亞系。1985年從Olac引到中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院試驗動物研究所。(2)毛色：黑色。(3)主要特征：①乳腺腫瘤自然發(fā)生率低，化學(xué)物質(zhì)難以誘發(fā)乳腺和卵巢腫瘤。②12%有眼睛缺損;雌仔鼠16.8%，雄仔鼠3%為小眼或無眼。用可松可誘發(fā)腭裂，其發(fā)生率達20%。③對放射物質(zhì)耐受力中等;補體活性高;較易誘發(fā)免疫耐受性。④對結(jié)核桿菌敏感。對鼠痘病毒有一定抵抗力。⑤干擾素產(chǎn)量較高。⑥嗜酒精性高，腎上腺素類脂質(zhì)濃度低。對百日咳組織胺易感因子敏感。⑦常被認作"標準"近交系，為許多突變基因提供遺傳背景。(4)主要用途：是腫瘤學(xué)、生理學(xué)、免疫學(xué)、遺傳學(xué)研究中慣用品系。實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第27頁3、C3H/He(1)起源：19，斯特朗(Strong)用貝格(Bagg)白化雌鼠與乳腺腫瘤高發(fā)株DBA雄鼠雜交，再經(jīng)近交培育而取得。C3H/He于1985年從Olac引到中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院試驗動物研究所。(2)毛色：野鼠色(3)主要特征：①乳腺癌發(fā)病率高，6～10月齡雌鼠乳腺癌自然發(fā)生率達85%-100%，乳腺癌經(jīng)過乳汁而不是胎盤路徑傳輸。14月齡雌鼠肝癌發(fā)生率為85%；②補體活性高，干擾素產(chǎn)量低。③仔鼠下痢癥感染率高。④對狂犬病毒敏感。對炭疽桿菌有抵抗力。⑤血液中過氧化氫酶活性高。雄鼠對氨氣、氯仿、松節(jié)油等甚為敏感，死亡率高。(4)主要用途：主要用于腫瘤學(xué)、生理學(xué)、核醫(yī)學(xué)和免疫學(xué)研究。4、DBA(1)起源：19由立特(Little)在毛色分離試驗中建立，為最古老近交系小鼠。1929-1930年，在亞系間進行雜交，建立了兩個亞系;DBA/1和DBA/2，當前慣用是DBA/2。DBA/1于1977年從Lac引進到我國，實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第28頁DBA/2/Ola于1985年從Olac引到中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院試驗動物研究所，DBA/2N在1986年由NIH引到中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院試驗動物研究所。(2)毛色：淡棕色。(3)DBA/l主要特征：①抗DBA/2所生長瘤株。②P1534瘤株生長率為50%。③雌鼠乳腺癌發(fā)生率，一年紀以上繁殖鼠為75%。④對結(jié)核菌敏感;對鼠傷寒沙門氏菌補體抗性較強。⑤老齡雌鼠部份有鈣質(zhì)從容。⑥對瘧原蟲感染有抵抗力。(4)DBA/2(DBA/2/Ola及DBA/2N)主要特征：①對大部分DBA/1瘤株有抗性，但黑色素瘤S-91在兩系小鼠中均能生長。②雌雄鼠均會自發(fā)產(chǎn)生淋巴瘤。③雌鼠乳腺腫瘤發(fā)生率，繁殖鼠(經(jīng)產(chǎn)母鼠)為66%，處女鼠為3%。④白血病發(fā)生率，DBA/2/Ola雌鼠為34%，雄鼠為18%;而DBA/2N雌鼠為6%，雄鼠為8%。⑤DBA/2N肝癌發(fā)生率與飼料相關(guān)。⑥聽源性癲癇發(fā)作，36日齡小鼠為10O%，55日齡后為5%。⑦對鼠傷寒沙門氏菌補體有抗力，對瘧原蟲感染有一定抗性。⑧對百日咳組織胺易感因子敏感實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第29頁⑨雄鼠接觸氯仿和乙二醇氧化物，以及維生素K缺乏時，死亡率高(5)主要用途：DBA/2慣用于腫瘤學(xué)、遺傳學(xué)和免疫學(xué)研究。5、A系(1)起源：19美國斯特朗(Strong)將冷泉港(ColdSpringHarbor)白化小鼠與貝格(Bagg)白化小鼠雜交而來。1973、1977年分別從日本和美國引進中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院試驗動物研究所。(2)毛色：白化。(3)主要特征：①雌鼠乳腺腫瘤發(fā)生率，繁殖鼠為30%，處女鼠低于5%。②6月齡雌鼠44%有紅斑狼瘡(LE)細胞。③未足月幼鼠進行胸腺切除術(shù)后，84%出現(xiàn)矮小綜合癥。④與妊娠相關(guān)齒槽結(jié)節(jié)性增生發(fā)生率高。⑤可松易誘發(fā)唇裂和腭裂。初生仔鼠發(fā)生率為7.6%。⑥對麻疹病毒高度敏感。(4)主要用途：普通用作腫瘤學(xué)、免疫學(xué)研究，是當前國際上慣用品系之一。實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第30頁6、AKR(1)起源：1928-1936年間，佛司(Furth)用A系雜交培育出高發(fā)白血病株小鼠。爾后，在洛克非勒(Rockfeller)研究所作隨機繁殖若干代后，由路迪斯(RHoades)作近交繁殖至9代。再經(jīng)林科(LYnch)繁殖至21代，命名為AKR。1988年從Jax試驗室引進我國。(2)毛色：白化。(3)主要特征：①為高發(fā)白血病株小鼠，雌雄鼠淋巴細胞白血病發(fā)生率可達68%-90%。②對Graff白血病因子敏感。③腎上腺類脂質(zhì)(類固醇)濃度低。④血液過氧化氫酶活性(4)主要用途：用于白血病等研究。7、CBA(1)起源：19,Strong用Bagg白化雌鼠與DBA雄鼠交配后，經(jīng)近交培育而成。分為CBA/J/Ola和CBA/n等品系。(2)毛色：野鼠色。(3)主要特征：CBA/J/Olac雌鼠乳腺腫瘤發(fā)生率為33%～65%；雄鼠肝細胞腫瘤發(fā)生率為25%～65%。②CBA/J/Ola對中等劑量放射線有抗性。對麻疹病毒高度敏感。③CBA/n攜帶性連鎖隱性基因xid，該基因使小鼠脾臟B淋巴細胞數(shù)目降低并有缺點，造成實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第31頁成熟B細胞缺乏，從而對一些B細胞抗原缺乏免疫應(yīng)答。(4)主要用途：乳腺腫瘤、B細胞免疫功效等研究。8、TA1(津白1號)和TA2(津白2號)(1)起源：1955年，天津醫(yī)學(xué)院將市售雜種白化小鼠經(jīng)近交培育而成TA1。1963年又將昆明種小鼠經(jīng)近交培育而成TA2。1985年被國際小鼠遺傳命名委員會認可。(2)毛色：白化。(3)主要特征：TA1為自發(fā)低乳腺癌系，TA2為自發(fā)高乳腺癌系(4)主要用途：乳腺腫瘤研究。9、615(1)起源：1961年5月，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院血液病研究所用該所喂養(yǎng)昆明種白化雌鼠與蘇聯(lián)引進C57BL/血研雄鼠雜交，爾后又作近交培育20代以上而成615小鼠。1985年被國際小鼠遺傳命名委員會認可。實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第32頁(2)毛色：深褐色。(3)主要特征：①8月齡后，開始出現(xiàn)衰老現(xiàn)象，表現(xiàn)為肥胖、增重，最大致重雄鼠為40克以上，雌鼠可達38克以上，被毛蓬松、脫落。②自發(fā)腫瘤發(fā)生率：低白血病、低乳腺癌、高肺腺癌。③對津638白血病病毒敏感。(4)主要用途：用作白血病等研究。(二)、封閉群1、昆明小鼠(KM)(1)起源：1926年美國洛克非勒(Rockefeller)研究所克雷爾勒林可(ClaraLynch)，從瑞士同事手中得到2雄7雌白化小鼠，培育成功瑞士(Swiss)種小鼠。1946年，我國從印度哈夫金(Haffkine)研究所將Swiss小鼠引人云南昆明，1952年由昆明空運引人北京生物制品所，l954年推廣到全國各地。(2)毛色：白色。(3)主要特征：①繁殖率和成活率高。②抗病力和適應(yīng)性很強。③雌鼠乳腺腫瘤發(fā)生率為25%。

實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第33頁(4)主要用途：廣泛應(yīng)用于藥理、毒理、病毒和細菌學(xué)研究，以及生物制品、藥品檢定。2、NIH(1)起源：由美國國立衛(wèi)生研究院(NIH)培育而成。(2)毛色：白色。(3)主要特征：繁殖力強，產(chǎn)仔成活率高，雄性好斗，輕易打傷致殘。(4)主要用途：慣用于藥理毒理研究和生物制品檢定。3、ICR(又稱swissHauschka)(1)起源：為美國豪斯卡(Hauschka)研究所喂養(yǎng)瑞士種小鼠。后由美國腫瘤研究協(xié)會分送各地，取名為ICR。1973年由日本國立腫瘤研究所引進我國。(2)毛色：白色。(3)主要特征：繁殖力強。4、LACA(1)起源：1935年英國卡爾沃爾斯(Carworth)企業(yè)由美國洛克非勒(Rockefeller)研究所引進，經(jīng)20代近交培育后，采取隨機交配繁殖，命名為CFW。實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第34頁后又引人英國試驗動物中心(LAC)，更名為LACA。1973年由英國試驗動物中心引迸我國。(2)毛色：白色。(三)、突變系1、裸小鼠(nudemice)(1)起源：1962年英國格拉斯哥醫(yī)院克里斯特(Crist)在非近交系小鼠中偶然發(fā)覺有個別無毛小鼠，以后證實是因為基因突變造成，并伴有先天性胸腺發(fā)育不良，稱為裸小鼠(nudemice)，用"nu"表示裸基因符號。1966年，愛丁堡動物研究所沸拉那根(Flanagan)又證實了這種無毛小鼠是因為染色體上等位基因(第十一對染色體上)突變引發(fā)。1968年佩蒂路易斯(Pantelouris)發(fā)覺裸小鼠已失去正常胸腺，原胸腺殘留結(jié)構(gòu)中，部分上皮樣細胞呈巢狀排列而部分呈外分泌腺結(jié)構(gòu);淋巴結(jié)內(nèi)胸腺依賴區(qū)淋巴細胞消失，外周血中淋巴細胞數(shù)目降低。1969年丹麥里加爾德(Rygaard)首次將人結(jié)腸癌移植到裸小鼠并取得成功，為免疫缺點動物研究和應(yīng)用開創(chuàng)了新局面。實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第35頁(2)主要特征①無毛、裸體、無胸腺。伴隨年紀增加，皮膚逐步變薄、頭頸部皮膚出現(xiàn)皺折、生長發(fā)育遲緩。②因為無胸腺而僅有胸腺殘跡或異常胸腺上皮(該上皮不能使T細胞正常分化)，造成缺乏成熟T淋巴細胞，因而細胞免疫功效低下。但6～8周齡裸小鼠NK細胞活性高于普通小鼠。③B淋巴細胞正常，但其免疫功效欠佳。表現(xiàn)在B淋巴細胞分泌免疫球蛋白以lgM為主，僅含少許IgG。④抵抗力差，輕易患病毒性肝炎和肺炎。所以必須喂養(yǎng)在屏障系統(tǒng)中。⑤為了提升繁殖率和存活率，普通采取純合型雄鼠與雜合型雌鼠交配繁殖方式，能夠取得1/2純合型仔鼠。⑥慣用裸小鼠品系：BALB/c-nu、NIH-nu、NC-nuSwiss-nu、03H-nu,C57BL-nu等。(3)主要用途：廣泛應(yīng)用于腫瘤學(xué)、免疫學(xué)、毒理學(xué)等基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)研究。實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第36頁

2、SCID小鼠(1)起源：SCID(severecombinedimmunedeficency,SCID)英文意思是嚴重聯(lián)合免疫缺陷，SCID小鼠即嚴重聯(lián)合免疫缺點小鼠。在1983年由美國波斯瑪M.J(BosmaM.J)首先從C·B-17近交系小鼠中發(fā)覺，是位于第16號染色體，又稱為scid單個隱性基因發(fā)生突變所致，SCID小鼠是C·B-17/lcrJ同源近交系。1988年從美國Jackson試驗室引進我國。(2)主要特征：①SCID小鼠外觀與普通小鼠無異，體重發(fā)育正常。唯胸腺、脾臟、淋巴結(jié)重量僅為正常小鼠重量I/3以下。②胸腺、脾臟、淋巴結(jié)中T淋巴細胞和B淋巴細胞大大降低，細胞免疫和體液免疫功能缺點;但巨噬細胞和NK細胞功效末受影響。③骨髓結(jié)構(gòu)正常，外周血中白細胞和淋巴細胞降低。④輕易死于感染性疾病，必須喂養(yǎng)在屏障系統(tǒng)中。⑤兩性均可生育，每胎產(chǎn)仔3~5只，壽命達1年以上。實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第37頁(3)主要用途：廣泛應(yīng)用于免疫細胞分化和功效研究，異種免疫功效重建，單克隆抗體制備，人類本身免疫性疾病和免疫缺點性疾病研究，病毒學(xué)和腫瘤學(xué)研究等。3、快速老化模型小鼠(SAM)(1)起源：日本京都大學(xué)胸部疾患研究所老化生物研究室竹田俊男教授，在美國引迸AKR/J小鼠(胸腺腫瘤模型小鼠)中發(fā)覺突變小鼠，用時間精心培育成功快速老化模型小鼠(SeneScenCeaCCeIemtedn，0uSe，SAM)。當前已由天津中醫(yī)學(xué)院老年病研究所引進。(2)主要特征：SAM系列中一個品系在4~6月齡以前與普通小鼠生長一樣，4~6月齡以后則快速出現(xiàn)老化諸特征。如腦、視器、心、肺、腎、皮膚等器官老化，血液、免疫和抗氧化等系統(tǒng)老化，出現(xiàn)骨質(zhì)疏松和老化淀粉樣變。(3)主要用途：該小鼠是研究老年病理想動物模型，也是研究老化腎虛自發(fā)性動物模型。常見突變系小鼠還有肌萎縮癥小鼠、肥胖癥小鼠、株儒癥小鼠、糖尿病小鼠等。實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第38頁（四)、系統(tǒng)雜交動物國際上慣用系統(tǒng)雜交(F1代)小鼠見表9-9（P162）。四、小鼠繁殖與喂養(yǎng)管理1、小鼠繁殖（1）選種和留種：2~3胎仔鼠。（2）繁殖方法：封閉群~隨機交配（randommating）或分組交配；近交系~單線法、平行法、選優(yōu)法。2、小鼠喂養(yǎng)管理：（詳見P162~163）實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第39頁一、生物學(xué)特征二、解剖學(xué)特征三、小鼠在生物醫(yī)學(xué)研究中應(yīng)用四、慣用具種品系五、普通喂養(yǎng)管理方法大鼠實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第40頁

大鼠為哺乳綱、嚙齒目、鼠科、大鼠屬動物。一、大鼠生物學(xué)特征和解剖生理特點：1、生物學(xué)特征：①大鼠是晝伏夜動雜食動物。②喜啃咬，性情較溫順，抗病力強。③大鼠汗腺不發(fā)達。④嗅覺靈敏。⑤對噪聲敏感。⑥對營養(yǎng)缺乏敏感。⑦對濕度要求嚴格，相對濕度為40%~70%。⑧大鼠肝臟再生能力強，如切除60%~70%還能再生，不能嘔吐。⑨生長發(fā)育期長，長骨骨骺線不骨化。⑩垂體、腎上腺功效發(fā)達，應(yīng)激反應(yīng)敏感，行為表現(xiàn)多樣。2、解剖學(xué)特性：①齒式1003=16。②肺：左1、右4③肝分六葉，無膽囊。④大鼠子宮為雙子宮，呈“Y”字形。胸部及鼠鼷部各有3對乳頭。3、生殖生理特點：①繁殖力強。雄鼠2月齡、雌鼠2.5月齡達性成熟，性周期4~5天，妊娠期19~21天，每胎平均產(chǎn)仔8只。成年體重雄鼠為300~800g雌鼠為250~400g，大鼠為整年發(fā)情動物，壽命2.5~3年。染色體為21對。大鼠實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第41頁②不一樣發(fā)情期陰道粘膜涂片組織學(xué)改變（請見表9~11，P165）③心電圖中沒有S~T段，甚至無T波。④生理生化值：（請見P165）二、在生物醫(yī)學(xué)中應(yīng)用(一)內(nèi)分泌研究1、內(nèi)分泌學(xué)研究大鼠內(nèi)分泌腺輕易摘除，慣用于研究各種腺體及激素對全身生理生化功效調(diào)整;激素腺體和靶器官相互作用;激素對生殖功效影響，如發(fā)情、排卵、胚胎著床等調(diào)控作用，以及計劃生育。2、內(nèi)分泌疾病模型自發(fā)性或誘發(fā)性尿崩癥、糖尿病、甲狀腺機能衰退、甲狀旁腺功效低下造成新生兒強直性痙攣等疾病動物模型，常慣用于內(nèi)分泌功效失調(diào)所致疾病研究。肥胖癥大鼠可用于高血脂癥研究。大鼠垂體一腎上腺系統(tǒng)發(fā)達，應(yīng)激反應(yīng)靈敏，適合用于制作應(yīng)激性胃潰瘍模型。實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第42頁(二)營養(yǎng)、代謝性疾病研究大鼠對營養(yǎng)物質(zhì)缺乏敏感，可發(fā)生經(jīng)典缺乏癥狀，是營養(yǎng)學(xué)研究使用最早、用量最多試驗動物。如各種維生素缺乏癥，蛋白質(zhì)、氨基酸和鈣、磷等代謝研究，營養(yǎng)不良、動脈粥樣硬化等研究。(三)藥品研究1、藥品安全性評價試驗大鼠慣用于藥品亞急性毒性試驗、慢性毒性試驗、致畸試驗和藥品毒性作用機理研究，以及一些藥品副作用研究。2、藥效學(xué)研究(1)神經(jīng)系統(tǒng)藥品評價。利血平和阿樸嗎啡可誘導(dǎo)大鼠神經(jīng)性異常行為?？衫妹詫m或處罰和獎勵試驗來測試大鼠學(xué)習記憶能力，進而評價上述藥品藥效。(2)心血管系統(tǒng)藥品評價。大鼠血壓和血管阻力對藥品反應(yīng)很敏感，慣用作研究心血管藥品藥理和調(diào)壓作用動物模型。還用于心血管系統(tǒng)新藥篩選。實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第43頁(3)抗炎藥品篩選和評價。如大鼠踝關(guān)節(jié)對炎癥反應(yīng)敏感，慣用以篩選抗關(guān)節(jié)炎藥品;大鼠也用于多發(fā)性、化膿性及變態(tài)反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎、中耳炎、內(nèi)耳炎、淋巴腺炎等治療藥品評價。(四)行為學(xué)研究大鼠行為表現(xiàn)多樣，情緒反應(yīng)敏感，含有一定改變特征，慣用以研究各種行為和高級神經(jīng)活動表現(xiàn)。1、迷宮試驗：利用迷宮試驗測試大鼠學(xué)習和記憶能力。2、獎勵和處罰試驗：采取跳臺試驗等方法，測試大鼠記憶判斷和回避處罰能力。3、成癮性藥品行為學(xué)研究大鼠適合于成癮性藥品行為學(xué)研究，在一定時間內(nèi)給大鼠喂飼一定劑量酒精、咖啡因、鴉片后，大鼠對上述藥品(物質(zhì))產(chǎn)生依賴以及行為改變。如對酒精依賴大鼠，當取消酒精喂飼后，可產(chǎn)生行為改變，甚至出現(xiàn)陣發(fā)性強直性肌肉痙攣乃至死亡。4、高級神經(jīng)活動實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第44頁

行為學(xué)研究中慣用大鼠研究那些假定與神經(jīng)反射異常相關(guān)行為情景。如進行神經(jīng)官能癥、抑郁性精神病、腦發(fā)育不全或遲緩等疾病行為學(xué)研究。(五)老年病學(xué)研究大鼠是進行老年病學(xué)研究慣用試驗動物，因為老年病學(xué)動物試驗周期長，老年試驗動物體質(zhì)差，在開放環(huán)境進行試驗，大鼠存活率低。所以，最好在屏障系統(tǒng)和隔離系統(tǒng)中進行試驗，并使用SPF級和無菌級大鼠，確保試驗成功。使用大鼠能夠進行衰老機理研究，如衰老生理改變、成活率與年紀相關(guān)曲線關(guān)系、膠原老化、器官老化、飲食方式與壽命關(guān)系等方面研究。還能夠進行老年高發(fā)腫瘤和非腫瘤損傷所引發(fā)老年性疾病研究。(六)腫瘤研究大鼠可用于自發(fā)性和誘發(fā)性腫瘤模型研究。自發(fā)性腫瘤動物模型有腎上腺髓質(zhì)腫瘤，乳腺癌和粒細胞性白血病。誘發(fā)性腫瘤模型使用化學(xué)物質(zhì)有：二乙基亞硝胺和二甲基氨基偶氮苯誘發(fā)肝癌、甲基干基亞硝胺誘發(fā)食道癌、3-甲基膽蒽誘發(fā)肺鱗癌及惡性胸膜間皮瘤、大腸癌等。實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第45頁(七)感染性疾病研究慣用大鼠制作細菌性、病毒性和寄生蟲性疾病動物模型，其中部分模型發(fā)病經(jīng)過與人相同。制作感染性疾病慣用病原體，細菌有：沙門氏菌、大腸桿菌、巴氏桿菌、念珠狀鏈桿菌、各種厭氧菌、黃曲霉菌等;病毒有：肝炎病毒、疤疹病毒、流感病毒等;寄生蟲有：旋毛蟲、血吸蟲、鉤蟲、瘧原蟲、錐蟲等。(八)心血管疾病研究慣用大鼠制作心肌缺血、心律失常、高血壓、動脈硬化、試驗性動脈瘤、肺水腫、惡性貧血、血小板降低癥等動物模型。進行上述疾病發(fā)病機理和治療等方面研究。(九)中醫(yī)藥研究三、慣用具種、品系(一)近交系1、F344/N(1)起源：192O年由哥倫比亞大學(xué)腫瘤研究所科爾提斯(Curtis)培育，我國從美國NIH引進。實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第46頁(2)毛色：白化(3)主要特征：①壽命：10同齡時雄鼠體重到達190一280g,雌鼠達120～190g。平均壽命雄鼠為3I個月，雌鼠為29個月。②免疫學(xué)方面：原發(fā)性和繼發(fā)性脾紅細胞免疫反應(yīng)性低，其NADPH-細胞色素C還原酶誘發(fā)力較SD大鼠為低。③生理學(xué)方面：旋轉(zhuǎn)運動性低;血清胰島素含量低;肝結(jié)節(jié)狀增生發(fā)生率為5%;雄鼠乙基嗎啡和苯胺肝代謝率高，可作苯酮尿癥動物模型;對高血壓蛋白質(zhì)產(chǎn)生有抵抗力；腦垂體較大;乙烯雌酚吸收快且易引發(fā)死亡;戊巴比妥鈉LD50低，為70mg/kg;腎臟疾病發(fā)生率低;可作周圍視網(wǎng)膜退化模型;對血吸蟲囊尾蚴易感。④腫瘤學(xué)性狀。自發(fā)性腫瘤。各種大鼠自發(fā)性腫瘤發(fā)生率，甲狀腺癌為22%;單核細胞白血病為24%。乳腺癌雄鼠為23%、雌鼠41%;腦垂體腺瘤雄鼠占24%、雌鼠36%。雄鼠睪丸間質(zhì)細胞瘤為85%。雌鼠乳腺纖維腺瘤為9%;多發(fā)性子宮內(nèi)膜腫瘤占21%。移植性腫瘤。實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第47頁

有肝癌(Dunning氏肝癌、LC-18肝癌、Novikoff肝癌)、乳腺腫瘤(HMC和R-3230乳腺癌、乳腺纖維瘤F-609)、垂體腫瘤(MtT和MtTf4腦垂體瘤)、肉瘤(Walker256癌肉瘤、吉田肉瘤、肉瘤IRS-9802和R-13259、纖維肉瘤R-3244、R-3251淋巴肉瘤)、白血病(Dun-ning白血病、HLF1白血病、IRC-741和R-3149白血病、白血病R-3323、3330、3399、3432)、子宮瘤F-529等。(4)主要用途：廣泛用于毒理學(xué)、腫瘤學(xué)、生理學(xué)研究。2.Lou/CN(1)起源：Lou/CN是由貝辛(Bazin)和別科爾斯(Beckers)培育出漿細胞瘤高發(fā)系，其同類系Lou/MN為漿細胞瘤低發(fā)系，二者組織相容性相同。1985年從美國NIH引進我國。(2)毛色：白化(3)主要特征：Lou/CN大鼠免疫細胞瘤(免疫球蛋白分泌瘤)發(fā)病率，雄鼠為31%，雌鼠16%，發(fā)病部位主要位于回盲部淋巴結(jié)。該腫瘤細胞分化率極低，多在1月內(nèi)死亡。此腫瘤可移植到同系大鼠及其雜交Fi代，60%免疫細胞合成并分泌單克隆免疫球蛋白實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)第48頁

(4)用途：慣用于免疫學(xué)研究，尤其是制備單克隆抗體。Lou/CN大鼠腹水量比BALB/c小鼠大幾十倍，可大量生產(chǎn)單克隆抗體。(二)封閉群1、Wistar大鼠(1)起源：19由美國維斯塔爾(Wistar)研究所育成，現(xiàn)己遍布世界各國試驗室。我國從日本及前蘇聯(lián)引進，是引進最早、使用最廣泛、數(shù)量最多大鼠品系之一。(2)毛色：白化。(3)主要特征：①頭部較寬、耳朵較長、尾長度小于身長。②性周朝穩(wěn)定，繁殖力強，產(chǎn)仔多，平均每胎產(chǎn)仔在10只左右，生長發(fā)育快。10周齡時雄鼠體重可達28