一種供應(yīng)鏈鑒別冬蟲夏草及其混淆品的方法

甘草是麥角菌科的一種真菌草地昆蟲（sac）。寄生蟲與蝙蝠昆蟲后代的頭部和幼體重組。近年來(lái)迅速發(fā)展,是一種常用的貴重中藥材。由于其適生環(huán)境的限制,生長(zhǎng)在西藏、青海及四川西部,海拔3000m以上,采收困難,生長(zhǎng)年期長(zhǎng)等原因,故現(xiàn)時(shí)仍難以人工培植,只有野生品種供應(yīng)。又因其療效顯著,有補(bǔ)肺益腎,止血,化痰等功效,另現(xiàn)代藥理研究指出,冬蟲夏草還具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、降血壓、抗衰老和抗病毒等多種作用,故現(xiàn)多作為保健用途。人們對(duì)其需求越來(lái)越大,但在資源短缺的情況下,價(jià)格不斷上升。同時(shí),冬蟲夏草及其混淆品(蟲草類),一般較難以理化方法鑒別。本研究以來(lái)源于不同產(chǎn)地的蟲草樣本進(jìn)行了性狀及顯微鑒別的研究。1供試菌株:青少年59號(hào)Axioplan2universalmicroscope光學(xué)顯微鏡,Stemi2000-C實(shí)體顯微鏡,徠卡(Leica)IM50軟件。冬蟲夏草C.sinensis產(chǎn)自西藏及四川(1～4號(hào)樣本);亞香棒蟲草C.hawkesii,香港購(gòu),產(chǎn)地不明(5～7號(hào)樣本);涼山蟲草C.liangshanesis,產(chǎn)自四川及云南(8～9號(hào)樣本);新疆蟲草C.gracilis,產(chǎn)自新疆(10號(hào)樣本);闊孢蟲草C.crassispora,產(chǎn)自云南(11號(hào)樣本)。闊孢蟲草由云南麗江市食品藥品檢驗(yàn)所黃云先主任鑒定;其余的蟲草品種由香港衛(wèi)生署中藥主任劉寶玲教授鑒定。2方法和結(jié)果2.1屬性評(píng)估方法對(duì)5種蟲草的蟲體形狀、大小、色澤和表面等特征進(jìn)行鑒別。某些特征需采用實(shí)體顯微鏡觀察。2.2體壁特征觀察把5種蟲草的蟲體研磨粉碎成中粉,以水合氯醛試液封藏。用顯微鏡觀察蟲體粉末的體壁特征等。照顯微鑒別法(《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄IIC)項(xiàng)下的方法制片觀察。2.3性別鑒定研究2.3.1近下頜氣的形態(tài)蟲體表面黃色至棕黃色。環(huán)紋明顯,30～40個(gè)。足8對(duì),其中4對(duì)明顯。氣門淺黃色至黃棕色,點(diǎn)狀,背部有1對(duì)近頭部的氣門較明顯。子座上部稍膨大,頂端不圓鈍。2.3.2氣孔紅色蟲體表面淺黃色至深棕色。環(huán)紋稍明顯,20～30個(gè)。足8對(duì),不明顯,大小相近。氣門淺黃色至黃棕色,點(diǎn)狀,多數(shù),分布不規(guī)則。子座上部多膨大,頂端圓鈍,有時(shí)可見2個(gè)或以上的分枝。2.3.3涼山昆蟲采樣號(hào)8.9蟲體表面黃棕色至橙棕色。環(huán)紋不明顯,去菌膜后,可見20～30個(gè)環(huán)紋。足8對(duì),不明顯。氣門不明顯。缺子座或細(xì)長(zhǎng),頂端不圓鈍。2.3.4新疆昆蟲10蟲體表面棕黃色至紅棕色。環(huán)紋明顯,30～40個(gè)。足8對(duì),其中4對(duì)明顯。氣門棕黑色,點(diǎn)狀,多數(shù)。缺子座。2.3.5環(huán)紋、足及氣功蟲體表面棕黃色至棕黑色,呈泡狀不規(guī)則突起。環(huán)紋、足及氣門均極不明顯。子座多卷曲,上部多明顯膨大,基部較細(xì),頂端圓鈍。5種蟲草的外形及區(qū)別見圖1,2。2.4關(guān)于粉末的微觀鑒定研究2.4.1形態(tài)的形態(tài)蟲體背部體壁細(xì)胞淺黃色至黃色。具大量的叢生刺狀毛;上部較窄,基部較寬;頂端細(xì)尖。蟲體足部具短剛毛,黃色至橙黃色,排列不規(guī)則;頂端鈍圓,基部漸闊,有些上部略呈鉤狀。并具叢生微刺。2.4.2形態(tài)組織的形態(tài)蟲體背部體壁細(xì)胞淺黃色至黃棕色,可見深棕色斑點(diǎn)及網(wǎng)狀紋理,側(cè)面觀呈緊密排列縱向延長(zhǎng)的柱形細(xì)胞。蟲體足部具短剛毛,黃色至棕黃色,排列整齊;棒狀或基部漸闊;可見V-型剛毛。2.4.3涼山昆蟲采樣號(hào)8.9蟲體背部體壁細(xì)胞金黃色至褐黃色,溝紋明顯;側(cè)面觀呈波浪紋排列。蟲體足部具短剛毛,淺黃色至金黃色,排列不規(guī)則;頂端鈍圓,基部較闊。2.4.4布短細(xì)胞一般形態(tài)蟲體背部體壁細(xì)胞黃色至棕黃色;表面觀呈網(wǎng)狀紋理;側(cè)面觀呈緊密排列縱向延長(zhǎng)的柱形細(xì)胞。蟲體足部具短剛毛,紅黃色至棕黃色,排列不規(guī)則;頂端鈍圓,基部較闊,有的呈橢圓形。2.4.5側(cè)觀圖7蟲體背部體壁細(xì)胞金黃色,具有不規(guī)則的魚鱗狀紋理;側(cè)面觀呈層紋狀或橫向紋理。蟲體足部具短剛毛,后者黃色至棕黃色,排列整齊;棒狀或基部漸闊;有些上部略呈鉤狀。5種蟲草顯微特征區(qū)別見表2,圖3,4。3討論3.1足部及病品特征冬蟲夏草與其他4種蟲草屬混淆品的主要區(qū)別有4點(diǎn)。環(huán)紋:冬蟲夏草與新疆蟲草環(huán)紋明顯。其他蟲草的不太明顯。足部特征:冬蟲夏草和新疆蟲草均為足8對(duì),其中4對(duì)明顯。氣門:亞香棒蟲草的氣門為多數(shù),冬蟲夏草的背部有1對(duì)近頭部的氣門較明顯。而新疆蟲草的氣門棕黑色,點(diǎn)狀,多數(shù)。子座:4種蟲草的子座形態(tài)亦有不同。3.2胞的形態(tài)特征5種蟲草的背部及足部,有著不同的特征。背部主要觀