液相色譜柱后衍生法lc-msms測定蔬菜中氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留

氨基丙烯酸農(nóng)藥對各種害蟲都有良好的殺蟲效果，是最常見的農(nóng)藥。在植物栽培過程中，尤其是在種子處理方面，氨基丙烯酸農(nóng)藥得到了廣泛使用。然而,氨基甲酸酯類化合物屬于乙酰膽堿酯酶的抑制劑1材料和方法1.1柱后衍生試劑甘藍(lán)市售。氨基甲酸酯類農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品[涕滅威亞砜(aldicarbsulfoxide)、涕滅威砜(aldicarbsulfone)、3-羥基克百威(3-hydroxycarbofuran)、涕滅威(aldicard)、克百威(carbofuran)、滅多威(methomyl)、西維因(carbary)]國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心。柱后衍生試劑乙腈、甲醇(均為色譜純)德國Meker公司;丙酮(重蒸)、氯化鈉(140℃烘烤4h)天津市化學(xué)試劑一廠;固相萃取柱、氨基柱(容積6mL,填充物500mg)、濾膜(0.2μm)天津津楊公司。1.2超純水質(zhì)譜儀以及儀器2695高效液相色譜儀(配有2695四元梯度泵、2475熒光檢測器、柱后衍生系統(tǒng))、超高效液相色譜儀Waters公司;TSQQUATUM質(zhì)譜儀(配有ESI源、色譜工作站)Thermo公司;超純水儀Millipore公司;KL512J氮吹儀北京康林科技公司;T18basic勻漿機(jī)德國IKA公司;RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上海亞榮生儀器公司。1.3氨基柱的制備準(zhǔn)確稱取25.0g樣品倒入勻漿機(jī)中,加入50.0mL乙腈,高速勻漿2min。濾液收集到裝有5~7g氯化鈉的50mL具塞量筒中,收集濾液40~50mL。蓋上塞子,劇烈振蕩1min,在室溫下靜置分層約10min。從100mL具塞量筒中準(zhǔn)確吸取10.00mL乙腈相溶液,放入150mL燒杯中,將燒杯放在80℃電熱板上加熱,杯內(nèi)緩緩?fù)ㄈ肟諝饬?將乙腈蒸發(fā)近干,加入2.0mL甲醇-二氯甲烷(1:99,V/V)溶解殘?jiān)?蓋上鋁箔待凈化,將氨基柱用4.0mL甲醇-二氯甲烷(1:99)預(yù)洗條件化,當(dāng)溶劑液面到達(dá)柱吸附層表面時(shí),立即加入樣品溶液,用15mL離心管收集洗脫液,用2mL甲醇-二氯甲烷(1:99)洗燒杯后過柱,并重復(fù)一次。將離心管置于氮吹儀上,水浴溫度50℃氮吹蒸發(fā)至近干,用甲醇準(zhǔn)確定容至2.5mL,在混合器上混勻后,用0.2μm濾膜過濾,待液相色譜-柱后衍生系統(tǒng)測定。氮吹蒸發(fā)至近干后,用體積分?jǐn)?shù)0.1%甲酸溶液定容2.0mL,在混合器上混勻后,用0.2μm濾膜過濾,待液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀測定。1.4條件11.4.1水、甲醇和乙腈的梯度洗脫程序色譜柱:CarbamateAnalysisColomn;柱溫:40℃;流動(dòng)相:水、甲醇和乙腈,其梯度洗脫程序見表1;熒光激發(fā)波長339nm,發(fā)射波長445nm。柱后衍生反應(yīng)器:A為0.05mol/LNaOH溶液,流量0.5mL/min;B為衍生試劑,流量0.5mL/min;柱后反應(yīng)單元的溫度為80℃。1.4.2在液體層析成像-質(zhì)量分析的條件下2結(jié)果與分析2.1氨基甲酸酯農(nóng)藥殘留分析在本實(shí)驗(yàn)條件下,兩種方法均能對7種氨基甲酸酯農(nóng)藥取得較好的分離效果和很好的峰形,沒有互相干擾,滿足多組分農(nóng)藥殘留分析要求,結(jié)果見圖1、2。2.2色譜質(zhì)譜條件對7種氨基甲酸酯類農(nóng)藥在甘藍(lán)中進(jìn)行回收實(shí)驗(yàn),按上述前處理方法處理后分別上液相色譜儀和液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀,結(jié)果見表4、5。由表可知,液相色譜法測定氨基甲酸酯類農(nóng)藥回收率為75.5%~103.5%,檢出限為(R3液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法多采用低能耗試劑,有利于提高檢測效率液相色譜法和液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法都可以用來測定蔬菜中的氨基甲酸酯類農(nóng)藥,其檢出限、回收率均能滿足測定要求,從表1、2的洗脫程序可以看出,液相色譜法上機(jī)時(shí)間為30min,而液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法上機(jī)時(shí)間為8min,液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法可以大大提高工作效率;從表4、5對比可以看出,液相色譜質(zhì)譜法檢出限更低,靈敏度更高,適合做農(nóng)藥殘留微量檢測;用液相色譜質(zhì)譜法不需要用衍生試劑,節(jié)約了實(shí)驗(yàn)成本。液相法衍生實(shí)驗(yàn)的衍生試劑價(jià)格比較貴,而且溶液配好后容易氧化不能長時(shí)間放置,大