小柴胡湯的現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)研究

小柴胡湯是東漢張仲景的《傷寒論》。這是中醫(yī)與邵陽(yáng)的經(jīng)典方劑。《傷寒論·辨少陽(yáng)證脈證并治》曰:“傷寒五六日,中風(fēng),往來(lái)寒熱,胸脅苦滿,默默不欲飲食,心煩喜嘔,或胸中煩而不嘔,或渴,或腹中痛,或脅下痞硬,或心下悸,小便不利,或不渴,身有微熱,或咳者,小柴胡湯主之?！弊詮堉倬皠?chuàng)立小柴胡湯后,經(jīng)歷代應(yīng)用,經(jīng)久不衰。經(jīng)現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)小柴胡湯具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗衰老、保肝、抗菌等藥理作用,從實(shí)驗(yàn)方面為小柴胡湯找到了證據(jù)。本文對(duì)近年來(lái)小柴胡湯的藥理研究進(jìn)展綜述如下。1關(guān)于循環(huán)系統(tǒng)疾病的實(shí)驗(yàn)研究1.1對(duì)hbv的藥物組方溫志堅(jiān)等研究提示柴胡湯提取物在體外有一定的抗HBV活性。倪勤等則通過實(shí)驗(yàn)研究顯示小柴胡片在無(wú)體內(nèi)免疫系統(tǒng)的參與下具有直接抗HBV活性,其中發(fā)揮作用的藥物成分是柴胡、黃芩和甘草,組方在抗HBV方面較單味藥更加優(yōu)越。李建蓉等采用RT-PCR半定量法檢測(cè)重組體PBK-HCVmRNA的表達(dá)量,進(jìn)行小柴胡湯抗HCV的體外實(shí)驗(yàn),結(jié)果小柴胡湯在75mg/ml是具有抗HCV作用,它不是抑制mRNA,而是通過調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能發(fā)揮作用。1.3小柴胡湯對(duì)大鼠肝纖維化模型的抑制作用田字彬等在探討肝纖維化過程中組織金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)mRNA的表達(dá)及小柴胡湯對(duì)其表達(dá)的影響中,用體積分?jǐn)?shù)0.40的四氯化碳花生油制備大鼠肝纖維化模型,并用不同劑量的小柴胡湯進(jìn)行干預(yù),結(jié)果顯示,小柴胡湯能顯著減輕大鼠肝纖維化程度,其可能通過抑制TIMP-1mRNA的表達(dá)來(lái)發(fā)揮抗纖維化作用。1.4指腸給藥大鼠胃黏膜損傷的作用國(guó)外研究者以SD雄性大鼠為對(duì)象進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究,結(jié)果小柴胡湯對(duì)應(yīng)激性胃潰瘍的發(fā)生有預(yù)防作用。顧海鷗等發(fā)現(xiàn)小柴胡湯水煎液灌胃或十二指腸給藥能顯著抑制大鼠胃內(nèi)灌注酸化的?；悄懰徕c和堿性上部腸液所造成的急性胃黏膜損傷,減少胃黏膜出血點(diǎn)和水腫,經(jīng)口給藥抑制大鼠幽門擴(kuò)張和十二指腸液返流入胃4W、8W所造成的慢性胃炎的發(fā)生率,同時(shí)降低胃內(nèi)膽酸含量。經(jīng)十二指腸給藥能顯著抑制胃液、胃酸分泌和胃蛋白酶活性,提示小柴胡湯有較好對(duì)抗胃炎作用,其作用可能與降低胃內(nèi)膽酸含量,抑制胃酸分泌和胃蛋白酶活性等機(jī)制有關(guān)。1.5改善膽脂停滯國(guó)外報(bào)道以正常大鼠制作阻塞性黃疸模型,小柴胡湯能解除膽汁瘀滯,并證明給藥后的GOT及ALP、TBIL值均有顯著改善。2小柴胡湯對(duì)正常小鼠免疫功能的影響李罡燦等通過研究顯示IL-2(白介素)聯(lián)合小柴胡湯治療自體造血干細(xì)胞移植后患者的CD4+在移植后第3個(gè)月即恢復(fù)到移植前的水平,大大提前于對(duì)照組,Th1也在3個(gè)月基本恢復(fù)到移植前的水平,且還在以后的時(shí)間段內(nèi)Th1高于移植前水平。IL-2聯(lián)合小柴胡湯治療可以達(dá)到降低復(fù)發(fā)率,提高移植療效的目的。本結(jié)果提示自體造血干細(xì)胞移植后的免疫治療是預(yù)防復(fù)發(fā)提高療效的關(guān)鍵之一。而IL-2聯(lián)合小柴胡湯方案是目前臨床切實(shí)可行的方法,能夠使患者的免疫功能早期得以恢復(fù),無(wú)病生存時(shí)間延長(zhǎng),復(fù)發(fā)率明顯降低。唐小云等研究發(fā)現(xiàn)灌服小柴胡湯的正常小鼠的各項(xiàng)指標(biāo)均有所升高,但除IL-2外,其余與正常小鼠均無(wú)明顯差異,而灌服小柴胡湯的免疫抑制小鼠的各項(xiàng)免疫指標(biāo)均明顯提高,幾乎與正常組小鼠的水平相當(dāng)(P>0.05),與免疫抑制小鼠相比較差異顯著(P<0.01),尤其足TH1型細(xì)因子(IL-2和IFN-γ)濃度升高明顯,表明小柴胡湯具有生物反調(diào)節(jié)的作用,可明顯增強(qiáng)免疫抑制小鼠的免疫功能,而對(duì)正常小鼠免疫功能的增強(qiáng)作用不明顯。孫艷等研究提示小柴胡湯對(duì)荷瘤小鼠化療所引起的免疫功能低下有明顯的恢復(fù)作用,明顯促進(jìn)化療荷瘤鼠自然殺傷細(xì)胞(NK)活性和白介素-2(IL-2)的產(chǎn)生能力。唐小云等通過肌肉注射免疫抑制劑環(huán)磷酰胺建立了BALB/c小鼠免疫抑制模型,檢測(cè)發(fā)現(xiàn)該免疫抑制小鼠與正常鼠比較,其T淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)、TH1型和TH2型細(xì)胞因子的產(chǎn)生都顯著降低,表明該免疫抑制模型已經(jīng)成功建立,可模擬臨床上使用免疫抑制劑治療患者的免疫狀態(tài)。進(jìn)一步通過檢測(cè)給予小柴胡湯的正常小鼠和免疫抑制小鼠T淋巴胞增殖能力、TH1型和TH2型細(xì)胞因子,發(fā)現(xiàn)小柴胡湯可明顯增強(qiáng)免疫抑制小鼠的免疫功能,而對(duì)正常小鼠免疫功能的增強(qiáng)作用不明顯。小柴胡湯可以作為免疫調(diào)節(jié)劑增強(qiáng)免疫抑制個(gè)體的免疫功能。唐小云等還發(fā)現(xiàn)注射環(huán)磷酰胺建立的小鼠模型的脾細(xì)胞凋亡率明顯升高,這可能是環(huán)磷酰胺具有免疫抑制作用的機(jī)制之一,而其凋亡率升高可能是通過低表達(dá)凋亡抑制基因Bcl-2和NF-κB實(shí)現(xiàn)。與免疫抑制小鼠模型比較,給予小柴胡湯的免疫抑制小鼠其脾細(xì)胞凋亡率明顯降低,同時(shí)伴隨著Bcl-2和NF-κB表達(dá)增加,表明小柴胡湯可能通過促進(jìn)Bcl-2和NF-κB的表達(dá)抑制細(xì)胞凋亡來(lái)調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能。同時(shí)還發(fā)現(xiàn)小柴胡湯對(duì)正常小鼠脾細(xì)胞凋亡及Bel-2和NF-κB的表達(dá)沒有明顯的影響,提示小柴胡湯可能作為一個(gè)生物應(yīng)答調(diào)節(jié)劑,促進(jìn)免疫抑制機(jī)體免疫功能的恢復(fù),而對(duì)正常機(jī)體的免疫功能的影響不大。王文杰和王濟(jì)實(shí)驗(yàn)證實(shí)小柴胡湯可使實(shí)驗(yàn)性肝損傷小鼠血清IFN-γ含量升高,IL-4含量下降,從而使Th1/Th2免疫平衡失調(diào)得到糾正。景浩通過實(shí)驗(yàn)表明小柴胡湯可有效地治療大鼠變應(yīng)性鼻炎,使大鼠的鼻炎癥狀好轉(zhuǎn),使血中CD3升高,CD8降低,CD4/CD8的比值恢復(fù)正常,提高紅細(xì)胞C3b受體花環(huán)率及IC(免疫復(fù)合物)花環(huán)率,增強(qiáng)紅細(xì)胞黏附能力,提高免疫活性,有效地減少免疫復(fù)合物沉積。3荷瘤小鼠的生長(zhǎng)梁靚靚等研究發(fā)現(xiàn)小柴胡湯能改善荷瘤小鼠的生活狀況,提高荷瘤小鼠的生存質(zhì)量,對(duì)肺癌細(xì)胞生長(zhǎng)有抑制作用。張豐華等研究發(fā)現(xiàn)小柴胡湯具有良好的抑瘤作用,量效關(guān)系上呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)趨勢(shì),中、小劑量效果好,但大劑量效果較差。3.1調(diào)節(jié)免疫功能近來(lái)年的研究表明,TNF(腫瘤壞死因子)主要通過對(duì)腫瘤區(qū)域血管的影響引起移植腫瘤的出血壞死。同時(shí),TNF能調(diào)節(jié)免疫功能,誘導(dǎo)針對(duì)腫瘤的免疫應(yīng)答;TNF-α還能誘導(dǎo)敏感細(xì)胞的凋亡。茅敏等研究發(fā)現(xiàn)小柴胡湯中、小劑量組可明顯誘導(dǎo)S180荷瘤鼠單核細(xì)胞產(chǎn)生TNF-α,與對(duì)照組比較,P<0.05。故可以認(rèn)為,小柴胡湯的抑瘤機(jī)制之一可能與其誘導(dǎo)產(chǎn)生TNF-α有關(guān)。3.2細(xì)胞免疫監(jiān)視功能腫瘤發(fā)生、發(fā)展及復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移與機(jī)體免疫功能的低下有著互為因果的關(guān)系,機(jī)體免疫系統(tǒng)能夠識(shí)別并通過細(xì)胞免疫機(jī)制殺傷腫瘤細(xì)胞,免疫系統(tǒng)的監(jiān)視功能是通過體內(nèi)免疫活性細(xì)胞,包括T細(xì)胞、NK細(xì)胞等發(fā)揮作用。陶金成和陳振德發(fā)現(xiàn)柴胡湯能抑制S180瘤細(xì)胞的生長(zhǎng),此與其誘導(dǎo)腸管黏膜免疫系統(tǒng)T細(xì)胞及NK細(xì)胞有關(guān)。3.3腫瘤細(xì)胞凋亡茅敏等通過體內(nèi)實(shí)驗(yàn)得出小柴胡湯抗腫瘤的作用機(jī)制可能與其誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡有關(guān);另一重要作用機(jī)制是影響腫瘤細(xì)胞周期,使癌細(xì)胞阻滯于細(xì)胞周期的G0/G1期,即DNA合成期的細(xì)胞數(shù)減少,造成其增殖指數(shù)降低,從而在一定程度上控制了腫瘤的增殖。4脂質(zhì)過氧化反應(yīng)現(xiàn)代研究表明,自由基作為體內(nèi)謝產(chǎn)物是導(dǎo)致機(jī)體衰老的重要物質(zhì)。鄭輝等通過實(shí)驗(yàn)在一定時(shí)間內(nèi)連續(xù)注射D-半乳糖,使機(jī)體細(xì)胞內(nèi)D-半乳糖濃度升高,引起細(xì)胞腫脹,代謝紊亂,破壞并消耗機(jī)體抗氧化防御系統(tǒng),使自由基脂質(zhì)過氧化反應(yīng)加劇,過氧化脂質(zhì)、脂褐素等增多,各器官系統(tǒng)功能減退,出現(xiàn)與自然衰老相似的生理生化改變。脂類極易在活性氧的攻擊下產(chǎn)生快速氧化作用而產(chǎn)生丙二醛(MDA),它與蛋白質(zhì)或核酸交聯(lián)后就形成脂褐素(LPF)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示:灌服小柴胡湯后D-半乳糖所致亞急性衰老模型大鼠線粒體腫脹、嵴斷裂、空泡樣變,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腫脹、核膜模糊或核周間隙擴(kuò)大,核蛋白破壞,核仁邊移,脂褐素、溶酶體大小形態(tài)不規(guī)則等衰老改變明顯減輕,這可能與小柴胡湯具有抗自由基損傷(提高超氧化物歧化酶活性、降低MDA及LPF含量),對(duì)活性氧的代謝產(chǎn)物有清除作用從而穩(wěn)定神經(jīng)元細(xì)胞膜系統(tǒng),保持神經(jīng)元內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定有關(guān),從而具有一定的抗衰老作用。5fas蛋白的表達(dá)鄭輝等小柴胡湯可能通過上調(diào)內(nèi)異癥大鼠異位內(nèi)膜腺細(xì)胞表面FAS蛋白的表達(dá),增強(qiáng)異位內(nèi)膜細(xì)胞凋亡水平,對(duì)異位內(nèi)膜抑制,提示小柴胡湯治療大鼠內(nèi)異癥的作用機(jī)制可能是通過上調(diào)FAS蛋白的表達(dá)而促進(jìn)異位內(nèi)膜細(xì)胞的凋亡。6抑菌環(huán)直徑袁長(zhǎng)津等研究顯示小柴胡湯在體外對(duì)乙型溶血性鏈球菌、嗜血流感桿菌、金黃色葡萄球菌、綠膿假單胞菌、大腸埃希菌有抗菌作用,抑菌環(huán)直徑依次為(12.05±0.23)mm、(14.25±0.23)mm、(13.20±0.31)mm、(10.20±0.35)mm、(12.01±0.46)mm;小柴胡湯對(duì)上述5種菌的MIC依次為200.00mg/ml、100.00mg/ml、100.00mg/ml、250.00mg/ml、200.00mg/ml。7小柴胡湯的藥養(yǎng)和活性作用機(jī)理現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)研究從分子水平、藥理學(xué)和免疫學(xué)等多領(lǐng)域?qū)π〔窈鷾右匝芯?在多方面取得了進(jìn)展,為臨床應(yīng)用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù),指導(dǎo)臨床用于治療消化系統(tǒng)疾病、腫瘤、變態(tài)反應(yīng)性疾病、感染性疾病和免疫力低下等疾病。但部分實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)小柴胡湯中小劑量作用優(yōu)于大劑量,應(yīng)進(jìn)一步研究其原因;另外,在實(shí)驗(yàn)研究中,找出對(duì)某種疾病有治療作用的有效成分,并將其制成多種劑型,以方便臨床應(yīng)用,其實(shí)用意義更大。總之,通過對(duì)小柴胡湯所做的藥理研究可以更深入的了解其藥理作用的機(jī)理,從而促進(jìn)小柴胡湯在臨床中的應(yīng)用,更好地服務(wù)于患者。王文杰和王濟(jì)通過實(shí)驗(yàn)證實(shí)BCG(卡間苗)和LPS(脂多糖)所致的實(shí)驗(yàn)性肝損傷小鼠模型有明顯的脾臟T、B淋巴細(xì)胞增殖能力降低和脾臟萎縮,小柴胡湯可以顯著