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Thermo離心濃縮系統(tǒng)介紹一.為什么用離心濃縮?對(duì)于生物樣本脆弱樣本采用電泳,GC,HPLC等方法分析和處理的樣本都很適于采用離心濃縮.離心濃縮的目的1.濃縮樣本,同時(shí)還防止以下問題1〕穿插污染2〕樣本喪失3〕樣本變性4〕樣本活性下降,氧化2.同時(shí)兼?zhèn)湟韵聝?yōu)點(diǎn):1) 高的回收率2) 對(duì)環(huán)境無(wú)害3) 操作簡(jiǎn)單三.與離心技術(shù)的區(qū)別1) 離心別離將懸浮的固體從液體中別離出來(lái)2) 離心濃縮溶液。偶爾,樣品會(huì)完全枯燥,在這種情況下,樣品必須是無(wú)機(jī)物,或者在枯燥后馬上被取走四.離心濃縮技術(shù)1) 抽真空,降低氣壓,從而降低溶劑的沸點(diǎn),使溶劑能在低溫下蒸發(fā)2) 給腔體施加熱量(能量),從而提高蒸發(fā)速率-3) 樣本溫度不會(huì)升高!4) 樣本在適宜的離心轉(zhuǎn)速下離心,產(chǎn)生少量的“g〃離心力,這樣就防止了由于曝沸〃而產(chǎn)生的樣本損失,或者由加熱和離心濃縮很容易引起的離心管內(nèi)布滿泡沫現(xiàn)象五.真空效益1) 在既定的氣壓下,溶劑的沸點(diǎn)是固定的.2) 對(duì)不同的溶劑施加不同的能量,對(duì)樣品溫度不會(huì)產(chǎn)生任何影響,因?yàn)闃悠返奶囟ǖ臍鈮合路悬c(diǎn)是一定的,只要蒸發(fā)還在進(jìn)展,樣品的溫度就沒有變化原理-真空效益1) 低溶劑的氣壓(提高真空度)這是一個(gè)關(guān)鍵因素!2) 液體的沸點(diǎn)在真空狀態(tài)下會(huì)降低.3) 真空同時(shí)還能將未濃縮的氣體從腔體中吸走,從而減少蒸汽流向冷阱時(shí)的遇到干擾和阻力.4) 通過快速蒸發(fā)溶劑,可保持樣品的低溫狀態(tài)原理-能量需求1) 能量〔熱量〕的輸入,可補(bǔ)充蒸發(fā)過程所需要的能量,對(duì)于加快蒸發(fā)速度是非常重要的2) 能量必須是間接施加給樣品,否那么,樣品必然會(huì)被局部加熱,從而導(dǎo)致?lián)p害樣品.3) 真空狀態(tài)下對(duì)流是不可能發(fā)生的,因此采用輻射加熱腔體溫度能高達(dá)80°C,而樣品的溫度卻能保持在起沸點(diǎn)下(或許是5°C),直到樣品完全枯燥了溫度才會(huì)上升4)如果樣品在真空狀態(tài)下沸點(diǎn)很低,在不給樣品施加能量的情況下讓樣品如果持續(xù)蒸發(fā),樣品很可能會(huì)結(jié)冰,濃縮也就不可能了!原理-‘g'離心力效應(yīng)1.當(dāng)溶劑蒸發(fā)(沸騰),會(huì)形成氣泡=>溶劑往往會(huì)“暴沸〞或起泡,會(huì)有小液飛濺到管外.3?讓樣品在離心濃縮儀里旋轉(zhuǎn),產(chǎn)生足夠的‘g'離心力,就能讓樣品停留在離心管內(nèi).無(wú)樣品損失.無(wú)穿插污染.樣品被濃縮了或枯燥后附著在管底,對(duì)于定量回收是最理想的在角轉(zhuǎn)頭里,液體的外表積提高了,因此加快了樣品蒸發(fā)和濃縮的速率原理-樣品的平安性!九.非常重要!熱敏感樣品是不允許被完全枯燥的.在相變過程中能量的吸收引起的低溫效應(yīng)消失了,也就無(wú)法給樣品提供保護(hù).真空壓力計(jì)就可以用于判斷是否濃縮的臨界點(diǎn)開場(chǎng)運(yùn)行以后,馬上觀察最大真空度[最小氣壓]蒸汽的產(chǎn)生會(huì)導(dǎo)致氣壓的上升,隨著溶劑的持續(xù)蒸發(fā)和減少,產(chǎn)生的蒸汽也會(huì)越少,氣壓也會(huì)下降.在到達(dá)最小氣壓以前停頓運(yùn)行.樣品仍然是濕的.十.結(jié)論如果離心樣品,在一個(gè)適宜的離心速度/'g'離心力,在真空狀態(tài)下,通過輻射給樣品補(bǔ)充能量,樣品將在非常平安的狀態(tài)下被濃縮。一.離心濃縮系統(tǒng)完整的系統(tǒng)應(yīng)包含以下部件最簡(jiǎn)單的配置:濃縮儀,轉(zhuǎn)頭,連接收線,真空泵完整的系統(tǒng)應(yīng)包括在完善的配制:濃縮儀,轉(zhuǎn)頭,隔膜泵,或高真空油泵以及油過濾器,連接收線,冷阱,燒瓶化學(xué)阱和吸收柱,真空控制閥,真空壓力計(jì),手推車二.濃縮儀的功能1離心2真空控制3在應(yīng)用真空以前必須先以足夠的rpm離心4能量5resistanceheatingofbowl(allmodels)6蓋子上的輻射加熱燈7加熱蓋8腔體上的加熱燈9runtimer控制整個(gè)運(yùn)行時(shí)間10heattimer控制加熱時(shí)間,防止樣品過熱,保護(hù)樣品濃縮儀的設(shè)計(jì)-冷阱ISpeedVac冷阱溫度范圍:-5°C(藥物開發(fā)),-50°C,-104°C2溫度最低的型號(hào)長(zhǎng)用于揮發(fā)性極強(qiáng)的溶劑.3劑在冷阱內(nèi)的玻璃瓶里冷凝.4快速連接口的玻璃瓶,很容易更換,也能作為溶劑的收集瓶5熱傳導(dǎo)液-Cryocool?硅樹脂液體(如果經(jīng)費(fèi)緊X,乙醇也可以用-但如果用乙醇,請(qǐng)務(wù)必每個(gè)月更換乙醇,防止玻璃瓶破裂,因?yàn)槔淠鄷r(shí)會(huì)結(jié)冰)濃縮儀的設(shè)計(jì)-化學(xué)吸收阱1吸收未被冷阱捕獲的蒸汽,從而保護(hù)了真空泵.2SpeedVacSystem一種尺寸,吸收柱,用于水+酸或放射性物質(zhì)&有機(jī)物濃縮儀設(shè)計(jì)-真空泵1Thermo能提供兩種類型的真空泵.Membrane(橫隔膜),pumps.-無(wú)油泵2stageHighvacuumoilpumps.2-級(jí)高真空旋轉(zhuǎn)葉片油泵2.無(wú)油泵非??箯?qiáng)酸和有機(jī)溶劑.3無(wú)油泵不用維護(hù)(不需換油).4通常情況下都選擇無(wú)油泵.5在一些特定應(yīng)用領(lǐng)域,需要用到高真空泵一free(dry)pumps無(wú)油泵六.其它濃縮方法比擬優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)離心濃縮枯燥1〕枯燥時(shí)間快,常規(guī)樣品24X1.5ML〕4小時(shí)左右。2〕可枯燥樣品容量規(guī)格多樣1.5ml—250ml。3〕可處理所有液相樣品,特別是強(qiáng)腐蝕性樣品。4〕可在多種溫度下處理樣品,保證生物活性,及加速枯燥時(shí)間。5〕混合物樣品可分別回收,以便進(jìn)一步利用,或方便處理1〕無(wú)法處理固相樣品2〕樣品無(wú)法徹底枯燥3〕最大單個(gè)樣品體積較小〔250ML〕4〕單次最大可處理樣品體積小〔2L〕

冷凍枯燥組大淋積血體:品品燥樣樣枯理殊耐處特徹可理品次處樣一可熟Y1123#。高淸作W/JM品證w,品更射掃處樣需放,預(yù)規(guī)品及一需常樣性單品,格蝕度樣長(zhǎng)規(guī)腐溫相可中里口叩液礦窮婦粉rm」n口rm」▼rm」理煤理可理處枯處不處12345旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)松、「價(jià)123管L品M羊11證#,莘一品保發(fā)法單樣法揮無(wú)格量無(wú)高劑規(guī)微式理溶品理小處物樣處熱法宀口理法加無(wú)混處無(wú)12345旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)11染峨管<砧害境宀M大閔和彷一酸婦品溫何O單大能樣品任麹能,只規(guī)樣或討功時(shí),常—性吐,少制染,一血B收太限污比單mw回或受雷間豚理鉗法大粋穿時(shí)溫處?底無(wú)量規(guī)蝕品品品層□口徹劑品品W樣樣樣無(wú)料不溶樣樣易生理理對(duì)射燥品理理頭產(chǎn)處處絕域枯樣處升處品幷易卄、」一ZE—123可456「789SpeedVac離心濃縮應(yīng)用實(shí)例Application01問:我們想在12*75mm管枯燥樣品中的三氯甲烷。每次需要離心75只12*75mm玻璃管。答:你應(yīng)該為顧客選擇SC250EXP或者SC210A。使用RH72-12轉(zhuǎn)頭的SPD121P只能放置72只12*75mm玻璃管。SC250EXP或者SC210A配上RH200-12轉(zhuǎn)頭就能滿足用戶的要求。如果選用SC250EXP,在使用PRO轉(zhuǎn)頭時(shí)需要RAD200S適配器。推薦UVS800DDA泵作為真空源。低溫泵〔Vapornet〕在除三氯甲烷時(shí)是很重要的。Application02問:請(qǐng)推薦一款產(chǎn)品用于濃縮HPLC〔高效率液相〕另IJ離出來(lái)的組分。樣品中含有60%水40%有機(jī)溶劑〔水-乙腈,或者水和乙腈各50%〕。樣品有70管,每管液體體積2-3ml.答:在您的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)中,選用無(wú)油泵是最適宜的!當(dāng)枯燥溶于水和乙腈中的樣品時(shí),乙腈首先蒸發(fā)出來(lái),并收集在冷阱中。濃縮系統(tǒng)需要繼續(xù)工作以除去水分。這個(gè)過程需要1小時(shí)甚至幾小時(shí)不等,時(shí)間主要取決用樣品體積以及濃縮儀器、提供的熱量。在儀器運(yùn)行的整個(gè)過程中,總有少量的乙腈從冷阱中泄露跑到泵里面來(lái)。如果采用油泵,該泵就會(huì)受污染。推薦SPD1010型配RH72-12轉(zhuǎn)頭〔一體化機(jī)型〕,LVS1和RH72-12轉(zhuǎn)頭〔半一體化〕或者SPD111V,RH72-12轉(zhuǎn)頭,RVT400冷阱,管,以及Cryocoo1熱傳導(dǎo)液。Application03問:我有一個(gè)非常好的潛在的顧客!這個(gè)顧客來(lái)自Aberdeen的Rowett研究院,他是做肽代謝研究的,最近他采用手工和旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)的方法來(lái)提取用于GC分析〔氣相色譜〕的脂肪酸。樣品中含有有機(jī)溶劑,正己烷,氯仿,酸和TFA〔三氯乙酸〕。玻璃管的尺寸為125mm高,直徑18m,或者是110X14mm。請(qǐng)問為他們選哪款產(chǎn)品最適宜?答:SPD1010處理氯仿和正己烷肯定沒問題!你知道他們使用的酸和TFA濃度嗎?在處理含已腈,水,0.1%TFA的HPLC組分時(shí),選用SPD1010/SPD2021非常適宜。在一些蛋白質(zhì)和肽的研究中,TFA濃度會(huì)到達(dá)10%到50%,這時(shí)挑選SPEEDVAC產(chǎn)品時(shí)就需要知道樣品量,每管的樣品體積,以及這種用儀器處理這種高濃度樣品的頻率。當(dāng) TFA的濃度高于50%時(shí),推薦使用SC250EXP+RVT4104+0FP400+管+Cryocool熱傳導(dǎo)液??蛇x用RH48-18-125轉(zhuǎn)頭來(lái)處理18X125mm管,RH60-17-100轉(zhuǎn)頭來(lái)處理110X14mm管。Application04我們用固相合成的方法合成化合物。使用的溶劑混合物是TFA+DCM,我們用這些溶劑作為裂解液從樹脂匯中提取化合物。下一步就需要將這些溶劑揮發(fā)以回收合成的化合物。然后將化合物溶解后分裝在96孔板中用高通量篩選〔HTS〕的方法檢測(cè)這些合成的化合物。有時(shí)這些檢測(cè)對(duì)溶劑和緩沖液的需求會(huì)不同,因此DMSO也需要用揮發(fā)的方法除去。在某些場(chǎng)合,這些合成后的化合物需要先用快速HPLC的方法進(jìn)展局部純化后再進(jìn)展檢測(cè)。這意味著需要先將HPLC下來(lái)的各組分中的乙腈和水揮發(fā)掉,才能回收這些局部純化的化合物。我們通常的處理量為8到10塊深孔板或者20到24塊淺孔板。請(qǐng)給我們推薦一款適宜的產(chǎn)品?答:SC250EXP+RVT405+RVT4104+VLP80+VP0F110+t+熱傳導(dǎo)液〔這個(gè)組合每次能處理8塊深孔板或者20塊淺孔板〕Explorer每次能處理12塊深孔板或者30塊淺孔板。因?yàn)檫@位顧客要處理的溶劑在一個(gè)很大的范圍內(nèi),包括腐蝕性和非腐蝕性的,他們應(yīng)該選取RVT405冷阱來(lái)處理DMSO,RVT4104處理酸和有機(jī)溶劑。Application05問:我們需要將20個(gè)16X125mm的玻璃瓶中的2ml6N鹽酸除去。請(qǐng)推薦一款適宜的產(chǎn)品。您能給告訴我處理完我這些樣品大概需要多長(zhǎng)時(shí)間嗎?答:SPD131DDA+RH10-15+UVS800DDA+管+熱傳導(dǎo)液或者SPD131DDA+RH10-15+UVS400或RVT4104+OFP400+管+熱傳導(dǎo)液。大概需要150分鐘到240分鐘的時(shí)間來(lái)枯燥這些樣品,這取決于所使用的熱量。每次運(yùn)行以前,請(qǐng)放入一個(gè)干凈的玻璃瓶,確保有足夠的熱傳導(dǎo)液來(lái)完全浸沒這些玻璃燒瓶。Application06問:一位顧客剛購(gòu)置了一臺(tái)SPD1010一體化離心濃縮系統(tǒng),想咨詢一下怎么用它來(lái)除去DMSO或者它終究是否適合處理DMSO?這位顧客的處理量是每離心管中5ulDMSO。在這種情況下輻射蓋是否有用?答:配無(wú)油低真空泵的SPD1010不能用于處理DMSO。必須選用高真空泵,和組合的真空離心濃縮系統(tǒng)。必須將系統(tǒng)進(jìn)展一定的設(shè)置后才能用于處理DMSO,冷阱要低于離心機(jī)的位置。Application07問:我們要枯燥48個(gè)閃爍瓶,每瓶中裝有10ml100%的DMF。答:DMF是一個(gè)高沸點(diǎn)的溶劑〔153°C〕,它是一個(gè)很好的溶劑,能將枯燥的化合物溶解,但和DMSO一樣,存在一個(gè)最后怎么去除的問題。在20C下DMF的蒸汽壓是2.7Torr,因此其揮發(fā)性增加,可以在使用OFP400無(wú)油泵的情況下除去。其凝固點(diǎn)為-60°C,因此不會(huì)在內(nèi)管中凝結(jié)。需要選用RVT400冷阱,RVT4104的撲獲能力更強(qiáng)。首選的搭配是250Express,RVT4101冷阱和OFP無(wú)油泵。第二套備選方案是用RVT4O0弋替RVT4104,RBA12-28-58轉(zhuǎn)頭。Application08問:我有一個(gè)客戶,他有一臺(tái)老式的SpeedVac系統(tǒng),現(xiàn)在他想買一臺(tái)新的,在購(gòu)置以前,他需要咨詢一些信息。他很關(guān)心的一個(gè)問題是:在哪一款適宜的SpeedVac系統(tǒng)中,大概花多長(zhǎng)時(shí)間能將含有約200ul液體〔0.1%TFA,30%乙腈〕的小瓶枯燥?我們應(yīng)該給他推薦哪種SpeedVac系統(tǒng)?答:需要15到30分鐘的時(shí)間完全枯燥。SPD1010〔RH40-12轉(zhuǎn)頭〕或者SPD111V,RVT400或者RVT4101或者UVS400,RH40-11,管子和熱傳導(dǎo)液。Application09問:我們?cè)谟梦⒘侩x心管處理DNA樣品。樣品中含有70%乙醇。我們?cè)撨x用哪種中離心濃縮系統(tǒng)?答:如果你處理的是24個(gè)甚至更少的Eppi管,那么選擇DNA110〔RD24轉(zhuǎn)頭〕。如果是處理96淺孔板,那就選用RD2MP轉(zhuǎn)頭。如果處理深孔板,那就要建議你選用另一個(gè)系統(tǒng)〔SPD111V+GP110或者LVS1系統(tǒng)〕Application10問:我們很想買兩臺(tái)干膠儀。但我們以前只用過BioRad的干膠儀,使用起來(lái)沒什么問題。為什么我們要買你們的干膠儀?我們很喜歡BioRad的熱蓋,而且我認(rèn)為你們的設(shè)備上沒有這個(gè)熱蓋???BioRad也有無(wú)油泵。答:BioRad

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