抗酒石酸酸性磷酸酶染色液簡(jiǎn)介：酸性磷酸酶(acidphosphatase,ACP)分布極廣泛，遍布各種組織，主要存在于細(xì)胞的溶酶體內(nèi)，所以常作為溶酶體標(biāo)志酶。溶酶體外的酸性磷酸酶存在于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和胞質(zhì)內(nèi)。各種動(dòng)物中的酸性磷酸酶各有不同，酸性磷酸酶的適宜pH為4.5~5.5。存在于正常人肺泡巨噬細(xì)胞和白血病人脾臟的抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate-resistntacidphosphatase,TRAP)均在細(xì)胞濾泡中，并不是釋放入血液。血液中的TRAP絕大多數(shù)來(lái)源于破骨細(xì)胞，因此可以通過(guò)測(cè)量血液中的TRAP了解破骨細(xì)胞的功能狀態(tài)。Leagene抗酒石酸酸性磷酸酶染色液以萘酚AS-BI為底物，在酸性pH下被酸性磷酸酶水解釋放出磷酸和萘酚，萘酚與重氮鹽偶聯(lián)生成有色產(chǎn)物，定位于細(xì)胞質(zhì)中，若細(xì)胞內(nèi)的ACP有抗酒石酸的活性，則呈陽(yáng)性反應(yīng)。該染色液可用于新鮮血涂片、細(xì)胞涂片，亦可用于冰凍切片、石蠟切片。組成：編號(hào)名稱 一—DE00134x10mlDE00134x20mlStorage試劑(A):TRAP固定液50ml100ml4°C避光試劑(B):TRAP孵育液B1:AS-BIBuffer1ml2ml-20OC避光B2:GBC染色液0.1ml0.2ml4C避光B3:TRAPBuffer9ml18mlRT避光臨用刖，按B1:B2:B3=10:1:90混合，即為T(mén)RAP孵育液，即配即用。試劑(C):Lea蘇木素染色液10ml20mlRT避光使用說(shuō)明書(shū)1份自備材料：1、 蒸餾水、恒溫箱2、 載玻片、推玻片3、 光學(xué)顯微鏡操作步驟(僅供參考):血液■細(xì)胞涂片：1、推片：取新鮮血液或骨髓涂片置于載坡片上，推玻片于載玻片保持30度，置于血液或細(xì)胞滴液的正前方，稍往后移與血液或細(xì)胞滴液接觸使后者沿推片下緣散開(kāi)，再勻速沿載玻片平面平穩(wěn)向前滑動(dòng)至鋪滿血膜為止。

2、 自然晾干，TRAP固定液固定。3、 水洗，稍微晾干（不易過(guò)分干燥）。（二） 冰凍切片：1、 冰凍切片回溫，水中浸泡。2、 自然晾干，TRAP固定液固定。3、 水洗，稍微晾干（不易過(guò)分干燥）。4、 切片入TRAP孵育液，置于溫箱，避光浸染，水洗。（三） 石蠟切片：1、 石蠟切片脫蠟，重復(fù)一次。2、 無(wú)水乙醇，90%乙醇和70%乙醇。3、 水洗。4、 自然晾干，TRAP固定液固定。5、 水洗，稍微晾干（不易過(guò)分干燥）。染色結(jié)果：陽(yáng)性顆粒紫紅色細(xì)胞核藍(lán)色riYi臨床意義：1、 毛細(xì)胞白血病的毛細(xì)胞ACP染色呈強(qiáng)陽(yáng)性或中度陽(yáng)性，且不被酒石酸抑制，其他細(xì)胞均呈陰性或極弱陽(yáng)性。2、 急性白血病幼單核細(xì)胞ACP染色呈陽(yáng)性，原淋巴細(xì)胞呈弱陽(yáng)性，原粒細(xì)胞對(duì)ACP反應(yīng)不一。3、 T淋巴細(xì)胞ACP染色呈陽(yáng)性，顆粒粗大、分布密集。B淋巴細(xì)胞呈陰性或顆粒細(xì)小的弱陽(yáng)性。4、 戈謝細(xì)胞呈強(qiáng)陽(yáng)性，尼曼-皮克細(xì)胞呈陰性或弱陽(yáng)性。注意*項(xiàng)：1、 TRAP孵育液易失效，本法宜用皮膚穿刺血涂片，晾干后應(yīng)及時(shí)染色2、 對(duì)冰凍切片染色時(shí)，應(yīng)減少切片在室溫暴露的時(shí)間。3、 樣本需新鮮，取材后應(yīng)立即處理，否則會(huì)影響酶的活性。4、 組織固定需在41冰箱進(jìn)行，時(shí)間不宜超過(guò)24h,否則酶活性會(huì)減弱或消失。5、 組織在石蠟包埋時(shí)，溫度不宜高于56。仁應(yīng)使用熔點(diǎn)為52~54^的石蠟進(jìn)行浸蠟，浸蠟時(shí)間要短，否則酶活性會(huì)減弱或消失。6、 不純的二甲苯會(huì)分解黑色沉淀，宜選用AR級(jí)以上的二甲苯。

7、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。有效期：6個(gè)月有效。相關(guān)：編號(hào)名稱CC0005磷酸緩沖鹽溶液（1XPBS，無(wú)鈣鎂）DC0032Masson三色染色液DG0005糖原PAS染色液DH0006蘇木素伊紅（HE）染色液PE0080Tris-HCl緩